休克期切痂对烫伤大鼠肝、肺组织高迁移率族蛋白B1表达及促炎/抗炎平衡的影响

目的 观察休克期切痂对烫伤大鼠组织早期和晚期炎症介质变化规律及相应器官功能的影响,探讨休克期切痂改善预后的分子机制。方法 Wistai大鼠30％Ⅲ度烫伤后随机分为24h切痂组和72h切痂组。分别检测肝、肺组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、白介素-10(IL-10)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达。结果烫伤后2d,肝、肺组织HMGB1、TNF-α mRNA表达增强,而IL-10mRNA伤后8d增强;24h切痂大鼠伤后4d肝、肺组织HMGB1和TNF-α mRNA表达下调,伤后8d其IL-10 mRNA表达恢复正常;72h切痂大鼠伤后8d肝、肺IL-10mRNA仍维持较高水平。伤后2．8d肝组织内TNF-α蛋白水平呈双峰改变,4d时减少;24h和72h切痂组肝TNF-α维持在正常范围;伤后2、4d肝TNF-α／IL-10比例升高,24h切痂可降低TNF-α／IL-10。此外,24h切痂组4、8d血浆天冬氨酸氨基转移酶和丙氨酸氨基转移酶含量及肺组织髓过氧化物酶活性显著降低。结论休克期切痂可阻断严重烫伤大鼠肝、肺组织早期和晚期炎症介质过度表达,维持促炎／抗炎介质平衡,改善多脏器功能。     

烫伤休克期切痂植皮对骨骼肌蛋白降解率影响的实验研究

目的　探讨严重烫伤休克期切痂的必要性。　方法　用大鼠 30 %Ⅲ度背部烫伤模型 ,观察大鼠严重烫伤后骨骼肌蛋白降解率的变化 ,以及实施休克期切痂前后骨骼肌蛋白分解的变化。大鼠随机分为烫伤组、休克期切痂组和非休克期切痂组 3组 ,每组 5个时间点 (含伤前对照 )每时间点8只大鼠。两切痂组分别于伤后 1d和 4d切痂植皮 ,采用无创技术和骨骼肌充分氧供离体孵育系统测定伸趾长肌蛋白降解率。　结果　烫伤后 1d伸趾长肌总蛋白降解率较伤前显著增加 (t=2 988～3 12 4均P <0 0 1) ,差异均有非常显著意义 ;余时间点变化不明显 ,烫伤组、休克期切痂组和非休克切痂组相比差异无显著性意义。然而伸趾长肌肌纤维蛋白降解率在烫伤后各时间点均较伤前值显著增加 (均t=2 977～ 4 72 5 ,P <0 0 1) ,差异均有非常显著性意义。休克期切痂组组较大休克切痂组在伤后 2、4、5d显著降低 (tz=2 311,P <0 0 5 ;t4,5=3 0 5 4 ,3 319,P <0 0 1) ,差异均有显著和非常显著性意义 ;其中休克期切痂组伸趾长肌肌纤维蛋白降解率均值分别为每 3h 3 17、2 33、1 75nmol/g。两切痂组比较差异无显著意义 ,仅在伤后 5d轻度下降。结论　休克期切痂有助于减轻烫伤后骨骼肌蛋白的高分解代谢反应。     

休克期切痂对烫伤大鼠肺高迁移率族蛋白B1表达的影响及其意义

目的　探讨休克期切痂对烫伤大鼠肺高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达的影响及其与急性肺损伤的关系。方法　将 3 0 %Ⅲ度烫伤Wistar大鼠随机分为 2 4和 72h切痂植皮组。RT PCR和免疫组织化学法检测肺HMGB1变化 ,肺髓过氧化物酶 (MPO)结合病理形态学观察肺损伤情况。结果　伤后 4d、2 4h切痂组肺HMGB1mRNA和Ⅱ型上皮细胞HMGB1蛋白表达较烫伤对照和72h切痂组均有明显下调 (P <0 .0 5 )。伤后大鼠肺MPO活性增强近 2倍 ,而 2 4h切痂大鼠 4d肺MPO活性明显降低。结论　休克期切痂可下调肺组织HMGB1表达 ,部分减轻烫伤后急性肺损伤。     

休克期切痂对烫伤大鼠γ干扰素、白细胞介素4 mRNA表达的影响

目的探讨烫伤大鼠伤后不同时间切痂对Th1细胞因子γ干扰素(IFN-γ)和Th2细胞因子白细胞介素4(IL-4)循环水平的变化及其mRNA在脾脏T淋巴细胞表达的影响。方法160只健康雄性Wistar大鼠背部30％Ⅲ度烫伤后,随机分为单纯烫伤对照组和伤后8h、24h、96h切痂组,分别在伤后4、12、24、48、96、120、168h活杀动物,采集血液和脾脏标本。ELISA法检测血浆内IFN-γ、IL-4浓度;Ficoll分离液法、贴壁法和尼龙毛柱吸附法提取纯化脾脏T淋巴细胞,一步法提取细胞总RNA、RT-PCR法扩增目的基因、琼脂糖凝胶电泳分析IFN-γ和IL-4 mRNA的表达。结果烫伤4h大鼠循环内上述细胞因子的浓度大幅升高,同时其mRNA表达迅速上调。Th1型细胞因子IFN-γ及其mRNA表达在烫伤后24h达峰值,其后逐渐下降;Th2型细胞因子IL4的循环浓度及mRNA表达进行性增加;伤后7d出现明显偏向Th2型反应的现象。切痂组两个细胞因子浓度增加及其mRNA表达上调的变化幅度小于单纯烫伤对照组,其中8h切痂组的变化最小,24h和96h切痂组次之。结论休克期切痂有利于抑制严重烧伤后Th2型细胞因子的过度表达。     

大鼠烫伤后不同时间切痂骨骼肌解偶联蛋白2、3 mRNA表达水平的改变

目的观察烫伤大鼠伤后不同时间切痂其骨骼肌解偶联蛋白(UCP)2、UCP3 mRNA表达水平的异同. 方法选用120只雄性Wistar大鼠,其中8只作为正常对照组;余下112只造成30%TBSAⅢ度烫伤后分成4组A组不切痂,分别于伤后8、24、96、120、168 h处死;B组伤后8 h切痂,于伤后24、96、120、168 h处死;C组伤后24 h切痂,伤后96、120、168 h处死;D组伤后96 h切痂,伤后120、168 h处死.测定各组大鼠各时相点的血清瘦素、肿瘤坏死因子(TNF)α含量以及腓肠肌UCP2、UCP3 mRNA表达水平. 结果 (1)血清瘦素水平A组大鼠伤后24～168 h均低于正常对照组(P<0.01),B、C、D组伤后120 h和(或)168 h均高于A组(P<0.01).(2)血清TNF-α水平A组伤后各时相点均高于正常对照组(P<0.01),B组伤后各时相点均低于A组(P<0.05或0.01).C组伤后168 h低于A组(P<0.05).(3)腓肠肌UCP2 mRNA的表达量A组大鼠在烫伤后8 h即已明显升高(P<0.01),24 h到达高峰,以后逐渐下降.B、C组伤后168 h时分别为0.32±0.20、0.35±0.15,明显低于同时相点A组 0.71±0.12(P<0.05).各组腓肠肌UCP3 mRNA表达的变化趋势与UCP2类似. 结论大鼠严重烫伤后UCP2、UCP3 mRNA表达上调可能是代谢率升高的重要因素之一,休克期切痂可降低这一表达,降低代谢率.     

休克期切痂对大鼠肺组织ICAM-1、TNF-α mRNA表达的影响

目的 研究烧伤后肺组织细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达和肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性变化的规律,探讨实施休克期切痂对上述指标变化的影响。方法 Wistar大鼠176只,30％体表面积Ⅲ度烫伤,采用逆转录PCR方法分别观察伤后不同时相点及不同时机切痂后肺组织ICAM-1、TNFα mRNA的表达及肺脏：MPO活性变化。结果烫伤后肺组织ICAM-1及TNFα的mRNA表达在伤后4h即已升高,分别在伤后12h和24h达到高峰,伤后8h和24h切痂组动物切痂后再次出现一峰值,但低于第一个峰值,伤后96h恢复正常。未切痂组和96h切痂组在伤后7d仍未恢复正常;休克期切痂动物的肺组织MPO活性伤后96h恢复正常,而非休克期切痂组动物一直维持较高水平。结论 尽早切痂去除坏死组织可阻断炎症介质及细菌毒素的释放,避免了内皮细胞大量合成ICAM-1等粘附分子,减轻由粘附分子介导的中性粒细胞对内皮细胞的进一步损害。     

休克期切痂对大鼠肺组织ICAM-1、NF-QmRNA表达的影响

目的研究烧伤后肺组织细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、肿瘤坏死因子-a(TNF-a)表达和肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性变化的规律,探讨实施休克期切痂对上述指标变化的影响。方法Wistar大鼠176只,30％体表面积Ⅲ度烫伤,采用逆转录PCR方法分别观察伤后不同时相点及不同时机切痂后肺组织ICAM-1、TNF-amRNA的表达及肺脏MPO活性变化。结果烫伤后肺组织ICAM-1及TNF-a的mRNA表达在伤后4h即已升高,分别在伤后12h和24h达到高峰,伤后8h和24h切痂组动物切痂后再次出现一峰值,但低于第一个峰值,伤后96h恢复正常。未切痂组和96h切痂组在伤后7d仍未恢复正常;休克期切痂动物的肺组织MPO活性伤后96h恢复正常,而非休克期切痂组动物一直维持较高水平。结论尽早切痂去除坏死组织可阻断炎症介质及细菌毒素的释放,避免了内皮细胞大量合成ICAM-1等粘附分子,减轻由粘附分子介导的中性粒细胞对内皮细胞的进一步损害。     

休克期切痂植皮对烧伤早期应激反应的影响

目的 观察小型猪切部前后应激时血浆激素的变化及烧伤休克斯切痂植皮手术对早期应激反应的影响。方法 采用１６只小型猪３５％Ⅲ度烧伤模型,随机分为伤后２４小时切痂组（Ｓ组）和９６小时切痂组（Ｎ组）,分别于伤前、伤后２４、４８、９６小时及７天采血,检测胰岛素、胰岛血糖素、皮质醇、生长激素（ＧＨ）和胰岛素样生长因子－Ⅰ（ＩＧＦ－Ⅰ）。结果 胰岛素、胰高血糖素和皮质醇于伤后均出现不同程度的增高。伤后７天时,Ｓ     

休克期切痂对大鼠肝组织ICAM-1及TNF-αmRNA表达的影响

目的研究烧伤后肝组织细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达及肝组织髓过氧化物酶(MPO)变化的规律,探讨实施休克期切痂对上述指标变化的影响,论证及早切除焦痂的重要性.方法Wistar大鼠176只,30%Ⅲ°烫伤,采用逆转录PCR方法分别观察伤后不同时相点及不同时机切痂后肝组织ICAM-1、TNF-α mRNA的表达及肝组织MPO活性变化.结果烫伤后肝组织ICAM-1及TNF-α的mRNA表达在伤后4h即已升高,分别在伤后12h和24h达到高峰;8h和24h切痂组动物切痂后再次出现一峰值,但低于第一个峰值,伤后96h恢复正常;未切痂组和96h切痂组在伤后7天仍未恢复正常.休克期切痂组MPO活性96时恢复正常,未切痂组和非休克期切痂组伤后7天仍未恢复正常.结论及早切痂去除了坏死组织,阻断了炎症介质及细菌毒素的释放,避免了内皮细胞大量合成ICAM-1等粘附分子,减轻了由粘附分子介导的中性粒细胞对内皮细胞的进一步损害.     

休克期切痂对烫伤大鼠外周血淋巴细胞凋亡及单核细胞抗原呈递功能的影响

目的观察不同时相点切痂对烫伤大鼠外周血淋巴细胞凋亡及单核细胞抗原呈递功能的影响。方法将136只雄性Wistar大鼠随机分为对照组(8只)、单纯烫伤组(64只)、休克期切痂组(40只)、非休克期切痂组(24只)。对照组不作烫伤处理;其他组均造成30％TBSAⅢ度烫伤,其中后两组分别于伤后36、120 h行切痂植皮术。单纯烫伤组分别于伤后6、12、24、72、120、168、216、288 h处死;两个切痂组分别于伤后72～288 h、168～288 h(时间间隔同上)处死,留取血液标本检测淋巴细胞凋亡率、单核细胞主要组织相容性抗原(MHC)Ⅱ类分子阳性表达率、干扰素(IFN)γ及白细胞介素(IL)4浓度的变化,并行相关性分析。结果伤后6 h开始,单纯烫伤组淋巴细胞凋亡率迅速升高,24 h达峰值(18．19±1．42)％,之后迅速回落,于伤后72 h降至低谷(8．25±0．56)％,随着时间延长又逐渐升高,288 h时(17．81±1．99)％接近峰值,均明显高于对照组(P<0．05);伤后168～288 h两个切痂组淋巴细胞凋亡率明显低于单纯烫伤组(P<0．01)。单纯烫伤组伤后6 h单核细胞MHC-Ⅱ类分子阳性表达率急剧下降,伤后24 h已低于对照组[(37．2±2．4)％]的20％,之后逐渐升高,伤后288 h为(18．8±2．8)％,明显低于两个切痂组(P<0．01)。伤后6 h开始,单纯烫伤组血浆IFN-γ浓度迅速上升,24 h时达峰值(440．8±25．1)ng／L,之后逐渐回落,288 h降至低谷(51．3±37．0)ng／L;而IL-4水平则呈线性上升,于伤后288 h达峰值(78．1±2．8)ng／L;伤后72～288 h单纯烫伤组单核细胞MHC-Ⅱ类分子阳性表达率与休克期切痂组IFN-γ／IL-4比值呈明显的负相关(r= -0．96,P<0．05)。结论大鼠烫伤后切痂能明显抑制淋巴细胞凋亡,减缓IFN-γ／IL-4倒置的趋势,改善单核细胞抗原呈递功能。其中在单核细胞免疫功能恢复方面,休克期切痂较非休克期切痂效果显著。     

休克期切痂对血浆内皮素及NO水平的影响

目的观察烧伤休克期切痂和休克期后切痂对血浆内皮素及一氧化氮水平的影响。方法利用小型猪制成35％Ⅲ度烧伤动物模型,分为两组,休克期切痂组(S组)于伤后24小时切痂,对照组(C组)于伤后96小时切痂,分别检测血浆内皮素(ET)、一氧化氮(NO),并计算ET/NO。结果两组ET及NO均高于伤前,伤后96小时开始S组ET明显低于C组;而NO水平S组明显高于C组;ET/NO亦显示伤后24小时开始S组明显低于C组。结论休克期切痂可减轻内皮细胞损伤,减轻渗出与水肿,减少组织缺氧,改善微循环。     

休克期切痂对血浆内皮素及NO水平的影响

观察烧伤休克期切痂和休克斯后切痂对血浆内皮素及一氧化氮水平的影响。方法 利用小型猪制成３５％Ⅲ度烧伤动物模型，分为两组，休克期切痂组于伤后２４小时切痂，对照组于伤后９６小时切痂，分别检测血浆内皮素，一氧化氮，并计算ＥＴ／ＮＯ。结果 两组ＥＴ及ＮＯ均高于伤前，伤后９６小时开始Ｓ组ＥＴ明显低于Ｃ组；     

休克期切痂对血浆内皮素及NO水平的影响

目的观察烧伤休克期切痂和休克期后切痂对血浆内皮素及一氧化氮水平的影响。方法利用小型猪制成３５％Ⅲ度烧伤动物模型，分为两组，休克期切痂组（Ｓ组）于伤后２４小时切痂，对照组（Ｃ组）于伤后９６小时切痂，分别检测血浆内皮素（ＥＴ）、一氧化氮（ＮＯ），并计算ＥＴ／ＮＯ。结果两组ＥＴ及ＮＯ均高于伤前，伤后９６小时开始Ｓ组ＥＴ明显低于Ｃ组；而ＮＯ水平Ｓ组明显高于Ｃ组；ＥＴ／ＮＯ亦显示伤后２４小时开始Ｓ组明显低于Ｃ组。结论休克期切痂可减轻内皮细胞损伤，减轻渗出与水肿，减少组织缺氧，改善微循环