D254离子交换树脂在肝素生产中的应用

国内外从脏器提取肝素的生产工艺曾采用过十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)络合、DEAE-纤维素纯化、离子交换树脂吸附等方法。许多文献报道,用离子交换树脂交换吸附肝素的工艺具有操作简便、成本较低、收率较高等优点。我们采用杭州争光塑料厂生产的D254季铵型强碱性阴离子交换树脂进行酶解-离子交换工艺的试验,证实了离子交换工艺的这些优越性。     

超滤技术在肝素生产中的应用

肝素是一种酸性粘多糖,临床上用于输血和防治血栓。它存在于动物组织中,在牛脾、肌肉和肝中含量较高;在猪粘膜中肝素含量亦不低,且价廉易得,目前多以此为原料制备肝素,工艺多采用盐解——离子交换,大致过程为:盐解、吸附、洗脱、沉淀、干燥。需     

肝素钠粗品生产工艺的改进

<正> 近十多年来,各地大专院校、科研单位和生化药厂对离子交换树脂法制备肝素钠的生产工艺研究很多,报道不一,但对提取肝素—蛋白质复合物及解离方式,多为盐解工艺和酶解—盐解结合工艺。两种工艺各有特点。从各地报道的收率、效价来看,二者基本上无显     

酶解—离子交换法提取肝素钠的几个问题的探讨

<正> 一、酶解—离子交换法提取肝素的基本原理酶解—离子交换法提取、纯化肝素的原理是利用胰脏內含有的胰旦白水解酶,在适当温度和酸碱度下水解肠粘膜,使结合在肠粘膜中的旦白和肝素拆开,释放出来的肝素在一定盐浓度下,通过强碱性季胺盐阴离子交换树脂的吸附、洗涤、洗脱而得粗品肝素。     

悬浮床离子交换树脂吸附肝素

利用猪小肠粘膜及肠衣盐液生产肝素钠,目前国内已广泛普及。其生产技术路线,普遍采用盐解——搅拌离子交换工艺。此工艺不但劳动强度大、效率低,且易损坏树脂。作者从强化传质的角度提出了悬浮床离子交换树脂进行吸附、洗涤、洗脱操作方案,这样不但保证了整个生产过程中树脂不放出设备,而且可采用减压抽滤措施,提高工效,且进一步可实现多级离子交换吸附操作、提高收率。实施以上方案,离子交换吸附操作是关键。因为提取液量大,离子交换速度慢,而采用固定床离子交换柱,则流加速度很低,难以放大到生产规模。为此,我们进行了悬浮床离     

低分子质量肝素-枸橼酸铵混合离子梯度法制备阿霉素脂质体

目的制备低分子质量肝素-枸橼酸铵混合离子梯度的阿霉素脂质体,并对其处方和制备工艺进行优化。方法采用离子交换树脂法建立脂质体内外水相低分子量肝素与枸橼酸铵的混合离子梯度,考察建立离子梯度的不同方法、脂质体处方及水化介质种类对阿霉素脂质体包封率的影响。结果最终优化的处方为m(hydrogenated soybean phosphatidylcholine,HSPC)∶m(cholesterol,CH)∶m(polyethylene glycol 2000-cholesteryl hemisuccinate,mPEG2000-CHEMS)=3.0∶1.0∶1.5;制备工艺为以100 mmol.L-1枸橼酸铵联同10 g.L-1低分子质量肝素铵为水化介质,除盐时间为15 min。加入低分子量肝素后,可使枸橼酸铵阿霉素脂质体的包封率由78.0%提高到95.5%。结论低分子量肝素的加入可显著提高枸橼酸铵阿霉素脂质体的包封率。     

不同来源肝素的理化性质和药理作用

为扩大原料来源,并对来源不同的肝素进行评价,以找出具有特异药理作用的肝素制剂,根据国内生产情况并参考常用的盐解和酶解工艺,以牛、羊、猪肠粘膜和牛、羊肺为     

不同来源肝素的理化性质和药理作用

<正> 为了扩大生产肝素的原料,挖掘具有特殊药理作用的肝素类药物,立足实际生产情况,参照盐解和酶解两种工艺,以牛,羊、猪肠粘膜和牛、羊肺为原料,制备了五种肝素,并对其进行了理化分析和初步的药理作用研究。材料和方法材料: Triton WR—1339,Serva,用生理盐水配成10％的溶液,肝素钠(国家标准品),168u/mg,北京药品生物制品检定所;其它试剂均为分析纯或化学纯。日立282型分析超速离心机;UV-260紫外-可见分光光度计;PEM783型红外分光光度计。     

肝素提取与纯化的研究

根据国内生产实际情况,用羊血浆生物检测法,以每1g肠粘膜干固体中肝素的抗凝效价作为收率比较指标,设计了多因素多水平的正交试验,对肝素生产中提取、除杂蛋白及离子交换吸附各生产步骤行了研究和优选。发现原料中来源于细菌的肝素酶对肝素破坏严重。探讨了肝素动态吸附以及肝素钙生产工艺。     

复合离子盐对自发性高血压大鼠胰岛素抵抗相关因素的影响

目的 :本研究通过观察不同剂量复合离子盐对自发性高血压大鼠 (SHR)胰岛素抵抗相关因素的影响 ,探讨复合离子盐能否对原发性高血压起到防治作用。方法 :对61只自发性高血压大鼠分别饲以复合离子盐 (高、低盐实验组 )及普通加碘盐 (高、低盐对照组 ) ,动态观测动物血压变化 ,检测大鼠血糖、血胰岛素水平,计算胰岛素敏感指数。结果 :(1)复合离子盐较普通加碘盐具有明显的预防高血压作用 ,高盐实验组血压明显低于高盐对照组(P<0.01)。 (2)4组血糖水平差别无统计学意义 (P>0.05) ;高盐对照组胰岛素水平高于其他3组 (P<0.05) ,胰岛素敏感指数明显低于其他3组 (P<0.05)。高盐实验组血糖和胰岛素水平与低盐实验组差别无统计学意义 (P>0.05)。结论 :复合离子盐对SHR的高血压有防治作用 ,且不增加胰岛素抵抗     

非表面活性剂增加大白鼠对胰岛素和肝素直肠吸收的研究

作者研究用水杨酸盐、5-甲氧基水杨酸钠、3-甲氧基水杨酸钠和高香草酸钠四种非表面活性剂作为胰岛素和肝素直肠吸收的辅助剂。实验采用微型灌肠技术,将胰岛素溶于0.2M的磷酸缓冲液中制成pH5.0的灌肠剂,给大白鼠灌肠后,于一定间隔时间内干颈静脉采血分别用O-甲苯胺法及酶免疫测定法对血浆中的血糖和胰岛素浓度进行测定。实验结果表明,在给予0.3ml含0.3IU的胰岛素和5mg 5-甲氧基水杨酸钠的微型灌肠剂后鼠血糖浓度迅速下降,并在给药90分钟后逐渐回升;在给予0.3ml含有1-8IU胰岛素和5mg 5-甲氧基水杨酸钠的灌肠剂后,血糖浓度也相应降低,在给药60到120分钟后逐渐回升。增加胰岛素的浓度可在20分钟左右产生最大的血糖下降值。在使用1.8IU胰岛素时,5mg的水杨酸盐、     

大孔树脂制备肝素钠的工艺改进

本文介绍了大孔树脂法制备肝素钠中提取工艺的改进。改进后的方法同时具有碱水解、酶解、盐解三种效应,使肝素提取完全、过滤迅速、操作简便、质量合格,且其废液尚可综合利用。经上百批生产证实,本法适用于工业生产。     

胰高血糖素分离纯化的研究

作者研究了自胰岛素生产过程中分离纯化胰高血糖素的方法。以胰岛素盐析物为起始物,经大孔强酸离子交换树脂柱层析,胰岛素不被吸附,随流出液流出(A),以NH₄OH稀溶液洗脱获得含有胰高血糖素的蛋白质溶液(B)。B液经凝胶过滤法分离,峰Ⅲ为富含胰高血糖素部分(C)。C液经DEAE—纤维素柱层析分离,其峰Ⅱ为电泳纯胰高血糖素(D)。标准品与D样品电泳行为相一致。兔血糖检查证明D保留有全部活性。以D浓缩物在pH 8.5下结晶,获得菱形十二面体结晶。以A制备胰岛素也同时获得胰岛素结晶。以上经离子交换树脂、凝胶过滤及DEAE—纤维素柱层析所得样品均经一种新型吸附树脂脱盐、浓缩。胰高血糖素收率为1 mg/kg猪胰。为自胰岛素生产过程中同时获得胰岛素及胰高血糖素提供了新的方法。     

单组分胰岛素的研制

目的　采用新型离子交换膜制备单组分胰岛素。方法　以单峰胰岛素为原料 ,用离子交换膜为层析材料快速制备单组分胰岛素 ,通过电泳、HPLC对产品进行纯度分析。结果　制得的单组分胰岛素回收率为 72 .37%± 0 .82 % (n =3) ,放大实验为 74 .16 %± 0 .91% (n =3)。制得的产品电泳检测为单带 ,HPLC检测脱酰胺胰岛素含量为 1.10 %± 0 .31% (n =9) ,符合美国药典第 2 4版标准。结论　所用工艺可快速制备单组分胰岛素     

肝素对大鼠胰岛细胞保护作用的实验研究

目的:探讨胰腺切取前全身肝素化对大鼠胰岛细胞的保护作用。方法:Wister大鼠20只被随机分为两组,肝素化组胰腺切取前经门静脉注入肝素3 mg/kg,全身肝素化后切取胰腺,非肝素化组胰腺切取前经门静脉注入等容量生理盐水,采用酶消化法分离胰岛,双硫腙(DTZ)染色鉴定并记数胰岛细胞,AO-PI染色计算存活率,胰岛素释放试验检测胰岛细胞功能。结果:肝素化组:胰岛细胞的产量为每克(897±169)个,纯度86%,存活率90%,胰岛素释放试验高糖组为(506±96.36)μIN/mL。低糖组为(329±59.17)μIN/mL;非肝素化组:胰岛细胞的产量为每克(620±150)个,纯度70%、存活率85%,胰岛素释放试验高糖组为(300±50.23)μIN/mL低糖组为(200±45.12)μIN/mL。两组对应指标比较P<0.05。结论:肝素对胰岛细胞具有保护作用,胰腺切取前全身肝素化可以作为预处理手段应用于胰岛细胞移植。     

负压吸气搅拌装置用于肝素钠生产

酶解-离子交换工艺生产肝素钠,所用的D254型树脂具有交换能力较强、达到交换平衡较快等优点,但它的机械强度和耐磨性能较差。生产中通常采用机械搅拌,树脂破碎损耗大。     

粗品肝素钠工艺浅谈

<正> 生产肝素钠粗品,一般是将肠粘膜(含肠皮)、半成品肠衣盐卤水,制成品肠衣的盐浸液(泡缸水)分别提取,费工、费时、成本高。而成品肠衣的扎把水、压榨水,则因肝素含量相对较低而废弃,造成不应有的损失。我们将半成品肠衣的盐卤水,制成品肠衣水的泡缸水,加入肠粘膜中一并提取,将成品肠衣的扎     

养殖鲟鱼软骨中硫酸软骨素的优化提取工艺研究

目的以养殖鲟鱼软骨为原料,提取硫酸软骨素、筛选提取工艺条件。方法用稀碱-盐解-酶解法提取硫酸软骨素,并对各工艺中影响提取效果的不同因素进行正交实验。结果碱提取最佳工艺组合为:碱浓度5%,料液比1∶6,碱提取时间3h;盐解最佳工艺组合为:盐浓度4%,盐解温度90℃,盐解时间20min;酶解最佳工艺组合为:酶浓度0.4%,酶解温度52℃,酶解时间2.5h。结论采用上述组合提取硫酸软骨素的得率为31.56%,显著高于(P<0.05)传统工艺的25.86%。     

琼脂平板电泳法鉴别肝素

<正> 肝素由葡萄糖醛酸和硫酸氨基葡萄糖分子相间组成,是一种酸性粘多糖类物质。对肝素的鉴别,多采用琼脂糖凝胶电泳法,该法系利用肝素在醋酸-锂盐缓冲液(ph3.0)中带强负电荷,在电场中向正极移动的性质进行鉴别。但该法所用试剂如琼脂糖较昂贵,故笔者研究了以琼脂平板电泳鉴别肝素的方法,该法所用试剂价廉易得,且分离效果也很好,现介绍如下。     

从猪胰脏制备胰岛素和胰酶的方法

1.从新鲜或冰冻的猪胰脏(通过在丙酮存在下提取胰腺)同时制备胰岛素和胰酶。这个方法的特点在于为了提取一个混合反应物,最少用40％的丙酮,在PH大约5～7提取。根据需要在提取以后进一步加丙酮,然后分出固体和提取液,这个提取液用关于胰岛素的制备方法来处理。分出的固体物质立刻用缓冲液使PH到 5～6,用一个已知的方法得胰酶。 2.按照例1操作,其特点是在提取胰岛素时用阳离子的水溶液调节PH。在提取的条件下,这个阳离子和胰岛素同时存立的酸性物质作用形成不离解(不溶解)的化合物。 3.按照例一操作:加多元酸的可溶性的酸式盐到提取混合物中。为了调节PH应用可溶性的盐。可熔性盐中的阳离子和加入的酸式盐的阴离子形成不溶解的盐。 3CaCl_2+2NaH_2Po_4→Ca_3(Po_4)_2↓+2NaCl+4HCl(译者加注)。 4.按照例一操作,提取胰岛素时,在提取混合物中丙酮的含量为50～60％,固体和提取物分离时,丙酮的含量为60～70％。