姜黄中脱甲氧基姜黄素和双脱甲氧基姜黄素对姜黄素稳定性的影响

目的 研究姜黄中脱甲氧基姜黄素、双脱甲氧基姜黄素对姜黄素稳定性的影响.方法 以pH 10的缓冲溶液为反应介质,将脱甲氧基姜黄素、双脱甲氧基姜黄素定量加入到姜黄素对照品溶液中,高效液相色谱法测定姜黄素质量浓度的变化,采用动力学方法 建立姜黄素降解速率方程.结果 脱甲氧基姜黄素、双脱甲氧基姜黄素均对姜黄素产生稳定作用,且呈量效关系.结论 姜黄中脱甲氧基姜黄素、双脱甲氧基姜黄素为姜黄素天然稳定剂,以姜黄乙醇提取物制备姜黄素制剂,可提高制剂中姜黄素的稳定性.     

HPLC法测定协日嘎四味片中姜黄素类成分的含量

目的：建立同时测定蒙药协日嘎四味片中姜黄素、脱甲氧基姜黄素、二脱甲氧基姜黄素含量的方法。方法：采用高效液相色谱（HPLC）法。应用VP—ODS（150mm×4．6mm,5μm）色谱柱;以乙睛-4％冰乙酸溶液（48：52）为流动相;流速为0．6ml／min;柱温为30℃;检测波长为425nm。结果：理论板数按姜黄素峰计算不低于4000的条件下：姜黄素、脱甲氧基姜黄素、二脱甲氧基姜黄素基线分离（R〉1．5）,空白无干扰;线性范围依次为0．0260μg-0．0780μg（r=0．9999）、0．02525μg～0．07575μg（r=0．9999）、O．01275μg～0．03825μg（r=0．9998）;平均回收率依次为99．85％（RSD=0．70％,n=6）、99．36％（RsD=0．90％,n=6）、99．09％（RSD=0．71％,n=6）。结论：本试验方法简便、快捷,结果准确、重复性好。可用于该制荆中姜黄素类的成分的含量测定。     

姜黄醇提取物中不同组分对血管平滑肌细胞增殖的影响研究

目的:比较姜黄醇提取物中不同组分对常规培养血管平滑肌细胞(Vascular Smooth Muscle Cells VSMC)增殖的影响和对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)条件培养的平滑肌细胞增殖作用的影响.方法:姜黄醇提取物经制备型薄层色谱分离,纯化,含量测定后配制成不同浓度的药物溶液,分别与常规培养的VSMC和浓度为2μmol/L的AngⅡ条件培养VSMC中共孵育48h,MTT法测定细胞的增殖情况.结果:姜黄素、一脱甲氧基姜黄素和二脱甲氧基姜黄素在剂量为(1.35×10-5mol/L)时,对常规条件培养和浓度为2×10-6mol/L的AngⅡ条件培养的VSMC均有明显的抑制增殖作用,P＜0.001～0.05;在剂量为(5.4×10-7mol/L)时三者均无明显差异,存在剂量依赖性.抑制作用姜黄素＞一脱甲氧基姜黄素＞二脱甲氧基姜黄素;对AngⅡ条件培养的抑制率＞常规条件培养.色谱的原点物质给予高剂量姜黄素组相同剂量,无抑制作用.     

萜烯缀合姜黄素类微量成分与姜黄素类成分在不同姜黄属药材中的定性与定量分析

目的对姜黄属药材中萜烯缀合姜黄素类化合物(BCE)进行系统的定性、定量分析。方法利用超高效液相色谱-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS/MS)建立针对BCE的定性分析,研究其在不同姜黄属药材中的分布情况;再利用UPLC法建立对姜黄、黄丝郁金及蓬莪术中的BCE及3个主要姜黄素(姜黄素、脱甲氧基姜黄素和双脱甲氧基姜黄素)的定量分析,研究BCE在不同姜黄属药材中的含量差异及其与其他姜黄素类成分的含量差异。结果在定性研究中,通过对BCE一级、二级裂解碎片及质谱裂解规律的分析,发现只有姜黄、黄丝郁金中含有该类成分,而蓬莪术中未能检测出BCE;在定量研究中,BCE及3个主要姜黄素在线性范围内均具有良好的线性关系(r≥0.9993);平均回收率在99.407%～113.631%,RSD4%,测定发现姜黄中的3个姜黄素类成分明显高于另外2种药材,且BCE在3种药材中含量差异较大,姜黄中的BCE含量是黄丝郁金的4倍。结论本研究建立的定性、定量分析方法能够为更多BCE类新颖结构化合物的发现和分析提供借鉴,并为提升姜黄属药材的质量标准提供依据。     

HPLC法测定姜黄、莪术、郁金中三种姜黄色素的含量

应用高效液相色谱法测定不同产地的姜黄、莪术、郁金中3种姜黄色素成分即姜黄素(Ⅰ)、脱甲氧基姜黄素(Ⅱ)和双脱甲氧基姜黄素(Ⅲ)含量.     

二脱甲氧基姜黄素对体外培养宫颈癌Hela细胞Caspase-8的影响

目的:观察二脱甲氧基姜黄素对体外培养人宫颈癌Hela细胞Caspase-8的作用。方法:MTT法检测二脱甲氧基姜黄素对体外培养人宫颈癌细胞Hela的抑制作用;分光光度计检测其对Caspase-8酶活性的影响;免疫组化法检测其对人宫颈癌细胞Hela Caspase-8蛋白表达的影响。结果:二脱甲氧基姜黄素对人宫颈癌细胞Hela有明显的抑制作用(P0.001),且呈剂量关系,与姜黄素有显著差异(P0.001);二脱甲氧基姜黄素能增强Caspase-8酶活性,增强Caspase-8蛋白的表达。结论:二脱甲氧基姜黄素能激活Caspase-8蛋白活性,这可能也是其体外抑制宫颈癌细胞Hela生长的机理之一。     

3种姜黄色素干预ox-LDL促平滑肌细胞增殖与影响LDL-R表达的研究

目的:研究3种不同结构的姜黄色素单体对牛主动脉平滑肌细胞(VSMC)增殖及牛VSMC低密度脂蛋白受体(LDL-R)表达的影响,解析构效关系。方法:用MTT比色法和流式细胞仪观察3种不同结构的姜黄色素单体对ox-LDL促牛VSMC增殖及对VSMC LDL-R表达的影响。结果:ox-LDL在2.5,5,10 mg.L^-1时,对VSMC有明显的促增殖作用,P<0.05。姜黄素16.5,33,66μmol.L^-1,一脱甲氧基姜黄素(简称一脱)33,66μmol.L^-1和二脱甲氧基姜黄素(简称二脱)66μmol.L^-1对10 mg.L^-1ox-LDL培养的VSMC有明显的抑制作用,P<0.05。3种姜黄色素的抑制率为姜黄素>一脱>二脱。3种姜黄色素在66,33,16.5μmol.L^-1时对VSMC LDL-R的表达均有明显的上调作用,其中姜黄素16.5μmol.L^-1组与正常组比较,P<0.05,其他组与正常组比较P<0.01,上调作用二脱>一脱>姜黄素,经组间方差分析,P<0.01,与姜黄色素抑制牛VSMC增殖作用相反。结论:3种不同结构姜黄色素单体能明显抑制ox-LDL促牛VSMC增殖作用,上调牛VSMC LDL-R表达,从而有可能延缓动脉粥样硬化的发生发展过程。     

二脱甲氧基姜黄素对体外HepG2 Caspase-3活性的影响

目的:研究二脱甲氧基姜黄素对体外培养人肝癌细胞HepG2 Caspase-3蛋白酶活性的作用。方法:MTT法检测二脱甲氧基姜黄素对体外培养人肝癌细胞HepG2的抑制作用;分光光度检测其对Caspase-3酶活性的影响;免疫组化法检测其对人肝癌细胞HepG2 Caspase-3蛋白的表达。结果:二脱甲氧基姜黄素对人肝癌细胞HepG2有明显的抑制作用(P<0.001)且呈剂量关系,与姜黄素有显著差异(P<0.001);二脱甲氧基姜黄素能增强Caspase-3酶活性,增强Caspase-3蛋白的表达。结论:二脱甲氧基姜黄素能激活Caspase-3蛋白活性,这可能也是它体外抑制肝癌细胞HepG2生长的机理之一。     

姜黄素、去甲氧基姜黄素和二去甲氧基姜黄素对照品的制备及姜黄素细胞毒性初步研究

目的建立从姜黄中制备姜黄素、去甲氧基姜黄素和二去甲氧基姜黄素对照品的方法,并对姜黄素进行细胞毒性初步研究。方法通过硅胶柱色谱对姜黄丙酮提取物进行分离纯化,IR、MS、1H-NMR波谱学方法对化合物进行结构鉴定,通过TLC和HPLC对其进行纯度检测;倒置显微镜观察姜黄素对高侵袭性人乳腺癌MCF-7细胞、低侵袭性人乳腺癌MDA-MB-231细胞和人肝癌HepG2细胞的毒性。结果从姜黄中分离、纯化出姜黄素、去甲氧基姜黄素和二去甲氧基姜黄素对照品,质量分数均>98%。10、100 ng/mL的姜黄素能明显抑制MCF-7、MDA-MB-231和HepG2细胞的生长,对HepG2细胞杀伤力较大。结论该法制备出的姜黄素、去甲氧基姜黄素和二去甲氧基姜黄素对照品符合中药化学对照品的相关要求,可作为姜黄药材及其制剂质量控制以及中药药效物质基础研究用的化学对照品;一定质量浓度的姜黄素能明显抑制人乳腺癌细胞和人肝癌细胞生长。     

姜黄素、去甲氧基姜黄素和双去甲氧基姜黄素稳定性研究

目的：研究姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素在不同pH缓冲溶液中的稳定性。方法：以一定pH的缓冲溶液为反应介质，将姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素定量加入到反应介质中，高效液相色谱法测定姜黄素类化合物浓度的变化，采用动力学方法建立姜黄素类化合物降解速率方程。结果：在相同的条件下姜黄素类化合物的稳定性依次为：双去甲氧基姜黄素≥去甲氧基姜黄素≥姜黄素。结论：去甲氧基姜黄素对姜黄素产生稳定作用最强，为姜黄素的天然稳定剂。     

姜黄中姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素的光稳定性分析

目的 研究姜黄中姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素的光稳定性,并对双去甲氧基姜黄素光化学反应产物进行考察.方法 姜黄的甲醇提取液于棕色量瓶储存,在自然光/避光条件下放置0、1、2、4、6、8h后,HPLC法测定其指标成分姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素量的变化;LC-MS法分析双去甲氧基姜黄素光化学反应产物.结果 姜黄素、去甲氧基姜黄素在自然光/避光条件下均有良好的稳定性;双去甲氧基姜黄素在避光条件下稳定,见光条件下发生光化学反应.结论 姜黄素和去甲氧基姜黄素具有良好稳定性,双去甲氧基姜黄素在自然光照射下不稳定,因此,姜黄药材分析供试液应于棕色量瓶中避光保存.     

不同产地姜黄中挥发油及姜黄色素的含量分析

目的:明确姜黄有效成分在不同地区的含量差异,考察姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素与挥发油之间含量的相关关系。方法:采集不同产地姜黄样品,结合HPLC-UV及2010年版《中国药典》中挥发油测定法分别分析姜黄中姜黄色素和挥发油的含量,采用SPSS 20.0软件的聚类分析及相关分析功能对测定的含量进行分析。结果:不同产地姜黄有效成分含量差异明显,姜黄色素质量分数最大值约4.9%,最小值仅约0.2%,相差约24.5倍;姜黄挥发油最大值与最小值之间差距达4.2倍。姜黄的传统道地产区含量优势明显,不同姜黄色素与挥发油之间均呈现极显著正相关关系。结论:海拔差异对姜黄中有效成分的含量变化有一定影响,姜黄的产区需要进行合理的规划以提高其品质并推进其产业的可持续发展。     

银杏内酯B的提取、分离与纯化研究

目的:建立1种较简单的从银杏叶中提取、分离和纯化银杏内酯B的方法。方法:以银杏内酯B得率为指标,对银杏内酯B的提取、分离和纯化工艺进行优选。结果:银杏叶用70%乙醇提取3次,浓缩至无醇味,加水稀释至每1mL含生药材0.1g,HPD-450大孔吸附树脂吸附,20%乙醇除杂,80%乙醇洗脱、浓缩、结晶,异丙醇重结晶,得到纯度为95%的银杏内酯B结晶。结论:该工艺稳定、简便易行,适合工业化大生产。     

Neuroprotective role of curcumin from curcuma longa on ethanol-induced brain damage.

In the present study, curcumin from Curcuma longa was screened for neuroprotective activity using ethanol as a model of brain injury. Oral administration of curcumin to rats caused a significant reversal in lipid peroxidation, brain lipids and produced enhancement of glutathione, a non-enzymic antioxidant in ethanol intoxicated rats, revealing that the antioxidative and hypolipidaemic action of curcumin is-responsible for its protective role against ethanol induced brain injury.     

细柱五加叶多糖提取分离纯化及保湿性能研究

目的 优化细柱五加Acanthopanax gracilistylus(AGS)叶(AGSL)多糖(AGSL-P)闪式提取工艺,然后将其进行分离纯化,并对其吸湿和保湿性能进行研究.方法 运用球面对称设计试验,优化AGSL-P闪式提取工艺;采用醇沉、Sevage法除蛋白、脱色、透析、琼脂糖凝胶色谱、葡聚糖凝胶分离等方法对AGSL-P进行分离纯化,通过化学实验及红外光谱、核磁共振等方法对其结构进行初步鉴定;对AGSL-P、AGSL-P-1和AGSL-P-2的吸湿和保湿性能进行了初步研究,并与常用保湿剂(聚乙二醇400等)在相对湿度43%和75%条件下进行对比.结果 AGSL-P闪式提取最佳工艺为固液比为1:14.5,提取温度为71 ℃,提取时间为257 s,在此条件下,AGSL-P提取率为1.62%;AGSL-P精制产物AGSL-P-1-1为均一多糖,经过红外光谱和核磁共振检测结果推测,AGSL-P-1-1的构型为α构型,可能含有葡萄糖、鼠李糖和半乳糖.吸湿和保湿性能研究结果表明,AGSL-P-1和AGSL-P-2的吸湿能力优于常用保湿剂聚乙二醇400,而AGSL-P-2保湿能力与聚乙二醇400相当.结论 建立了稳定、简便的AGSL-P闪式提取工艺方法;AGSL-P-1-1均一多糖为首次从AGSL中分离得到;AGSL-P-2可能是一种优良的天然保湿剂     

姜黄素类化合物体外抗凝血与抗血栓作用研究

目的研究姜黄素类化合物体外抗凝血与抗血栓活性,为探寻姜黄活血化瘀药效物质提供参考。方法采用家兔血浆复钙时间法、凝血酶时间法及体外血栓法、全血血块法,分别对3个天然姜黄素类化合物姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素的体外抗凝血与抗血栓活性进行测定。结果姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素均能延长家兔血浆复钙时间(P<0.01)及凝血酶时间(P<0.01),且均能加快体外血栓(P<0.01)及全血凝块的溶解(P<0.01),其中去甲氧基姜黄素的作用最强。结论姜黄素类化合物具有较好的体外抗凝血与抗血栓作用,空间不对称结构能加强姜黄素类化合物结构母核的抗凝活性。     

寡糖分离纯化和鉴定方法的研究进展

寡糖作为近年来备受关注的中药活性成分之一，具有广泛的药理活性和开发应用前景。寡糖种类多样、组成复杂，存在多种异构体，分离纯化和结构鉴定存在较大难度。采用文献分析法，系统梳理了近20年有关寡糖研究的相关文献，归纳了寡糖分离纯化的主要方法，包括色谱法（凝胶色谱法、离子交换色谱法、反相高效液相色谱法、活性炭色谱法、石墨化碳色谱法、亲水作用色谱法）、毛细管电泳法、膜分离技术等，以及寡糖结构鉴定的主要方法，包括紫外光谱法、红外光谱法、核磁共振波谱法、质谱法、色谱法、色谱-质谱联用技术等，并分析了这些方法的适用范围和发展趋势。     

梅花鹿鹿角脱盘总肽的分离纯化及其抗肿瘤活性研究

目的分离纯化梅花鹿鹿角脱盘总肽,以小鼠乳腺癌细胞系MA782为体外研究对象,初步研究鹿角脱盘总肽的抗肿瘤活性。方弦采用酸提醇沉、真空旋转蒸发及冷冻干燥提取鹿角脱盘总肽,再经SephadexG-25凝胶过滤层析除盐,BCA法测定总肽的蛋白质浓度,SDS-PAGE电泳分析总肽中的蛋白质,MTT法和流式细胞仪检测鹿角脱盘总肽对小鼠乳腺癌细胞系MA782增殖的影响和细胞周期的变化。结果分离纯化出鹿角脱盘总肽粗提物,其蛋白质含量为91．800％;SDS—PAGE分析显示,鹿角脱盘总肽中主要含有11kDa,18kDa,40kDa,64kDa和80kDa5种多肽,总肽对小鼠乳腺癌细胞的增殖具有明显抑制作用,细胞周期各期细胞比例变化明显,当总肽浓度为30mg／L时,作用72h后细胞抑制率最高为69．200％,G0／G1期细胞百分比为81．621％,S期细胞百分比为8．983％。结论鹿角脱盘总肽对乳腺癌细胞具有抑制作用,为深入研究鹿角脱盘的抗肿瘤活性提供了实验依据。