内源性CD34＋脂肪干细胞在提高人类脂肪移植效果持久性中的优势：一项异种移植模型

背景与目的脂肪移植是一项很有前景的软组织填充增大技术，但移植疗效持久性存在高度不可预知性，而且影响移植成活率的因素尚未明确。因为具有分化的潜能和释放生长因子的能力，脂肪来源干细胞（adipose-derivedstemcells，ADSCs）可在移植修复过程中起关键作用。我们旨在确定ADSCs在人体脂肪中呈现的生物学特性是否与移植体积的体内效果保持存在关联。方法利用标准的离心分离技术对从8例人体受术者获取的脂肪抽吸物进行处理，然后将其注射至6周龄无胸腺裸鼠躯体两侧。测量移植物的质量和体积，于移植后8周进行包含针对血管的CD31^＋染色的组织学评估。从各供体脂肪抽吸物中分离获取基质血管细胞群（stromalvascularfraction，SVF），利用多参数流式细胞术对其表面标记物进行分析，并对其增值、分化能力和正常含氧量／低含氧量血管内皮细胞生长因子（vas—cularendothelialgrcwlhfactor，VEGF）的分泌情况进行实验研究。结果从不同供体中获取的SVF，其CD34^＋祖细胞含量百分率存在较大差异，其平均值为21．3％±15．O％（X±s）。SVF细胞的增殖速率和成脂潜能在不同供体间存在较为中等差异。在小鼠异种移植研究中，移植后8周体积保存的量约为36％～68％，总体平均值为52％±11％。SVF中CD34^＋祖细胞的含量与脂肪移植效果持久性方面存在较强的关联（P〈0．05）。结论在不同患者之间，其脂肪组织的内在生物学特性存在差异。特别是SVF中CD34^＋祖细胞的浓度可能是影响脂肪移植持久性的因素之一。     

脂肪干细胞辅助的自体脂肪移植隆乳术临床疗效分析

目的：评价脂肪干细胞（ADSCs）辅助的自体脂肪移植隆乳术的临床效果。方法：选取2008年11月-2009年12月于韩国首尔TIARA整形外科医院接受ADSCs辅助的自体脂肪移植隆乳术的患者100例,对其临床效果进行研究和分析。所有患者均自下腹或大腿部抽取脂肪组织,从其中100mL脂肪组织中提取ADSCs约5mL,与填充用脂肪组织均匀混合后注射于患者乳房内,每侧乳房注射约200mL脂肪。术后测量患者直立位乳头根部至前胸壁平面的垂直距离即为乳房的隆起值。测量术后2周、1个月、3个月和6个月患者乳房的隆起值,与术前隆起值之差即为隆起增加值,并以2周时的隆起值（或隆起增加值）作为基准,评价乳房隆起的保持效果。结果：1OO例患者乳腺整形手术均顺利完成,未出现严重的并发症。绝大多数患者对隆乳效果表示满意,尤其对于自然的胸部曲线与触感非常满意。术后2周测量100例患者隆起的总值是1435mm,平均隆起14．35mm;术后1个月保持率为79．08％,术后3个月保持率为66．75％,术后6个月保持率为7057％。术后1、3和6个月的隆起值与术后2周相比,差异均有统计学意义（P〈O．001）;术后1个月隆起值与术后3、6个月比较,差异有统计学意义（P〈O．05）;而术后3个月和6个月之间差异无统计学意义（P〉O．05）。不同年龄组的患者术后隆乳效果除术后2周有差异外（P〈O．05）,其他时间段的差异无统计学意义（P〉O．05）。结论：ADSCs辅助的自体脂肪移植隆乳术临床效果确切可靠。术后3个月乳房内保存的移植脂肪基本成功存活,之后乳房的隆起效果不再发生变化。不同年龄组的患者均可以通过ADSCs辅助的自体脂肪移植隆乳术获得满意的临床效果。     

干细胞辅助脂肪移植的临床试验进展分析

20世纪,自体脂肪组织移植已经应用于人体软组织缺损的重建.在传统的脂肪组织移植中,平均吸收率为25％～80％.影响移植脂肪组织吸收率的因素包括：移植脂肪细胞的活性及纯度、受区的血供情况、移植脂肪组织的数量和体积等.因为脂肪细胞耐受缺氧能力差,所以在移植的初始阶段,受区血液供应（毛细血管系统）没有建立,多数脂肪细胞在最初的48 h内发生变性和坏死.近年的研究发现,脂肪来源干细胞（adipose-derived stem cells,ADSCs）能够耐受缺氧,在缺氧条件刺激下,可分泌多种细胞因子,发挥促血管生成作用和趋化作用,从而提高脂肪细胞的成活率;同时,ADSCs还可以向脂肪细胞分化.因此,应用干细胞辅助脂肪移植（cell-assisted lipotransfer,CAL）可以提高移植脂肪的成活率.     

脂肪干细胞复合脂肪颗粒移植的实验研究

目的 探索脂肪来源干细胞(ADSCs)与脂肪颗粒复合移植对植入脂肪成活率的影响.方法 将1ml通过吸脂术获得的纯化脂肪颗粒分别与1ml含有下列细胞浓度的PBS混合:①原代ADSCs 1×106/ml(A组);②原代ADSCs 2×106/ml(B组);③二代ADSCs 2×106/ml(D组);④二代ADSCs 2×107/ml(E组);对照组为单纯的脂肪颗粒和1ml PBS混合移植(C组).随机注射移植于40只裸鼠背部皮下.移植12周后,取出移植物,进行如下测量:①大体观察;②重量和体积测定;③HE染色,观察细胞形态和小血管形成情况;④计算机图像分析测定血管密度;⑤统计学比较各实验组与对照组移植物体积、重量以及血管密度的差异.结果 ①湿重与体积:A、B、D、E组与C组之间差异有统计学意义(P ＜0.01);A组与B、D、E组之间差异有统计学意义(P ＜0.01);B、D、E组之间差异无统计学意义(P ＞0.05);②血管密度:A、B、D、E组与C组间差异有统计学意义(P ＜0.01);A、B、D、E各组间差异无统计学意义 (P ＞0.05).结论 原代和二代不同浓度的ADSCs与脂肪颗粒复合移植均可提高脂肪移植物成活率,相同浓度的原代与二代的ADSCs在促进脂肪颗粒成活上无显著差异,在一定范围内,随ADSCs浓度的增加,脂肪颗粒成活率也会相应提高;但是超过了一定范围,脂肪颗粒成活率不会随ADSCs浓度的增加而无限提高.     

脂肪瓣延迟术后瓣内脂肪细胞移植增加成活的实验研究

目的探讨脂肪瓣延迟术后瓣内脂肪细胞移植成活率和成活时间。方法以兔为模型，在腹股沟处形成脂肪瓣。12h时，用Elisa法检测瓣内血管内皮生长因子（VEGF）的表达，21d后把瓣内脂肪剪成颗粒状移植至兔的背部，移植后1、3、6、9和12个月取出移植脂肪组织，进行肉眼观察，称重和组织切片检查，用CD34染色检测血管增生情况。结果在脂肪瓣形成12h后VEGF显著增高（P〈0．05），移植后1和3个月，实验组移植脂肪血管数显著高于对照组（P〈0．01），成活率未见差异（P〉0．05），但存活时间明显延长，瓣内脂肪细胞在移植后12个月仍然存活，而对照组6个月时已基本吸收。结论脂肪瓣延迟术后移植瓣内脂肪细胞能增加成活率及成活时间，可为临床脂肪移植提供新的思路和方法。     

非血管化的脂肪移植后脂肪细胞的命运：脂肪细胞早期死亡和替换的证据

背景与目的脂肪移植的临床效果是一种可变因素，而且其依赖于所采用的技术，同时，移植组织怎样建立血管化是未知的。近来，我们通过对蛋白进行免疫组化染色，而非HE染色，对存活和死亡的脂肪细胞进行观察。方法利用如下方法对人类脂肪组织中各细胞成分（脂肪细胞，脂肪干细胞／间质细胞／祖细胞，血管内皮细胞，造血细胞）的生存能力进行评价：①储存脂肪抽吸物；②培养细胞；③培养功能性脂肪组织。此外，将小鼠腹股沟脂肪垫（150～200mg）移植于头皮下，并在第0、1、2-,3、5、7、14天对移植物进行染色。结果体外研究显示，尽管脂肪来源间质干细胞可以保持3d的活性，但在缺血环境条件下脂肪细胞最易受影响而死亡。体内研究证实，大多数移植脂肪细胞在第1天开始死亡，仅有少部分距离组织边缘300μm的脂肪细胞存活。增殖细胞的数量在第3天开始增多，从第7天开始活性脂肪细胞区域增大，提示坏死组织的修复重建过程开始。结论我们展示了非血管化的脂肪移植后脂肪组织最大程度有活力模型的令人信服的证据。我们观察到移植组织由外围至内部分为3个区域：存活区域（脂肪细胞存活），再生区域（脂肪细胞死亡，脂肪来源间质干细胞存活，坏死脂肪细胞由新生的脂肪细胞替换），坏死区域（脂肪细胞核脂肪来源间质干细胞均死亡）。     

压力和剪力在自体脂肪移植中的作用

背景与目的由于供区损伤小、并发症发生率低及恢复时间快等特点,脂肪移植已成为整形外科中的常规项目。然而,仍有待确定最佳的脂肪移植技术。压力和剪力这两种临界变量均被定义为由区域划分的力。本研究中,我们将利用裸鼠模型检验压力和剪力在人类脂肪移植中的作用。方法对新鲜脂膜切除术标本行负压肿胀吸脂术。抽吸压力位-15inHg或-25inHg。将脂肪抽吸物以1200g／min离心,并注射至裸鼠侧腹部。对脂肪抽吸物行正压力处理至6atm,保持3min,然后注射至裸鼠,以检验正压力的作用。将脂肪抽吸物以1200g／min离心3min,然后以快速（3．0～5．0ml／s）和慢速（0．5～1．0ml／s）的方式注射至裸鼠,以检验剪切应力的作用。4周后,对脂肪移植物的质量和组织学进行分析。结果作为负压力,采取高压或低压行脂肪抽吸对抽吸物的质量和组织学影响均无差别。作为正压力,4周后发现,将正压力调至6atm并保持3min并未对移植物的质量及组织学造成影响。作为剪切应力的体内研究,缓慢注射的方式比快速注射其移植物质量多38％（P〈0．01）。而两种注射方式对移植物组织学的影响相似。结论调至-0．83atm的较高的抽吸压力并未对脂肪移植物的体内存活能力造成影响。调至6atm的正压力也并未影响脂肪移植物的存活能力。而剪切应力的程度,即注射推送速率,会对脂肪移植物的存活能力造成明显的影响。用较低剪切应力缓慢注射的脂肪移植物明显比用较高剪切应力注射的好。研究数据提示,与压力相比,剪切应力是影响脂肪移植物存活能力更重要的变量。     

吸脂术后人类脂肪抽吸物中脂肪细胞、基质血管细胞群和脂肪来源干细胞凋亡和坏死情况的分析

背景与目的脂肪来源干细胞已成为研究最多的成体干细胞。我们对新鲜的人类脂肪抽吸物中脂肪细胞、基质血管细胞群（stromalvascularfraction,SVF）和脂肪来源干细胞（adipose—derivedstemcells,ADSCs）的凋亡和坏死概率进行了检测。方法利用标准的吸脂术方法获取人类脂肪抽吸物（n=8）。将SVF细胞从脂肪细胞中分离出来,并经培养获取纯化的ADSCs。利用一组干细胞标记物来鉴定培养的ADSCs的表面表型。将独特的干细胞亚群（CD90^＋CD45^-、CD105^＋／CD45^-、CD34^＋／CD31^-）从SVF中挑选出来。利用膜联蛋白V／碘化丙啶实验和流式细胞术检测分析细胞凋亡和坏死情况。结果通过细胞倍增时间及油红O染色和碱性磷酸酶染色阳性证实,培养的ADSCs显示出长效增殖和分化的潜能。对脂肪抽吸物进行分离,脂肪细胞的凋亡率为19．7％±3．7％,坏死率为1．1％±0．3％;SVF细胞的凋亡率为22．0％±6．3％,坏死率为11．2％±1．9％;与脂肪细胞相比,SVF细胞有较高的坏死率（P〈0．05）。在SVF细胞中,51．1％±3．7％的细胞表达CD90^＋／CD45^-,7．5％±1．0％的细胞表达CD105^＋／CD45^-,而26．4％±3．8％的细胞表达CD34^＋／CD31^-。与表达CD105^＋／CIM5^-的AD—SCs相比,表达CD34^＋／CD31^-的ADSCs其凋亡和坏死概率更低（P〈0．05）。结论虽然ADSCs比脂肪细胞有更高的凋亡和坏死率。但在各种ADSCs亚群之间,其凋亡和坏死的程度存在明显差异。     

体外扩增后人脂肪源干细胞的体外免疫调节功能的实验研究

目的研究体外扩增后人脂肪源干细胞（Adipose—derived stem cells，ADSCs）在体外的免疫调节功能，以期以少量组织获得足够量的低免疫原性且具有免疫调节功能的脂肪源干细胞，用于组织修复及细胞治疗。方法流式细胞仪检测扩增至第2代及第5代的人脂肪源干细胞表面标记物，观察在扩增的过程中ADSCs表面标记物的变化：同时．检测扩增至第5代的ADSCs在体外抑制淋巴细胞增殖的能力，以评价ADSCs的免疫原性及免疫调节功能。结果ADSCs在扩增过程造血干细胞标记物表达降低，间质细胞表型及内皮细胞表型变化无显著性差异．同时第5代的ADSCs在体外不会引起淋巴细胞的增殖，并且在混合淋巴细胞反应中可以抑制淋巴细胞的增殖。结论扩增中的ADSCs逐渐表达均一的间充质干细胞的表面标记物，并在扩增至第5代时仍保持有低免疫原性及免疫调节的能力。     

小颗粒脂肪移植碱性成纤维细胞生长因子及缓释剂浓度的正交筛选

目的解决游离脂肪移植吸收问题。方法根据碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）的生物学特性，以纤维蛋白作为缓释剂，参与小颗粒状脂肪移植。并采用正交法设计，观察ｂＦＧＦ及缓释剂浓度与效应关系。结果术后３个月，移植物重量变化在差位级为９８％，好位级为２２５％。后者基本与动物体重同步增长。脂肪生存及增殖与ｂＦＧＦ缓释剂浓度关系密切。在０．２ｇ移植脂肪中加入ｂＦＧＦ１０００Ｕ、２０００Ｕ或４０００Ｕ，以４０００Ｕ效果最佳。缓释剂浓度１０００ｍｇ／Ｌ，２０００ｍｇ／Ｌ，或３０００ｍｇ／Ｌ，以１０００ｍｇ／Ｌ为佳。组织学观察各移植物均有被膜、纤维间隔。脂肪组织结构良好，细胞成熟。结论ｂＦＧＦ在以纤维蛋白为缓释剂条件下，对移植脂肪具有良好的促增殖作用。其效应具有浓度依赖关系     

自体脂肪干细胞辅助脂肪移植77例分析

目的 探讨自体脂肪来源干细胞(ADSCs)辅助脂肪移植的方法 和疗效.方法 应用干细胞分离技术获取ADSCs,再从自体血液提取富血小板血浆(PRP),将ADSCs和PRP混入脂肪颗粒中进行脂肪移植.自2010年1月至2011年10月,共对77例求美者行凹陷部位的填充及面部年轻化、隆乳、隆臀治疗.结果 本组求美者77例,术后随访观察6～12个月,凹陷部位得到有效填充,皮肤老化问题得到明显改善,效果满意.结论 ADSCs辅助脂肪移植疗效可靠,移植脂肪成活率高.     

不同移植部位对组织工程化脂肪存活的影响

目的：采用人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs）与蚕丝蛋白生物支架构建组织工程化脂肪组织,研究不同移植部位对组织工程化脂肪存活的影响。方法：将人脐带间充质干细胞接种于蚕丝蛋白支架上,体外成脂诱导培养1～2周,扫描电镜观察细胞在支架上的生长及黏附情况;同时,将细胞-支架复合物分别移植于6只Wistar雌性大鼠背部皮下和股二头肌内,观察其成脂及存活情况。结果：移植8周、12周后,组织冰冻切片油红O染色、HE染色及扫描电镜显示,实验组移植复合物内有脂肪细胞生成,背部移植复合物表面皮肤结合紧密,与底部肌肉组织结合疏松,体积较移植前增大,支架材料随移植时间延长逐渐降解;股二头肌内移植复合物移植8周后,与肌肉组织结合紧密,但体积较移植前明显减小,支架材料降解明显,到移植12周后移植处不见移植物存在。空白对照组移植物内无脂肪细胞生成,移植物体积较植入前减小,股二头肌内移植物减小更明显;股二头肌内移植物移植12周后,移植处不见移植物存在。结论：蚕丝蛋白生物支架具有良好的三维空间结构和生物降解性,人脐带间充质干细胞接种于蚕丝蛋白生物支架可用于组织工程化脂肪组织的研究;不同移植部位对该组织工程化脂肪存活有一定的影响,而背部皮下为良好的移植位点。     

SVF细胞影响移植脂肪LPL表达的实验研究

目的 探讨脂肪移植后脂蛋白脂肪酶(Lipoprotein lipase,LPL)在SVF(Stromal vascular fraction)辅助移植脂肪组织中的表达模式。方法 本实验以新鲜分离的自体SVF细胞辅助移植的脂肪组织为实验组,以脂肪组织与等量生理盐水的混合物为对照组,随机在裸鼠背部两侧注射建立动物模型,对两组移植物进行脂周蛋白免疫组化染色分析、LPL免疫组化染色分析和LPL蛋白含量测定。结果 TPL蛋白含量测定及LPL免疫组化染色分析显示,随着移植时间的延长,实验组和对照组LPL表达逐渐下降,在第2周、第3周、第4周时,实验组LPL表达明显高于对照组。脂周蛋白免疫组化染色分析显示,两组脂肪移植后的存活细胞均逐渐减少,但第2周、第3周、第4周实验组存活细胞数高于对照组。结论 SVF促进脂肪组织表达LPL,表达差异在移植后的第2周开始出现,这可能与SVF提高脂肪组织存活率和ASCs(Adipose-derived stromal cells)成脂分化有关。     

血管内皮祖细胞促进游离移植脂肪颗粒组织存活的实验

目的探讨血管内皮祖细胞（endothelial progenitor cell，EPC）移植促进游离移植的脂肪颗粒组织的血管新生，提高移植脂肪颗粒组织存活率。方法体外分离、培养人脐血中EPCs，然后与来自人体的脂肪颗粒组织混合移植于裸鼠背部。结果脐血中分离培养的EPCs表达血管内皮细胞生长因子受体（KDR）及细胞表面标记CD34、CD133，EPCs与脂肪颗粒组织混合移植到裸鼠3个月后，EPCs整合到缺血部位新生血管中，与对照组的脂肪颗粒组织存活率分别为（89．3±6．8）％、（42．2±2．5）％（P〈0．05），而且实验组与对照组脂肪颗粒组织周边区毛细血管密度差异有统计学意义（P〈0．05）。术后3个月2组脂肪颗粒组织周边区的EPCs密度分别为（95．2±10．5）个／mm^2、0个／mm^2（P％O．05）。结论体外培养的脐血EPCs移植体内可促进游离移植的脂肪颗粒组织的血管新生，提高存活率。     

自体颗粒脂肪注射移植在面部年轻化手术中的应用

目的：探讨自体颗粒脂肪注射移植在面部年轻化中的应用。方法：采用肿胀吸脂术抽吸腹部、大腿等部位的皮下脂肪，将抽吸出的自体颗粒脂肪经过提纯后超量30％均匀注射入面部及颈部标定的老化凹陷区域，不同部位选择不同的注射层次。结果：17例患者38个注射部位，脂肪移植量1～15ml（平均每个部位6．5ml）。除4例患者6～12个月后重复注射外，其余均注射一次。随访时间6个月到4年，效果良好。无感染、脂肪液化等并发症发生，面部老化症状改善明显，效果持久。结论：自体颗粒脂肪注射移植是一种安全有效实现面部年轻化的手术方法。     

诱导脂肪干细胞向表皮细胞表型的转分化研究

目的探讨脂肪干细胞（ADSCs）经诱导向表皮细胞转分化的可能性。方法（1）切取12例SD大鼠脂肪组织，用酶消化法分离和培养ADSCs，流式细胞仪检测第3代细胞的CD49d、CD44和CD106的表达以鉴定脚s；（2）诱导大鼠ADSCs向表皮细胞转分化的实验分组和处理：①含30％大鼠皮肤匀浆液的条件培养基组；②条件培养基中加入EGF（20μg／L）组；③含EGF（20μg／L）的10％FBSDMEM组；④10％FBSDMEM为对照组，各组诱导3d。（3）诱导后经流式细胞仪检测：①各组ADSCsCK19、CK14的表达。②条件培养基组诱导前、3d后ADSCs细胞周期。结果流式细胞仪检测CD49d、CD44和CD106阳性率分别为98．32％、90．38％和0．06％；各诱导组细胞CK19阳性率分别为10．44％、8．22％、4．49％，CK14阳性率分别为12．46％、8．19％、4．37％，均较对照组CK19阳性率1．38％、CK14阳性率1．7％升高（P〈0．01），差异有统计学意义。条件培养基诱导前ADSCs细胞周期：G1：67．25％、G2：2．46％、S：30．29％，诱导3d后ADSCs细胞周期：G1：35．04％、G2：0．00％、S：64．96％，细胞分裂增殖速度加快。结论ADSCs可以被诱导向表皮细胞表型转分化，提示ADSCs具有参与皮肤创面修复的潜能。     

细胞辅助的脂肪移植法隆乳术:18例报告

目的 评估应用细胞辅助的脂肪移植技术( cell-assissted lipotransfer,CAL)隆乳的临床疗效.方法 应用韩国Lipokit脂肪移植机自患者大腿、侧腰和下腹部抽取脂肪,将静置后的上层脂肪250 ml及抽吸液500 ml分别按文献中所示步骤经消化、离心和洗涤等处理,获取基质血管成分(stromal vascular fraction,SVF).流式细胞仪检测术中提纯的SVF中脂肪来源干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs)的比例.收集体外培养的第3代ADSCs,进行ADSCs的功能检测.MRI测量术前及术后3、6个月的乳房体积,分别记为V0、V3、V6,计算移植脂肪组织的吸收率,记为R3、R6.所有数据采用t检验进行分析.评价术前和术后乳房MRI影像的变化,观察有无结节、囊肿或钙化形成.结果 2009年6月至2010年11月,于临床共进行CAL隆乳18例,其中10例患者随访达6个月.新鲜分离的SVF细胞群中ADSCs平均占41.67％;培养的ADSCs细胞生长良好,经诱导后具有成脂、成骨、成软骨的能力;MRI测量结果显示V0=(416.19 ±40.43) ml、V3=(551.72±59.86) ml、V6=(538.81±68.35) ml;R3=(51.20±11.96)％、R6=(54.22±12.73)％.统计结果显示,V3和V6分别与V0比较,差异有统计学意义(P ＜0.05);V3与V6比较,R3与R6比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).所有患者MRI影像未见囊肿或钙化表现.结论 CAL隆乳术中提纯的SVF细胞群中具有纯度较高的ADSCs,并具有成脂、成骨、成软骨的功能特征.术后3个月内,乳房体积缩小明显,之后乳房体积基本稳定,并较术前明显增大,形态明显改善,CAL隆乳术安全有效.     

人细胞外基质支架联合脂肪干细胞构建脂肪组织

目的 探讨人脂肪组织细胞外基质(ECM)支架联合人脂肪来源干细胞(ADSCs)构建工程化脂肪组织的可行性.方法 以酶消化法从人抽脂术抽吸物脂质部分获取人ADSCs,体外进行多向分化诱导鉴定,并行DiI荧光标记.从抽脂术的脂质部分分离提取人脂肪组织细胞外基质,经过低温冻干、粉碎、灭菌等处理,制备成粉末状,电镜扫描观察表面特征并将其与ADSCs进行黏附实验,探讨其作为支架材料的可行性.收集人ADSCs,以2×109/L的细胞密度与提取的细胞外基质支架复合后移植于裸鼠背部皮下,同鼠对侧背部皮下移植ECM支架和细胞培养液作为对照,每侧移植0.5 ml,共6只实验鼠.8周后取材,称量标本湿重.取出的标本行苏木素-伊红(HE)染色和油红O染色进行定性判断,分析人脂肪组织ECM支架联合人ADSCs构建工程化脂肪组织的能力.结果 从脂肪组织中分离得到人ADSCs和ECM支架.ADSCs在相应的诱导环境下能够分化成为脂肪细胞、骨细胞和软骨细胞.ECM支架电镜扫描和大体观察具有疏松、多孔的结构特征,适合ADSCs的黏附生长.ADSCs与支架相容性良好,黏附率达(89.87±2.59)％,细胞在支架表面可充分伸展生长.体内移植8周后,实验组和对照组都能够形成新生物,湿重比较实验组较对照组重(P＜0.05).经HE切片及油红O染色均证实实验组形成成熟的脂肪组织,对照组不能形成脂肪组织.结论 人脂肪组织ECM支架联合人ADSCs在体内能够成功构建成熟的脂肪组织,8周后支架并无明显吸收.     

血管生成素协同血管内皮细胞生长因子对自体脂肪移植血运重建的影响

目的：探讨血管内皮细胞生长因子（VEGF）及血管生成素（ANG）协同VEGF对大鼠自体脂肪移植血运重建的影响。方法：在颗粒脂肪移植的实验动物模型中应用纤维蛋白原缓释VEGF，作用于血管生成素浸泡过的自体脂肪细胞，免疫组化法观察实验组和各对照组移植体血管生长情况，并测量各组脂肪移植体剩余体积量。结果：实验组脂肪组织移植体血供重建良好，实验组脂肪块剩余体积明显大于对照组。结论：VEGF能加快脂肪移植的血运重建，ANG能协同VEGF作用，从而显著提高自体脂肪移植成活率。     

人脂肪来源间充质干细胞促进Matrigel培养内皮细胞血管形成

目的:通过体外细胞学研究(共培养体系建立)直观表现脂肪干细胞(Adipose derived stem cells,ADSCs)体外进血管形成能力,阐述脂肪干细胞作为辅助细胞通过促进早期血供建立而提高移植脂肪存活率的可能机制。方法:临床通过Coleman法抽吸成人大腿或腹部浅层脂肪,并通过经典方法培养获取ADSCs。对ADSCs进行形态学、表面分子标记物及多向分化等生物学特性鉴定,并通过Matrigel培养脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)管腔样结构形成实验探讨ADSCs体外促血管形成能力,说明ADSCs促进血管新生及移植物早期血供建立的潜力。结果:ADSCs/HUVECs共培养体系可于体外促进内皮细胞形成血管腔样结构,提高早期血管新生。结论:通过共培养体系模拟提示ADSCs体外具备促血管形成的能力,具有促进早期血供建立而提高移植物存活的潜力,为临床细胞辅助脂肪移植提高存活率的可能机制。