塞来昔布治疗裸鼠前列腺癌骨转移研究

目的建立裸鼠前列腺癌骨转移模型,探讨塞来昔布作为血管抑制剂对前列腺癌骨转移的形成及生长的影响。方法将30只前列腺癌骨转移裸鼠随机分成二组,第一组隔日予以生理盐水,腹腔注射;第二组隔日予以塞来昔布30 mg/kg,腹腔注射;30 d后处死。检测血清碱性磷酸酶,采用免疫组化和图象分析系统测定血管内皮生长因子(VEGF)和肿瘤微血管密度(MVD),光镜下观察各组肿瘤组织,流式细胞仪检测肿瘤细胞的凋亡。结果治疗组肿瘤的生长明显受到抑制(P<0.01),塞来昔布组肿瘤组织中的VEGF和MVD与对照组比较无统计学意义(P<0.01),抑瘤率为54.47%,凋亡指数由(4.68±1.83)%上升到(24.93±6.14)%,血清碱性磷酸酶由(26.5±4.93)U/L下降到(17.17±3.13)U/L。结论塞来昔布能显著抑制裸鼠前列腺癌骨转移瘤的生长和新生血管形成。     

血管生成抑制剂联合分化诱导剂治疗结肠癌的实验研究

目的通过建立人LOVO细胞结肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,研究血管生成抑制剂（TNP-470）联合分化诱导剂（RA）抗结肠癌生长的效应,二者是否具有协同效果。方法建立人LOVO细胞结肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,模型建立后分组治疗,按治疗方式分为对照组、TNP-470组、RA组和联合组（TNP-470＋RA）至治疗结束时处死裸鼠,测量皮下移植瘤重量,计算抑瘤率;检测肿瘤组织结肠癌细胞凋亡指数（AI）。结果裸鼠皮下移植瘤瘤重、抑瘤率,联合组和对照组及TNP-470组、RA组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）,且TNP-470组、RA组和对照组之间差异亦有统计学意义（P〈0.05）。治疗组与对照组癌细胞AI比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;且联合组与RA组和TNP-470组癌细胞的AI比较,差异也有统计学意义（P〈0.05）。结论血管生成抑制剂TNP-470与分化诱导剂RA联合治疗结肠癌裸鼠皮下移植瘤比TNP-470或RA单药治疗具有更强的抑瘤作用,TNP-470通过抑制肿瘤血管生成,切断肿瘤细胞的血供和营养供给,抑制结肠癌裸鼠皮下移植瘤的生长;而RA通过诱导肿瘤细胞凋亡,降低VEGF的表达抑制肿瘤的生长,二者联和应用,抗肿瘤效应明显增强。     

反应停对人癌裸鼠肿瘤及新血管形成的影响

目的:观察反应停对人卵巢癌细胞(OVCAR-3)及人结肠癌细胞(HCT-8)生长及肿瘤组织内新血管形成的影响。方法:建立人癌裸鼠异种移植的模型,将接种肿瘤后的裸鼠分别灌胃给予不同剂量的反应停,并与正常对照组进行比较,观察肿瘤生长的情况;采用免疫组化检验方法检测肿瘤组织中微血管密度(MVD)。结果:对人癌裸鼠OVCAR-3肿瘤,反应停中、高剂量组均可显著抑制肿瘤生长(P<0.05、P<0.01),对HCT-8的生长却无明显影响,但反应停均呈剂量依赖性降低上述肿瘤组织MVD。结论:反应停的抗肿瘤作用可能与抗新血管形成作用无关。     

塞来昔布对肺癌的抑制作用机制研究

目的探讨环氧化酶抑制剂（COX-2）抑制剂塞来昔布对于A549肺癌细胞增殖及其小鼠移植瘤生长的抑制作用及可能机制。方法加不同浓度塞来昔布与A549肺癌细胞共培养,MTT法检测细胞增殖。流式细胞仪法检测细胞凋亡情况。A549细胞移植入BALB／c裸小鼠皮下后,随机分为实验组和对照组,实验组隔日腹腔注射塞来昔布30mg．kg^-1,对照组隔日腹腔注射等体积生理盐水,24d后处死移植瘤小鼠,计算抑瘤率,RT-PCR检测移植瘤组织中COX一2和VEGFmRNA表达水平,同时酶联免疫检测小鼠血清中MMP-9浓度,免疫组化检测瘤组织中微血管密度（MVD）。结果塞来昔布在体外对细胞株A549的生长抑制作用呈剂量、时间依赖性,且经塞来昔布作用后,A549细胞G0／G1期比例增加,S、G2／M期比例下降。在体实验显示,塞来昔布具有明显的抑制A549肺癌移植瘤增殖的作用,同时能抑制移植瘤组织中COX-2、VEGF表达,降低血清MMP-9浓度,减少移植瘤中微血管密度（P〈0．05）。结论塞来昔布在体内外均可显著抑制A549肺癌细胞的增殖,而诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤血管生成和降低癌细胞侵袭能力是其可能的作用机制。     

TNP-470联合丝裂霉素对小鼠原位移植性肝癌生长抑制及作用机制的实验研究

目的　研究血管形成抑制剂TNP 4 70联合MMC对小鼠原位移植性肝癌生长抑制及作用机制。方法　小鼠H2 2肝癌细胞先在KM小鼠皮下造成实体瘤 ,再原位接种于KM小鼠肝脏。原位肝癌模型小鼠 4 0只 ,分为四组。 (1)对照组 :隔日皮下注射溶剂 (3%酒精 ) ;(2 )MMC组 :一周 2次腹腔注射MMC(2mg/kg) ;(3)TNP 4 70组 :隔日皮下注射TNP 4 70 (30mg/kg) ;(4)TNP 4 70 +MMC组 :隔日皮下注射TNP 4 70 (30mg/kg) ,一周 2次腹腔注射MMC(2mg/kg)。用药 2周后处死小鼠 ,检测原位肿瘤的体积 ,治疗前后小鼠体重 ;肿瘤组织送检ki 6 7、凋亡及微血管密度 ;另取肿瘤组织电镜观察。结果　 (1)各治疗组肿瘤生长均较对照组有不同程度的抑制 ,联合用药组最显著 (P <0 0 5 ) ;各组治疗前后体重变化无明显差异 ;(2 )相比于对照组 ,TNP 4 70对增殖指数无明显影响 (P >0 0 5 ) ,凋亡指数增加 ,微血管密度明显减少 (P <0 0 5 )。联合用药组增殖指数及凋亡指数较对照组及单用药组明显增加 ,微血管密度较对照组及MMC组明显减少 (P <0 0 5 )。 (3)电镜显示 :联合用药组可见凋亡的内皮细胞及较多凋亡的肿瘤细胞。结论　联合TNP 4 70及MMC能明显提高单药对小鼠原位移植瘤生长抑制 ,TNP 4 70作用的靶点主要是血管内皮细胞 ,增效的机制可能是通     

抗肿瘤血管生成抑制剂TNP-470的研究进展

肿瘤是一种血管生成依赖性疾病,肿瘤的生成、转移均与血管生成密切相关.烟曲霉素合成类似物TNP-470能有效抑制肿瘤血管生成,破坏血管内皮细胞增殖,从而抑制肿瘤的生成与扩散.当前TNP-470正处于治疗各种肿瘤的临床试验中.本文就近几年来,对TNP-470的研究进展作一综述.     

腺病毒介导的血管抑素K1-5转基因治疗裸鼠卵巢癌移植瘤

目的：探讨血管抑素k1-5对裸鼠卵巢癌皮下移植瘤的治疗作用。方法：20只荷瘤裸鼠随机分成4组．每组5只，DDP组：顺铂（DDP）20mg／kg，腹腔内注射隔日1次，连续5次；AdHA组：表达血管抑素k1-5基因的腺病毒载体（AdHA）1×10^8 pfu／次，隔日1次，连续5次；AdHA＋DDP组：AdHA1×10^8 pfu／次，隔日1次，连续5次＋DDP20mg／kg，腹腔内注射隔日1次，连续5次，以上3组为实验组。NS组（对照组）：生理盐水（NS）100此，腹腔内注射隔日1次，连续5次。以肿瘤体积、瘤质量及组织学改变来评价AdHA治疗效果及安全性。结果：瘤体内多点注射表达血管抑素k1-5的腺病毒能显著抑制肿瘤生长，AdHA组、DDP组及AdHA＋DDP组较NS组肿瘤体积及瘤质量明显降低（P〈0．05或P〈0．01），且AdHA组及AdHA＋DDP组较Ns组微血管密度明显降低（P〈0．05）。结论：表达血管抑素k1-5的腺病毒载体能抑制裸鼠卵巢癌皮下移植瘤的生长，且与化疗药联合应用有协同作用，提高肿瘤抑制率。     

雷公藤红素抑制可移植性人脑胶质瘤生长相关分子

目的 研究雷公藤红素在裸鼠胶质瘤动物模型治疗人脑胶质瘤的可行性.探讨雷公藤红素抑制SHG-44胶质瘤裸鼠移植瘤生长的作用机制.方法 建立BALB/c裸小鼠SHG-44胶质瘤移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分为5组,采用腹腔内注射给药方法.雷公藤红素按4mg/kg、2mg/kg、1mg/kg三种浓度分组给药;阳性对照顺铂组按2mg/kg给药.定期观察肿瘤生长情况测量肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线并计算抑瘤率.全部SHG-44裸鼠移植瘤石蜡标本用SP法免疫组化染色,检测移植瘤组织中的微血管计数(MVD)、以及bFGF、周期蛋白D1和PCNA的蛋白表达.结果 与溶媒对照组相比,雷公藤红素4mg/kg组、2mg/kg组均能抑制肿瘤生长(P＜0.05),其体积抑瘤率分别为35%和26.9%.雷公藤红素高剂量组能下调移植瘤组织中bFGF的蛋白表达(P＜0.05);MVD也随之降低(P＜0.05),呈剂量依赖关系.PCNA、周期蛋白D1在雷公藤红素高、中剂量组及阳性对照组移植瘤中的蛋白表达明显低于溶媒对照组(P＜0.05),呈剂量依赖关系.结论 雷公藤红素能明显抑制SHG-44裸鼠移植瘤生长,并存在剂量依赖性.其机制可能是下调bFGF的蛋白表达,抑制肿瘤血管生成,下调周期蛋白D1、PCNA的蛋白表达,对肿瘤细胞周期进行调控.     

羧基-D-氨基葡萄糖对食管癌裸鼠及相关基因表达的影响

目的观察羧基-D-氨基葡萄糖(COPADG)对食管癌裸鼠及相关基因表达的影响。方法建立食管癌裸鼠模型,随机分为对照组、COPADG组、氟尿嘧啶组(5-FU)和联合组(CF)。计算抑瘤率;用免疫组化法,检测细胞增殖核抗原(PCNA)、天冬氨酸半胱氨酸特异性蛋白酶(caspase3)、血管内皮生长因子(VEGF)表达和微血管密度(MVD);用流式细胞术,检测肿瘤细胞凋亡。结果 COPADG组、5-FU组和CF组抑瘤率分别为54.16%,38.78%,73.91%;以上3组VEGF和MVD表达均低于对照组(P<0.01),caspase3表达均高于对照组(P<0.01);COPADG组和CF组的PCNA表达低于对照组和5-FU组(P<0.01),以上3组的早期凋亡细胞率均高于对照组(P<0.01)。结论 COPADG通过抑制食管癌肿瘤细胞增殖和血管形成及诱导肿瘤细胞凋亡,抑制食管癌裸鼠肿瘤的生长。     

辛伐他汀抑制过表达HER2型结直肠癌的肿瘤血管生成

目的探讨辛伐他汀在结直肠癌(CRC)血管生成调控中的作用及分子机制。方法 Western blot法检测HER2和VEGF蛋白表达。采用Matrigel小管形成、MTT、伤口愈合试验和Transwell检测辛伐他汀对CRC小管形成、增殖、迁移和侵袭能力的影响。另外,采用HTC-116和LoVo细胞构建裸鼠移植瘤模型,模型小鼠分成2组,对照组每日注射0.1 ml磷酸盐缓冲盐水,治疗组小鼠每天注射50 mg/kg辛伐他汀。免疫组化方法检测肿瘤CD31表达情况,计算肿瘤微血管密度(MVD)。观察辛伐他汀对裸鼠肿瘤生长及肿瘤血管形成的影响。结果 VEGF和HER2在CRC细胞中表达上调,而辛伐他汀明显降低其表达。辛伐他汀预处理可减少体外内皮细胞小管形成和体内微血管密度。辛伐他汀明显抑制HRG-β1诱导的血管形成。机制研究显示,辛伐他汀通过抑制VEGF分泌而显著抑制HER2诱导引起的肿瘤血管生成。结论辛伐他汀通过对HER2/VEGF轴的调控抑制肿瘤血管生成,为辛伐他汀抑制过表达HER2型CRC提供了一种新的机制。     

Short-term effects of TNP-470 in combination with cisplatin in the rat model of bladder cancer

PURPOSE: To investigate the short-term effects of TNP-470 in combination with cisplatin in a rat model of bladder cancer. MATERIALS AND METHODS: Following treatment of TNP-470 with or without cisplatin for 7 days, the states of angiogenesis, apoptosis and cell proliferation were evaluated in rat bladder cancer induced by N-butyl-N-(4-hydroxybutyl) nitrosamine. RESULTS: In comparison with untreated tumors, we noted a significantly decreased microvessel density (MVD) in the rat bladder cancer treated by TNP-470, and a significantly increased apoptotic index (AI) when treated by cisplatin. In TNP-470 plus cisplatin-treated tumors, both significantly decreased MVD and increased AI were observed in non-invasive and invasive rat bladder cancers in addition to a significantly decreased proliferation index (PI) in invasive cancer. CONCLUSION: The combination therapy of TNP-470 with cisplatin may act through both the inhibition of angiogenesis and induction of apoptosis, and invasive tumor cells may be much more sensitive to this combined therapy in rat bladder cancer.     

O-(氯乙酰-氨甲酰基)烟曲霉醇联合5-氟尿嘧啶对胃癌生长的抑制

目的　以了解和探讨血管生成抑制剂与传统化疗药物联合治疗的可行性及疗效为目的 ,研究血管生成抑制剂O (氯乙酰 氨甲酰基 )烟曲霉醇 (代号TNP 4 70 )联合 5 氟尿嘧啶 (5 FU)对人胃癌裸小鼠皮下瘤的作用。方法　将人胃癌细胞株SGC 790 1sc于32只裸小鼠 ,并随机分成 4组 ,TNP 4 70组 (5 0mg·kg- 1)、5 FU组 (30mg·kg- 1)、联合用药组 (TNP 4 705 0mg·kg- 1+ 5 FU 30mg·kg- 1)及对照组 (含 3%乙醇的 5 %阿拉伯胶 ,每只 0 .2mL) ,均隔日sc。观察皮下瘤长径及短径 ,4周后处死 ,取瘤组织行RT PCR检测VEGF16 5mRNA和免疫组化测定微血管密度 (MVD)。结果　 4周末TNP 4 70组、5 FU组及联合治疗组的抑瘤率分别为 69.7% ,86.7% ,98.8% ,3周末联合治疗组的瘤体积已小于两单一治疗组 (P <0 .0 5 ) ,提示联合治疗对皮下瘤生长的抑制作用明显优于各单一治疗。而各组间VEGF16 5mRNA表达无明显差异 (P >0 .0 5 )。TNP 4 70组、5 FU组、联合治疗组及对照组的MVD计数分别为 3.8± 0 .6,8.8± 4 .8,4 .8± 0 .4 ,8.8± 1.3,TNP 4 70组及联合治疗组的MVD明显较 5 FU治疗组及对照组减少 (P <0 .0 5 ) ;TNP 4 70与联合治疗组之间、5 FU与对照组之间MVD无差异 (P >0 .0 5 )。结论　血管生成抑制剂TNP 4 70与细胞毒     

Enhanced suppression of prostate tumor growth by combining C-CAM1 gene therapy and angiogenesis inhibitor TNP-470

We have previously shown that C-CAM1-based gene therapy effectively suppressed prostate tumor growth in nude mice xenograft models. In this study, we examined the effects of combining C-CAM1-based therapy and TNP-470, a potent angiogenesis inhibitor, on prostate cancer in a xenografted tumor model. The direct cytotoxic effects of Ad-C-CAM1 (recombinant adenovirus containing C-CAM1 cDNA) and TNP-470 on DU145 cells in vitro were determined by microculture tetrazolium assay. The in vivo antitumor effects of either agent alone were studied in a DU145 xenografted tumor model. Cells were infected with Ad-C-CAM1 or the control virus at multiplicities of infection (m.o.i.) of 5 or 10 and then inoculated onto nude mice 48 h later. TNP-470 (0, 17 or 35 mg/kg) was given 15, 17 and 19 days after inoculation. Combined treatments in vivo were carried out to determine whether there were synergistic antitumor effects. Both Ad-C-CAM1 and the control virus were minimally toxic to DU145 in vitro. There was evident dose-dependent suppression of xenografted tumor growth by either Ad-C-CAM1 or TNP-470. By the median-effect analysis, combination of the two agents generated strong synergistic antitumor effects as shown by marked tumor suppression as compared to either treatment alone. The novel strategy may have clinical implications for the treatment of prostate cancer.     

三氧化二砷对小鼠肝癌生物学行为的影响

目的研究三氧化二砷对HepA小鼠肝癌生长、血管生成及侵袭与转移特性的影响。方法建立皮下种植肝癌小鼠模型,用药后观察小鼠肿瘤体积变化及抑瘤率;利用免疫组织化学观察移植瘤中血管内皮生长因子（VEGF）,对移植瘤的微血管密度（MVD）进行计数。结果三氧化二砷对小鼠肝癌瘤体体积和抑瘤率均具有抑制作用;三氧化二砷能抑制肿瘤新生血管生成,降低VEGF的表达,并能降低肿瘤MVD,与未用药对照组相比差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论三氧化二砷能缩小肿瘤体积、增加抑瘤率,并能降低VEGF的表达,减少微血管密度。     

肺癌组织中高迁移率族蛋白-1、血管内皮生长因子和基质金属蛋白酶-9与微血管生成的相关性研究

目的 探讨肺癌组织中高迁移率族蛋白-1（HMGB-1）、VEGF和MMP-9与微血管生成的相关性.方法 选择肺癌患者标本80例为研究对象,癌组织作为观察组,癌旁正常肺组织作为对照组,采用免疫组化染色测定组织中HMGB-1、VEGF、MMP-9和MVD的表达情况.结果 观察组肺组织HMGB-1、VEGF和MMP-9的表达均明显高于对照组（χ^2=6.27、5.93、5.16,均P＜0.05）.观察组MVD值为（76.27±19.24）个,对照组为（24.67±6.14）个,两组差异有统计学意义（t=6.764,P＜0.01）.HMGB-1、VEGF和MMP-9均与MVD呈正相关关系（r=0.430、0.506、0.597,均P＜0.05）.结论 肺癌组织中HMGB-1、VEGF和MMP-9与微血管生成有密切关系.     

血管内皮生长因子异常表达对肺癌诊断和预后价值

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)在肺癌组织中的表达及其临床价值以及VEGF与肿瘤生长、转移及预后的关系。方法:对38例肺癌组织以免疫组织化学法研究VEGF在肿瘤组织的胞内分布及其表达;同时以ELISA法测定临床上肺癌、良性肺病患者及正常对照血清中的VEGF水平。结果:肺癌组织中VEGF位于胞质和胞膜,呈棕黄色颗粒状过度表达,Ⅲ期、Ⅳ期肺癌和伴远处转移者阳性率为90%,肺癌患者血清中VEGF水平显著高于正常对照(P<0.01),但在良恶性肺病组间未见明显差异,经抗感染药物治疗后,良性肺病患者血清VEGF水平明显下降。结论:肺癌发生和发展过程中VEGF呈过度表达,检测患者血清VEGF可以作为肺癌诊断和预后的有用指标。