银杏叶片萜类内酯含量测定方法改进

（1. ［摘要］目的改进目前《中华人民共和国药典》2005年版收载的银杏萜类内酯含量测定方法。方法对色谱条件中的流动相系统进行选择和优化,然后按中药质量标准分析方法验证指导原则进行方法学研究。结果采用蒸发光散射 高效液相色谱（ELSD HPLC）法,甲醇 水（28：72）系统为流动相,方法学总回收率为100.42%,RSD为3.80%（n＝6）。结论建立的ELSD HPLC法测定银杏萜类内酯专属性强,准确性好,可用于银杏叶片的质量控制。     

国产和进口银杏叶片中萜类内酯的比较

目的比较常用的国产与进口银杏叶片中所含萜类内酯,以保证临床用药的有效性。方法采用Ultimate 3000高效液相色谱仪结合蒸发光散射检测器,Zorbax SB-C18柱(250mm×4.6mm,5μm),以正丙醇-四氢呋喃-水(1:15:84)为流动相,体积流量1.0mL/min,漂移管温度115℃,压缩气体氮气体积流量为3.00L/min,检测国产和进口2种银杏叶片各3批所含银杏内酯A、B、C和白果内酯的量,并计算内酯总量。结果 2种银杏叶片每片所含银杏内酯A、B、C和白果内酯分别为(1.29±0.05)、(0.69±0.05),(0.83±0.17)、(0.45±0.09)mg,(0.45±0.05)、(0.46±0.02),(1.38±0.15)、(1.26±0.06)mg,内酯总量分别为(3.95±0.11)、(2.87±0.22)mg。结论 2种银杏叶片所含萜类内酯的量均符合中国药典的规定,其中二者所含银杏内酯C和白果内酯的量相似,但国产银杏叶片所含银杏内酯A、B的量以及内酯总量明显高于进口银杏叶片。     

HPLC测定银杏叶片中总黄酮醇苷和萜类内酯的含量

目的 测定银杏叶片中总黄酮醇苷和银杏萜类内酯的含量.方法 采用HPLC法,色谱柱为YMC-Pack ODS-A(150mm×6.0 mm含量,5 μm);流动相分别为甲醇-0.4%磷酸溶液(55:45)、水-甲醇-四氢呋喃(75:25:12);流速1.0 ml·min-1;检测波长360 nm;进样量10 μl.结果 槲皮素、山柰素和异鼠李素等3种黄酮苷元、白果内酯及银杏内酯A、B、C等4种银杏萜类内酯均能得到良好分离,标准曲线线性关系良好.结论 所建方法准确、灵敏、稳定、可靠,可满足定量分析的需要.     

蒸发光散射检测法测定银杏叶片中4种萜类内酯含量

目的优化银杏叶片银杏萜类内酯A、B、C及白果内酯含量测定方法。方法采用高效液相色谱 蒸发光散射检测法（HPLC ELSD）,色谱柱：Purispher star C18（4.6 mm×250 mm,5 μm）,以A：B（31：69）[A：四氢呋喃 乙腈 甲醇（5：22：12）,B：1%醋酸溶液]为流动相,柱温为室温,流速1 mL•min 1,载气为氮气,压力350 kPa,漂移管温度40 ℃,增阈值6.0。结果银杏内酯C进样量在0.46～13.80 μg范围内线性关系良好,r=0.999 0;平均回收率为99.14%（n＝5）,RSD＝1.39%;白果内酯进样量在1.175～35.250 μg范围内线性关系良好,r=0.999 7,平均回收率98.75%（n＝5）,RSD＝2.06%。银杏内酯A进样量在0.875～26.250 μg范围内线性关系良好,r=0.999 0,平均回收率98.71%（n＝5）,RSD＝3.11%;银杏内酯B进样量在0.475～14.250 μg范围内线性关系良好,r=0.999 1,平均回收率97.80%（n＝5）,RSD＝3.22%。结论优化后的方法简便,快速,准确,稳定性和重复性较好,可用于银杏叶片萜类内酯的含量测定。     

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定银杏叶片中4种萜类内酯含量

目的 优化银杏叶片银杏萜类内酯A、B、C及白果内酯含量测定方法.方法 采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD),色谱柱:Purispher star-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm),以A:B(31:69)[A:四氢呋喃-乙腈-甲醇(5:22:12),B:1%醋酸溶液]为流动相,柱温为室温,流速1 mL·min-1,载气为氮气,压力350 kPa,漂移管温度40 ℃,增阈值6.0.结果 银杏内酯C进样量在0.46～13.80 μg范围内线性关系良好,r=0.999 0;平均回收率为99.14%(n＝5),RSD＝1.39%;白果内酯进样量在1.175～35.250 μg范围内线性关系良好,r=0.999 7,平均回收率98.75%(n＝5),RSD＝2.06%.银杏内酯A进样量在0.875～26.250 μg范围内线性关系良好,r=0.999 0,平均回收率98.71%(n＝5),RSD＝3.11%;银杏内酯B进样量在0.475～14.250 μg范围内线性关系良好,r=0.999 1,平均回收率97.80%(n＝5),RSD＝3.22%.结论 优化后的方法简便,快速,准确,稳定性和重复性较好,可用于银杏叶片萜类内酯的含量测定.     

HPLC-ELSD法测定银杏叶分散片中萜类内酯的溶出度

目的:建立测定银杏叶分散片中萜类内酯的溶出度测定方法。方法:用HPLC-ELSD法测定溶出液中萜类内酯的含量,用Hypersil ODS C18柱(200 mm×4．6 mm,5μm),正丙醇-四氢呋喃-水(1:15:84)为流动相,流速1．0 ml·min-1,用ELSD检测,溶出度测定方法用《中国药典》2005年版二部附录XC第三法,以0．1 mol·L-1盐酸溶液为溶剂。结果:白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B及银杏内酯C的线性范围分别为0．92-3．66,0．51-2．04,0．52-2．08μg和0．45-1．78μg,平均回收率分别为100．1％(RSD 0．7％),97．7％(RSD为1．1％),97．6％(RSD为1．1％),101．0％(RSD0．9％)。3批样品溶出度(限度)分别为97％,96％和98％％。结论:该方法简便、重复性好,可作为银杏分散片中萜类内酯的溶出度的测定。     

HPLC-MS法测定银杏叶片中银杏内酯A、B、C和白果内酯

目的建立测定银杏叶片中银杏内酯A、B、C及白果内酯的HPLC-MS法。方法采用HPLC-MS法,Zorbax SB-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇–10 mmol乙酸铵水溶液,梯度洗脱;柱温:30℃;体积流量:1 m L/min;进样量:10μL。采用离子阱(ESI)负离子模式进行检测,检测模式为母离子全扫描方式(Scan),并进行二次离子化扫描。雾化器压力310.28 k Pa,毛细管电压3.5 k V,碰撞诱导解离电压150 V,干燥气为N_2,干燥器温度350℃,干燥气流量8.0 L/min。结果银杏内酯A、B、C和白果内酯在0.100 6~2.012 0、0.102 0~2.040 0、0.050 0~1.000 0、0.101 6~2.032 0 mg/m L显示良好的线性关系;平均加样回收率分别为97.1%、97.0%、98.2%、97.8%,RSD值分别为1.73%、1.68%、1.76%、1.83%(n=6)。结论该法灵敏度高、选择性高、检测限低,为银杏叶片的质量控制提供依据。     

高效液相色谱法-蒸发激光散射检测器测定银杏酮酯舌下片中萜类内酯的含量

目的 :采用高效液相色谱法 -蒸发激光散射检测器测定银杏酮酯舌下片中总内酯的含量 ,以控制该制剂质量。方法 :应用高效液相色谱 -蒸发激光散射检测法分析 4种萜类内酯的含量。色谱条件为 :Diamonsil TM (钻石 ) C1 8色谱柱(2 5 0 mm× 4 .6 mm,5μm) ;流动相 :甲醇 -水 (36 :6 4 ) ;柱温 :30 o C;流速为 0 .6 ml/ min;检测器条件 :漂移管温度为 4 0 o C,载气压力为 2 .0 bar,灵敏度为 6。结果 :4种萜类内酯之间分离度均达 2 .5以上 ;理论板数以白果内酯峰计算为 830 8,6次平均加样回收率分别为 :白果内酯 10 2 .3% (RSD为 1.4 9% ) ,银杏内酯 C 10 2 .6 % (RSD为 1.31% ) ,银杏内酯 A 10 1.2 % (RSD为 2 .39% ) ,银杏内酯 B98.0 % (RSD为 2 .75 % ) ;白果内酯、银杏内酯 C、银杏内酯 A、银杏内酯 B,分别在 3.4～ 2 0 .4 μg、2 .2 2～ 13.32μg、2 .4 6～ 14 .76μg、2 .0 6～ 12 .36μg范围内 ,进样量对数值与峰面积对数值呈良好的线性关系。结论 :本法测定银杏酮酯舌下片中萜类内酯的含量 ,结果准确 ,重复性好     

HPLC-ELSD法测定银杏叶口腔崩解片中的银杏内酯含量

目的:建立HPLC-ELSD法测定银杏叶口腔崩解片中银杏内酯A,B,C及白果内酯含量。方法:VP-ODSC18柱(150 mm×4．6 mm,5μm),流动相为正丙醇-四氢呋喃-水(1:15:84),流速1．0 ml·min-1,ELSD检测器。结果:银杏内酯A、B、C及白果内酯的线性范围分别为:0．18-3．56 mg·ml-1(r=0．999 8)0．11-2．18 mg·ml-1(r=0．999 8),0．14-2．78 mg．ml-1(r= 0．999 7)及0．16-3．10 mg·ml-1(r=0．999 8),平均回收率分别为99．9％(RSD 2．9％),100．7％(RSD 3．0％),100．0％(RSD 1．8％)及100．1％(RSD2．6％)。结论:方法简单,准确,可用于银杏叶口腔崩解片的质量控制。     

RP-HPLC法测定复方银杏叶片中葛根素的含量

目的:建立以RP-HPLC法测定复方银杏叶片中葛根素含量的方法。方法:色谱柱为Kromasil C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(20∶80),流速为1mL.min-1,测定波长为250nm,柱温为35℃。结果:葛根素进样量在0.8~2.4μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9993,n=5);平均回收率为99.98%,RSD=1.31%(n=5)。结论:本法简便、灵敏度高、重现性好,可用于复方银杏叶片的质量控制。     

高效液相色谱法测定恩他卡朋片的含量

目的建立恩他卡朋片含量测定的方法。方法色谱柱:Intersil C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:甲醇-乙腈-0.03 mmol.L-1磷酸二氢钾缓冲溶液(磷酸调节pH至2.75)(35∶25∶40,V/V/V),检测波长:310 nm,柱温:30℃,流速:1.0 mL.min-1。结果恩他卡朋的线性范围为10～50 mg.L-1(r=0.999 9),平均回收率为(99.74±0.69)%,RSD=0.68%(n=9)。结论本方法简便、准确、重现性好,可用于恩他卡朋片的含量测定。     

高效液相色谱法测定马拉韦罗片的含量

目的建立高效液相色谱法测定马拉韦罗片的含量。方法色谱柱:Shimadzu C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-0.01 mol.L-1磷酸二氢钾溶液(25∶75,V/V),柱温:(35.0±1.0)℃,流速:1.0 mL.min-1,检测波长:197 nm。结果马拉韦罗的线性范围为0.1～0.5 g.L-1(r=0.999 7),平均回收率为(99.83±0.60)%(n=9)。结论本方法简便、准确,可用于马拉韦罗片的含量测定。     

Determination of leflunomide in tablets by high performance liquid chromatography

In the present study, a reverse phase high performance liquid chromatography (HPLC) method was validated and applied for the determination of leflunomide in tablets. Chromatographic separation of leflunomide and oxazepam as an internal standard was carried out on a C(18) column (50 mm, 3 mm i.d.) using a mobile phase, consisting of methanol and water (60:40, v/v), at a flow rate of 0.5 ml min(-1) and UV detection at 260 nm. The retention times for oxazepam and leflunomide were 2.6 and 5.2 min, respectively. The validated quantification range of the method was 2.7 x 10(-6) to 5.5 x 10(-5) M for leflunomide. The results of the developed procedure in tablets were compared with those of UV spectrophotometry to assess active leflunomide content.     

氯沙坦钾片的HPLC测定

目的:建立高效液相色谱法测定氯沙坦钾片含量,为质量控制提供有效的分析手段.方法:色谱柱:Phenomenex ODS C18(5μm、4.6mm×150mm);流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液(55:45);检测波长:230nm.结果:制剂中辅料和有关物质对主药无干扰,氯沙坦钾在浓度100.2～350.8μg/mL范围内线性关系良好,相关系数r＝0.9999;平均回收率分别为99.36%、99.68%、99.40%,RSD为0.42%.结论:本法专属性好,准确,简便.     

HPLC-CAD法测定盐酸乙胺丁醇片中盐酸乙胺丁醇的含量

目的建立高效液相-电雾检测器（HPLGCAD）方法测定盐酸乙胺丁醇片剂中盐酸乙胺丁醇（EMB）的含量。方法采用安捷伦1200系列高效液相色谱系统联合电雾式检测器测定。流动相溶解片剂样品,涡旋约30min,过滤后注入色谱系统。色谱柱为HederaODS-2C18柱（250mm×4．6mm,5μm）,柱温：40℃,流动相：15mm01·L^-1醋酸铵溶液（pH7．3）-甲醇（80：20,v／v）,流速：1．0mL·min^-1,进样体积：20μL。CAD参数：气压35psi（housenitrogen）,量程100pA。结果此方法测定EMB的最低定量限（LOQ）为15μg·mL^-1（S／N=10）,方法回收率〉99．84％,日间、日内精密度均〈3．50％,线性范围为25-200μg·mL^-1（r〉0．9999）。片剂的赋形剂对EMB的含量测定几乎没有干扰。结论本方法准确、快速、简便,可用于EMB的测定及其释放度和稳定性研究,对其类似化合物的测定具有参考价值。     

反相高效液相色谱法测定盐酸乙哌立松片剂的含量

目的：建立高效液相色谱法测定盐酸乙哌立公片含量的方法。方法：酸盐乙哌立松片加甲醇,超声振荡,过滤后以ODS C18为分析柱,以甲醇－水－三乙胺（80：19．5：0．5,V／V）为流动相,托哌酮为内标,于254nm波长检测。结果：盐酸乙哌立松在0．4－1．6mg/ml浓度范围内线性关系良好（r=0.9999),平均回收率98．4％,RSD,1．2％,三批协酸乙哌立松片含量测定结果分别为标示量的97．8％,98．3％和98．9％,结论：方法快速,准确,专一性强,适用于盐酸乙哌立松片的含量测定。     

HPLC法测定甲磺酸酚妥拉明分散片的含量

目的：建立了采用高效液相色谱法测定了一种药物新剂型甲磺酸酚妥拉明分散片的含量的方法。方法：采用Ｋromasil C18色谱柱,流动相为醋酸溶液（取冰醋酸１.0ml加水至１０00ml,用三乙胺调节pH值至3．8）－甲醇（10：90）, 检测波长设定在278nm。结果：线性范围为进样量0．2－5．0μg,r=0.9998,平均回收率为99．5％,RSD＝0．70％。结：本方法快速、无干扰、精密度好,灵敏度高。     

那格列奈片的高效液相色谱分析

目的:建立那格列奈片中主药那格列奈及杂质的高效液相色谱测定方法。方法:采用Shim-Pack CLC-ODS(150mm×6.0mm)色谱柱,甲醇-0.02mol.L~(-1)磷酸盐缓冲液(pH6.6)(75:25)作流动相,检测波长210nm,含量测定采用外标法, 杂质检查采用面积归一化法。考察了不同流动相下那格列奈的色谱行为及其与杂质的分离情况。结果:在优化的色谱条件下,片剂辅料不干扰测定,有关杂质与主药那格列奈分离良好,那格列奈线性范围5.1～101.0 mg·L~(-1),最低检测限0.2 mg·L~(-1),含量测定的回收率99.4％～100.4％,RSD<1.7％。结论:此法简便,准确,专属性强,重现性好,可用于那格列奈片的质量控制、稳定性考察和有效期预测。