基于LC-MS代谢组学研究黄芪注射液对白细胞减少症模型小鼠的干预作用

目的:研究黄芪注射液对白细胞减少症模型小鼠的干预作用。方法:将昆明种小鼠随机分为正常组、模型组和药物组,每组8只。模型组和药物组小鼠均腹腔注射环磷酰胺以复制白细胞减少症模型,正常组小鼠腹腔注射等体积无菌注射用水。造模成功后,正常组和模型组小鼠均腹腔注射等体积无菌注射用水,药物组小鼠腹腔注射黄芪注射液0.04 mL/10 g,每日1次,连续7d。在检测各组小鼠血常规指标(白细胞、淋巴细胞、中性粒细胞、单核细胞计数)的基础上,采用液质联用技术(LC-MS)分析血清中的代谢产物,并通过主成分分析(PCA)、偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)、正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)等多元统计分析以及HMDB、METLIN、KEGG等数据库和相关文献指认、鉴定差异代谢物;借助MetPA在线工具对差异代谢物的代谢通路进行分析,并基于皮尔逊相关系数分析血常规指标与差异代谢物的相关性。结果:与正常组比较,模型组小鼠血常规指标计数均显著减少(P<0.01);与模型组比较,黄芪注射液组小鼠上述血常规指标均显著增加(P<0.01)。正常组和模型组小鼠血清样品的LC-MS图谱明显不同,且...     

Akt-Kv4.3-CaMKⅡ在有氧运动抑制压力负荷小鼠 心肌肥厚中的作用及其机制

目的 探讨丝氨酸/苏氨酸激酶（Akt）-离子通道Kv4.3（Kv4.3）-钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）信号 通路在有氧运动抑制压力负荷小鼠心肌肥厚中的作用及其机制。方法 60只实验小鼠均分为5组：假手术（SHAM） 组、主动脉缩窄手术（TAC）组、假手术+有氧运动（SHAM+E）组、主动脉缩窄术+有氧运动（TAC+E）组,主动脉缩窄术+ 有氧运动+ Akt抑制剂Perifosine（TAC+E+Peri）组。高分辨率小动物超声系统评价小鼠心功能及肥厚程度,麦胚凝集 素（WGA）染色检测心肌细胞横截面积;荧光定量PCR（RT-qPCR）检测ANP表达,Western blot检测蛋白心房钠尿肽 （ANP）、p-Akt、Kv4.3、p-CaMKⅡ表达水平。结果 与SHAM组相比,TAC促进心肌肥厚,恶化心功能（P＜0.01）。给 予有氧运动训练后,TAC+E组较TAC组小鼠心功能改善,心肌肥厚程度减轻（P＜0.01）。同时Western blot检测显示, TAC组较SHAM组p-Akt、Kv4.3表达降低,p-CaMKⅡ上调（P＜0.01）;TAC+E组p-Akt和Kv4.3表达较TAC小鼠增加, p-CaMKⅡ下调（P＜0.01）。而给予Akt抑制剂Perifosine后,相比于TAC+E组,TAC+E+Peri组心功能恶化、心肌肥厚 程度和ANP表达增加,心肌细胞横截面积增大,同时伴随Kv4.3表达降低、p-CaMKⅡ增高（P＜0.01）。结论 有氧运 动训练能够通过调节Akt-Kv4.3-CaMKⅡ信号通路抑制压力负荷心肌肥厚。     

基于GC-MS代谢组学技术的甲氨蝶呤毒性机制探究

目的:采用基于气相色谱-质谱联用(GC-MS)的代谢组学技术探究甲氨蝶呤(MTX)的毒性机制。方法:喂养第7天时小鼠腹腔注射MTX (20 mg·kg^-1),对照组小鼠腹腔注射等量的生理盐水。摘除眼球后采集血样，并收集心脏、肝脏、肾脏、肺、肠、胃和海马进行代谢组学分析。通过正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)进行差异代谢物筛选，随后采用MetaboAnalyst 5.0 (http://www.metaboanalyst.ca)及京都基因和基因组百科全书数据库(KEGG;http://www.kegg.jp)进行通路分析。最后以肠组织为例，进行病理学分析及代谢物验证。结果:非靶向代谢组学分析显示，MTX暴露后，小鼠整体代谢轮廓发生改变，其中肝脏与肠道中代谢轮廓改变最为显著；通路分析结果表明MTX主要影响小鼠体内多种氨基酸代谢/合成、能量代谢、泛酸盐和辅酶A生物合成、嘧啶代谢以及谷胱甘肽代谢等代谢通路。MTX处理能够明显破坏肠道上皮结构，同时炎性细胞增加。通过全自动氨基酸分析仪分析发现，L-谷氨酸，L-天冬氨酸和甘氨酸的含量在MTX处理后明显上升，这与代谢组学分...     

藤黄酸作用后小鼠血清代谢组学研究

目的研究藤黄酸对小鼠血清代谢稳态的影响,发掘其体内效应分子。方法 11只雌性小鼠随机分为两组,分别尾静脉注射藤黄酸(10 mg·kg^-1)和空白溶液。整合运用液相色谱-质谱(LC/MS)和气相色谱-质谱(GC/MS)技术全面表征各组小鼠血清代谢指纹谱,利用偏最小二乘-判别分析(PLS-DA)和(非)参数检验进行模式识别和统计分析,筛选、鉴定差异代谢物,聚焦相关代谢通路。结果与对照组比较,藤黄酸组小鼠血清中苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸等14个物质含量显著上升,PC、LysoPE等7个物质含量显著下降,涉及氨基酸代谢、脂肪酸代谢、三羧酸循环等通路。结论藤黄酸能显著影响机体的氨基酸代谢、磷脂代谢以及能量代谢,提示其发挥体内作用可能与之有关。该研究结果可为深入揭示藤黄酸的作用机制提供一定参考。     

腺病毒介导心脏特异性过表达RIP140对大鼠心脏功能及炎症通路的影响

目的探讨心脏组织特异性过表达受体相互作用蛋白140(receptor interacting protein 140,RIP140)对心脏功能及炎症通路的影响。方法大鼠心脏组织多点注射携带RIP140基因的腺病毒载体,使心肌组织过表达RIP140;免疫荧光验证RIP140蛋白在心脏组织中的过表达情况;超声心动图与血流动力学参数评估心脏功能;ELISA分析TNF-α、IL-2、IL-1β等炎症因子水平;Western blot分析p65、IκB-α的蛋白水平。结果腺病毒载体介导的外源基因RIP140可成功过表达于心脏组织,诱导心室扩张、左室射血分数下降、心功能受损,促进心肌组织TNF-α、IL-2、IL-1β炎症因子释放,p65蛋白入核、胞质IκB-α蛋白降解。结论腺病毒介导RIP140基因在心脏组织中的特异性过表达损伤心脏功能,激活NF-κB/p65炎症通路,促进炎症因子释放。     

苯溴马隆对高尿酸血症模型大鼠脂质代谢的影响

目的 基于脂质组学方法研究苯溴马隆治疗高尿酸血症（hyperuricemia,HUA）大鼠的作用机制,并揭示尿酸水平增高与脂质代谢异常的内在相关性。方法 利用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF/MS）技术,结合主成分分析（PCA）和偏最小二乘法判别分析（OPLS-DA）研究正常组、模型组和苯溴马隆组的大鼠血清中内源性脂质代谢物的变化,寻找潜在生物标记物,分析相关代谢通路,绘制代谢网络机制图。结果 脂质组学分析发现,苯溴马隆可使HUA大鼠体内水平异常的20个差异代谢物回调到正常水平;相关代谢通路分析发现,苯溴马隆影响果糖诱导HUA大鼠血清中的脂质水平,主要与甘油磷脂代谢通路相关。结论 苯溴马隆对HUA的治疗可能与改善体内甘油磷脂代谢通路异常密切相关。     

基于代谢组学技术研究绞股蓝总皂苷抑制tau蛋白过表达诱导的细胞损伤机制

目的 研究绞股蓝总皂苷(GPs)对tau蛋白过表达细胞代谢的影响,探讨GPs治疗阿尔茨海默病(AD)的机制。方法 通过采用CRISPR/Cas9技术构建微管相关蛋白tau (MAPT)过表达N2a细胞系(MAPT细胞);用CCK-8法检测GPs对N2a、MAPT细胞存活率的影响;体外培养N2a (对照组)、MAPT细胞(模型组),向MAPT细胞中加入GPs (50、100 μg·mL^-1)进行干预,共同孵育24 h后收集细胞,采用Western blotting技术检测总tau蛋白量水平;利用代谢组学技术检测GPs对MAPT细胞内源性代谢产物的影响,明确差异代谢产物及通路。结果 50、100、200 μg·mL^-1 GPs对N2a细胞活力无明显影响;5、50、100、200 μg·mL^-1 GPs对MAPT细胞活力无显著性影响;与对照组相比,MAPT细胞内tau蛋白水平明显增加(P<0.001);与模型组比较,50 μg·mL^-1 GPs可明显减少MAPT细胞内总tau蛋白含量(P<0.05);代谢组学结果显示,按照差异代谢产物数量占比从高到底依次为脂质和类脂分子,有机酸及其衍生物,核苷、核苷酸和类似物等。通过京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析,差异代谢产物主要富集在核苷酸代谢、氨基酸合成、甘油磷脂代谢等通路。与模型组比较,给药后参与甘油磷脂代谢通路的胞磷胆碱和磷脂酰胆碱水平显著增加(P<0.001),甘油磷酰胆碱、甘油-3-磷乙醇胺水平显著降低(P<0.001)。结论 GPs可以减少细胞内tau蛋白的异常过表达,通过增加胞磷胆碱和磷脂酰胆碱水平、减少甘油磷酰胆碱和甘油-3-磷乙醇胺水平调控甘油磷脂代谢通路。     

四氢姜黄素对压力负荷引起的小鼠心肌肥厚的保护作用

目的 探究四氢姜黄素（THC）能否减轻压力负荷引起的成年小鼠病理性心肌肥厚。方法 24只C57BL/6小鼠随机分为4组：假手术（Sham）组、THC组、主动脉弓缩窄（TAC）组及TAC+THC组,每组6只。通过TAC术建立小鼠心肌肥厚模型,Sham组和THC组不结扎主动脉弓。TAC术后每日通过饮水摄入THC（120 mg/kg）。TAC术后4周检测小鼠心脏功能,分离心脏和肺脏计算心脏/体质量比和肺脏/体质量比,HE 染色计算心肌细胞平均横截面积,Masson 染色观察心脏组织胶原沉积程度,Western blotting 检测 α-肌球蛋白重链（α-MHC）、β-肌球蛋白重链（β- MHC）蛋白表达,实时定量PCR（real-time PCR）检测心房钠尿肽（ANP）mRNA表达情况。结果 TAC术后4周,小鼠发生病理性心肌肥厚,表现为心脏/体质量比、肺脏/体质量比、心肌细胞平均横截面积、心脏组织胶原沉积、β-MHC和ANP表达较Sham组小鼠明显增高,而左室射血分数（LVEF）、左室短轴缩短率（LVFS）和α-MHC表达较Sham组小鼠明显降低。与TAC组相比,THC处理可以明显缓解TAC引起的病理性心肌肥厚,改善心脏功能,提高α-MHC表达,降低心脏/体质量比、肺脏/体质量比、心肌细胞平均横截面积、心脏组织胶原沉积、β-MHC和ANP表达（均P＜ 0.05）。结论 THC能够有效减轻压力负荷引起的病理性心肌肥厚。     

血必净注射液改善早期脓毒症代谢紊乱的机制研究

目的 用代谢组学方法探究血必净注射液改善早期脓毒症代谢紊乱的作用机制。方法 将雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和实验组。模型组用盲肠结扎穿刺(CLP)构建脓毒症大鼠模型，假手术组只游离盲肠，不予以结扎穿孔；实验组在手术后立即腹腔注射血必净注射液4 mL·kg^-1,12 h后通过腹主动脉取血收集血清。用UPLC-QTOF-MS法分析大鼠血清代谢物变化，用偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)、正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA),筛选血必净注射液治疗脓毒症的差异代谢物(P<0.05, FC>1.2或<0.8, VIP>1)。用KEGG数据库筛选出关键代谢通路。结果 血必净注射液可以显著提高脓毒症大鼠存活率，建模后7 d,模型组生存率为4.5%,实验组生存率为36.4%,差异有统计学意义(P<0.05)。与假手术组相比，模型组共鉴定出24个差异代谢物，涉及半胱氨酸和蛋氨酸代谢、半乳糖代谢等12条代谢通路；与模型组相比，实验组共鉴定43个差异代谢物，涉及18条代谢通路；将模型组与实验组差异代谢物取交集，共获得8个共同差异代谢物，...     

USP1调节心肌细胞肥大的效果研究

目的研究泛素特异性蛋白酶1(USP1)在心肌肥厚中的作用。方法建立异丙肾上腺素(ISO)诱导的小鼠心肌肥厚模型并应用荧光定量PCR方法及Western Blot方法检测USP1在正常小鼠心脏组织及心肌肥厚小鼠心脏组织中的表达情况。分离大鼠原代心肌细胞,并用腺病毒的方法干扰USP1的表达,应用荧光定量PCR方法及Western Blot方法检测USP1的干扰效率;应用Image J软件统计干扰USP1后心肌细胞的面积,并应用荧光定量PCR方法检测下调USP1的表达对心肌肥厚相关基因Anp及Bnp mRNA表达的影响。结果 ISO诱导的小鼠心脏组织中心肌肥厚标志性基因Anp、 Bnp及Myh7的mRNA表达水平显著上调,提示心肌肥厚小鼠模型建立成功;USP1在小鼠心肌肥厚的心脏组织中其蛋白水平及mRNA水平均显著上调(P<0.01);荧光定量PCR及Western Blot结果显示,在大鼠原代心肌细胞中USP1得到有效敲低;干扰USP1的表达后,原代心肌细胞面积减小,并且抑制心肌肥厚标志物Anp及Bnp基因的表达。结论干扰USP1可以抑制心肌肥厚的发生。     

子宫中隔切除术后预防粘连方法探讨

目的 探讨子宫中隔并不孕患者宫腔镜术后不同处理方法预防宫腔粘连的效果.方法 55例子宫中隔并不孕患者行腹腔镜监护下宫腔镜子宫中隔切除术(TCRS),术后针对不同患者采用不同术后处理措施,包括宫腔放置与不放IUD,是否进行人工周期治疗,部分患者术后使用GnRH-a类药物治疗术后第1、3个月行宫腔镜检查随访,宫内放置IUD的患者;于术后第3个月取环.结果 54例患者术后进行宫腔镜检查随访,其中40例分别于术后第1、3个月完成了术后2次宫腔镜检查,另14例只完成一次检查.宫腔术后放环与否对术后宫腔形态影响无差异(P>0.05),术后使用人工周期治疗患者较未使用者子宫内膜厚,此两者术后第3个月宫腔镜检查发现宫底创面均已有内膜覆盖.使用GnRH-a类药物患者术后官腔形态满意.结论 TCRS术后宫腔放置IUD无助于预防术后粘连的发生;术后人工周期治疗应更个体化并有针对性的使用GnRH-a类药物治疗.术后及时进行宫腔镜检查随访可防止术后宫底新粘连的形成.     

10例狂犬病误诊原因分析

狂犬病近年来发病率有逐年增加的趋势,近十二年来,我们共遇见狂大病２３例,其中１０例被误诊为其它疾病,现就其误诊原因进行分析如下。１临床资料１．１ 一般资料：男８例,女２例;年龄最大７８岁,最小４岁。发病季节为３月～１１月。首诊科室,儿科３例、内科３例、转院３例、急诊科１例。１．２ 临床表现：发热７例,恐风５例,恐水６例,怕光３例,流涎１０例,胸闷、气促、呼吸困难４例,烦躁不安１０例,多汗７例,恐惧６例,肢体麻木４例,抽搐４例,恶心、呕吐２例,昏厥１例。所有病例发病至死亡时间为２天～６天,死亡原因为…     

住院患者精神用药情况调查分析

目的：了解目前住院精神患者的药物使用情况。方法：采用一日法调查西安市精神卫生中心403例住院精神患者诊断和治疗情况，并与上海市精神卫生中心2004年调查结果相比较。结果：①传统精神药物使用显著减少，新型精神药物使用占据首位；②抗精神病药物使用趋向小剂量化；③本组联用丙戊酸盐类药物显著增多；④我院精神药物使用情况与上海精神卫生中心比较有显著差异。结论：近年来精神药物使用情况已发生了显著变化，与新型精神药物疗效好，副作用少，患者依从性高有关。     

欧洲药典适用性认证介绍

目的介绍欧洲药典适用性认证程序,为国内药品监管机构和原料药生产企业提供信息,促进我国原料药生产企业的国际化。方法通过查阅调研欧盟相关药品法规和与EDQM同行面对面的交流,详细了解欧洲药典适用性认证的组织机构和具体程序。结果与结论欧洲药典适用性认证程序在对原料药的质量控制有重要作用,加强了药典的监管力度,进一步保证了原料药的质量、安全性和有效性。     

新疆维吾尔自治区基层医院平均住院日调查分析

目的 通过对新疆维吾尔自治区14个县乡级医疗机构住院患者平均住院日及影响因素进行分析,为县乡级医疗机构进一步提高医疗管理质量提供依据.方法 将2009-2010年1504例县乡级医院住院患者平均住院天数,按性别、年龄、院别、付费方式、疾病分类进行描述性统计和秩和检验分析.结果 不同性别间及院别间平均住院日差异均有统计学意义(均P＜0.05),男性平均住院日为10.39 d,女性为8.69d,乡级医院为9.27d,县级医院为9.50 d.不同年龄间平均住院日差异有统计学意义(P＜0.05),小于15岁组、15 ～24岁组、25～44岁组、45 ～65岁组、大干65岁组平均住院日分别为8.10 d、7.66d、8.83 d、10.26 d和11.33 d.自费患者平均住院日为8.39 d,新农合组为9.10 d,商业保险组10.17 d,社会基本医疗保险患者则为11.08 d.不同疾病分类间平均住院日差异明显,妊娠类平均住院日最短,为6.73 d,而肿瘤患者则为14.26 d.结论 不同性别、不同年龄段、不同疾病分类及不同付费方式间平均住院日存在差异,县级医疗机构和乡级医疗机构住院患者平均住院日也存在差异.     

不同方法治疗慢性宫颈炎的疗效分析

目的慢性宫颈炎是妇科最常见的疾病之一,可引起盆腔脏器炎症,并且与宫颈癌的发生关系密切。本文诣在探讨不同方法在慢性宫颈炎中的疗效。方法回顾性分析新乡市中心医院收治的210例宫颈炎患者,采用药物保妇康栓、聚焦超声治疗及宫腔镜下宫颈电切术的临床效果进行统计分析。结果宫颈电切术治疗有效率为97.9%,明显高于另外两组,差异有统计学意义。结论宫腔镜下宫颈电切术治愈慢性宫颈炎,并且切除宫颈移行带,减少宫颈癌发生。     

复发性耳廓假性囊肿的治疗

目的 探讨不同方法对复发性假性耳廓囊肿的治疗效果.方法 对2008年5月至2012年2月在我科就诊的58例复发性假性耳廓囊肿分成2组,穿刺抽液+冷冻+加压包扎组(19例),手术切除囊肿前壁软骨+对穿缝合组(39例),随访3个月到1年,观察2组治愈率、复发率,有效率、并发症等情况.结果 对照组1次治愈后痊愈5例,复发14例,治愈率为26.3％,复发率为73.7％,有效率为78.9％,其中耳廓增厚6例,1例并发化脓性软骨膜炎.观察组治愈38例,复发1例,经过1次穿刺后治愈,治愈率为97.4％,复发率为2.6％,有效率为100.0％.所有患者无耳廓变形、增厚,无化脓性耳廓软骨膜炎的并发症.结论 囊肿前壁软骨切除+对穿缝合是治疗复发性假性耳廓囊肿的高效、首选办法,值得推广.     

The effect of temperature and of cetrimide on the rate of loss of refractility of spores of Bacillus megaterium

The rate of germination of spores of Bacillus megaterium at 30° is not significantly different from the rate at 37° but the onset of germination is delayed; outgrowth is normal. At 45° germination of some spores occurs but the rate is much slower than at 37°, and there is no lag; emergence occurs from only a proportion of the germinated spores and after 3 or 4 vegetative cells have been produced, replication ceases. A single regression equation can represent the germination rate of the spores at 37° in the presence of from 0.0005 to 0.02% w/v of cetrimide and in its absence. In 0.0005% w/v of cetrimide, germ cells emerge from some of the germinated spores but many of them become swollen and disintegrate. Concentrations of 0.00125% w/v or more progressively inhibit swelling and completely inhibit emergence.     

经尿道前列腺汽化电切术与经尿道前列腺电切术治疗前列腺增生症的效果对比

目的 对比分析经尿道前列腺汽化电切术与经尿道前列腺电切术治疗前列腺增生症的效果.方法 将本院2011年3月～2013年2月收治的90例前列腺增生症患者随机分为观察组（n=45）和对照组（n=45）,观察组患者采用经尿道前列腺汽化电切术治疗,对照组患者采用尿道前列腺电切术治疗,比较两组患者的疗效.结果 观察组的手术时间、术中出血量、术后冲洗时间、术后留置导尿管时间、住院时间少于对照组（P＜0.05）,残余尿量、国际前列腺症状评分和生活质量评分优于对照组（P＜0.05）,但是两组患者的并发症发生率差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 经尿道前列腺汽化电切术治疗前列腺增生症具有疗效更确切、出血少、恢复快等优势,可以作为治疗前列腺增生症的首选方法.