神经生长因子对缺氧/缺糖诱导的大鼠小脑皮质神经细胞凋亡的影响

目的:观察神经生长因子对缺氧/缺糖诱导的原代培养的大鼠乳鼠小脑皮质神经细胞凋亡的保护作用。方法:实验于2003-03/10在锦州医学院科技实验中心细胞培养实验室进行。将原代培养7d的大鼠乳鼠小脑皮质细胞分为5组:①正常对照组:不干预。②模型组:换含0.5mmol/L连二亚硫酸钠的无糖Earles液继续培养48h,建立了缺氧/缺糖诱导的神经细胞凋亡模型。③神经生长因子5,50,100μg/L组:提前24h加入5,50,100μg/L的神经生长因子,同前造模。通过光学显微镜观察各组细胞损害情况,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:①细胞凋亡率:模型组和神经生长因子5μg/L组高于正常对照组([47.08±13.27)%,(39.01±11.08)%,(4.08±2.45)%,P<0.01]。神经生长因子50,100μg/L组低于模型组和神经生长因子5μg/L组([15.09±5.68)%,(10.56±4.72)%,P<0.01]。②细胞形态:模型组TUNEL染色发现大量阳性细胞,细胞形态亦有明显损伤变化。神经生长因子50,100μg/L组细胞形态结构损伤减轻或基本恢复正常。结论:给予外源性神经生长因子,能够抑制缺氧/缺糖造成的小脑皮质神经细胞凋亡,对缺氧/缺糖引起的小脑皮质神经细胞损伤有明显保护作用。     

参芎注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用的组织病理学研究

目的:探讨参芎注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用。方法:将60只SD大鼠随机分为假手术组10只,脑缺血再灌注模型组25只,参芎注射液治疗组25只。线栓法制备大脑中动脉梗塞模型,HE染色和Nissl染色观察病理学变化,TTC染色检测脑梗死体积,TUNEL法原位检测神经细胞凋亡。结果:模型组大鼠脑缺血再灌注后72 hHE染色显示出典型梗死灶和神经元丢失,Nissl染色可见细胞尼氏体肿胀,消失,参芎注射液治疗可以减轻上述损害。模型组梗死灶明显,神经细胞凋亡计数明显增多(P<0.01),参芎注射液治疗可明显减少大鼠脑缺血再灌注后的脑梗死体积(P<0.05),及其神经细胞凋亡计数(P<0.05)。结论:参芎注射液能减轻大鼠脑缺血再灌注损伤。     

肿瘤坏死因子α诱导蜕膜细胞凋亡模型建立及黄芩苷对蜕膜细胞凋亡的影响

目的:探索建立肿瘤坏死因子诱导蜕膜细胞凋亡模型,观察黄芩苷对早孕蜕膜细胞凋亡的影响,初步分析黄芩清热安胎作用机制。方法:实验于2006-04/09在湖南中医药大学国家重点二级实验室病理生理实验室完成。取湖南中医药大学第一附属医院门诊人流手术室正常妊娠40d健康孕妇人流组织,患者知情同意。体外常规进行蜕膜细胞培养,选取经鉴定的4、5代细胞蜕膜细胞,用不同浓度(0.5,2.0,10.0,50.0μg/L,共设4组,并设空白对照组)的肿瘤坏死因子α作用于蜕膜细胞,四甲基偶氮唑盐比色实验分析肿瘤坏死因子α对蜕膜细胞活力的影响,荧光细胞染色观察确定蜕膜细胞凋亡模型的建立。选取适宜浓度的黄芩苷作用于正常蜕膜细胞及肿瘤坏死因子α诱导的凋亡蜕膜细胞(设肿瘤坏死因子α模型组,黄芩苷组,肿瘤坏死因子α加黄芩苷组,并设空白对照组),培养24h后,四甲基偶氮唑盐比色实验分析黄芩苷对蜕膜细胞活力的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:实验成功获取足够量的细胞,经泌乳素免疫组化鉴定为较高纯度的蜕膜细胞。①肿瘤坏死因子α作用后的蜕膜细胞活性均低于空白对照组,并且随着肿瘤坏死因子α浓度越大,活力越小。10.0,50.0μg/L肿瘤坏死因子α作用后蜕膜细胞活性与空白对照组比较,差异有显著性意义[(0.196±0.040),(0.106±0.020),(0.317±0.020),P<0.05]。但50.0μg/L时经形态学观察有部分细胞漂浮、死亡。②肿瘤坏死因子α模型组蜕膜细胞活性低于黄芩苷组和肿瘤坏死因子α加黄芩苷组,差异具有显著性意义[(0.27±0.03),(0.49±0.01),(0.38±0.02),P<0.05]。③流式细胞术示空白对照组蜕膜细胞凋亡率低于其他各组,差异均有显著性意义[(1.48±0.45)%,(16.40±0.82)%,(9.78±0.26)%,(10.96±0.92)%,P<0.05]。在荧光显微镜下,肿瘤坏死因子α作用后凋亡的蜕膜细胞细胞核变小皱缩,可见致密强荧光。结论:肿瘤坏死因子α能明显抑制人蜕膜细胞增殖分裂的过程,诱导该细胞凋亡,可用于人蜕膜细胞凋亡模型的建立。而黄芩苷对肿瘤坏死因子α诱导的蜕膜细胞凋亡具有一定对抗抑制作用。     

神经生长因子对新生的大鼠小脑皮质神经细胞凋亡的影响

目的:探讨神经生长因子(nervegrowthfactor,NGF)对小脑皮质神经元凋亡的影响,为临床治疗小脑变性疾病的提供新的措施。方法:实验于2001-12/2003-03在锦州医学院科技楼实验室完成。以原代培养的新生SD乳鼠小脑皮质细胞建立谷氨酸诱导的神经细胞凋亡模型。通过流式细胞术检测神经细胞凋亡率;利用光学显微镜技术观察细胞凋亡的形态学改变。结果:谷氨酸(500μmol/L)作用5min可诱导小脑神经细胞凋亡。应用流式细胞仪检测发现受损细胞在G1峰前出现一个G1亚峰,凋亡细胞所占比例为50.2%及45.7%,通过荧光染色观察发现模型组细胞核出现染色体聚集,凋亡小体形成等形态学变化。流式细胞仪检测结果显示模型组与正常对照组亦有明显差异,光学和荧光显微镜观察发现受损细胞的形态学变化也得到明显改善。结论:外源性NGF能够减轻大鼠小脑皮质神经细胞凋亡。     

神经生长因子对缺氧缺血性脑损伤细胞凋亡的影响

背景:细胞凋亡是脑缺氧缺血神经细胞死亡的一种方式,体外试验表明神经生长因子(nervegrowthfactor,NGF)缺乏可诱导神经细胞凋亡。目的:探讨新生儿缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemicbraindamageHIBD)与细胞凋亡之间的关系,研究NGF对HIBD的保护作用,为用NGF治疗新生儿HIBD提供理论依据。设计:完全随机设计,对照实验研究。地点与材料:7dSD大鼠40只来源于南京医科大学实验动物中心,体质量约14～18g,雌雄不拘,饲养于屏障环境的SPF级实验动物。干预:40只大鼠制成HIBD动物模型,随机分成两组:HIBD模型对照组20只,NGF治疗组在大鼠缺氧缺血后即刻腹腔注射NGF。主要观察指标:观察NGF对HIBD模型的新生大鼠体质量增长情况、死亡率、左右脑质量影响,并用原位缺口末梢标记(insitunickendlabeling,TUNEL)法检测NGF对缺氧缺血后脑细胞凋亡的影响。结果:HIBD模型NGF治疗组体质量增长明显高于对照组(P<0.01);治疗组实验过程中死亡率明显低于对照组;HIBD模型NGF治疗组与对照组健侧(右侧)脑质量相近,但治疗组患侧(左侧)脑质量犤(0.57±0.02)g犦明显重与对照组犤(0.42±0.1)g,P<0.01犦;治疗组左右脑质量无显著差异,而对照组左右脑质量差异有显著性意义(P<0.01);TUNEL染色所见阳性凋亡细胞,其凋亡特征为胞体缩小、核固缩、核碎     

Egb761对大鼠海马神经细胞缺血再灌注损伤保护作用的形态学研究

目的：从形态学探讨Egb761对大鼠海马神经细胞缺血再灌注损伤保护作用。方法：用四血管法建立大鼠全脑缺血再灌注模型。24只大鼠随机分为3组（分别为假手术组,缺血再灌注组和Egb761治疗组）。观察海马神经元缺血再灌注后HE染色、TUNEL染色及透射电子显微镜下改变。结果：海马神经原水肿、凋亡等改变在缺血再灌注组明显高于假手术组,Egb761组介于上述两组之间。结论：缺血再灌注后神经细胞发生水肿、凋亡、坏死等形态学改变,Egb761对大鼠海马神经细胞缺血再灌注损伤具有保护作用。     

银杏叶提取物对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 :探讨银杏叶提取物 (GBE)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 :制造大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。 40只Wistar雄性大鼠随机分为假手术组 (A组 )、缺血组 (B组 )、小剂量GBE组 (C组 )、大剂量GBE组 (D组 )。C、D 2组于术前 3 0min及术后 1h分别给予银杏叶提取物 2 0mg/kg、40mg/kg腹腔内注射。应用TTC染色及HE染色观察梗死体积及缺血坏死程度 ,应用TUNEL法检测凋亡细胞数。结果 :①C、D 2组梗死体积明显小于B组 (P <0 .0 1) ,D组小于C组 (P <0 .0 5)。②C、D 2组凋亡细胞数明显少于B组 (P <0 .0 1) ,D组少于C组 (P <0 .0 5)。结论 :银杏叶提取物可减少脑缺血再灌注后神经细胞凋亡和梗死体积 ,疗效与剂量有关     

黄角颗粒对大脑中动脉栓塞老年大鼠脑神经细胞凋亡形态学的影响

背景:黄角颗粒为纯中药制剂,具有通腑泄热、开窍熄风、活血化淤等功效。目的:观察黄角颗粒对大鼠大脑中动脉栓塞模型神经细胞凋亡的影响,探讨黄角颗粒治疗急性期脑梗死的可能机制。设计:完全随机分组设计,对照动物实验。单位:华中科技大学同济医学院附属中西医结合医院神经内科。材料:实验于2003-09/2003-12在湖北中医学院中心实验室完成。采用鼠龄为22个月的老年Wistar大鼠60只。大鼠适应性喂养3d后,按体质量随机分为6组:正常对照组、模型组、尼莫地平组、黄角颗粒10g/kg组、黄角颗粒5g/kg组、黄角颗粒2.5g/kg组,每组10只。方法:①采用大脑中动脉栓塞法将大鼠造成脑缺血模型。黄角颗粒(主要成分为生大黄、水牛角等,武汉市第一医院制剂室提供,批号:021120)10,5,2.5g/kg组于造模前30min分别给予含生药1,0.5,0.25kg/L的黄角颗粒水溶液按10,5,2.5g/kg灌胃,每只灌胃1次;尼莫地平组于造模前30min给予含生药1g/L的尼莫地平水溶液按10mg/kg灌胃,每只灌胃1次;模型组和正常对照组(只结扎颈外动脉)于造模前30min给予生理盐水按10mL/kg灌胃,每只灌胃1次。②采用光学显微镜观察原位细胞凋亡染色切片,在高倍镜(20×10)下观察5个视野,观察每个高倍视野平均阳性细胞数,并计算细胞凋亡率。普通光镜下观察皮质缺血局部及周围组织学变化。电镜下观察大鼠大脑皮质细胞超微结构变化。③计量资料差异比较采用F检验及Q检验。主要观察指标:黄角颗粒对大脑中动脉栓塞老年大鼠脑组织神经细胞凋亡率及大脑皮质细胞形态学的影响。结果:Wistar大鼠60只均进入结果分析。①模型组大鼠脑组织凋亡阳性细胞数及细胞凋亡率明显高于正常对照组(P<0.01);黄角颗粒各剂量组及尼莫地平组大鼠脑组织凋亡阳性细胞数及细胞凋亡率明显低于模型组(P<0.01);黄角颗粒10g/kg组大鼠脑组织凋亡阳性细胞数及细胞凋亡率与尼莫地平组比较,差异不明显(P>0.05)。黄角颗粒10g/kg组大鼠脑组织凋亡阳性细胞数及细胞凋亡率明显低于黄角颗粒5和2.5g/kg组(P<0.05,0.01)。②光镜及电镜观察结果显示模型组大鼠局部脑组织细胞有明显的凋亡现象,而黄角颗粒有明显的改善作用。结论:黄角颗粒对急性缺血性神经细胞凋亡有一定的拮抗作用,该种作用可能是黄角颗粒治疗急性期脑梗死的可能机制之一。     

乌龙丹对大鼠局灶性脑缺血神经元凋亡及其相关基因表达的影响

目的:观察乌龙丹对大鼠局灶性脑缺血神经元损害病理过程的保护作用,并分析其作用途径。方法:实验于2004-09/2005-10在南方医科大学中医药学院实验室完成。①选用Wistar大鼠30只,3～4月龄,体质量(250±20)g。按随机抽签法将大鼠分为5组(每组6只):假手术组:只做开颅术,不结扎血管;模型组和乌龙丹低、中、高剂量组:造成局灶性脑缺血模型。乌龙丹低、中、高剂量组:造模前灌胃乌龙丹流浸膏眼乌龙丹由生黄芪、葛根、制首乌、川芎、丹参、地龙、全蝎、制僵蚕、水蛭、生晒参、石菖蒲、女贞子、白术、当归组成,由南方医科大学南方医院中药房提供,加工为流浸膏穴含生药2.5g/mL雪演1,2,4mL,给药7d;假手术组:术前灌胃2mL生理盐水,干预7d;模型组:造模前灌胃2mL生理盐水,干预7d。②于末次给药后2h造模:结扎右侧颈总动脉,夹闭左侧颈总动脉1h后放开;阻断大脑中动脉造成局灶性脑缺血模型。③大鼠造模24h后,剥取脑组织,冠状连续切片。在JEM1200-EX透射电镜下观察脑组织的超微结构。采用原位末端标记法,按试剂盒说明书方法操作,应用图形分析仪系统,计算原位末端标记法染色阳性细胞数(细胞凋亡数)。采用免疫组化法,按试剂盒说明书方法操作检测Bcl-2与半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3蛋白表达情况。④组间计量资料差异比较采用单因素方差分析,结果:Wistar大鼠30只均进入结果分析。①假手术组:神经细胞形态正常。模型组:神经细胞有明显病理改变,神经元肿胀或浓缩,有凋亡细胞表现。乌龙丹3个剂量组:多数细神经细胞胞保存完好,神经细胞基本形态结构完整,与假手术组相似。②模型组脑组织原位末端标记法染色阳性细胞、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3免疫反应阳性细胞数明显多于其他4组穴P<0.05雪,Bcl-2免疫反应阳性细胞数明显少于其他4组穴P<0.05雪。乌龙丹低、中、高剂量组神经细胞凋亡情况与相关基因表达与假手术组相近。结论:乌龙丹具有减轻局灶性脑缺血神经细胞结构的病理损伤,对抗细胞凋亡的神经保护作用,该作用发挥可能与乌龙丹影响脑缺血后Bcl-2,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3基因表达有关。     

脊髓损伤后早期应用FK506抑制半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3表达及细胞凋亡的实验研究

目的:观察FK506对脊髓损伤大鼠后肢运动功能及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)表达和细胞凋亡的影响。方法:成年雄性Wistar大鼠60只,采用Allen′s法建立脊髓损伤模型后,随机分为应用FK506治疗组(n=30)和应用生理盐水对照组(n=30),于伤后不同时间点取材,行苏木精-伊红(HE)染色观察损伤脊髓组织病理变化,免疫组织化学染色检测caspase-3的表达,原位末端标记法(TUNEL)检测神经细胞凋亡,同时以BBB评分法评价后肢运动功能恢复情况。结果:HE染色显示治疗组脊髓组织病理学改变明显轻于对照组;治疗组和对照组均存在caspase-3的表达和神经细胞凋亡,两者都于伤后24h达高峰,但治疗组较对照组明显减少(P<0.01,P<0.05);治疗组后肢运动功能评分显著优于对照组(P<0.05)。结论:FK506能抑制脊髓损伤后caspase-3的表达和神经细胞凋亡,从而减轻继发性损害,促进脊髓功能恢复。     

The World of The Epileptic

Epilepsy in its various forms affects approximately one percent of the population. There are still many prejudices and restrictions imposed on the epileptic by a poorly enlightened public. In this article, an overview of the world of the epileptic is attempted with some comments on types of seizures, their acute and chronic treatment, and the general management of an epileptic patient. Comments are made on various aspects of epilepsy including personality traits, employability, education, car driving, insurance, marriage and child-bearing.     

98例甲状腺肿块的超声图象分析

本文报告98例经手术及病理证实的甲状腺肿块的B超声像图表现,B超诊断符合率为88.78%。文中就误诊原因及鉴别诊断进行了分析和讨论。     

B超在小儿肝母细胞瘤诊断治疗上的应用价值：附42例分析

本文报道B超诊断婴幼儿肝母细胞瘤42例。就其声象图特点进行了分析,根据不同超声特征分为二型(1)结节局限型(2)巨块弥漫浸润型。通过图象分析帮助临床医师制定手术治疗方案。本文还讨论了小儿中上腹部其它常见肿瘤的超声图象特点及与肝母细胞瘤的鉴别诊断问题。     

高锰酸钾溶液在水痘患者皮肤护理中的应用

目的：观察高锰酸钾溶液在水痘患者皮肤护理中的应用效果。方法将40例水痘患者随机分为观察组和对照组各20例,两组患者都使用抗生素和阿昔洛韦。对照组使用炉甘石洗剂涂擦,观察组使用高锰酸钾溶液进行洗浴,观察2组患者用药后24、48、72h皮疹消退及皮肤的瘙痒情况。结果在皮疹消退方面,用药后24、48、72h观察组明显优于对照组（P＜0．05）;在减轻痒感方面,用药24、48、72h观察组明显优于对照组（P＜0．05）。结论高锰酸钾溶液应用于水痘患者的皮肤护理中,在减轻痒感、加速皮疹的消退方面有着十分显著的疗效。     

The toxicology of molluscicides. The organotins

Organotin compounds have found a wide range of uses. They have also been shown to be active in control of the snail hosts of the tropical disease, schistosomiasis. Development of this application requires definitive information on acute and particularly their chronic mammalian toxicity. The literature on their toxicology and pharmacology is therefore reviewed and also the data available on their behaviour in the environment, both with particular reference to those compounds which have shown promise as molluscicides. Future organotin molluscicide potential is discussed against this background and current thinking on methods for control of schistosomiasis.     

The history of antibiotics: The Japanese story

 It is well-known that Japan was the third country, after the United States and the United Kingdom, to become self-sufficient in penicillin manufacture, as early as 1948. Besides the production of penicillin, much effort was made nationwide in exploratory research on anti-infective, anti-cancer, and agricultural antibiotics, and also other bioactive microbial products. One can list upwards of 117 useful antibiotics and related agents of Japanese origin, and among them, 41 agents have been licensed out around the world. The first antibiotic from Japan was colistin (discovered in 1950) followed by well-known agents such as mitomycin C (1955), kanamycin (1957), bleomycin (1965), cefazolin (1969), amikacin (1972), piperacillin (1976), norfloxacin (1977), cefoperazone (1978), ofloxacin (1980), clarithromycin (1984), meropenem (1987), and others. The major group is the beta-lactam antibiotics (up to 15), followed by 7 fluoroquinolones and anti-cancer and agricultural antibiotics (4 of each). Noteworthy was the expansion of antibiotics research into bioactive microbial products, which led to the discovery of extremely beneficial agents for human quality of life (QOL), such as pravastatin for hyperlipidemia and tacrolimus for atopic diseases. It is to be expected that Japan will continue a high level of activity in exploratory research on beneficial chemotherapeutic agents in the twenty-first century. The Japanese Society of Chemotherapy (JSC), established in 1953, has played a central role for about a half century in the evaluation of novel agents discovered in Japan and those introduced from abroad. Besides the evaluation of chemotherapeutic agents, both fundamentally and clinically, the JSC has taken an active part in the establishment of a variety of guidelines for chemotherapy and in the education of clinical scientists who have evaluated all agents of Japanese origin appropriately. Received: October 1, 2001 / Accepted: January 8, 2002     

宫内妊娠残留物易误诊绒癌声像图分析

目的：探讨宫内妊娠残留物合并感染后二维声像图特点。方法：本文分析了经我科会诊的１２例误诊为绒癌病例。确诊后在超声引导下行清宫术，病理证实为宫内妊娠残留物。与已明确诊断为绒癌经手术及病理证实的子宫声像图为对照，进一步分析了两者易造成误诊的原因。结果：宫内残留物与宫腔关系密切。结论：对疑诊为宫内残留物者可用超声引导下宫腔探查的方法协助诊断及鉴别