不同剂量X线照射对小鼠免疫功能损伤的动态观察研究

目的 观察不同剂量X线照射对小鼠免疫功能的影响，进而研究辐射损伤的机制。方法 100只小鼠随机分为0、2和8Gy3个剂量组，三个干预组分别为20、30、50只小鼠。分别用X射线全身照射1次，照射后4h、3d和14d，分别抽取小鼠眼球血，用流式细胞仪进行外周血T淋巴细胞亚群CD4^＋和CD8^＋的测定。另取出新鲜胸腺和脾脏分别研碎，制成细胞悬液，用流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果 不同剂量的X线照射后4h，胸腺和脾脏细胞的凋亡率即明显升高，3天时达高峰，14天时略有恢复，且同一时段细胞的凋亡率与照射剂量成正比。外周血淋巴细胞亚群数量改变，CD4^＋与CD8^＋均下降，其中以CD8^＋T细胞对辐射最为敏感，下降幅度最大。结论 大剂量X-射线整体照射后，小鼠胸腺、脾脏及外周血淋巴细胞规律性凋亡。     

慢性持续高剂量电磁辐射对小鼠外周血象的长期影响

目的通过研究慢性持续高剂量电磁辐射对小鼠外周血细胞变化的影响,探讨慢性持续高剂量电磁辐射对小鼠外周血象的长期影响。方法采用随机、平行对照分组法,将30只雄性Babl／c小鼠分为正常对照组（0mW／cm。）、辐射组（10mW／cm2）、环磷酰胺给药（CTX组）,每组10只。辐射组动物予以30min／d,持续20个工作日,功率密度为10mW／cm2电磁辐射;CTX组在小鼠开始辐照的时间点给药,每3d给药一次,每次每只30mg／kg,共7次;各组于辐照结束后30,45,60,75,90,105d和120d分别采集尾静脉血,应用全自动细胞分析仪检测外周血中红细胞、白细胞、血小板、血红蛋白、中性粒细胞等数量的变化。结果经持续高剂量电磁辐射后,与正常对照组相比,辐射组白细胞数量显著减少（P〈0．05）;辐射组红细胞数量于照射后60—90d开始显著上升（P〈0．05）;外周血血小板数量于照射后30—45d明显上升,结果有统计学意义。辐射组小鼠外周血免疫细胞及中性粒细胞的数量均低于正常对照组。辐照组血象各指标的变化情况与环磷酰胺给药组（CTX组）变化趋势一致。结论慢性持续大剂量电磁辐射可导致小鼠免疫系统的损伤,造成小鼠机体的炎症反应,通过检测外周血象各项指标峦化可了解辐射后生物机体的龟疫状杰。     

弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫小鼠诱导NALT和GALT黏膜部位的免疫应答

目的观察弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫小鼠诱导的鼻相关淋巴组织（NALT）和肠相关淋巴组第（GALT）黏膜部位的免疫应答。探讨弓形虫黏膜疫苗能否在感染起始阶段有效诱导免疫应答。方法将BALB／小鼠随机分为免疫和对照组,免疫组小鼠以弓形虫复合黏膜疫苗20μl／只（20μg STAg＋1μg CT）滴鼻免疫2移（间隔2周）,对照组PBS滴鼻。于末次滴鼻后14d颈椎脱臼处死小鼠,ELISA测定粪便和鼻咽冲洗液IgA抗型水平;计数NALT、NC及PP、IEL淋巴细胞数,免疫细胞化学法检测CD4^＋、CD8^＋T细胞亚群水平。结果免疫匀小鼠粪便IgA和鼻咽冲洗液IgA抗体显著高于对照组（P〈0．05）。NALT内淋巴细胞明显增生（P〈0．05）,其中CD4^＋、CD8^＋T细胞均有增生（P〈0．01）,CD4^＋／CD8^＋比值降低（P〈0．05）。NC中淋巴细胞数明显升高（P〈0．01）,以CD4^＋T细胞水平为主（P〈0．01）。GALT部位PP淋巴细胞增生显著（P〈0．01）,主要以CD4^＋T细胞为主;而IEL以CD8^＋T细胞增生为主（P〈0．01）,CD4^＋／CD8^＋比值降低（P〈0．05）。结论弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫BALB／c小鼠可有效诱导NALT和GALT黏膜部位免疫应答。     

玉屏风散对Hepa1-6肝癌荷瘤小鼠免疫调节的影响

目的：探讨玉屏风散对肝癌荷瘤小鼠机体免疫的调节作用。方法：采用皮下接种Hepa1-6肿瘤细胞建立肝癌荷瘤C57BL／6小鼠模型;应用流式细胞技术检测和分析荧光标记的免疫细胞亚群。结果：玉屏风散20、25、30g生药·kg“对Hepa1-6肝癌荷瘤C57小鼠的抑瘤率分别为18．86％、28．81％、37．44％。与模型对照组比较,玉屏风散组胸腺重量和胸腺指数无变化,脾重和脾脏指数均呈上升趋势,脾脏中CD19^＋B细胞数量、CD19^＋CD80^＋B细胞比例、巨噬细胞比例和数量、CD4^＋T和CD8^＋T细胞数量以及肿瘤组织中CD4^＋T和CD8^＋T细胞比例均显著增加（P〈0．05,P〈0．01）,而脾脏中CD19^＋B细胞、CD4^＋T和CD8^＋T细胞的比例均无变化（P〉0．05）。结论：玉屏风散对肝癌荷瘤小鼠机体免疫具有广泛调节和增强作用,为玉屏风散在临床抗肝癌中的合理应用提供了实验依据。     

止血固脱方对免疫低下小鼠T细胞亚群及IL-2水平影响的实验研究

目的：探讨止血固脱方对免疫低下小鼠T细胞亚群及IL-2水平的影响。方法：选取（20±2）g昆明种小鼠40只,随机分为空白对照组、环磷酰胺组、止血固脱方大剂量组（大剂量组）、止血固脱方小剂量组（小剂量组）4组,每组10只。除空白对照组外,其余各组小鼠每只按3mg／（kg·d）剂量腹腔注射环磷酰胺0．2mL,每天给药1次,连续7d。造成免疫低下小鼠模型。止血固脱方大、小剂量组分别按100g／（kg·d）、10g／（kg·d）剂量给药,2次/d,连续给药7d。最后一次给药24h后,采用断头采血法,每只采血0．4mL,将0．2mL加入抗凝试管中．采用流式细胞仪检测T细胞亚群．0．2mL放入离心机,以2000转／min离心20min,取血清速冻,采用放免γ测量仪检测IL-2含量。结果：止血固脱方能显著增加注射环磷酰胺引起的免疫低下小鼠的CD4^＋T细胞亚群的数量,增高CD4^＋／CD8^＋比值,提高血清中IL-2生成水平。结论：止血固脱方治疗过敏性紫癜（肾型）的免疫学机理可能与调节免疫系统功能紊乱有关。     

十全大补汤与化疗药物联合治疗移植性大肠癌小鼠抗肿瘤作用实验研究

目的：研究经典方剂十全大补汤（以下简称sqdbt）联合常用化疗药物5-氟尿嘧啶（以下简称5-fu）对HT29移植性大肠癌小鼠的抑瘤作用及其可能作用机制。方法：采用HT29移植性大肠癌瘤株制作大肠癌小鼠模型。24h后随机分成单纯肿瘤组、sqdbt组、5-向组、sqdbt＋5-fu组,给药4周后,观察小鼠一般状态的变化,计算胸腺指数与脾指数,脾脏组织制备脾细胞悬液,流式细胞分析T细胞亚群。结果：经药物治疗后,HT29大肠癌小鼠体内肿瘤生长受到不同程度的抑制,sqdbt＋5-向组大肠癌小鼠一般状态较好;胸腺指数与脾指数最高,机体免疫状态最好;T细胞亚群流式分析结果表明,sqdbt＋5-fu组小鼠较单纯肿瘤组小鼠CD4^＋细胞比例显著升高（P〈0．05）,CD8^＋细胞比例显著下降（P〈0．01）,CD4^＋／CD8^＋比值明显升高（P〈0．01）。结论：十全大补汤具有提高HT29大肠癌小鼠生存质量的作用,并可以抑制HT29大肠癌小鼠肿瘤生长,提高机体免疫力,对化疗药物治疗肿瘤有减毒增效的作用。     

重度脓毒症患者的免疫增强治疗临床研究

目的：分析重度脓毒症患者的细胞免疫状态,并研究α1胸腺肽对免疫调节治疗的影响。方法：选取2010年2月～2011年2月我院重度脓毒症患者135例,监测血清单核细胞人白细胞DR抗原（HLA—DR）、T淋巴细胞亚群绝对计数的动态变化;研究取CD2T淋巴细胞绝对计数〈410cells／μl的患者,并分为治疗组和对照组．治疗组再按CD4＋T淋巴细胞绝对计数进行亚组分析。治疗组皮下注射α1胸腺肽1．6mg／d,连续7d,同时给予经典SSC治疗：对照组给予经典SSC治疗。观察患者治疗前及治疗后3、7d上述免疫指标。结果：85例重度脓毒症患者HLA—DR、CD3^＋、CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞明显降低,治疗组治疗后7dHLA—DR、CD3^＋、CD4^＋和CD8^＋均明显增高,且7dHLA—DR、CD3^＋、和CD8^＋较3dHLA—DR、CD3^＋和CD8^＋增高,差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。与对照组同期比较。治疗组治疗后3dCD3^＋、7dHLA—DR、CD4^＋和CD8^＋均增高,7dCD3^＋则明显升高,差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）,而CD4^＋／CD8^＋比值无明显变化。治疗组亚组分析显示轻中度免疫低下患者单核细胞CD14^＋HLA—DR和T淋巴细胞计数短期内均呈上升趋势,重度免疫低下患者仅治疗后7dCD3^＋治疗前增高（P〈0．05）。结论：重度脓毒症患者存在细胞免疫抑制;α1胸腺肽具有免疫增强的作用,且对轻中度免疫低下效果更好,重度免疫低下持续治疗也能获益。     

复方枸杞袋泡茶对电离辐射致小鼠免疫功能损伤的保护作用

目的观察复方枸杞袋泡茶对电离辐射所致小鼠免疫功能损伤的影响。方法将4只小鼠随机分为空白对照组、照射对照组、照射＋复方枸杞袋泡茶高剂量组（2．4g/k）,照射＋复方枸杞袋泡茶低剂量组（0．6g／k）,12只／组,连续灌胃14d,2次／天,在给药第7天以20Gyx射线进行次照射,继续给药至14d后检测复方枸杞袋泡茶对小鼠外周血白细胞数、淋巴细胞百分数、淋巴细胞绝对值、脏器指数和ConA刺激小鼠脾淋巴细胞增殖能力的影响。结果与照射对照组比较,各剂量给药组对小鼠外周血白细胞数、淋巴细胞百分数、淋巴细胞绝对值、脏器指数和Con A刺激小鼠脾淋巴细胞增殖能力均高于照射对照组（P〈0．05,P〈0．01）。结论复方枸杞袋泡茶对电离辐射所致的小鼠免疫功能损伤有保护作用。     

异基因骨髓干细胞移植后重建NOD小鼠T淋巴细胞亚群比值的研究

目的：探讨骨髓干细胞移植对NOD小鼠免疫系统重建和预防糖尿病发生的机制。方法：①21只6周龄NOD雌性鼠接受9．5cGy全身照射后随机分为两组,移植组10只,对照组11只;②每周监测血常规和血糖的变化;③小鼠饲养至发生糖尿病时或至30周龄时处死,摘取脾脏分离淋巴细胞,通过流式细胞术检测移植鼠与非移植鼠脾脏CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋／CD8^＋淋巴细胞;采用ELISA法测定血清中IFN-γ水平;吉姆萨染色法计数小鼠骨髓分裂相中Y染色体所占比例,检测嵌合程度并作为细胞植活标记。结果：①移植后NOD受鼠经骨髓细胞的性别染色体检测显示均植入成功;②实验组糖尿病发病率显著低于对照组（P〈0．05）,且发病时间与对照组比较明显延缓（P〈0．05）;③实验组和对照组CD3^＋T细胞、CD4^＋T细胞比较差异无统计学意义（P〉0．05）,但实验组CD8^＋T细胞显著高于对照组（P〈0．05）。实验组的CD4^＋／CD8^＋比值显著低于对照组（P〈0．05）,血清IFN7数值也显著低于对照组水平（P〈0．01）。结论：NOD鼠在通过异基因骨髓干细胞移植后,能降低糖尿病的发生率和延缓糖尿病的发生,可能与移植后免疫重建,下调CD4^＋／CD8^＋T细胞的比值,使Th1／Th2极化向Th2偏移等机制相关,异基因骨髓干细胞移植可能成为防治1型糖尿病的新途径。     

17β-雌二醇对小鼠淋巴结、脾脏和胸腺调节性T细胞及其Foxp3表达的影响

目的：研究小鼠去卵巢及体内注射17β-雌二醇（E2）后，淋巴结、脾脏和胸腺CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（regulatory Tcell，Treg细胞）及相关调节性因子Foxp3表达的变化与E2的相关性。方法：采用流式细胞仪检测CD4^＋CD25^＋Treg细胞功能相关因子Foxp3的表达，CD4^＋CD25^＋T和CD4^＋CD25^＋high T细胞数量的变化。结果：E2抑制淋巴结中Treg细胞Foxp3的表达．上调其在脾脏和胸腺中的表达；E2下调淋巴结中CD4^＋CD25^＋T细胞和CD4^＋CD25^＋high T细胞的比例，上调它们在脾脏尤其是胸腺中的比例。结论：E2对淋巴结、脾脏和胸腺3种免疫器官中的Treg细胞有不同的调节作用。     

微波电磁辐射对小鼠卵母细胞钙离子浓度的影响

目的:探讨935 MHz微波电磁辐射对小鼠卵母细胞成熟过程中钙离子浓度的影响.方法:将7周龄昆明小鼠行腹腔注射促排卵药物,同时暴露于不同强度、不同时间的935 MHz微波连续辐射3d,应用激光扫描共聚焦显微镜下观察培养不同时间(0,2,4 h)的卵母细胞内钙离子浓度的变化.结果:1 400 μW/cm2,4 h/d组卵母细胞在培养0,2,4h与对照组相比钙离子浓度下降有显著性差异(P＜0.05),与1 400 μW/cm2,2 h/d组各培养时间段比较也均有显著性差异(P＜0.05),其余各组与对照组比较差异无显著性;在1 400 μW/cm2,4 h/d组内,培养0,2,4h分别观察时,4h观察组与0h、2h观察组比较有显著性差异(P＜0.05).结论:935 MHz微波电磁辐射可能通过增加小鼠卵母细胞钙离子释放来抑制小鼠卵母细胞成熟,并呈现出一定的剂量反应关系及累积效应.     

持续高剂量电磁辐射对小鼠外周血免疫细胞数量影响的长期效应

目的:观察慢性持续高剂量电磁辐射照射后小鼠外周血免疫细胞数量及比例变化,探讨慢性持续高剂量电磁辐射对小鼠免疫系统的影响。方法：采用随机、平行对照分组法,将30只雄性Balb/c小鼠平均分为正常对照组、10 mW•cm^-2辐照组及环磷酰胺给药组,每组10只。辐照组动物予以30 min•d^-1、每周辐照5 d,持续4周;给药组在辐照组开始辐照时给药,每次每只30 mg•kg^-1,共7次;各组小鼠于辐照结束后30、45、60、75、90、105和120 d分别采集尾静脉血,应用流式细胞术检测外周血中CD4+ T细胞、CD8+T细胞、CD4+/CD8+比率、CD49+NK细胞数量及比例的变化。结果：经持续高剂量电磁辐射后,小鼠的外周血白细胞数量显著上升,CD4+ T细胞数量于辐照后75 d开始明显升高,辐照后90 d开始下降但仍高于正常组（P<0.05）,观察周期结束时,CD4+T细胞数量下降到与正常组相同（120 d）;CD8+T细胞数量于辐照后75 d明显降低,直到观察周期结束时（120 d）,T细胞的数量恢复至与正常组的T细胞数量相同;CD4+/CD8+比率在持续高剂量电磁辐射诱导下呈上升趋势,并且明显高于正常对照组（P<0.05）;CD49+NK细胞数量在辐射后明显低于正常对照组（P<0.05）。结论：慢性、持续性大剂量电磁辐射可导致小鼠免疫系统的紊乱,通过检测外周血中CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4+/CD8+T细胞、CD49+NK细胞数量及比例的变化,可了解辐照后机体的免疫状态。     

935 MHz微波电磁辐射对卵母细胞成熟的影响

目的:研究935 MHz微波电磁辐射对小鼠卵母细胞成熟的影响。方法:将促排卵小鼠暴露于不同强度、不同时间的935 MHz微波辐射,观察其对超排卵母细胞数以及不同时间间隔(0,8,24 h)生发泡破裂率、第一极体释放率及卵母细胞存活率的影响。结果:1 400μW/cm2,4 h/d组与对照组相比,第一极体释放率显著降低(0 h,P<0.01;8 h,P<0.01),卵母细胞存活率也明显下降(0 h,P<0.01;8 h,P<0.05;24 h,P<0.05);与1 400μW/cm2,2 h/d组比较,第一极体释放率均显著降低(0 h,P<0.01;8 h,P<0.01;24 h,P<0.05),卵母细胞存活率也均明显下降(P<0.01)。结论:935 MHz微波电磁辐射可抑制小鼠卵母细胞体内成熟,并具一定剂量反应关系及累积效应。     

氦氖激光对小鼠小脑信息传递物质一氧化氮及环磷酸鸟苷含量的影响

目的：研究低功率氦氖激光对小鼠小脑信息传递物质的影响。方法：采用雄性BALB／C小鼠,随机分为对照组,辐射后即刻组、1h组、2h组,注入氮氖合酶（NOS）抑制剂的辐射后即刻组、副射后1h组,用波长632．8nm、功率密度5mW/cm^2连续氦氖激光每天局部辐射1次,每次1h,连续5d。对照辐射功率密度为0。结果：辐射组分别于辐射后即刻、1h小脑组织中一氧化氮（NO）代谢产物亚硝酸根（NO2^-)及环磷酸鸟苷（cGMP)含量均升高（P＜0．01）,辐射2h二者均降至正常,此增高效应可同时被NOS抑制剂阻断。结论：低功率氦氖激光可使小鼠小脑NO代谢产物NO2^-及cGMP含量短暂性升高,在氦氖激光辐射产生的生物学效应中涉及NO／cGMP信息传递机制。     

Changes in gap junctional intercellular communication in rabbits lens epithelial cells induced by low power density microwave radiation

Objective To demonstrate the changes in gap junctional intercellular communication (GJIC) mediated by low power density microwave radiation in rabbits lens epithelial cells (LECs) and its mechanisms.Methods Rabbits’ eyes were exposed to 5 mW/cm(2) and 10 mW/cm(2) power densities of microwave radiation for 3 hours. The fluorescence-recovery-after-photobleaching (FRAP) method was used to determine the GJIC. The localization and function of connexin 43 in LECs was detected by laser scanning confocal microscopy.Results The GJIC of rabbits LECs was inhibited by microwave radiation especially in the 10 mW/cm(2) irradiated samples. A decrease in connexin 43-positive staining was seen in 5 mW/cm(2)×3 h treated LECs. Intracellular space accumulation and cytoplasmic internalization were clearly demonstrated in 10 mW/cm(2) group.Conclusions Low power densities microwave radiation (5 mW/cm(2) and 10 mW/cm(2)) induces damage to connexin 43 and inhibits the GJIC of rabbits LECs. These changes result in an osmotic imbalance within the lens and induce early cataract. 5 mW/cm(2) or 10 mW/cm(2) microwave radiation is cataractogenic.     

低强度微波辐射对小鼠NK细胞活性的影响

目的观察低强度微波辐射对小鼠NK细胞活性的影响。方法小鼠脾细胞体外经不同强度微波直接辐射不同时间后,用LDH法测定小鼠NK细胞的活性,并用MTT法测定脾细胞的生长代谢。结果①4种不同强度的微波(0.05mW/cm     

移动电话电磁辐射对睾丸乳酸脱氢酶同工酶的影响

目的 :探讨移动电话的电磁辐射对雄鼠生殖功能的影响。方法 :用移动电话的模拟辐射源对小鼠进行全身辐射 ,辐射频率为 935MHz ,每天 2h ,连续 35d ,平均功率密度分别为 0 ,5 70 ,14 0 0 μW·cm-2 。照射 35d后取双侧睾丸和附睾称重 ,并观察睾丸乳酸脱氢酶 (LDH)及其同工酶 (LDH X)的活性和睾丸组织结构及电镜超微结构的变化。结果 :各组间的睾丸和附睾的脏器系数差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;但 14 0 0 μW·cm-2 辐射组的LDH X活性显著下降 (P <0 .0 5 ) ,并出现精子超微结构的改变。结论 :移动电话的电磁辐射可以降低睾丸乳酸脱氢酶同工酶活性 ,可能存在生殖毒性。     

Rhodaminel23介导的光动力学疗法对小鼠淋巴细胞增殖及骨髓干祖细胞集落形成的影响

目的　探讨Rhodamine12 3(Rh12 3)介导的光动力学疗法对小鼠淋巴细胞增殖及骨髓干祖细胞集落形成的影响。方法　以C5 7B/ 6小鼠为供鼠 ,BALB/c小鼠为受鼠 ,脾脏淋巴细胞混合培养 ,比较单纯Rh12 3、单纯激光照射、光动力学疗法对小鼠混合淋巴细胞增殖 (MTT法 )及骨髓粒单核巨噬细胞集落形成 (CFU -GM)的影响 (甲基纤维素培养基法 ) ;流式细胞仪检测混合淋巴细胞中CD3 CD6 9 阳性率。结果　Rh12 3组及单纯激光组对细胞增殖无显著影响 ,光动力学组 2 0mW/cm2 以下剂量激光对细胞增殖无明显影响 ,30mW/cm2 以上明显抑制细胞增殖 ;30mW/cm2 以下剂量对CFU -GM集落无明显影响。光动力学疗法后细胞培养 2 4h ,CD3 CD6 9 表达明显下降。结论　光动力学疗法在 30mW/cm2 激光照射时可抑制淋巴细胞增殖 ,降低早期活化T细胞表达 ,但不影响骨髓CFU -GM集落形成     

电磁辐射对原代培养的皮层神经元中tau蛋白磷酸化的影响

目的研究电磁辐射对原代培养皮层神经元tau蛋白磷酸化的影响。方法原代培养大鼠皮层神经元分为假辐照组和辐照组,辐照组采用平均功率密度为90 mW/cm2的电磁波辐照10 min,分别于辐照后0、1、3、6、12 h取材。采用CCK-8检测电磁辐射辐照后神经元活性,Western blot检测tau蛋白磷酸化位点ser199/202、ser396、ser404磷酸化变化,同时观察细胞周期素依赖性蛋白激酶5(cyclin dependent kinase 5,CDK5)抑制剂Roscovitine、糖原合成激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)抑制剂氯化锂(LiCl)和钙激活蛋白酶(calpain)抑制剂PD150606对电磁辐射暴露后tau蛋白磷酸化水平的影响。结果电磁辐射辐照后6 h和12 h,原代培养大鼠皮层神经元细胞活性明显降低[与假辐照组比较,分别下降19%(P<0.05)和30%(P<0.01)]。电磁辐射辐照后1 h和3 h,原代培养大鼠皮层神经元tau蛋白ser404位点磷酸化程度一过性增强[与假辐照组比较,分别升高89%(P<0.01)和46%(P<0.05)],而ser199/202、ser396位点磷酸化程度变化不明显(P>0.05)。Roscovitine、LiCl和PD150606对电磁辐射引起的tau蛋白ser404位点过度磷酸化有显著抑制作用(P<0.01)。结论电磁辐射可引起原代培养的皮层神经元tau蛋白ser404位点过度磷酸化,CDK5、GSK-3β和calpain参与其中。