慢加急性肝衰竭中IL-10的表达及其启动子甲基化状态的研究

目的 探讨慢加急性肝衰竭患者血清IL-10的表达及其甲基化状态的意义.方法 慢加急性肝衰竭组25例,慢乙肝组25例,正常对照组10例,ELISA法测定血清IL-10的水平,MSP方法检测IL-10启动子甲基化状态,三组间比较.结果 肝衰竭组、慢乙肝组较正常对照组血清IL-10水平明显升高,有统计学意义(P<0.05);肝衰竭组较慢乙肝组升高,无统计学意义(P>0.05).肝衰竭组IL-10水平与TBIL、MELD明显正相关(分别为r=0.566,r=0.443,P<0.05),与PTA呈明显负相关(r=-0.581,P<0.05),与ALT、HBV-DNA无明显相关性(分别为r=-0.022,r=0.033,P>0.05).肝衰竭组甲基化分布状态较慢乙肝组和正常对照组有统计学差异(P<0.05).结论 肝衰竭、慢乙肝患者IL-10水平明显升高.IL-10水平随肝衰竭的严重程度升高.IL-10启动子区甲基化可能是基因失活的重要机制.     

慢加急性肝衰竭中IL-10的表达及其启动子甲基化状态的研究

目的 探讨慢加急性肝衰竭患者血清IL-10的表达及其甲基化状态的意义.方法 慢加急性肝衰竭组25例,慢乙肝组25例,正常对照组10例,ELISA法测定血清IL-10的水平,MSP方法检测IL-10启动子甲基化状态,三组间比较.结果 肝衰竭组、慢乙肝组较正常对照组血清IL-10水平明显升高,有统计学意义(P<0.05);肝衰竭组较慢乙肝组升高,无统计学意义(P>0.05).肝衰竭组IL-10水平与TBIL、MELD明显正相关(分别为r=0.566,r=0.443,P<0.05),与PTA呈明显负相关(r=-0.581,P<0.05),与ALT、HBV-DNA无明显相关性(分别为r=-0.022,r=0.033,P>0.05).肝衰竭组甲基化分布状态较慢乙肝组和正常对照组有统计学差异(P<0.05).结论 肝衰竭、慢乙肝患者IL-10水平明显升高.IL-10水平随肝衰竭的严重程度升高.IL-10启动子区甲基化可能是基因失活的重要机制.     

多囊卵巢综合征患者血清IL-18、IL-6及CRP的变化及意义

目的探讨血清IL-18、IL-6及CRP水平在多囊卵巢综合征患者（PCOS）患者中的变化及其临床意义。方法分别应用酶联免疫吸附法和免疫透射比浊法检测64例PCOS患者血清IL-18、IL-6及CRP含量,并与64例正常对照组比较分析。结果PCOS患者血清IL-18、IL-6、CRP及HOMA—IR水平较健康对照组升高（P〈0．05）;且PCOS肥胖型患者血清IL—18、IL-6、CRP及HOMA—IR水平较非肥胖型明显升高（P〈0．05）;血清IL-18、IL-6、CRP水平与HOMA—IR均呈明显正相关（r=0．639,r=0．657,r=0．708,均P〈0．01）。结论PCOS可能是一种慢性亚临床炎症反应状态,炎症因子的明显增加,导致炎症损伤,并和胰岛素抵抗关系密切,而肥胖可能作为一种慢性亚临床炎症反应加重P—COS的异常。     

慢加急性肝衰竭患者外周血肿瘤坏死因子-α基因启动子甲基化状态的研究

目的探讨肿瘤坏死因子-仅及表观遗传调控在慢加急性肝衰竭发病机制中的可能作用。方法ELISA法检测外周血TNF-α的表达,并与患者的肝功能进行相关性分析。同时提取外周血单个核细胞DNA,重亚硫酸盐处理后,用针对改变后的DNA序列设计特异性引物并进行聚合酶链反应（PCR）。根据修饰后DNA序列的不同,运用在线MethPrimer软件设计引物,甲基化特异性聚合酶链反应（Methylationspecificpolymerasechainreaction,MSP）检测标本中TNF-α扩增产物,分析TNF-α启动子甲基化与血清TNF-α表达的相关性,并分析甲基化与病情严重程度的相关性。采用SPSS16．0软件进行统计分析。结果慢加急性肝衰竭患者组外周血TNF-α蛋白水平（44．9260±26．48523）均高于慢性乙型病毒性肝炎患者组（18．92505±9．04461）和健康对照组（11．9172±5．04612）,且各组间比较差异均具有统计学意义（P〈0．05）。慢加急性肝衰竭患者组外周血清TNF—a水平与血清TBIL及终末期肝脏病模型（MELD）评分之间呈明显的正相关,与PTA呈明显的负相关。慢加急性肝衰竭组、慢性乙型病毒性肝炎患者组、健康对照组TNF-α启动子甲基化状态的差别有统计学意义。慢加急性肝衰竭患者与慢性乙型病毒性肝炎患者及健康对照甲基化组血清TNF-α水平均明显低于非甲基化组（P〈0．05）。结论TNF-α与肝炎活动及肝细胞损害有密切关系,DNA甲基化在慢加急肝衰竭患者中参与调控细胞因子的表达中。     

慢性肾炎患者血浆leptin和血清IL-6、EL-18及SOD检测的临床意义

目的：探讨慢性肾炎患者治疗前后血浆leptin和血清IL-6、IL．18及SOD水平的变化及临床意义。方法：应用放射免疫分析和酶联免疫法对33例慢性肾炎患者进行了血浆leptin和血清IL-6、IL．18及SOD检测,并与35名正常健康人作比较。结果：慢性肾炎患者在治疗前血浆leptin和血清IL-6、IL．18均显着地高于正常人组（P〈0．01）,而血清SOD水平则显着地低于正常人组（P〈0．01）。经中西医结合治疗3个月后与正常人组比较仍有显著性差异（P〈0．05）,血浆leptin水平与血清IL-6、IL．18水平呈正相关（r=0．5718、0．4916,P〈0．01）,而与SOD水平呈负相关（r=-0．6018,P〈0．01）。结论：检测慢性肾炎患者治疗前后血浆leptin和血清IL-6、IL-18及SOD水平的变化对临床观察和预后有重要的临床价值。     

IL-17与甲状腺功能亢进症患者血清中FT3、FT4的关系研究

目的探讨甲状腺功能亢进症患者血清IL-17的水平及其FT3、FT4的相关性。方法采用酶联免疫吸附试验测定30例健康对照者和30例甲亢患者血清中IL-17的水平,化学发光法检测FF3、FT4,并分析IL-17与FT3、FT4的相关性。结果甲亢组血清中的IL-17（1089．5±101．9）pg／L与正常对照gg（725．4±94．6）pg／L比较明显升高（P〈0．05）;同时相关性分析表明甲亢患者血清中IL-17的表达水平与FIB、FT4的浓度呈明显的正相关[r（FT3）=0．68,r（FT4）=0．56,P〈0．05]。结论甲亢患者血清中IL—17的高表达可能与FT3、FT4激素分泌有关。     

肺炎支原体肺炎患儿治疗前后血清IL-2、IL-10、IL-18和D-D检测的临床意义

目的：探讨了肺炎支原体肺炎患儿治疗前后血清IL-2、IL-10、IL-18和D—D水平的变化及临床意义。方法：应用放免法、酶联法和免疫比浊法对32例肺炎支原体肺炎患儿进行了治疗前后血清IL-2、IL-10、IL．18和D—D检测。并与35名正常健康儿比较。结果：肺炎支原体肺炎患儿在治疗前血清IL-2水平显著地低于正常儿组（P〈0．01）,而IL-10、IL-18和D-D水平又非常显著地高于正常儿组（P〈0．01）,经治疗1个月后则与正常儿组比较无显著性差异（P〉0．05）,且血清IL-2水平与IL．10、IL．18和D-D水平呈显著负相关（r=-0．4806、-0．5014、-0．5988,P〈0．01）。结论：血清IL-2、IL—10、IL-18和D—D参与了肺炎支原体感染的全过程,检测这些细胞因子的变化有助于诊断、治疗和预后,具有-定的临床价值。     

阿托伐他汀对ACS患者PCI术后血清MCP-1、IL-10和hs-CRP水平的影响

目的：探讨阿托伐他汀对经皮冠脉介入术（PCI）术后血清单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、白细胞介素-10（IL-10）和高敏C反应蛋白（hs-CRP）的影响。方法：62例接受PCI术的ACS患者随机分为两组,分别给予阿托伐他汀20mg（A组,n=31）和10mg（B组,n=31）每日一次口服。于术前及术后24h、1周测定血清hs-CRP、MCP-1和IL-10水平。MCP-1、IL-10检测采用酶联免疫吸附法,hs-CRP采用免疫比浊法。结果：①术后24h两组hs-CRP、MCP-1水平升高（P均〈0．01）;术后1周两组均低于术后24h（P均〈0．01）,B组下降较A组更明显（P〈0．05）。②两组IL-10水平术后24h升高（P〈0．05）;术后1周进一步升高（P均〈0．01）,B组明显高于A组（P〈0．01）。③MCP-1／IL-10比值A组术后24h高于术前（P〈0．05）;术后1周两组均低于术前和术后24h（P〈0．01）,B组较A组下降更著（P〈0．01）。④血清hs-CRP、MCP-1水平和MCP-1／IL-10与阿托伐他汀剂量负相关（P均〈0．01）,IL-10与阿托伐他汀剂量正相关（P〈0．01）。结论：①ACS患者PCI术后24h血清hs-CRP、MCP-1、IL-10水平和MCP-1／IL-10比值均明显高于术前。②术后1周血清hs-CRP、MCP-1水平和MCP-1／IL-10水平降低,IL-10水平显著升高,以20mg组为著。③血清hs-CRP、MCP-1和MCP-1／IL-10与阿托伐他汀剂量负相关,IL-10水平与阿托伐他汀剂量正相关。     

系统性红斑狼疮患者外周血白细胞介素15的研究

目的：检测系统性红斑狼疮（SLE）患者血清白细胞介素15（IL-15）水平及外周血单个核细胞（PBMC）IL-15mRNA表达，并进一步分析其临床意义。方法：IL-15检测采用ELISA方法；PBMCIL-15mRNA表达采用原位杂交法检测。结果：①SLE组患者血清IL-15水平显著高于正常对照组（P〈0．01），活动期SLE患者血清IL-15水平显著高于缓解期患者（P〈0．05）。②发生临床肾损害者IL-15水平明显高于无肾损害者（P〈0．05），出现血清抗dsDNA抗体阳性、低补体C3血症、高IgG血症者血清IL-15水平均分别显著高于无上述表现者。③SLE患者PBMCIL-15mRNA表达量明显高于正常对照组（P〈0．05），活动期SLE显著高于缓解期（P〈0．05）。④SLE患者PBMC培养上清IgG、IgM和抗dsDNA抗体浓度均显著高于正常对照组；SLE患者PBMCIL-15mRNA表达量与细胞培养上清的IgG及抗dsDNA抗体滴度均呈正相关关系（分别为r=0．645和r=0．715，P〈0．05），而与IgM．无相关关系（r=0．451，P〉0．05）。⑤SEE患者PBMCIL-15mRNA表达量与血清IL-15水平呈正相关关系（r=0．726，P〈0．05）。结论：SLE患者存在外周血IL-15蛋白和基因表达异常，且与其分泌免疫球蛋白和自身抗体有关，提示IL-15可能参与SLE的病理生理过程。     

新生儿缺氧缺血性脑病血清caspase-1和IL-1β测定及意义

目的 探讨新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）血清半胱氨酸酶-1（easpase—1）和白细胞介素-1β（IL—1β）的变化以及两者与脑组织损伤程度之间的关系。方法 采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测70例HIE患儿（分轻、中、重三组）及22例正常对照组新生儿第三天血清caspase-1和IL-1β的水平。结果 （1）与对照组比较，轻、中、重度HIE组血清caspase-1水平显著增高（P分别〈0．05，〈0．01，〈0．01）；HIE组间两两比较，中度与轻度组比较有显著性差异（P〈0．01）；重度组与其他两组比较血清caspase-1水平均显著升高（P〈0．01）。（2）轻、中、重度HIE组血清IL-1β与对照组比较，中、重度HIE组显著增高（P〈0．01）；轻度HIE组与对照组无显著性差异（P〉0．05）。HIE组间血清IL-1β两两比较，中度与轻度组比较有显著性差异（P〈0．05）；重度组与其他两组比较均显著升高（P〈0．01）。（3）血清caspase-1与IL-1β呈正相关（r=0．7934，P〈0．0001）。结论 （1）血清caspase-1水平与HIE临床分度基本一致，可作为早期辅助诊断HIE及协助临床分度的指标。（2）急性期HIE血清IL-1β测定有助于HIE的早期诊断及病情评估。     

慢加急性肝衰竭患者外周血肿瘤坏死因子-α基因启动子甲基化状态的研究

目的 探讨肿瘤坏死因子-α及表观遗传调控在慢加急性肝衰竭发病机制中的可能作用.方法 ELISA法检测外周血TNF-α的表达,并与患者的肝功能进行相关性分析.同时提取外周血单个核细胞DNA,重亚硫酸盐处理后,用针对改变后的DNA序列设计特异性引物并进行聚合酶链反应(PCR).根据修饰后DNA序列的不同,运用在线MethPrimer软件设计引物,甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation specific polymerase chain reaction,MSP)检测标本中TNF-α扩增产物,分析TNF-α启动子甲基化与血清TNF-α表达的相关性,并分析甲基化与病情严重程度的相关性.采用SPSS16.0软件进行统计分析.结果 慢加急性肝衰竭患者组外周血TNF-α蛋白水平(44.9260±26.48523)均高于慢性乙型病毒性肝炎患者组(18.92505±9.04461)和健康对照组(11.9172±5.04612),且各组间比较差异均具有统计学意义(P＜0.05).慢加急性肝衰竭患者组外周血清TNF-α水平与血清TBIL及终末期肝脏病模型(MELD)评分之间呈明显的正相关,与PTA呈明显的负相关.慢加急性肝衰竭组、慢性乙型病毒性肝炎患者组、健康对照组TNF-α启动子甲基化状态的差别有统计学意义.慢加急性肝衰竭患者与慢性乙型病毒性肝炎患者及健康对照甲基化组血清TNF-α水平均明显低于非甲基化组(P＜0.05).结论 TNF-α与肝炎活动及肝细胞损害有密切关系,DNA甲基化在慢加急肝衰竭患者中参与调控细胞因子的表达中.     

慢性乙肝患者血清IL-27水平检测及意义

目的:初步探讨慢性乙肝(CHB)患者血清白介素-27(IL-27)表达水平及意义。方法:根据临床表现将33例CHB患者分为轻度组(12例)、中度组(11例)和重度组(10例),分别检测各组血清IL-27水平以及谷丙转氨酶(ALT)和γ-谷氨酰转肽酶(GGT)水平;又根据血清乙型肝炎病DNA(HBV-DNA)载量,将患者分成HBV-DNA低载量组(≤105拷贝数/ml)和高载量组(>105拷贝数/ml),比较两组IL-27水平差异。结果:CHB各组血清IL-27水平较健康对照组明显升高(P<0.05),且重度组显著高于轻度组和中度组(P<0.05);不同HBV-DNA载量组血清IL-27水平有显著差异,低载量组显著高于高载量组(P<0.05);CHB患者血清IL-27水平与ALT和GGT水平均呈显著正相关(r分别为0.723和0.664,P<0.01)。结论:IL-27水平升高与CHB严重程度有关;IL-27在清除患者HBV感染的同时也造成其肝细胞炎性损伤。     

CTLA4-Ig在小鼠病毒性心肌炎中作用机制的研究

目的 探讨细胞毒T淋巴细胞相关抗原4融合蛋白(CTLA4-Ig)对柯萨舒B3(CVB3)病毒性心肌炎(VMC)小鼠死亡率、心肌病理改变与病毒滴度、CTLA4蛋白表达及Th1/Th2平衡的影响.方法 将106只BALB/c小鼠随机分为CTLA4-Ig组16只、病毒组40只、IgG组40只及正常对照组10只,于接种病毒后第7天处死所有小鼠,采用光镜检查心肌病理变化和实时荧光定量PCR(RQ-PCR)检测心肌组织中CVB3 mRNA的表达,免疫组化法检测CTLA4蛋白的表达,取外周血应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清IL-2、IL-4及IFN-γ的含最.结果 CTLA4-Ig组小鼠死亡率、心肌病理积分、心肌CVB3 mRNA均低于病毒对照组(P均<0.05);CTLA4-Ig组小鼠心肌组织中CTLA4表达较病毒组明显增加(P<0.05);病毒组小鼠血清IFN-γ水平明显高于正常对照组小鼠(P<0.01),IL-4水平明显低于正常对照组小鼠(P<0.01),两组小鼠间IL-2的水平差异无统计学意义(P>0.05).CTLA4-Ig组小鼠血清IL-4水平明显高于病毒组及IgG组(P均<0.01),IFN-γ水平低于病毒组及IgG组(P均<0.01),三组小鼠血清IL-2水平的差异无统计学意义(P均>0.05).结论 CTLA4-Ig可减轻VMC小鼠心肌炎症,降低心肌病毒滴度及死亡率,其机制可能与阻断T细胞活化的共刺激信号,使Th2反应增强有关.     

The Transforming Growth Factor β1/Interleukin-31 Pathway Is Upregulated in Patients with Hepatitis B Virus-Related Acute-on-Chronic Liver Failure and Is Associated with Disease Severity and Survival

The transforming growth factor β1/interleukin-31 (TGF-β1/IL-31) pathway plays an important role in the process of cell injury and inflammation. The purpose of this work was to explore the role of the TGF-β1/IL-31 pathway in the cytopathic process of hepatitis B virus (HBV)-related acute-on-chronic liver failure (ACLF). The quantitative serum levels of TGF-β1, IL-9, IL-10, IL-17, IL-22, IL-23, IL-31, IL-33, and IL-35 were analyzed among chronic hepatitis B (CHB) patients (n = 17), ACLF patients (n = 18), and normal control (NC) subjects (n = 18). Disease severity in patients with ACLF was assessed using the model for end-stage liver disease (MELD) and Child-Pugh scores. Serum TGF-β1 levels were strongly positively correlated with IL-31 in all subjects, and both of them were positively correlated with IL-17, IL-22, and IL-33. In CHB and ACLF patients, serum levels of TGF-β1 and IL-31 were both increased significantly compared with those in NC subjects and positively correlated with total bilirubin (TBil) and alpha-fetoprotein (AFP) levels. ACLF patients showed the highest levels of TGF-β1 and IL-31, which were positively correlated with Child-Pugh scores. Furthermore, the recovery from the liver injury in CHB was accompanied by decreased TGF-β1 and IL-31 levels. More importantly, serum levels of TGF-β1 and IL-31 were markedly upregulated in ACLF nonsurvivors, and IL-31 displayed the highest sensitivity and specificity (85.7% and 100.0%, respectively) in predicting nonsurvival of ACLF patients. Increasing activity of the TGF-β1/IL-31 pathway is well correlated with the extent of liver injury, disease severity, and nonsurvival of ACLF patients, while reducing activity is detected along the recovery from liver injury in CHB, suggesting its potential role in the pathogenesis of liver injury during chronic HBV infection.     

多发性硬化患者血清sIL-6R 水平观察

为探讨可溶性白细胞介素－６受体（ｓＩＬ－６Ｒ）在多发性硬化（ＭＳ）发生、发展中的作用，采用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ方法，对２８例ＭＳ患者和２５例正常对照组血清ｓＩＬ－６Ｒ水平进行了测定。结果显示缓解－复发型和进展型ＭＳ患者血清ｓＩＬ－６Ｒ水平明显高于正常对照组和良性型组（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）；而良性型ＭＳ患者血清ｓＩＬ－６Ｒ水平与正常对照组相比，未见明显改变。缓解－复发型ＭＳ患者血清ｓＩＬ－６Ｒ水平随着病情的好转而下降。ｓＩＬ－６Ｒ水平与ＭＳ患者头颅ＭＲＩ上的病灶大小和部位无明显相关性（ｒ１＝０．１２４，Ｐ＞０．０５；ｒ２＝０．０９１，Ｐ＞０．０５）。推测ｓＩＬ－６Ｒ水平的高低可作为判断ＭＳ患者病情变化的指标之一。     

Increased Th17 cells and interleukin-17 contribute to immune activation and disease aggravation in patients with chronic hepatitis B virus infection

T helper17 (Th17) cells have been demonstrated to participate in the pathogenesis of hepatitis B virus (HBV) associated liver damage. However, the contribution of Th17 cells to immune activation and disease aggravation in patients with HBV infection is not fully clear. In this study, we investigated the Th17 cells frequencies and interleukin-17 (IL-17) mRNA expressions in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs), intrahepatic IL-17-positive cells accumulation, as well as serum IL-17 levels in asymptomatic chronic HBV carriers (AsC), and patients with chronic hepatitis B (CHB) and HBV related acute-on-chronic liver failure (ACLF). Furthermore, the dynamic changes of Th17 cells frequencies and IL-17 concentration in different prognostic ACLF patients were observed. As result, the intrahepatic and peripheral Th17 cells and serum IL-17 concentration were both significantly higher in CHB and HBV related ACLF patients than that in AsC and normal control groups, and increased gradually with immune inflammation aggravation from AsC, CHB to ACLF. Moreover, in ACLF patients, peripheral Th17 cells frequencies were positively correlated with international normalized ratio (INR) and model of end-stage liver disease (MELD) score. Especially the survival patients had an initially lower Th17 cells frequencies and IL-17 levels which gradually decreased following condition improvement as compared with higher baseline level followed by gradually increasing trend in the non-survivals. In conclusion, Th17 cells can be contributed to the immune activation and disease aggravation in patients with chronic HBV infection. This may places Th17 cells as a potential blocking target for controlling CHB and ACLF.     

系统性红斑狼疮患者血清IL-10的水平及临床意义

目的 观察系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者血清IL-10的表达与疾病活动的关系.方法 选取22例SLE患者及24名健康人作为对照,根据狼疮疾病活动指数(SLE disease activity index,SLEDAI)将SLE患者分为活动期组和非活动期组,检测血清抗dsDNA抗体,血清总补体溶血活性(CH50)及C反应蛋白(C reactive protein,CRP),酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清IL-10表达.结果 与对照组[(18.11±6.97)ng/L]相比,IL-10在SLE活动期组[(78.54±5.62)ng/L,P＜0.01]及非活动期组[(30.36±10.98)ng/L,P＜0.05]均有所增高,活动期组增高更为明显(与非活动期组相比,P＜0.05).IL-10水平与SLEDAI呈正相关(SLE活动期,r=0.77,P＜0.01;SLE非活动期,r=0.84,P＜0.01),IL-10的水平与抗dsDNA抗体(r=0.71,P＜0.01)、CRP(r=0.63,P＜0.01)和CH50(r=-0.56,P＜0.05)均相关.结论 IL-10在SLE患者血清中表达升高,在疾病活动时更为明显,IL-10能反应疾病活动的程度,可以做为临床观察SLE疾病活动的指标之一.