紫草萘醌组分制剂逆转可移植肿瘤的免疫损伤效应

目的:观察紫草萘醌组分可溶性提取物的抗肿瘤和免疫调节作用.方法:紫草萘醌醇提物制备成可溶于水的微乳液(LE)制剂,给荷瘤模型小鼠灌胃;皮下接种HepA22肝癌细胞或S180肉瘤细胞制作荷瘤模型;观察其生存时间、瘤重和免疫学指标.结果:荷瘤小鼠胸腺和脾脏指数以及NK细胞毒、ConA诱导淋转和IL-2生成能力明显降低,胸腺皮质和脾脏生发中心严重萎缩;应用LE阻止荷瘤动物免疫器官形态改变的发生;提高其脾细胞免疫功能.结论:紫草萘醌组分制剂抑制可移植肿瘤原位增殖,逆转荷瘤对小鼠免疫系统的损害.     

乙酰紫草素对小鼠肝癌移植性肿瘤的抑制作用初步研究

目的：观察乙酰紫草素对小鼠移植性肝癌H22的抑瘤作用。方法：采用小鼠肝癌H22模型进行体内抑瘤实验。观察荷瘤动物的生长情况,测量各实验组肿瘤体积及瘤质量变化,绘制肿瘤生长曲线并计算抑瘤率。结果：乙酰紫草素低、中、高三个剂量组的抑瘤率分别为23．39％、26．61％、37．90％（P〈0．05）。各实验组小鼠免疫器官未见明显抑制。结论：乙酰紫草素对小鼠肝癌H22具有一定的抑制作用。     

Am80抑制血管内皮细胞增殖和血管新生内膜形成的机制研究

目的:探讨维甲酸衍生物Am80抑制血管内皮细胞增殖和大鼠颈总动脉内皮剥脱术后新生内膜增生的机制。方法:用不同浓度Am80处理EA-hy926细胞24 h后,应用细胞计数和MTS细胞活力分析检测细胞的增殖情况;将Am80处理的细胞进行PI染色,用流式细胞术检测细胞周期的变化情况;通过real-time PCR方法分析Am80处理后EA-hy926细胞中cyclin B1、P21和基质金属蛋白酶(MMP)-2表达的变化;制备SD大鼠颈总动脉内皮球囊损伤模型,通过HE和免疫组化染色方法,观察Am80对球囊损伤后新生内膜形成的影响。结果:细胞计数和MTS细胞活力分析结果显示,Am80以浓度依赖性方式抑制EA-hy926血管内皮细胞增殖;流式细胞分析显示,Am80可使EA-hy926细胞周期停滞在G2/S期;real-time PCR结果表明,Am80处理后,EA-hy926细胞中P21表达上调,cyclin B1和MMP-2表达水平降低;内皮损伤动物模型结果显示,Am80处理后新生内膜的形成受到显著抑制。结论:Am80可通过促进P21而抑制cyclin B1表达,从而抑制血管内皮细胞增殖和血管新生内膜的形成。     

Aliskiren抑制LPS诱导HUVECs新生血管的形成及可能机制

 目的: 研究阿利吉仑(aliskiren)对脂多糖(LPS)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)新生血管形成能力的影响及可能的机制。方法: 常规培养的HUVECs随机分为空白组和肾素组,ELISA法测定炎性细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)水平,Western blot法检测Toll样受体4(TLR4)和ICAM-1的蛋白水平。将常规培养的HUVECs随机分为空白对照组、LPS模型组以及aliskiren低剂量(1μ mol/L)、中剂量(10μ mol/L)和高剂量(100μ mol/L)组。MTT法和BrdU法检测HUVECs的增殖能力,Transwell法测定HUVECs的迁移率,以HUVECs在Matrigel胶上形成管腔结构情况来判断其血管形成能力。ELISA测定炎性细胞因子TNF-α、ICAM-1和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的水平,RT-PCR和Western blot法检测肾素、TLR4、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的mRNA和蛋白水平。结果: 肾素能够刺激HUVECs炎症因子的分泌及TLR4的表达;aliskiren呈浓度依赖性抑制HUVECs增殖、迁移及新生血管形成,降低MCP-1、TNF-α、IL-6水平及肾素、MMP-2、MMP-9的表达,抑制TLR4表达(P<0.05)。结论: Aliskiren能够有效抑制LPS诱导HUVECs新生血管形成能力,可能与其下调肾素表达抑制TLR4途径介导的炎症反应及MMP-2、MMP-9生成有关。     

色素上皮衍生因子对角膜碱烧伤后新生血管形成的抑制

背景：角膜新生血管导致角膜透明性降低,造成严重的视觉障碍。色素上皮衍生因子是一种内源性血管生成抑制剂,其对于角膜新生血管是否具有抑制作用尚不清楚。 目的：探索局部运用色素上皮衍生因子对大鼠角膜碱烧伤后角膜新生血管的抑制作用。 方法：将20只大鼠随机分为生理盐水组与色素上皮衍生因子组,每组10只。用NaOH溶液将大鼠右眼角膜烧伤诱导产生新生血管。碱烧伤后2组每日分别给予生理盐水和色素上皮衍生因子点眼,并采用裂隙灯显微镜观察和测量各组角膜新生血管生长情况。碱烧伤后12 d处死大鼠,将角膜组织固定切片,行苏木精-伊红染色观察,并进行免疫组织化学染色检测各组大鼠角膜血管内皮生长因子和CD31的表达。 结果与结论：大鼠角膜碱烧伤后3,7,12 d,色素上皮衍生因子组大鼠角膜新生血管面积均小于生理盐水组(P < 0.05)。角膜碱烧伤后12 d,苏木精-伊红染色显示生理盐水组大鼠角膜产生大量新生血管,角膜组织结构紊乱;色素上皮衍生因子组新生血管较少,角膜组织结构趋于整齐。角膜碱烧伤后12 d,免疫组织化学染色示生理盐水组大鼠角膜上皮和基质层可见血管内皮生长因子大量表达,角膜基质层可见血管内皮生长因子和CD31大量表达;色素上皮衍生因子组新生血管稀少,CD31表达较弱。证实局部应用色素上皮衍生因子可有效抑制大鼠角膜化学伤后的血管新生。     

新生血管形成与类风湿关节炎

新生血管形成是类风湿关节炎（ＲＡ）的主要病理特征。影响ＲＡ关节局部新生血管形成的因素较多，新生血管形成诱导剂（如ＦＧＦ、转化生长因子、血小板激活因子和生长因子、血管内皮生长因子等）可促进血管形成；拮抗剂（如γ－干抗素、软骨源性抑制剂等）可抑制血管生成。合理地联合应用阻抑血管生成并能最终改变病程的药物，适时应用手术清除病灶和促血管生成因子，并探索生物学试剂，可望征服ＲＡ     

利用血管模型体外模拟新生血管的形成

目的：利用体外二维和三维血管模型，模拟血管的发生发展过程。 方法： 体外培养人脐静脉内皮细胞，将内皮细胞消化到细胞培养池内，利用无血清培养基培养细胞，观察内皮细胞逐渐形成二维血管的过程；利用Ⅰ型胶原蛋白构成三维系统，将内皮细胞置于其上培养，随着三维系统溶解成油井样结构，内皮细胞在其壁上形成三维血管样结构。 结果： 二维、三维血管模型顺利形成，从二维血管模型观察到：内皮细胞首先形成血管网样结构，相互联系逐渐紧密，细胞之间界限逐渐消失，形成血管壁样结构，并从不规则形状到规则的圆形。三维血管模型随三维系统溶解形成，首先形成的血管样结构不紧密，经过重塑形成规整的环状。 结论： 血管的形成主要经过增殖、出芽、形成、重塑这4个阶段，从结构疏松到联系紧密，从不规整到规整的环状结构。     

不同浓度血管抑素抑制大鼠角膜血管的新生

背景：血管抑素在角膜中是否抑制组织中的新生血管生长尚不清楚。 目的：观察血管抑素溶液对大鼠角膜新生血管生长的作用。 方法：24只大鼠制备左眼碱烧伤角膜新生血管模型,随机抽签法分为4组,对照组给予生理盐水,25,50,75 mg/L AS组分别给与25,50,75 mg/L AS血管抑素溶液滴眼,4次/d至实验结束。 结果与结论：造模后第3天各组角膜均可见少量血管新生,但对照组角膜新生血管生长较其他3组明显。3~7 d,各组角膜新生血管生长速度加快,对照组角膜新生血管粗大。烧伤后14 d,对照组角膜新生血管仍然粗大未见明显消退,各浓度组较前消退明显。碱烧伤后不同时间点各浓度组角膜新生血管面积较对照组少(P < 0.05),75mg/L AS组碱烧伤14 d各时间新生血管面积较其他3组减少(P < 0.05)。Real-Time PCR结果显示：各浓度组间CD31 mRNA表达差异均有显著性意义(P < 0.01)。Western blot结果显示血管抑素作用大鼠后,各浓度组角膜组织的CD31表达均较对照组降低,且随着血管抑素溶液浓度的增加而减少。提示血管抑素能够阻止角膜新生血管的生长。     

XAV939抑制人肝癌HepG2细胞血管生成拟态的形成

目的初步研究XAV939对人肝癌Hep G2细胞血管生成拟态形成的影响及其可能的机制。方法实验分为对照组和实验组(0.5和1μmol/L XAV939分别处理Hep G2细胞48 h);体外成管实验检测各组细胞形成血管拟态的能力,RT-PCR检测ZEB1及MMP-7 mRNA的表达,Western blot检测β-catenin、ZEB1和MMP-7蛋白的表达。结果对照组与实验组形成管状结构数目分别为9.67±0.70,5.67±0.64(0.5μmol/L)和2.27±0.81(1μmol/L),体外形成管道结构的数目减少(P0.01);实验组ZEB1及MMP-7 mRNA表达和ZEB1、MMP-7及β-catenin蛋白表达均较对照组减少(P0.05)。结论 XAV939能有效抑制人肝癌Hep G2细胞血管生成拟态的形成。     

苦参素对小鼠移植性S180肉瘤血管形成的抑制作用

目的 :苦参素注射液是氧化苦参碱水溶液制剂 ,为纯生物碱类药物 ,氧化苦参碱含量达 98%以上 ,为纯中药制剂。研究表明 :苦参及其主要成分 -氧化苦参碱均具有明显的抗肿瘤活性 ,但是否具有抗肿瘤血管生成的作用 ,目前鲜见报道。我们对氧化苦参碱进行了研究 ,以探讨苦参素注射液对肿瘤血管形成是否具有抑制作用。方法 :小鼠肉瘤S180瘤株 ,腹腔传代接种。待腹水生长旺盛时 ,抽出腹水 ,细胞计数 ,调整细胞浓度为 2× 10 10 个细胞 /L ,在小鼠腋下皮下注射S180肉瘤细胞 ,每只接种0 2mL ,以建立小鼠皮下肿瘤模型。 4 8只小鼠于接种当天随机分为…     

小檗碱抗肿瘤新生血管形成作用机制的研究

目的：研究小檗碱对bFGF活化人脐静脉内皮细胞（HUVEC）增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响，探讨其对肿瘤新生血管形成作用的机制。方法：MTT法检测小檗碱对bFGF活化HUVEC的增殖作用；流式细胞仪检测用药后细胞周期的变化；激光共聚焦扫描显微镜下观察药物对细胞形态、细胞内钙的影响；流式细胞仪检测小檗碱对细胞凋亡的作用。结果：小檗碱能明显抑制bFGF活化的HUVEC增殖，且存在剂量依赖关系；使细胞在G0-G1期的比例明显增多；使细胞核浓缩、甚至裂解成碎块，同时使细胞内钙增多；并诱导活化HUVEC发生细胞凋亡。结论：小檗碱可能通过将bFGF活化的HUVEC细胞周期阻滞在G0-G1期，抑制活化HUVEC的增殖：诱导活化HUVEC细胞发生凋亡等机制，阻止新生血管形成，发挥其抗肿瘤作用。     

促甲状腺激素与视网膜新生血管形成

视网膜新生血管形成主要见于糖尿病视网膜病变(DR)、早产儿视网膜病(ROP)及视网膜中央静脉阻塞(CRVO),是视网膜病变的主要致盲原因。有研究表明高水平促甲状腺激素(TSH)可能促进了视网膜新生血管形成,其作用机制可能与TSH与其受体结合后激活了血管内皮生长因子(VEGF)和环磷酸腺苷-雷帕霉素靶蛋白(cAMP-mTOR)信号通路而使血管生成增加有关。     

VEGF与原发性肝癌血管新生关系的研究进展

原发性肝癌是我国和一些亚非地区常见癌症．是我国最常见的恶性肿瘤之一。据1995年我国卫生部统计资料，我国肝癌年死亡率约为20．4／10万人，居癌症中的第二位。我国原发性肝癌90％以上为肝细胞肝癌（HCC）。     

紫草萘醌提取物对小鼠NK细胞活性的增强作用

本文研究了紫草萘醌单体提取物(Lm)对小鼠NK细胞毒活性的调节作用。每日经腹腔注射每公斤体重6mg的Lm,连续5天,小鼠脾细胞NK细胞毒提高约20%(p<0.001).细胞毒动力学分析的结果显示:给药小鼠的动力学实验参数Vmax和Kmapp均明显增加而Vmax/Kmapp则无明显变化,提示Lm增强NK活性的机理为增加了杀伤细胞的频率.     

扶正抗癌方治疗大鼠移植性肝癌的研究

目的： 复制类似人类原发性肝癌发生发展的大鼠移植性肝癌模型,探讨“扶正抗癌方”对大鼠移植性肝癌的治疗作用及机制。方法：采用Walker256 癌肉瘤细胞株接种SD大鼠复制原位种植肝癌模型,分为正常组、假手术组、模型组、抗癌扶正方低、中、高剂量组。定时记录体重、进食及饮水等生命体征;实验1周、2周、3周分别抽取动脉血,进行生化检测：包括谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、草/丙比值(S/L)、血清白蛋白（ALB）、白蛋白/球蛋白比值（A/G）及碱性磷酸酶（ALP）、γ-谷氨酰转移酶（GGT）和岩藻糖苷酶（AFU）;观察各组大鼠的生存时间。结果：实验3周时,扶正抗癌方高、中剂量组ALT、AST低于模型组(P<0.01),ALB及A/G比值高于模型组（P<0.05）;高剂量组ALP、GGT、AFU活性明显低于模型组（P＜0.01）;高、中、低剂量组大鼠的生存率高于模型组（P<0.05）。结论：扶正抗癌方可改善移植性肝癌的大鼠生存状况;保护肝脏功能,降低肝ALT、AST释放;维持ALB水平;降低ALP、GGT、AFU的活性,最终延长移植性肝癌大鼠生存时间,其中以“扶正抗癌方”高剂量组疗效最好。     

血小板源性生长因子促进新生血管形成的机制研究

目的 :观察血小板源性生长因子 ( PDGF)对于培养脐静脉内皮细胞碱性成纤维细胞生长因子 ( b FGF)水平的影响 ,揭示 PDGF促进新生血管形成的机制。方法 :免疫组织化学检测培养脐静脉内皮细胞 b FGF水平。结果 :缺氧培养与常规培养相比内皮细胞胞浆b F GF水平无显著变化 ;不同剂量的 PDGF在常规或缺氧培养条件下均能增加内皮细胞胞浆 b FGF水平 ,且呈剂量依赖性。结论 :说明 PDGF可能通过直接促血管形成生长因子的介导作用间接促进新生血管的形成。     

VEGF165转染大鼠血管内皮细胞对新生血管形成影响的实验研究

目的探讨血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）基因与增强绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein，EGFP）共表达载体转染大鼠血管内皮细胞，植入大鼠体内，观察诱导新生血管情况，为移植组织诱导新生血管形成奠定基础。方法对质粒pIRES2-EGFP／VEGF，岱进行扩增、纯化，以脂质体法转染大鼠血管内皮细胞并植入肾被膜下。采用荧光显微镜检测增强绿色荧光蛋白在内皮细胞中的表达，用流式细胞仪检测转染效率。用RT-PCR检测VEGF mRNA的表达。免疫组化检测VEGF在内皮细胞中的表达。切取移植肾脏组织标本,HE染色观察组织形态学变化。结果荧光显微镜观察到实验组内皮细胞有特异性的EGFP表达。流式细胞仪分析转染效率为13．06％。实验组血管内皮细胞胞核和胞浆中均有VEGF表达。RT-PCR显示实验组大鼠血管内皮细胞中有人源化VEGF165基因在mRNA水平表达。移植后14d，实验组大鼠肾被膜下可见成团的新生毛细血管网形成，而对照组及空白转染组尽管血管内皮细胞仍存活，但未形成明显血窦。结论转染VEGF是促进内皮细胞早期（14d内）形成新生血管的有效途径。     

移植血管外膜早期NADPH氧化酶激活和新生血管形成

<正>目的:动脉外膜所产生的活性氧和新生血管形成,可能导致和促进病理性血管重构的形成。本课题研究NADPH氧化酶在同种异体主动脉移植模型的外膜血管动态表达和新生血管形成。方法:将F344大鼠胸主动脉移植到Lewis腹主动脉造模。于移植后0.5、3、7和14 d收集移植血管,进行形态学分析、免疫组化和定量PCR检测。结果:血管外膜移植后3 d、内膜7 d     

斯赤列提取物抑制骨关节炎模型大鼠的异常血管新生

背景：课题组前期研究表明,斯赤列提取物具有促进成骨细胞增殖分化,促进骨折愈合、抗炎、抗氧化等作用,可有效缓解骨关节炎的发展。血管内皮生长因子则为骨关节炎严重程度评价的生物标记物。目的：探讨斯赤列两种提取物(甲醇提取物SAW-ME、二氯甲烷提取物SAW-DCE)对抗骨关节炎血管新生的作用及机制。方法：(1)采用前交叉韧带切断法复制大鼠骨关节炎模型(模型组),分别给予SAW-ME、SAW-DCE干预,并设假手术组为对照。运用免疫组化、免疫荧光等方法检测大鼠关节中血管内皮生长因子A、血清中血管内皮生长因子和软骨下骨H型血管的变化。(2)以血管内皮细胞EA.hy926为研究对象,给予SAW-ME、SAW-DCE干预,MTT法检测对细胞增殖的影响;采用血管内皮生长因子诱导EA.hy926细胞,复制血管新生模型,进行划痕实验、成管实验研究其作用和机制。(3)采用EA.hy926细胞进行转录组测序,分析给予SAW-DCE干预后细胞差异基因及相关功能的特征变化。结果与结论：(1)SAW-ME、SAW-DCE可下调骨关节炎大鼠膝关节软骨中血管内皮生长因子A的表达,减少关节中H型血管的生成;SAW-ME可...     

KLF4抑制球囊损伤诱导的新生内膜形成

目的： 通过腺病毒载体介导外源性KLF4在大鼠颈动脉球囊剥脱血管中进行表达,观察新生内膜增生情况,研究外源性KLF4对球囊损伤诱导的新生内膜形成的影响及初步探讨其机制。方法： 构建含有KLF4基因的重组腺病毒载体pAd-KLF4,将其导入内皮剥脱的血管壁。用HE染色观察血管新生内膜的厚度,免疫组织化学染色和RT-PCR分别检测外源性KLF4在血管中的表达以及与增殖和分化标志基因表达的关系。结果： 重组腺病毒pAd-KLF4可在血管壁中稳定表达KLF4。KLF4的过表达可显著抑制球囊损伤后血管新生内膜的增厚,转染pAd-KLF4的血管,其内膜/中膜比值（I/M）（0.52±0.15）明显小于pAd对照组（2.48±0.38）,P<0.05。pAd-KLF4组血管壁增殖标志蛋白PCNA和c-Jun表达也较pAd组明显降低（P<0.05）。结论： KLF4过表达可阻断损伤诱导的血管平滑肌细胞表型转化,进而抑制球囊剥脱后血管内膜的增生。