尖锐湿疣及湿疣样病变中HPV6／11DNA原位杂交的观察

对４８例生殖道尖锐湿疣（ＣＡ）及湿疣样病变常规石蜡包埋组织切片进行人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）６／１１型ＤＮＡ原位分子杂交及病理组织学观察，在１２例ＣＡ中９例（７５％）和湿疣样病变中１例（２．７％）检出ＨＰＶ６／１１ＤＮＡ，阳性细胞位于鳞状上皮中表层的凹空细胞及其周围细胞核内。在ＣＡ与湿疣样病变的鉴别诊断中，ＨＰＶ６／１１ＤＮＡ原位杂交检测具有重要的价值。     

聚合酶链反应检测尖锐湿疣皮损内人乳头瘤病毒

１３个皮损组织取自１３例尖锐湿疣（ＣＡ）患者，１３例基底细胞上皮瘤（ＢＣＣ）组织作为对照，用溴化钠液分离表真皮，从组织中提出的 ＤＮＡ和溴化钠液分别用聚合酶链反应检测 ＨＰＶ ＤＮＡ。１１例ＣＡ表皮中检出 ＨＰＶ ＤＮＡ，ＨＰＶ６有７例，ＨＰＶ１１有４例。３例ＣＡ真皮中发现有ＨＰＶ ＤＮＡ，ＨＰＶ６有２例，ＨＰＶ１１有１例。２例标本因溴化钠液被ＨＰＶ污染未作统计。在ＢＣＣ组织中未发现有ＨＰＶ ＤＮＡ。在某些ＣＡ真皮内含有 ＨＰＶ ＤＮＡ可以解释散发病例的复发性。     

人乳头瘤病毒及癌基因在人生殖器癌发生中的作用

我们对生殖器疣与癌中人乳头瘤病毒型别别分布及癌基因表达进行了研究。结果：（１）９８例生殖哭疣中ＨＰＶ６，１１的检出率为９５％，４３例生殖器癌中ＨＰＶ１６检出率为８８．３％；（２）Ｃ－Ｈａ－ｒａｓ及Ｃｍｙｓ癌基因在阴茎癌及宫颈癌中表达较生殖器疣中均显著增强（Ｐ＜０．００１）；（３）ＨＰＶ６感染病例ｒａｓ，ｍｙｃ基因表达率分别为１６．７％、６．７％，ＨＰＶ１１分别为１０％、２０％、ＨＰＶ１６分别为７０     

尖锐湿疣凹空细胞的观察

本文对９７例尖锐湿疣（ＣＡ）进行聚合酶链反应检测人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）ＤＮＡ及光镜下观察凹空细胞的特征。结果显示，９５例有凹空细胞，占９７．９４％。凹空细胞多分布在棘层的中、上层。根据核的改变将凹空细胞分为九型，以镰刀形核、毛虫样核和核大浓染型出现例数最多，分别为７５／９５、７４／９５和６１／９５，此三型对ＣＡ最有诊断价值。ＨＰＶ６、１１阳性９３例（９５．８８％），ＨＰＶ１６、１８、３１、３３、５２ｂ、５８阳性２例（２．０６％），ＨＰＶ６、１１、１６、１８、３１、３３、５２ｂ、５８阴性２例（２．０６％），但有典型的凹空细胞。２例ＣＡ无凹空细胞而ＨＰＶ６、１１为阳性。     

白癜风患者外周血T淋巴细胞亚群和sIL-2R水平变化的研究

采用ＡＰＡＡＰ法和双缺本夹心ＥＬＩＳＡ技术检测１５０例白癜风患者外周血Ｔ淋巴细胞亚群及可溶性白介素－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）水平。结果显示：（１）寻常型白癜风外周血ＣＤ３＾＋、ＣＤ４＾＋细胞数、ＣＤ４＾＋／ＣＤ８＾＋比值明显低于正常对照（Ｐ〈０．０１）,ｓＩＬ－２Ｒ活性显著性高于节段型白癜风和正常人（Ｐ〈０．０１）;节段型白癜风ＣＤ４＾＋、ＣＤ４＾＋／ＣＤ８＾＋与正常对照组比较也显著减少（Ｐ〈０．０     

增列细胞核抗原,细胞周期素E及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制 …

目的 探讨细胞周期相关因子增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）、细胞周期素Ｅ（ｃｙｃｌｉｎＥ）、ｐ２１（ＷＡＦ１／ＣＩＰ）、ｐ２７在ＨＰＶ６／１１相关尖锐湿疣（ＣＡ）病变中的各种变化及其意义。方法 应用原位杂交技术诊断ＨＰＶ６／１１相关ＣＡ,采用ＳＰ免疫组化染色技术检测５０例ＨＰＶ６／１１阳性ＣＡ患者皮损、２５例正常人皮肤（包 皮）中ＰＣＮＡ、ｃｙｃｌｉｎＥ及ｐ２１、ｐ２７的表达及分布。结果 ①ＣＡ皮损中Ｐ     

原位聚合酶链反应技术检测结节性红斑皮损中Ⅱ型单纯疱疹病毒DNA

目的　探讨结节性红斑（ Ｅ Ｎ） 的发病与Ⅱ型单纯疱疹病毒（ Ｈ Ｓ Ｖ２） 的关系。方法　用原位聚合酶链反应法（ Ｉ Ｓ Ｐ Ｃ Ｒ） ,对３５ 例 Ｅ Ｎ 皮损组织及１４ 例正常皮肤组织切片中的 Ｈ Ｓ Ｖ２ Ｄ Ｎ Ａ 进行扩增, Ｓ Ｐ 免疫组化染色, Ａ Ｅ Ｃ 显色。结果　 Ｈ Ｓ Ｖ２ Ｄ Ｎ Ａ 在 Ｅ Ｎ 及正常皮肤中的检出率分别为５７ ．１ ％ （２０／３５） 、８ ．３ ％ （２／１４） , Ｐ＜ ０ ．０１ ,阳性信号主要位于皮损部位,以小血管为著,细胞内的分布以核内型为主,亦有核浆混合型。结论　 Ｅ Ｎ 的发病与 Ｈ Ｓ Ｖ２ 有关。     

聚合酶链反应和斑点杂交方法检测人乳头瘤病毒DNA

目前用于检测ＨＰＶ感染的方法很多，我们对聚合酶链反应（ＰＣＲ）和斑点杂交方法进行了比较研究。一、临床资料１７例尖锐湿疣病例均来自１９９０～１９９１年我院皮肤科和妇科外阴门诊，５％醋酸白试验均阳性。所有病例均取病损活检，经病理诊断为尖锐湿疣。二、方法（一）ＰＣＲ１．寡核着酸引物的设计：根据已公布的病毒基因组序列设计寡核着酸引物序列，扩增４型ＨＰＶ的高保守区Ｅ６区［‘·’］。由于尖锐湿疣主要是ＨＰＶ６、１１型引起，ＨＰＶ６和１１型的基因组Ｅ６区有同源序列，故将ＨＰＶ６、１１型设计了一对共同引物，引物…     

原位聚合酶链反应技术检测结节性红斑皮损中Ⅱ型单纯疱疹...

目的 探讨结节性红斑（ＥＮ）的发病与Ⅱ型单纯疱疹病毒（ＨＳＶ－２）的关系。方法 用原位聚合酶链反应法（ＩＳＰＣＲ）,对３５ＮＥ皮损组织及１４例正常皮肤组织切片中的ＨＳＶ－２ＤＮＡ进行扩增,ＳＰ免疫组化染色,ＡＥＣ显色,结果 ＨＳＶ－２ＤＮＡ在ＥＮ及正常皮肤中的检出率分别为５７．１％（２０／３５）、８．３％（２／１４）,Ｐ〈０．０１,阳性信号主要位于皮损部位,以小血管为著,细胞内的分布以核内型为主,     

粘膜疾病

２００１１０９８连理汤加味治疗口腔扁平苔藓临床观察／陈建灵（广东省中医院）／／湖北中医杂志．－２０００， ２２（８）．－２７ 党参２０ｇ，黄芪３０ｇ，干姜８ｇ，白术、茯苓、丹参各１５ｇ，桃仁１２ｇ，甘草 ６ｇ。水煎服，共服２次，１剂／ｄ。对照组用左旋咪唑５０ｍｇ，３次／ｄ，连服 ２天，停药 ５天。结果：治疗组４８例，痊愈５例，显效１２例，好转２５例，无效６例，总有效率为８７．５０％；对照组３０例，分别为２例、４例，１３例、１１例和６３．３３％。两组等级疗效比较差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。表１参５（…     

尖锐湿疣人乳头瘤病毒的基因分型

目的：检测尖锐湿疣中人乳头瘤病毒（HPV）的基因型别。方法：用通用引物进行聚合酶链反应,扩增尖锐湿疣中HPV DNA,用生物素标记的特异性基因分型探针,对聚合酶链反应扩增后的HPV DNA进行斑点杂交,结果：50例尖锐湿疣标本经PCR扩增后48例HPV DNA阳性,阳性标本中HPV6,11,16,18型的检出率分别为16．7％（8／48）,37．5％（18／48％）,14．6％（7／48）,4．2％（2／48）,多重型别检出率为22．9％（11／48）,结论 HPV11型感染是尖锐湿疣发病的首要原因。     

尖锐湿疣皮损中人乳头瘤病毒基因分型研究

目的 采用反向杂交研究尖锐湿疣皮损中人乳头瘤病毒(HPV)的感染状况。方法 提取尖锐湿疣新鲜标本的HPVDNA,采用PGMY09/11引物系统进行聚合酶链反应(PCR)。PCR产物在标记有37种HPV型特异性探针的尼龙膜条带上进行HPVDNA杂交分型。所有DNA模板采用HPV6和11型特异性引物进行PCR检测验证。数据经SPSS11.0统计软件分析。结果 杂交结果显示201例标本HPVDNA均为阳性,共发现31种HPV基因型,其主要的HPV基因型名称及所占比例分别如下:HPV11(53.7%,108/201)、HPV6(43.8%,88/201)、HPV16(6.5%,13/201)、HPV52(6.0%,12/201)、HPV33和HPVcp6108(均为5.5%,11/201)、HPV42(5.0%,10/201)等。60.2%(121/201)的标本由单一型HPV感染,39.8%的标本由混合型HPV感染。HPV6和11型特异性引物PCR结果显示HPV6和11的阳性率分别为45.8%和56.2%,与杂交结果比较,一致性分别为98.5%和96.5%,资值分别为0.97和0.93,P值均<0.001。结论 至少有31种HPV基因型与尖锐湿疣相关。HPV11阳性率最高,HPV68、40、54、67、73、82、35、64和83在尖锐湿疣中少见,HPVcp6108在尖锐湿疣中首次发现,且阳性率较高(与HPV33并列第5位)。HPV26、69、70、71、72和IS39可能与尖锐湿疣不相关。尖锐湿疣中单一型和混合型HPV阳性率分别为60.2%(121/201)和39.8%(80/201)。     

Detection of epidermodysplasia verruciformis-associated human papillomavirus DNA in nongenital seborrhoeic keratosis

BACKGROUND: DNA of epidermodysplasia verruciformis (EV)-associated human papillomaviruses (HPVs) has been widely detected in lesions of malignant skin tumours, benign tumours and other proliferative diseases of epithelial origin. OBJECTIVES: To investigate the presence of EV-associated HPV DNA in nongenital seborrhoeic keratosis (SK) and to elucidate the prevalence of distinct HPV genotypes. METHODS: We investigated HPV DNA in 55 nongenital SK biopsies, which were compared with 48 normal skin biopsies (healthy controls) using a nested polymerase chain reaction (PCR) using consensus primers CP65/CP70 and CP66/CP69. The positive PCR products were retracted and used to prepare recombination clones with T-vector. Distinct clones were analysed with endonucleases, and HPV genotypes were identified by direct sequencing. RESULTS: EV-associated HPV DNA was detected in 42 of 55 (76%) nongenital SK biopsies vs. only 13 of 48 (27%) healthy controls (chi2 = 22.087; P < 0.005). The prevalence was higher in patients with more than five lesions than in those with only one lesion (P < 0.05). Ten distinct HPV genotypes were detected in the nongenital SK biopsies: HPV 20, 23, 5, renal transplant recipient (RTR) X7, HPV 17, 37, 17b, RTRX4, RTRX4b and strain SK3. HPV 20 was found in 26 of 42 (62%) positive specimens, followed by HPV 23 (11 of 42, 26%) and HPV 5 (six of 42, 14%). Existence of multiple HPV genotypes was observed in 12 of 42 (29%) positive specimens. In healthy controls, five genotypes of EV-associated HPV (HPV 20, 23, 5, 17 and RTRX4) were detected, with the same predominant genotype of HPV 20 (five of 13, 38%). Several distinct HPV genotypes were found to coexist in four of 13 (31%) positive specimens. CONCLUSIONS: This study provides some evidence that EV-associated HPVs might play a part in the pathogenesis of nongenital SK.     

核酸分子原位杂交检测人乳头瘤病毒与光镜诊断尖锐湿疣的比较及其图像定量分析

采用原位杂交方法对 50例尖锐湿疣组织进行 HPV6B、11型检测。其中光镜诊断为尖锐湿疣的 2 3例中 14例阳性 ,阳性率 60 .9% ;光镜诊断符合尖锐湿疣的 2 7例中 7例阳性 ,阳性率 2 5.9%。结果提示 :原位杂交方法对尖锐湿疣的诊断、鉴别诊断、防止误诊、漏诊 ,提高确诊率 ,可以提供直接可靠的依据。图像定量分析对于判断 HPV感染的程度及其 DNA含量有一定意义。     

MDM2蛋白和MDM2 mRNA在尖锐湿疣中的表达

目的 研究尖锐湿疣中MDM2蛋白及MDM2 mRNA的表达情况,探讨MDM2在尖锐湿疣增殖及癌变中的作用。方法 分别采用免疫组化染色及原位杂交方法检测外阴尖锐湿疣和正常人皮肤组织中MDM2蛋白及mRNA的表达情况,同时用PCR法检测人乳头瘤病毒(HPV)型别。结果 32例外阴尖锐湿疣中MDM2蛋白阳性表达18例(56.25%),MDM2 mRNA阳性表达22例(68.75%)。MDM2蛋白与mRNA共同阳性表达14例。PCR检测示尖锐湿疣皮损中HPV6/11型28例(87.5%),HPV16/18型4例(12.5%)。在18例MDM2蛋白阳性表达的标本中,HPV6/11型15例,HPV16/18型3例。在22例MDM2 mRNA阳性表达的标本中,HPV6/11型18例,HPV16/18型4例。而正常人皮肤中MDM2蛋白及MDM2 mRNA均未见表达。结论 MDM2的异常表达可能与尖锐湿疣过度增殖及癌变有关。     

尖锐湿疣治愈后皮肤及毛囊人乳头瘤病毒检测

目的:研究尖锐湿疣(CA)患者经治疗后原患处外观正常的皮肤和周围的毛发毛囊是否还携带人乳头瘤病毒(HPV)及其与复发的关系。方法:CA患者常规微波治疗后2～3周,取治疗后外观正常的原患处皮肤黏膜和周围的毛发毛囊,进行HPV-DNA-PCR检测。随访3个月,观察复发情况。结果:治疗后皮肤黏膜HPV检测阳性者中,HPV6/11型为15/71例(21.13%),HPV16/18型为5/71例(7.04%)。总复发率:阳性患者为65.00%,阴性患者为15.69%,P<0.005,二者间差异有显著性。患处周围的毛发毛囊处HPV检测阳性者中,HPV6/11型为8/39例(20.51%),HPV16/18型为2/39例(5.13%)。总复发率:阳性患者为60.00%,阴性患者为20.68%,差异亦有显著性,P<0.01。结论:HPV可潜伏于治疗后外观正常的皮肤黏膜和周围毛发毛囊处,潜伏的HPV作为病毒储存库与CA的复发相关。提示我们在临床中对有HPV潜伏的患者要进行随访观察和亚型检测分析,尤其是有癌变可能的高危型携带者。     

热休克蛋白在尖锐湿疣组织中的检测及其与HPV感染相关性

目的　探讨热休克蛋白 70(HSP70)在尖锐湿疣(CA)组织中的检测及其与人乳头瘤病毒 (HPV)感染的关系。方法　采用免疫组化法检测了 24例CA、46例宫颈癌和 28例正常宫颈组织HSP70,用PCR技术对各组织标本的HPV-DNA进行检测和 6, 1 1, 1 6, 1 8分型。结果　HSP7 0在CA和宫颈癌组的阳性率显著高于正常宫颈对照组 (P<0. 01)。CA组HPV6, 11型DNA阳性者HSP70的检出率显著高于阴性者(P<0. 05),宫颈癌组HPV16, 18型DNA阳性者与阴性者HSP70的检出率差异无显著性(P>0. 05)。结论　HSP70的表达与尖锐湿疣的发病有关,HSP70在尖锐湿疣组织中的表达与HPV的感染明显相关。     

性激素与尖锐湿疣人乳头瘤病毒的相关性研究

为了探讨尖锐湿疣人乳头瘤病毒感染与性激素的关系，采用斑点杂交、免疫组化和放免测定等技术，检测了重庆地区４７例女性尖锐湿疣（ＣＡ）患者病变组织中ＨＰＶＤＮＡ、雌激素受体（ＥＲ）以及血清中雌二醇（Ｅ２）、孕酮（Ｐ）和睾酮（Ｔ）。结果提示：妊娠期ＨＰＶＤＮＡ含量、ＥＲ表达量均明显高于对照组和其余各组（Ｐ＜０．００１），健康组中无ＥＲ表达；ＨＰＶＤＮＡ含量与ＥＲ表达量之间呈正相关（Ｐ＜０．００１），与血清Ｅ２、Ｐ也呈正相关（Ｐ＜０．００１），与Ｔ无明显相关（Ｐ＞０．０５）。我们认为性激素特别是雌激素、孕激素在ＨＰＶ感染中可能有协同作用     

尖锐湿疣组织中人乳头状瘤病毒感染与生存素和增殖细胞核抗原的表达

目的 探讨人乳头状瘤病毒（HPV）6／11、16／18在尖锐湿疣（CA）组织中的感染情况及其与生存素和增殖细胞核抗原（PCNA）表达的关系。方法 HPV分型PCR检测试剂盒检测HPV6／11、16／18在41例尖锐湿疣组织、23例正常皮肤组织中的表达情况，同时用SP免疫组化法检测生存素及PCNA蛋白的表达。结果 ①正常对照组未检测到HPV6／11、16／18感染；HPV6／11在尖锐湿疣中的感染率为87．80％（36／41），与正常对照组比较差异有统计学意义（P〈0．005）；HPV16／18在尖锐湿疣中的感染率为19．51％（8／41），与正常对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。②生存素和PCNA在尖锐湿疣组织中的阳性率分别为53．66％（22／41）和87．80％（36／41），在正常皮肤组织中的阳性率分别为8．70％（2／23）和47．83％（11／23）。尖锐湿疣组中生存素和PCNA表达的阳性率与正常对照组比较差异均有统计学意义．且尖锐湿疣中两者的阳性表达呈正相关（P=0．009）。③生存素及PCNA在有HPV6／11感染患者中的表达明显强于无HPV6/11感染患者。结论 HPV感染可上调生存素与PCNA的表达。