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相似文献
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1.
目的采用实时荧光定量聚合酶链反应(RFQ-PCR)技术分析非霍奇金淋巴瘤(NHL)患儿外周血增殖诱导配体(APRIL)及其受体mRNA水平。方法在APRIL及其受体基因的高保守区设计相应引物和荧光探针,实时检测PCR产物的荧光强度,根据标准品建立的标准曲线,由软件自动计算出待测样本中靶基因中APRIL和B细胞成熟抗原(BCMA)水平,并以靶基因和内参β2微球蛋白(β2M)mRNA水平的比值作为评价靶基因表达水平的指标。结果RFQ-PCR检测靶基因mRNA水平的线性范围为10-109ng/L,批内和批间重复性测定的变异系数(cv)分别为1.68%-5.97%和6.40%-10.58%。NHL 22例APRIL及其受体BCMA和穿膜蛋白活化物(TACI)mRNA表达水平均显著高于正常儿童(P<0.05)。结论成功建立RFQ-PCR检测APRIL及其受体mRNA水平的方法,具有较好的检测灵敏度和重复性;APRIL在儿童NHL的发病过程中可能通过受体BCMA和TACI起重要作用。  相似文献   

2.
目的观察更昔洛韦(丽科伟)对儿童传染性单核细胞增多症治疗观察。方法随机对照方法将400例符合儿童传染性单核细胞增多症患儿,分为治疗组(350例)和对照组(50例)进行治疗,其他治疗方法相同。结果更昔洛韦治疗组疗效明显,患儿热退时 间明显短于对照组(P〈0.05),且无明显不良反应。结论更昔洛韦是治疗传染性单核细胞增多症患儿最有效的药物。  相似文献   

3.
目的:探讨再生障碍性贫血(简称再障)患儿骨髓造血干细胞端粒酶活性及端粒酶逆转录酶(hTERT)基因和端粒酶RNA组分(hTERC)基因的表达变化和关系。方法:用重复序列扩增(TRAP)银染法和实时荧光定量RT-PCR法分别检测52例慢性再障患儿(CAA组)、13例急性再障患儿(SAA组)和21例骨髓造血正常儿童(对照组)端粒酶活性及hTERT和hTERC mRNA的表达。结果:CAA组、SAA组端粒酶活性和hTERT mRNA水平均高于对照组(P<0.01),且CAA组端粒酶活性和hTERT mRNA水平较SAA组升高(P<0.05);hTERC mRNA在各组间表达差异无统计学意义(P=0.812);hTERTmRNA的表达水平与端粒酶活性呈正相关(r=0.660,P<0.01)。结论:端粒酶活性的表达变化与儿童再障发病及发展过程有关,hTERT表达在端粒酶活性调节过程中起重要作用。  相似文献   

4.
目的:实时荧光定量PCR方法检测E2A-PBX1融合基因的表达水平,探讨其在监测急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿微小残留病(MRD)及判断预后中的临床价值。方法:采用实时荧光定量RT-PCR方法,动态检测11例E2A-PBX1融合基因阳性的ALL患儿在初治期(11例)、完全缓解期(11例)、复发期(3例)和10例同期骨髓细胞形态学正常的非血液及肿瘤疾病对照组患儿的E2A-PBX1融合基因表达水平。结果:11例ALL患儿初治期和复发期的E2A-PBX1基因表达水平均显著高于缓解期及对照组(P<0.01)。与诱导缓解治疗第33天E2A-PBX1水平表达阴性的患儿比较,表达阳性的患儿3年的复发率增高,无病生存率降低(均P<0.05)。结论:实时荧光定量RT-PCR检测E2A-PBX1融合基因的表达水平是监测MRD、预测复发、指导个体化治疗的良好指标,诱导缓解第33天E2A-PBX1融合基因水平可用于判断预后。  相似文献   

5.
目的:探讨肾母细胞瘤患儿血液中p73基因的转录表达、启动子甲基化状态及二者之间关系。方法:收集45例肾母细胞瘤患儿为病例组,以健康体检或因其他原因就诊的性别、年龄匹配的15例(排除肿瘤等恶性疾病)儿童为对照组。采集两组儿童外周血,运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和甲基化特异性PCR (MSP)法检测p73基因转录表达水平及其启动子甲基化状态,并分析病例组中p73基因的表达及甲基化与临床资料的关系,及p73基因的甲基化对其转录表达的影响。结果:病例组中p73 mRNA的相对表达量(3.2±0.9)高于对照组(1.6±1.1),差异有统计学意义(P<0.01);病例组p73基因甲基化阳性率(20%)低于对照组 (73%),差异有统计学意义(P<0.01)。病例组中甲基化p73 mRNA的相对表达量大于非甲基化p73 mRNA的相对表达量(P<0.01),且大于对照组中甲基化p73 mRNA的相对表达量(P<0.01);非甲基化p73 mRNA的相对表达量在两组间差异无统计学意义(P=0.810)。结论:肾母细胞瘤外周血中p73基因启动子的异常甲基化是其基因表达调节方式之一,并与肾母细胞瘤的发生发展有关;发生甲基化的p73基因在肾母细胞瘤中有可能充当癌基因的角色,转录水平的过度表达与其甲基化状态有关。  相似文献   

6.
目的 探讨环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)在3岁以下反复喘息患儿中的表达水平及其对血清类黏蛋白1样蛋白3基因(ORMDL3)表达水平的影响。方法 选取2017年6月至2019年6月就诊的3岁以下反复喘息儿童36例为病例组,另选取行健康体检的24例儿童为健康对照组,使用荧光定量PCR法检测外周血CREB的表达水平。培养人支气管上皮细胞(BEAS-2B),使用双荧光素酶报告基因和荧光定量PCR法检测过表达和siRNA干扰CREB对BEAS-2B细胞ORMDL3基因启动子活性及mRNA表达水平的影响。结果 病例组CREB表达水平高于健康对照组(P < 0.001)。在BEAS-2B细胞中,过表达CREB能上调ORMDL3基因的启动子活性及mRNA表达水平(P < 0.05);siRNA干扰CREB的表达后ORMDL3基因的启动子活性及mRNA表达水平均降低(P < 0.05)。结论 反复喘息患儿CREB表达增加,其可能通过调控ORMDL3基因的表达参与了反复喘息的发病。  相似文献   

7.
目的 探讨环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)在3岁以下反复喘息患儿中的表达水平及其对血清类黏蛋白1样蛋白3基因(ORMDL3)表达水平的影响。方法 选取2017年6月至2019年6月就诊的3岁以下反复喘息儿童36例为病例组,另选取行健康体检的24例儿童为健康对照组,使用荧光定量PCR法检测外周血CREB的表达水平。培养人支气管上皮细胞(BEAS-2B),使用双荧光素酶报告基因和荧光定量PCR法检测过表达和siRNA干扰CREB对BEAS-2B细胞ORMDL3基因启动子活性及mRNA表达水平的影响。结果 病例组CREB表达水平高于健康对照组(P < 0.001)。在BEAS-2B细胞中,过表达CREB能上调ORMDL3基因的启动子活性及mRNA表达水平(P < 0.05);siRNA干扰CREB的表达后ORMDL3基因的启动子活性及mRNA表达水平均降低(P < 0.05)。结论 反复喘息患儿CREB表达增加,其可能通过调控ORMDL3基因的表达参与了反复喘息的发病。  相似文献   

8.
目的:CYP3A5参与多种常用化疗药物的代谢反应。目前对于CYP3A5基因参与急性白血病的研究主要限于细胞系的体外研究。该文通过检测急性白血病患儿CYP3A5-6986位点的基因型分布特点和基因表达水平,探讨其基因表达水平对白血病患者治疗、预后评价的意义。方法:①应用聚合酶链-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)及PCR产物序列测定,检测66例初治急性白血病患儿和20例对照儿童的CYP3A5-6986位点基因型分布;②实时定量PCR法检测病例组及对照组儿童骨髓单核细胞内wt-CYP3A5和SV1-CYP3A5 mRNA的表达水平。结果:①对照组和急性白血病儿童CYP3A5-6986多态性位点存在野生型(CYP3A5*1/*1)、杂合突变型(CYP3A5*1/*3)、纯合突变型(CYP3A5*3/*3)3种基因型;②66例初治急性白血病患儿按基因型分组后对其mRNA表达水平进行检测,3组间的wt-CYP3A5 mRNA差异有显著性意义(P<0.05);③ALL组wt-CYP3A5 mRNA低表达者第1次化疗后的缓解率高于wt-CYP3A5 mRNA高表达者,两者比较差异有显著性意义(P<0.05);④对两例急性淋巴细胞性白血病患儿的CYP3A5 mRNA表达水平动态监测显示,1例复发前wt-CYP3A5 mRNA表达水平较缓解时升高。另1例wt-CYP3A5 mRNA表达一直处于较低水平,患儿目前仍处于缓解状态。结论:wt-CYP3A5 mRNA表达与白血病患儿的化疗疗效及预后密切相关,动态监测wt-CYP3A5 mRNA表达水平变化有助于判断病情变化。[中国当代儿科杂志,2009,11(7):549-554]  相似文献   

9.
目的:研究儿童B系急性淋巴细胞性白血病(B-ALL)患者骨髓单个核细胞中X染色体耦联锌指蛋白(ZFX)的表达及其与白血病预后的关系。方法:通过Western blot方法检测白血病细胞株(REH、HL-60、NB4、K562)中ZFX蛋白的表达;利用PCR方法扩增获得全长ZFX,并测序验证;通过实时定量PCR检测82例初发B-ALL儿童骨髓样本,24例B-ALL缓解期样本,以及64例骨折或先天性心脏病手术患儿样本(对照组)ZFX的表达;并根据治疗3年内有无骨髓或中枢神经系统复发分为预后好组和预后差组,比较两组患儿初发时骨髓中ZFX mRNA的表达水平。结果:ZFX蛋白在白血病细胞株REH、HL-60、NB4和K562中均有表达。初发ALL组骨髓中ZFX mRNA表达高于对照组(P<0.01);ALL缓解组ZFX mRNA表达明显低于ALL初发组(P<0.01);预后差的ALL患儿初发骨髓中ZFX mRNA的表达高于预后好的患儿(P<0.05)。结论ZFX在儿童B-ALL中高表达,且预后差组表达相对较高,提示它可能在B-ALL预后判断中有重要意义。  相似文献   

10.
目的:探讨再生障碍性贫血(简称再障)患儿应用环孢素治疗后外周血中CD4+CD25+CD127low T调节细胞(Treg)及Foxp3 mRNA表达水平的变化。方法:选取50例慢性再障(CAA)患儿,随机分为环孢素治疗组(30例)及非环孢素治疗组(20例),同时选取健康儿童20例作为对照组。采用流式细胞术检测各组患儿CD4+CD25+CD127low Treg的表达,并用实时荧光定量PCR检测Foxp3 mRNA的水平。结果:治疗6个月后,环孢素治疗组外周血CD4+CD25+CD127low Treg和Foxp3 mRNA表达水平与对照组比较差异无统计学意义;而非环孢素治疗组两者表达水平显著低于对照组,差异有统计学意义;环孢素治疗组两者表达水平明显高于非环孢素治疗组,差异有统计学意义。结论:环孢素可以促进再障患儿外周血CD4+CD25+CD127low Treg及Foxp3 mRNA表达水平上升。  相似文献   

11.
OBJECTIVE: Idiopathic nephrotic syndrome (INS) is a common glomerular disease. The pathogenesis of the disease remains unclear. Recent studies indicate that transforming growth factor beta (TGF beta) is the main cytokine involved in glomerular disease. It plays an important role in the development of INS and in occurrence of glomerulosclerosis. The present study aimed to study changes and significance of TGF beta in children with idiopathic nephrotic syndrome (INS). METHODS: Totally 35 cases with INS (13 males, 22 females) were studied. The age of onset was between 2 years and 1 months and 14 years with an average of 8 years and 3 months. The active stage group had 35 cases and the remission stage groups had 25 cases. The cases in active stage group had first onset of the disease with obvious clinical symptoms and abnormal laboratory findings without use of corticosteroids. The cases in remission stage group were asymptomatic without abnormal laboratory findings. Protein in urine was negative over 4 weeks after oral administration of prednisone for 8 weeks. Twenty five cases were steroid responsive and 10 cases were steroid non-responsive among the 35 cases. Thirty healthy young children were enrolled as control. TGF beta was detected by ELISA in peripheral blood mononuclear cell (PBMC) culture medium. The TGF beta mRNA gene expression was measured by in situ PCR in PBMC. RESULTS: (1) Concentration of TGF beta(247 +/- 26) ng/L and TGF beta mRNA expression (0.57 +/- 0.18) in active stage of simple type or nephritis type INS were higher than those of remission stage and control (P < 0.01). Concentration of TGF beta[(125 +/- 16) ng/L] and TGF beta mRNA expression (0.30 +/- 0.12) in remission stage were higher than that of control (P < 0.05). (2) The level of TGF beta protein in nephritis type [(275 +/- 26) ng/L] was significantly higher than that in simple type [(220 +/- 18) ng/L] in active stage INS (t = 6.45, P < 0.01). No significant difference in TGF beta mRNA expression was found between the nephritis type (0.58 +/- 0.15) and simple type (0.55 +/- 0.16) in active stage INS, either (P > 0.05). But these two types were different from the control (P < 0.01). (3) Concentration of TGF beta and TGF beta mRNA expression after therapy was clearly lower than that before therapy in steroid responsive group (P < 0.01). Whereas no significant change was seen in steroid non-responsive group. Both indicators were higher in steroid non-responsive group than in steroid responsive group whether before or after therapy. CONCLUSION: TGF beta may play an important role in the mechanism of INS and its level in PBMC can be used as an immunological indicator for the illness state, therefore, determination of TGF beta level and mRNA may be of some clinical significance.  相似文献   

12.
目的:观察川崎病(KD)患者血浆基质细胞衍生因子1(SDF1)水平及外周血单个核细胞(PBMC)中SDF1的受体CXCR4mRNA表达变化,并分析其与KD及冠状动脉损害的相关关系。方法:采用ELISA方法及荧光定量PCR技术分别测定12例合并冠脉损害和44例无冠脉损害KD患者的急性期与缓解期血浆SDF1浓度及PBMC中CXCR4mRNA表达变化,并与60例正常人比较。结果:KD患者急性期血浆SDF1蛋白水平为1833±395ng/L;PBMC中CXCR4mRNA表达水平为6.57±2.81较对照组升高(P<0.05,P<0.01);缓解期血浆SDF1蛋白和CXCR4mRNA表达水平较急性期下降(P<0.01),但仍显著高于对照组。KD患者合并冠脉损害者PBMC中CXCR4mRNA表达为8.19±2.39,显著高于无冠脉损害者的6.13±2.77(P<0.01)。结论:KD患者血浆SDF1水平及PBMC中CXCR4mRNA表达是增高的,有可能作为判断KD病情活动状态及冠脉损害的免疫学指标。  相似文献   

13.
单纯性肥胖儿童外周血单核细胞载脂蛋白E基因的表达   总被引:4,自引:0,他引:4  
Xiang W  Ma YL  Chen C  Fu SM  Yang JF  Zhao SP  Guo DX  Zhao DC  Nie S  Wang FL 《中华儿科杂志》2003,41(10):755-760
目的 探讨单纯性肥胖儿童外周血单核细胞载脂蛋白E基因表达及其与血脂、脂蛋白、载脂蛋白的相关关系。方法 采用竞争性逆转录 聚合酶链式反应方法分析 3 2例单纯性肥胖儿童和 3 2例正常健康儿童外周血单核细胞的载脂蛋白E基因表达。结果 载脂蛋白E基因能在儿童外周血单核细胞表达 ,与健康儿童比较 ,单纯性肥胖儿童外周血单核细胞载脂蛋白E基因表达水平显著下调 (P <0 0 1) ,重度肥胖儿童尤其明显 ,载脂蛋白E基因表达水平与肥胖度呈负相关 (P <0 0 5)。肥胖儿童存在明显的血脂代谢紊乱 ,载脂蛋白E基因表达水平与低密度脂蛋白 胆固醇呈负相关 ,与血载脂蛋白E浓度呈正相关 (P <0 0 5) ,与血总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白 胆固醇、脂蛋白 (a)、载脂蛋白AⅠ水平无明显相关 (P >0 0 5)。结论 单纯性肥胖儿童外周血单核细胞载脂蛋白E基因表达水平明显下调 ,并与肥胖程度及血脂代谢异常相关联 ,提示载脂蛋白E基因表达变化可能与肥胖的发生发展及肥胖的心血管病变相关联  相似文献   

14.
目的:MYCN基因表达对神经母细胞瘤的治疗及预后评估有指导意义,目前国内对于MYCN基因mRNA的定量检测未见报道,该研究拟采用SYBR 绿色荧光染料Ⅰ(SYBR GREEN Ⅰ) 实时检测的逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测神经母细胞瘤细胞系LA-N-5细胞 MYCN基因mRNA的表达,并对其可行性及实用性进行研究,力争探索出微量瘤标本的MYCN基因mRNA定量检测的可行方法。方法:提取神经母细胞瘤细胞系LA-N-5 细胞总RNA,采用SYBR GREEN I 实时检测的RT-PCR检测其MYCN基因mRNA的表达,并用3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)作为内参照,将MYCN基因的mRNA拷贝数与GAPDH的拷贝数相除,结果为单细胞MYCN基因mRNA的表达水平。结果:反应标准曲线有良好的相关性( R2>0.99), PCR 产物特异, 神经母细胞瘤细胞系LA-N-5 MYCN基因mRNA的表达水平为17.4±1.2。结论:只要严格控制PCR 反应条件,SYBR GREEN Ⅰ定量RT-PCR 法可以作为一种良好的定量PCR方法对神经母细胞瘤细胞系LA-N-5 MYCN基因mRNA的表达进行检测,此方法为临床微量神经母细胞瘤瘤组织的MYCN基因mRNA的定量检测提供了可能。[中国当代儿科杂志,2007,9(1):47-50]  相似文献   

15.
传染性单核细胞增多症外周血B淋巴细胞CD21的表达   总被引:7,自引:2,他引:7  
目的 探讨外周血B淋巴细胞CD2 1 的表达在传染性单核细胞增多症 (IM)发病机制中的作用。方法 用流式细胞术测定IM患儿 38例、新生儿 1 4例、对照组 1 4例的外周血B淋巴细胞CD2 1 表达水平。结果 IM组外周血中B淋巴细胞比例、表达CD2 1 B淋巴细胞数及B淋巴细胞表达CD2 1 位点均高于 2个对照组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1 )。结论 EB病毒 (EBV)感染可诱导B淋巴细胞持续高表达CD2 1 ,以利于病毒进入细胞并导致潜伏型感染和增殖性感染。  相似文献   

16.
目的探讨应用聚合酶链反应技术(PCR)检测EBV-DNA的临床应用及140例EBV阳性病例的临床分析。方法应用PCR和荧光检测技术检测外周血EBV-DNA,并对140例阳性病例的临床特点进行回顾性分析。结果病例年龄1月~12岁,中位年龄3岁,<3岁84例,3~7岁45例,>7岁11例;140例患儿中传染性单核细胞增多症17例(12.1%),呼吸道感染20例(14.3%),另外还有原发性血小板减少性紫癜、肝炎、嗜血细胞综合征、过敏性紫癜等及隐性感染病例;结论PCR法检测EBV-DNA时间短,准确性好,灵敏度高,在EB病毒感染相关疾病诊断中很有价值。  相似文献   

17.
Bao HY  Chen RH  Huang SM  Pan XQ  Fei L 《中华儿科杂志》2003,41(11):822-826
目的 观察姜黄素对系膜细胞增殖以及对系膜细胞基质蛋白分泌的影响 ,并进一步探索姜黄素对系膜细胞白细胞介素 (IL 1β)和巨噬细胞趋化蛋白 (MCP 1)基因表达的改变。 方法 采用不同浓度姜黄素处理体外培养的人肾小球系膜细胞后 ,分别收集上清液及细胞 ,应用ELISA的方法测定上清液中胶原Ⅳ和Ⅲ的蛋白分泌量 ,MTT法测定系膜细胞活性 (吸光度值 ) ,RT PCR的方法测定系膜细胞IL 1β和MCP 1基因的相对表达量 ,以未加LPS及姜黄素和仅加LPS不加姜黄素作为对照组。结果 当姜黄素浓度大于或等于 6 2 5 μmol/L时 ,系膜细胞增殖明显受到抑制 (P <0 0 1) ,且表现为浓度依赖性。在基础状态下 ,系膜细胞分泌一定量的胶原Ⅳ和Ⅲ [(10± 9 13)ng/ml和 (2 9 5± 0 5 8)ng/ml],亦有MCP 1mRNA表达 [(42 1± 14 98) % ],但IL 1βmRNA几乎不表达 ;经LPS刺激后其胶原Ⅳ和Ⅲ分泌增加 [(138 75± 2 3 2 3)ng/ml和 (38 2 5± 5 38)ng/ml],同时IL 1β和MCP 1基因表达上调 [分别为 (16 91± 1 6 8) %和 (76 6± 6 5 9) % ],而姜黄素浓度为 4 μmol/L时即能明显抑制LPS刺激的系膜细胞胶原Ⅳ和Ⅲ的蛋白分泌 (P <0 0 5 ) ,且在高浓度时作用更为明显 ;同时姜黄素还能消除LPS上调系膜细胞IL 1β和MCP 1基因表达的作用 (P <  相似文献   

18.
During a 5 year period, 33 children (22 males) were diagnosed to have infectious mononucleosis (M:F::2:1; age 9 mo-15 y). The common clinical features observed were fever (100%), lymphadenopathy (84%) hepatosplenomegaly (81%), tonsillar enlargement (45%), neck swelling (30%), upper respiratory symptoms (21%), epitrochlear node enlargement (20%), vomiting and diarrhea (1%). Ten children had complications; upper airway obstruction and hemophagocytic lymphohistocytosis occurred in four each and septic shock in two. EBV associated infectious mononucleosis in hospitalized children was found to affect mainly preschool children and had a favorable prognosis.  相似文献   

19.
目的 探讨肺炎支原体肺炎(MPP)患儿NLRP3炎症小体通路的表达及意义。方法 147例MPP患儿根据病情分为轻症组(n=83)和重症组(n=64),根据病程分为急性期(n=77)和恢复期(n=70)组,同期选取健康儿童50例作为对照组。实时荧光定量PCR技术检测外周血NLRP3、ASC和caspase-1基因表达,酶联免疫吸附试验检测血清IL-1β和IL-18水平。结果 MPP患儿外周血NLRP3、ASC和caspase-1 mRNA的表达量均高于对照组(P < 0.05),IL-1β和IL-18水平也高于对照组(P < 0.05)。轻症和重症MPP患儿的NLRP3、ASC、caspase-1 mRNA表达量以及IL-1β、IL-18水平均高于对照组,以重症组更高,差异均有统计学意义(P < 0.05)。MPP患儿急性期和恢复期的NLRP3、ASC和caspase-1 mRNA表达量以及IL-1β、IL-18水平均高于对照组,以急性期更高,差异均有统计学意义(P < 0.05)。NLRP3与ASC mRNA、caspase-1 mRNA表达量以及IL-1β、IL-18水平均呈正相关(r=0.701、0.717、0.676和0.645,P < 0.05)。结论 NLRP3炎症小体通路可能参与了MPP发病过程,与病情严重程度及病程密切相关。  相似文献   

20.
IgM antibodies specific for Epstein-Barr virus (EBV) were measured in 302 patients with high IgG antibody titers to study whether EBV was the cause of disease in children having one or more symptoms of classical infectious mononucleosis. IgM antibodies specific for EBV were found in all patients with the defined clinical picture of infectious mononucleosis. In addition the majority of cases with clinical suspicion of the disease had also specific IgM titers. Besides infectious mononucleosis EBV can also be the cause of other diseases like hepatitis, and lymphadenitis: we found IgM antibodies specific for EBV in 48% of patients with nonbacterial lymphadenitis and in 64% of patients with hepatitis not due to hepatitis A or B virus. In contrast to observations by others we were able to show heterophile antibodies in cases with incomplete features of infectious mononucleosis. IgM antibodies to EBV were found in 4 out of 85 controls only. We conclude that untypical features of infectious mononucleosis can be caused by EBV also. Therefore the determination of specific IgM antibodies to EBV can be helpful in the diagnosis of uncharacteristic EBV infections.  相似文献   

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