EB病毒相关胃癌与mdm2，p53及p21基因异常的研究

 目的 探讨p53基因突变以及mdm2，p53和p21蛋白表达异常在EBV相关胃癌（EBVaGC）发生发展中的作用。方法 应用免疫组化技术检测13例EBVaGC、45例临床病理资料与之匹配的EBV阴性胃癌（EBVnGC）组织中 mdm2，p53和p21蛋白的表达；PCR-SSCP银染技术结合DNA序列分析检测p53基因exon 5~8突变；RT-PCR检测EBV相关基因的表达。结果 E-BVaGC组与EBVnGC组相比，两组间mdm2，p53和p21蛋白的阳性检出率差异无统计学意义（P = 0.830 0；P = 0.791 2；P = 0.353 1），但EBVaGC组p53蛋白过表达率（15.38 %）明显低于EBVnGC组（57.78 %），两组间差异有统计学意义（P = 0.008 5）。mdm2蛋白阳性表达与p53蛋白过表达呈显著正相关（P = 0.000 8，r = 0.439 1）；p21与p53蛋白共同表达率较高，但经计数资料相关性统计学分析表明两者无显著相关性（P = 0.2501，r = 0.202 5）。2例EBVnGC检测到p53基因突变，突变均位于exon 5，13例E-BVaGC和58例相应癌旁组织均未检测到p53基因突变。13例EBVaGC核抗原基因EBNA1均为阳性，潜伏膜蛋白基因LMP1均为阴性，即刻早期基因BZLF1，早期基因BARF1和BHRF1阳性率分别为46.15 %（6／13），46.15 %（6／13）和15.38 %（2／13），三者与EBVaGC组织中mdm2，p21和p53蛋白的表达均无显著相关性（P＞0.05）。 结论 EBV感染以及mdm2，p53和p21蛋白表达异常与胃癌发生有关； p53基因突变可能并非胃癌组织中p53蛋白异常累积的主要原因；胃癌组织中EBV感染与p53蛋白的异常表达有关，而与mdm2和p21蛋白的异常表达以及p53基因突变无显著相关性。     

胃癌组织p53、p16基因表达的研究

目的探讨胃癌p53、p16基因表达与临床病理因素的关系.方法采用免疫组化SP法检测63例胃癌患者的原发灶、转移淋巴结及正常粘膜组织的p53、p16基因表达情况,分析其与临床病理因素之间的关系.结果p53基因与胃癌淋巴转移密切相关,P16基因表达与胃癌临床病理诸因素无关,p53高表达与p16低表达联合与淋巴结转移有关.结论p53基因的阳性表达与胃癌恶性程度,特别是与淋巴结转移有关,可以作为胃癌淋巴结转移的标志物.     

胃癌患者p53基因甲基化的研究

作者应用限制性内切酶ＨｐａⅡ和ＭｓｐⅠ酶切胃癌组织及正常胃组织ＤＮＡ，经ＰＣＲ扩增ｐ５３基因第５外显子，琼脂糖凝胶电泳分析其电泳图谱，比较胃癌组织及正常胃组织ｐ５３基因第５外显子特定序列５′－ＣＣＧＧ－３′位点甲基化差异。结果显示：１５例胃癌组织中１２例ｐ５３基因第５外显子出现高甲基化状态，而１０例正常胃组织为低甲基化状态，结果提示，ｐ５３基因高甲基化状态与胃癌发生有关。     

p53和p21基因蛋白表达与胃癌侵袭力的关系

采用免疫组织化学方法研究了６８例胃癌中癌细胞ｐ５３和ｐ２１基因蛋白表达与癌细胞侵袭力的关系。结果表明：６８例胃癌中有３６例ｐ５３基因蛋白染色阳性（５２．９％）,４８例ｐ２１基因蛋白染色阳性（７０．６％）;浸润于浆膜层和肌层的癌细胞ｐ５３蛋白染色的阳性程度明显高于粘膜层癌细胞（Ｐ＜０．０５）;浸润性生长的癌细胞中ｐ５３和ｐ２１蛋白阳性程度均明显强于膨胀性生长的癌细胞（Ｐ＜０．０５）;淋巴结转移病例的癌细胞其ｐ５３和ｐ２１蛋白染色阳性率（分别为５４．３％和７３．９％）与无淋巴结转移的病例（分别为５０．０％和６３．６％）无显著性差异（Ｐ＞０．０５）;有淋巴结转移的病例中,原发癌ｐ５３蛋白阳性强度与转移癌正相关（γ＝０．６８,Ｐ＜０．０１）。结果提示：ｐ５３和ｐ２１基因蛋白染色阳性程度较高的胃癌细胞具有较强的侵袭力。     

胃癌及癌前病变中幽门螺杆菌与p53基因表达关系的研究

目的为研究胃癌及癌前病变中幽门螺杆菌(HP)与p53基因表达的关系,探讨HP致癌的可能机理.方法应用免疫组化S-P法和甲苯胺蓝染色法.结果胃癌组HP阳性检出率为65%(26/40),明显高于慢性浅表性胃炎组32.5%(13/40),两者比较有显著差异性(P＜0.01);HP阳性胃癌组中p53阳性表达率为73.1%(19/26),高于HP阴性胃癌组p53阳性表达率50%(7/14),两者比较有显著性差异性(P＜0.05),HP阳性胃癌组中p53基因阳性表达率与胃癌的分化程度、浸润深度、淋巴结转移有关.结论胃癌及癌前病变与HP感染有密切关系,可能是胃癌发展过程的主要诱发因子.其作用机理可能是通过HP产生损伤因素如细胞毒素等作用,减弱了胃粘膜的保护因素,使组织损伤,胃上皮细胞增殖加速,导致基因突变,使胃粘膜上皮细胞恶性转化.另外HP可能在p53基因突变中起促进作用,使其失去正常抑癌功能,导致胃上皮细胞易于向癌细胞转化.     

鼻咽癌EB病毒感染与p53、bcl-2蛋白异常表达

（目的）探讨EB病毒在鼻咽癌发病中的作用。（方法）应用免疫组化技术分别检测46例鼻咽癌中EB病毒潜在膜蛋白（LMP－1）、p53及bcl－2蛋白表达。（结果）LMP－1的阳性率为52．2％（24/46）；24例LMP－1阳性病例中p53阳性16例、bcl－2阳性20例，22例LMP－1阴性病例中P53和bcl－2阳性分别有15例和18例，两组间无明显差异（P＞0．05）。〔结论〕LMP一1对p53和bcl-2表达无明显影响。     

p53和c-erbB-2表达与胃癌进展的关系

目的探讨p53和c-erbB-2表达与胃癌进展的关系。方法收集139例胃癌手术切除标本,包括黏膜内癌23例、浸润至黏膜下层31例、浸润至肌层47例、浸润至浆膜或浆膜外38例,切片采用免疫组化S-P法染色。结果进展期胃癌中p53和c-erbB-2阳性表达率均明显高于早期胃癌（P值分别为0.010、0.000）。c-erbB-2表达与p53表达存在相关性（P=0.023〈0.05）。c-erbB-2阳性表达是胃癌发展的1个危险因素,p53表达阳性和阴性的OR值比较无统计学意义（P〉0.05）。结论抑癌基因p53突变有利于癌基因c-erbB-2的表达;c-erbB-2阳性表达是胃癌发展的1个危险因素,与胃癌的发展密切相关。     

ras p21及p53基因的表达与胃癌生物学行为关系的探讨

应用SP免疫组化法检测1980～1989年存档的33例胃癌及其癌旁组织石蜡包埋标本的ras p21和p53基因表达情况，并与临床、病理和随访资料进行对比分析。结果显示：胃癌标本的ras p21阳性表达7例(21．21％)，p53蛋白的阳性表达11例(33．33%)。ras p21的阳性表达与病理类型、性别、年龄、民族以及肿瘤部位无关，但肿瘤浸润深度及有无淋巴结转移与ras p21阳性表达之间显著相关。生存不足1年组的ras p21表达阳性率(50%)明显高于1～5年组(22．22％)和5年以上组，表明P21蛋白的表达与胃癌的浸润、进展和预后有关，提示ras p21的检测有可能成为胃癌预后指标，并有指导临床治疗的意义。p53蛋白的表达与患者的临床病理状况无显著相关，提示p53基因的改变可能主要发生在癌变早期，对胃癌的发生起关键作用，但并不影响胃癌细胞的生物学行为。p53蛋白的表达与ras p21蛋白表达之间无明显关系。     

p53在弥漫型胃癌中的表达研究

「目的」研究ｐ５３蛋白表达在胃癌预后中的意义。「方法」采用免疫组织化学ＬＳＡＢ法，对１５２例胃癌组织中ｐ５３蛋白表达进行检测，分析ｐ５３表达与临床病理因素及预后之间的关系。「结果」ｐ５３蛋白表达阳性率为２４．３％（３７／１５２），其表达与胃癌各临床病理因素之间无明显相关性。ｐ５３表达在肠型胃癌与弥漫型胃癌之间不同，生存率分析显示，ｐ５３表达的不良预后者仅见于弥漫型胃癌而非肠型胃癌。「结论」ｐ５３蛋     

广西地区肝细胞癌患者组织中p53蛋白表达的研究

目的：探索广西肝癌高发区肝细胞癌（HCC）的组织中检测p53蛋白的表达情况。方法：用免疫组织化学方法对30例肝细胞癌（HCC）和癌旁组织进行检测。p53蛋白的免疫组化染色一抗用的是兔抗。连续切片染色乙型肝炎表面抗原和核心抗原。结果：30例肝细胞癌组织中有13例（13／30,43.3％）p53蛋白表达阳性;在≤5.0的肝细胞癌组织中有25％（1／4）的p53蛋白表达阳性;在＞10.0cm的肝细胞癌组织中有71.4%(5/7)的p53蛋白表达阳性。p53蛋白阳性在中、低分化肝细胞癌中的表达高于在高分化肝细胞癌组织中,而且大多数在年轻患者的肝细胞组织中。结论：本组资料表明,p53蛋白表达与肿瘤的大小、分级和患者的年龄有着密切的关系。30例中有27例（90.0％）证实为HBV感染,表明p53蛋白表达与性别和HBV感染、肝硬化及AFP水平无密切相关关系。     

胃癌组织中p53蛋白的表达与生物学行为的关系

目的：探讨突变型ｐ５３基因产物在胃癌中异常表达的意义。方法：应用免疫组织化学方法研究ｐ５３基因在９８例胃癌中３的表达。结果：９８例胃癌标本中,ｐ５３表达阳性率为５９．２％,与组织学类型无关;不同浸润深度胃癌与ｐ５３异常表达有关（Ｐ〈０．０５）,肿瘤直径大于５ｃｍｐ５３阳性率明显高于直径小于５ｃｍ（Ｐ〈０．０１）,在淋巴结转移组和无转移组间ｐ５３阳性程度有显差异（Ｐ〈０．０１）。结论：ｐ５３异     

p53选择性剪切异构体在胃癌中表达的研究

目的 探讨p53的5种选择性剪接异构体p53β、p53γ、Δ133p53、Δ133p53β和Δ133p53γ mRNA在胃癌和癌旁组织中的表达情况及其与胃癌发生、发展的关系。方法 收集2010年3月至2010年6月15例胃癌根治术患者的手术切除标本,采用巢式RT-PCR检测胃癌组织与癌旁组织中p53β、p53γ、Δ133p53、Δ133p53β和Δ133p53γ共5种异构体mRNA的表达情况,并进行统计学分析。结果 在15例胃癌组织与癌旁组织中均未检测出p53γ、Δ133p53β和Δ133p53γ mRNA的表达。Δ133p53在胃癌组织中的表达率为73.3％（11/15）,在癌旁组织中为20.0％（3/15）,差异有统计学意义（P=0.009）。p53β在胃癌组织中的表达率为20.0％（3/15）,在癌旁组织中为66.7％（10/15）,差异有统计学意义（P=0.0253）。结论 Δ133p53 mRNA和p53β mRNA在胃癌和癌旁组织中的表达情况不同,这两种异构体的差异性表达与胃癌的发生发展有关。     

利用组织芯片技术观察Hp感染与p53、p63表达在胃癌中的相关性

目的:研究Hp与p53、p63表达与胃癌临床病理特征的关系。方法:应用免疫组化技术检测人胃癌组织芯片144芯中Hp、p53和p63的表达。结果:144例胃癌标本中p53阳性表达80例（55.6%）,p63阳性表达53例（36.8%）,Hp阳性表达94例（65.3%）。p53表达与胃癌组织学分型、病理分级和淋巴结转移有关(P＜0.05),与肿瘤部位及浸润深度无关(P＞0.05);p63在低分化腺癌组织中表达率明显高于高、中分化腺癌(P＜0.05),与肿瘤部位、浸润深度及淋巴结转移无关(P＞0.05);Hp主要寄居在胃窦,且其感染与肿瘤组织学分型和病理分级有关(P＜0.05),与淋巴结转移及浸润深度无关(P＞0.05)。胃癌组织中Hp感染与p53表达呈正相关(r=0.20,P＜0.05)。结论:p53和p63的高表达与胃癌的发生及进展密切相关,但p53和p63在胃腺癌发生发展过程中并无交互作用, Hp感染与p53高表达存在一定相关性。     

The detection of serum anti-p53 antibodies from patients with gastric carcinoma in China

Background: Gastric carcinoma is one of the most frequently occurring cancers. The aim of this research was to increase the detection efficiency of anti-p53 antibodies in the sera of patients with gastric carcinoma and to improve the diagnosis for patients with gastric carcinoma. Methods: We prepared phage-displayed peptide DO7 and established an enzyme-linked immunosorbent assay method to detect the anti-p53 antibodies. We detected the anti-p53 antibodies of 61 patients with gastric carcinoma using the method and our previous ELISA method assisted by the recombinant wild-type human p53 protein to detect the anti-p53 antibodies. We studied the correlation between the anti-p53 antibodies and the clinicopathological data including sex, age, carcinoembryonic antigen, tumor size, tumor TNM staging, and lymph-node status. Results: The anti-p53 antibodies positive rate for patients with gastric carcinoma was increased (31.1%, 19/61) through the combination of p53-ELISA and phage-ELISA. We found that the positive anti-p53 antibodies correlated significantly with tumor size (P = 0.047). The combination of the anti-p53 antibodies and carcinoembryonic antigen could improve the diagnosis for patients with gastric carcinoma. Conclusions: This approach indicated an increased anti-p53 antibodies positive rate for patients with gastric carcinoma and provided a useful marker for clinical diagnosis for patients with gastric carcinoma.     

术前动脉化疗对胃癌细胞凋亡及p53表达的影响

背景与目的:区域化疗具有肿瘤局部药物浓度高、全身副作用小的特点,术前选择性区域动脉灌注化疗可明显改变胃癌患者的肿瘤组织学形态。本文旨在研究术前动脉化疗对胃癌细胞凋亡及p53表达的影响和意义。方法:对33例胃癌患者动脉化疗前胃镜活检病理标本和动脉化疗后手术切除的病理标本,应用DNA原位末端标记法、免疫组化S-P法分别检测肿瘤细胞凋亡及p53蛋白表达。结果:胃癌动脉化疗后肿瘤细胞凋亡指数为19.29±6.48,显著高于动脉化疗前的9.24±5.03(P<0.01);动脉化疗后p53表达阳性率为30.30%,显著低于动脉化疗前的54.55%(P<0.05);动脉化疗后p53表达“下降”组的生存期长于p53表达“增加”组的生存期(P<0.05)。结论:术前动脉化疗对胃癌细胞有明显的促进凋亡作用,可显著降低胃癌组织p53蛋白的表达,提高患者的生存期。     

树突状细胞密度、p53表达在进展期胃癌中的临床意义

目的 研究进展期胃癌树突状细胞浸润和p53表达、临床病理学特性之间的相关性及其临床意义.方法用免疫组化法使用通过图像分析仪检测50例进展期胃癌细胞中树突状细胞标志蛋白S-100及p53表达.结果 50例肿瘤患者中树突状细胞均值为(10.160±7.939)/mm2.树突状细胞浸润密度在有淋巴结转移的胃癌组低于无淋巴结转移的胃癌组(P＝0.015).有淋巴管侵犯的胃癌组中树突状细胞浸润密度低于无淋巴管侵犯的胃癌组(P＝0.011).p53表达阳性的胃癌组树突状细胞浸润密度低于p53表达阴性的胃癌组(P＝0.032).50例患者5年生存率中,树突状细胞高浸润组(≥10.16/mm2)明显好于树突状细胞低浸润组(＜10.16/mm2)(P＝0.001).树突状细胞高浸润、p53阴性表达者预后最好.结论肿瘤内和肿瘤周围树突状细胞浸润可代表宿主局部免疫状态.较少程度的树突状细胞浸润、p53阳性表达可促进疾病的进展,与较差的预后相关.     

食管癌组织中p53蛋白表达的临床意义

目的 :探讨p53蛋白表达在食管癌中的临床意义。方法 :用鼠抗人p53单克隆抗体 ,以SP免疫组化法检测p53蛋白。结果 :p53蛋白阳性表达率为 56 3% ,其表达与肿瘤大小、TNM分期、有无淋巴结转移无关 (P >0 0 5) ,与肿瘤分化程度有关 (P <0 0 1)。p53蛋白阳性组与阴性组比较 ,其术后生存率有显著差异 (P <0 0 1)。结论 :食管癌组织中p53蛋白表达与肿瘤大小、TNM分期及有无淋巴结转移无关 ,与肿瘤分化程度密切相关 ,并可用于判断预后     

胃癌细胞凋亡与p53蛋白异常相关性研究

采用ＤＮＡ末端转移酶介导的Ｂｉｏ－ｄＵＴＰ原位末端标记技术（ＴＵＮＥＬ）和免疫组织化学技术，分别对６０例胃癌标本的细胞凋亡和ｐ５３蛋白异常作同步研究和相关性分析。结果在６０例胃癌组织中细胞凋亡指数为１．８％～１９．４％（平均９．３±３．９％），ｐ５３蛋白异常表达率为６３．３％（３８／６０）；ｐ５３蛋白阳性组细胞凋亡指数为３．７±１．１％（１．８％～７．９％），而ｐ５３蛋白阴性组细胞凋亡指数１４．７±２．４％（７．４％～１９．４％），两组间有显著性差异。结果表明胃癌中存在较高频率的ｐ５３蛋白异常和细胞凋亡，ｐ５３蛋白异常与胃癌细胞凋亡间存在着负相关性