辐射敏感突变细胞与哺乳类DNA损伤修复研究

利用突变细胞研究DNA损伤修复机制,是DNA损伤修复研究领域的一大进展。本文综述了近年来从部分哺乳动物细胞中诱变获得的辐射敏感突变株,及其在DNA损伤修复研究、人类DNA修复基因的分子克隆和染色体定位等方面的应用。     

DNA同源重组修复的分子机制

电离辐射直接造成生物靶分子细胞DNA的损伤，DNA的损伤类型很多，其中以DNA双链断裂（double strand break，DSB）最为严重。DNA DSB的修复较其他类型的DNA损伤更加困难。不修复则可能导致染色体断裂和细胞死亡，而修复不当则可能导致染色体缺失、重排、转位和倒置等，从而易于形成肿瘤等疾病。DNA损伤的不完全修复可导致基因组不稳定，机体细胞为了对抗损伤，发展出多个修复系统来保证基因组的完整性，同源重组修复（homologous recombination repair，HRR）是DNA DSB损伤修复的主要方式，对于保持哺乳动物细胞的基因组完整性十分重要。重组即遗传物质的重排，同源重组是指发生在同源DNA序列间的重组，主要是利用DNA序列间的同源性来识别，而负责配对和重组的蛋白质因子并无碱基序列特异性。     

电离辐射损伤与DNA修复基因

DNA辐射损伤直接影响复制、转录和蛋白质合成,进而影响细胞遗传、发育、生长和代谢等生命活动。DNA损伤还是突变的重要原因,而严重的突变可造成细胞癌变,导致肿瘤的发生。然而,生物体内存在着DNA损伤修复系统,其中DNA修复基因起着重要的作用。     

电离辐射损伤与DNA修复基因

DNA辐射损伤直接影响复制、转录和蛋白质合成，进而影响细胞遗传、发育、生长和代谢等生命活动。DNA损伤还是突变的重要原因，而严重的突变可造成细胞癌变，导致肿瘤的发生。然而，生物体内存在着DNA损伤修复系统，其中DNA修复基因起着重要的作用。     

电离辐射损伤与DNA修复基因

DNA辐射损伤直接影响复制、转录和蛋白质合成,进而影响细胞遗传、发育、生长和代谢等生命活动.DNA损伤还是突变的重要原因,而严重的突变可造成细胞癌变,导致肿瘤的发生.然而,生物体内存在着DNA损伤修复系统,其中DNA修复基因起着重要的作用.     

DNA链断裂损伤修复及其修复酶

电离辐射能导致DNA链断裂。本文阐述了DNA链断裂的修复及其在维持细胞的生物学功能和活存中的意义,介绍了与其有关的修复酶在DNA损伤修复中的作用。     

电离辐射致DNA簇损伤中的DNA片段

细胞受照后DNA分子发生损伤的空间分布是其生物学效应的重要决定因素。本实验研究这种损伤的类型、程度、产率及修复。     

辐射所致的DNA碱基损伤和它的修复——在癌变中的意义及血清学检测方法

碱基损伤和修复与细胞恶性转化的关系DNA可被环境因素(包括物理及化学因素)所损伤,正常细胞的修复机能可将其修复。但当环境因素的数量异常增加,或细胞的修复机制有缺陷时,则可能在DNA复制模板上存留着一些致死性、致突性或致癌性损伤,影响了细胞的正常增殖和分化。     

双标记基因质粒（pSVneo—gpt）DNA的重组

利用基因转移技术,将受到损伤的重组DNA分子导入哺乳动物细胞中,观察受损的外源DNA分子在细胞中的修复和表达情况,是研究细胞DNA损伤修复过程的一种新的实验手段。实验室通常用的重组DNA分子只带有单个选择标记基因,当用于上述实验时,尤其是要比较不同细胞的DNA修复效率,因受到基因转移效率、未被修复或错误修复的受损标记基因不能正确表达等因素的影响,使实验结果出现一定的误差。本试验将选择标记基因gpt和neo重组到一个质粒DNA分子中,这样在以后的研究中,可以用限制性内切酶等损伤其中一个标记基因,再将质粒     

DNA分子水平的放射效应研究

点介绍癌基因与全基因DNA辐射损伤的比较,有氧和乏氧下、剂量率、LET、加热等因素对DNA修复作用的机制及p53基因研究等的最新研究进展。许多研究结果进一步论证了DNA辐射损伤类型的多样性,其损伤类型受环境因素影响。随后的修复则视其损伤在DNA中的位置,可能是决定细胞命运的关键。     

脑组织对DNA双链断裂的反应

DNA双链断裂是电离辐射引起的最严重DNA损伤形式,脑组织对DNA损伤的反应与其发展程度密切相关,脑组织中增殖细胞主要是通过同源重组进行修复,而分化细胞则通过非同源末端联接修复。DNA双链断裂信号通路相关因子的缺陷会导致一系列的有神经病理表现的人类遗传病。重点讨论电离辐射触发脑细胞DNA双链断裂后,信号转导相关因子和与相关因子导致的神经系统人类遗传疾病。     

DNA损伤应答与DNA双链断裂修复

在多种多样的生物体中，基因组保持完整具有极为重要的意义，它是细胞发挥功能和维持生存的必要条件。但是许多内源或外源因素如电离辐射（IR）、基因毒性剂、复制叉停止．核酸酶、减数分裂、免疫细胞V（D）J基因重排等，均可引起DNA损伤，破坏基因组的稳定性。DNA损伤发生频率很高．其中DNA双链断裂（DNA double strand breaks，DSBs）是最严重的DNA损伤，是细胞内多种类型的DNA损伤中最危险的一种，如何及时地感直DNA的损伤并进行修复．是至美重要的一个问题．     

DNA双链断裂残留损伤与癌细胞辐射敏感性研究

目的 了解不同组织来源癌细胞株和人体肿瘤组织原代细胞的DNA双链断裂损伤修复的个体差异性,探寻预测癌细胞辐射敏感性的生物指标。方法 ⁶⁰Co γ射线照射诱发DNA损伤,脉冲电场凝胶电泳检测DNA双链断裂损伤修复,细胞克隆形成能力法检测细胞辐射敏感性。结果 8个不同组织来源癌细胞株的辐射敏感性有较大的差异(D₀为0.65~2.15 Gy),不同细胞株20 Gy γ射线照射诱发产生的DNA双链断裂原初损伤有一定的差别,但与细胞辐射抗性无相关性。辐射敏感细胞SX-10的DNA双链断裂修复缺陷发生在早期快速修复相,而A2780细胞的修复缺陷是发生在晚期慢速修复相。20 Gy照射修复2 h后DNA双链断裂残留量与细胞辐射敏感性指标D₀或SF₂值有显著的相关性。不同个体患者脑肿瘤组织原代细胞之间,辐射诱发DNA双链断裂的修复反应存在明显差异,修复2 h后残留损伤的个体差异性分布类似于癌细胞株。结论 DNA双链断裂残留损伤与癌细胞辐射抗性有显著相关性,可作生物指标预测肿瘤组织细胞对放射治疗的反应性。     

DNA双链断裂-集簇性损伤的诱导及其修复特点研究进展

近年来研究表明,高LET射线诱发的DNA集簇性损伤,特别是双链断裂（ double-stand break, DSB）-集簇性损伤比低LET射线诱发的单一位点DSB损伤的修复更为困难甚至不能修复,更易造成染色体畸变、细胞死亡和癌变的严重后果。 DNA损伤应答（ DNA damage response, DDR）机制,包括损伤信号的监测和传递、启动修复系统、激活细胞周期检验点和诱导细胞凋亡等多条信号传导通路,通过以此构成的复杂而精确的调控网络来应对这些损伤,在维持基因组稳定性中具有非常重要的意义。然而,DSB-集簇性损伤诱导细胞DDR的精确机制目前尚不清楚［1］。本文主要就当前DSB-集簇性损伤的诱导与电离辐射的品质、DSB-集簇性损伤修复及其修复动力学特点的研究进展做一综述。     

不同周期的S-180V细胞DNA辐射损伤修复的比较

根据小鼠腹水瘤S-180 Ⅴ细胞的生长特点,设计了获取G_1、S、M期同步化细胞的方法,并用碱洗脱法对同步化细胞DNA单链断裂程度与重接修复速度进行了比较。观察到0～50Gyγ线照射范围内,不同周期细胞DNA单链断裂损伤无明显差别。30Gy照射后,不同周期细胞的断裂的DNA的修复速度不同,其中以S期重接修复速度最慢。     

新基因LRP15参与紫外线诱导的DNA损伤的修复作用

目的探讨LRP15基因在K562细胞中对紫外线诱导的DNA损伤的修复作用，以进一步研究该基因的功能。方法利用真核表达质粒pcDNA3．1构建LRP15基因开放阅读框架（ORF）序列的正义及反义重组质粒；两种质粒经阳性脂质体介导法分别转染K562细胞，G418筛选阳性克隆；采用单细胞凝胶电泳（SCGE）技术观察两组细胞对紫外线诱导的DNA损伤的修复作用的差异。结果PCR鉴定证实，正义及反义重组质粒中LRP15基因ORF序列均按预定方向正确插入；SCGE实验表明，经紫外线照射后两组细胞的DNA基础损伤无明显差异（P=0.156）。但经45及90min修复后实验组细胞的DNA迁移长度明显小于对照细胞（P〈0．001）。结论成功构建LRP15基因的正义及反义真核表达质粒；LRP15基因对紫外线诱导的DNA损伤具有修复作用，可能是一个DNA修复基因。     

DNA损伤修复及细胞周期检控点激活的研究进展

新近的研究结果使人们对DNA损伤诱导的细胞和分子事件,特别是与DNA损伤反应和损伤修复相关蛋白的激活以及在DNA损伤部位的募集,有了更深入的认识;对细胞周期检控点的激活以及随后的细胞周期调控有了进一步的理解.     

DNA损伤修复及细胞周期检控点激活的研究进展

新近的研究结果使人们对DNA损伤诱导的细胞和分子事件,特别是与DNA损伤反应和损伤修复相关蛋白的激活以及在DNA损伤部位的募集,有了更深入的认识;对细胞周期检控点的激活以及随后的细胞周期调控有了进一步的理解     

靶向DNA损伤应答在小细胞肺癌中的作用研究进展

小细胞肺癌(SCLC)是高度恶性肿瘤,具有增殖速度快、早期转移及预后差的特点,5年生存率仅7.2%。DNA损伤应答(DDR)是机体在面对DNA损伤及复制应激时,通过激活细胞周期检查点、阻滞细胞周期来促进DNA损伤修复,避免未修复的DNA损伤诱导程序性死亡的过程。SCLC具有突变负荷高、基因组不稳定的特征,普遍存在p53及RB1功能失活,致使细胞周期G₁/S检查点缺陷,因而更加依赖后续的S、G₂/M检查点进行周期阻滞和DNA损伤修复以确保基因组的稳定性及染色体的正确分离。因此,在基于致DNA损伤的放化疗应用背景下,抑制周期检查点以促进周期进程、增加DNA损伤及抑制DNA损伤修复成为SCLC治疗的新策略。本文就靶向DDR及其通路关键分子(PARP、ATR、CHK1/2、WEE1、ATM、Aurora A)抑制剂在SCLC中的研究进展进行综述,以期为SCLC的治疗策略提供思考。     

辐射敏感型irs细胞系列的基因突变与V(D)J区DNA重组

不同哺乳动物细胞的辐射敏感性与DNA损伤修复特别是DNA双链断裂(dsb)的修复能力有关。DNA拟伤修复有两种:正确修复。DNA恢复原样;错误修复,导致基因或染色体突变,生殖细胞或体细胞病变甚至癌变。