不同浓度的金属硫蛋白对离体豚鼠乳头肌缺氧、复氧电生理特性的影响

为探讨金属硫蛋白（MT）对豚鼠乳头肌缺血再灌注损伤所致心律失常的影响，利用标准玻璃微电极技术，采用缺氧及复氧豚鼠乳头肌模型，模拟体内缺血再灌注损伤，观察不同浓度MT对豚鼠乳头肌电生理特性的影响。结果显示低浓度的MT（0．002mmol／L）对正常及缺氧和复氧豚鼠乳头肌的动作电位（AP）有关参数及自律性均无影响；中等浓度的MT（0．02mmol／L）仅使正常乳头肌的AP复极达50％时程（APD50）缩短24％（P＜0．05），但使缺氧乳头肌的AP复极达20％时程（APD20）、APD50和AP复极达90％时程（APD90）分别缩短68％、56％和43％（P均＜0．01），并使静息电位（RP）、AP幅值（APA）和0相最大上升速率（Vmax）分别增加30％、30％和45％（P均＜0．01）；高浓度的MT（0．1mmol／L）使正常豚鼠乳头肌的APD20、APD50和APD90分别缩短57％、54％和50％（P均＜0．01），并且RP、APA及Vmax分别下降22％（P＜0．05）、28％（P＜0．01）和29％（P＜0．05），而使缺氧豚鼠乳头肌的APD20、APD50和APD90分别延长92％、78％和50％（P均＜0．01），对RP、APA及Vmax无明显影响。在复氧期间，0．02mmol／L的MT可使自律性的发生率从77．8％降至55．6％（P＜0．05）；而0．1mmol／L的MT则使自律性的发生率从77.8％降至22．2％（P     

Zn2+诱导金属硫蛋白表达对离体大鼠缺血再灌注损伤心肌的保护作用

金属硫蛋白 (metallothionein ,MT)是近年来研究的热门课题之一。本研究在离体大鼠缺血再灌注损伤心脏模型上 ,观察Zn2 +诱导MT合成对缺血再灌注损伤心肌的保护作用 ,为临床提供心脏保护的新途径。1 材料与方法 :( 1)分组及方法 :3月龄Sprague Dawley大鼠 32只 ,雌雄不拘 ,体重 2 5 0～ 32 0g,随机分为 4组 ,每组 8只。对照组 :腹腔注射 0 3ml蒸馏水 2 4h后常规建立Langendorff灌注模型 ,平衡灌注 2 0min ,夹闭灌注管全心停灌45min ,再灌注 1h ,其中再灌注 15min时取冠状窦流出液 2ml,冷冻储存。工作末 ,取心肌标本吸干水渍后迅速置于…     

模拟缺血对豚鼠离体乳头肌纵,横向兴奋阈及有效不…

采用常规微电极技术，观察豚鼠乳头肌兴奋性在重复模拟缺血下的变化及其对电场梯度方向的依赖性，并探讨重复缺血是否有累积损伤作用。结果显示；在对照级缺血的情况下，心肌细胞横向电场梯度舒张期兴奋阈均显著高于纵向。     

缺氧对离体豚鼠乳头肌纵横向兴奋阈及有效不应期的影响

通过对离体豚鼠乳头肌行重复缺氧处理，观察心肌细胞在缺氧和复滞过程中舒张期兴奋阈（ＤＥＴ）和有效不应期（ＥＰＲ）等参数的改变与电场刺激方向的关系，并探讨重复缺氧是否具有累积损伤作用。结果表明，缺氧开始后横纵向ＤＥＴ均有不同程度增加。第２次缺氧开始后ＤＥＴ均降至对照水平，至第２次复灌再次升高。ＥＲＰ在缺氧过程中呈先延长后缩短的双向改变，ＥＲＰ在第２次缺氧复灌过程中恢复减慢。结果提示，首次缺氧可减少随后     

锌对缺血再灌注损伤家兔心肌金属硫蛋白-1基因表达的影响

目的研究锌对家兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用RT-PCR技术,检测分析金属硫蛋白-1(MT-1)基因在家兔缺血再灌注损伤心肌的表达及锌对其基因表达的调节。结果各组家兔心肌组织中均有MT-1基因的表达,缺血再灌注组MT-1基因的表达较正常对照组明显下降(P<0.01),补锌再灌注组MT-1基因的表达较缺血再灌注组明显上调(P<0.01)。结论锌对家兔心肌缺血再灌注损伤的分子机制中,调节其心肌组织中MT-1基因转录水平的表达可能是一条重要途径。     

茶多酚对大鼠心脏乳头肌收缩功能的影响

绿茶提取物茶多酚(TP)具有众多的生物活性，如抑制动脉粥样硬化，减轻心肌缺血再灌注损伤，清除自由基和抗衰老，增强心肌收缩力等作用。本研究探讨TP对正常及糖尿病大鼠离体右心室乳头肌收缩功能的影响，现报道如下。     

雌二醇对豚鼠离体心脏功能的作用研究

目的研究雌二醇（E2，10-6）急性给药对缺血再灌注心脏功能的作用及可能机制。方法制备豚鼠离体工作心脏模型，记录使用马时正常灌注和缺血再灌注心功能的变化，测定心肌组织内丙二醛（MDA）浓度和超氧化物歧化酶（SOD）活力。结果E2抑制正常灌注心脏的舒缩功能，减少心肌内MDA含量；促进缺血再灌注心脏的舒缩功能和SOD活力恢复，减少其心肌内MDA含量。结论E2对缺血再灌注心脏的心功能具有一定的保护作用。     

金属硫蛋白对离体心脏心肌间质的保护作用

目的 探讨金属硫蛋白(MT)对离体心脏心肌间质的影响。方法 Wistar大鼠16只,分为2组:对照组(C,n=8),腹腔注射蒸馏水0.5ml 24h后取离体心脏行离体灌注(Langendorff模型),测定心功能,然后灌注HTK心脏保护液,4C保存3h后再行Langendorff灌注25min;实验组(E,n=8)腹腔注射3.6％硫酸锌(1.5 ml/kg)24 h后取离体心脏,处理方法同C组。以心肌细胞中MT含量、血流动力学指标、心肌组织羟脯氨酸(HP)含量、内皮素(ET)含量和心肌超微结构等作为观察指标。结果MT含量E组与C组比较明显增高;E组心功能恢复方面优于C组(P<0.05),HP含量优于C组(P<0.01),ET含量低于C组(P<0.01),心肌超微结构损伤较C组明显减轻。结论MT对供心心肌间质具有保护作用。     

诱导金属硫蛋白表达对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡及核因子κB表达的影响

目的 探讨金属硫蛋白(MT)对大鼠缺血再灌注(I/R)心肌细胞凋亡及核因子κB(NF-κB)表达水平的影响.方法 32只SD大鼠随机分成实验组、对照组,每组16只.分别予硫酸锌(ZnS04)和蒸馏水预处理.预处理后构建Langendorff离体心脏I/R动物模型,动态观测缺血前及再灌注期左心室发展压(LVDP)、左心室压力最大上升和下降速率(±dp/dtmax)、冠状动脉流出量(CF);测定冠状动脉流出液肌酸磷酸激酶MB同工酶(CK-MB)的漏出率;Western印迹法检测金属硫蛋白(MT)表达;TUNEL法检测心肌细胞凋亡;免疫组化法检测NF-κB的活化水平.结果 与对照组比较,实验组再灌注期LVDP、±dp/dtmax及CF得到改善(P ＜0.05);CK-MB的漏出率减少;金属硫蛋白的表达增加;细胞凋亡指数及NF-κB表达减少(均P＜0.01).结论 MT下调NF-κB表达可能与其抑制I/R心肌细胞凋亡有关.     

不同缺血时间窗对大鼠在体心肌缺血再灌注损伤的影响

目的:探讨不同缺血时间窗对大鼠在体心肌缺血再灌注损伤的影响。方法:取7～8周龄Wistar大鼠48只,雌雄各半,随机分为4组(假手术组、缺血7.5 min组、缺血15 min组、缺血30 min组),假手术组开胸后只穿线不结扎,其余各组开胸后分别结扎左冠状动脉前降支(LAD)7.5 min、15 min、30 min后行再灌注,术后检测大鼠心肌酶水平、心肌梗死面积、心功能情况,并行心肌病理检查。结果:与假手组比较,缺血7.5 min、15 min、30 min组血清心肌酶CK-MB含量均明显升高(P均0.05),缺血15 min、30 min组心肌梗死面积均明显增大(P均0.01);超声心动图示缺血7.5 min组心功能与假手术组相比无变化(P0.05),缺血15 min、30 min组心功能较假手术组均明显下降(P均0.05);心肌病理检查示各缺血组均有炎性细胞浸润,心肌结构损伤,缺血15 min、30 min组损伤更明显。结论:不同缺血再灌注时间对大鼠在体心肌损伤的影响不同。     

金属络合剂对离体大鼠心肌缺血后再灌注损伤…

本实验采用Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ离体大鼠心脏模型及电子自旋共振方法，检测金属络合剂去铁敏，青霉胺对心肌缺血后再灌注损伤的影响。结果显示：去铁敏，青霉胺可抑制心肌缺血后再灌注过程中自由基的产生，拮抗缺血对心肌组织的损伤。其机制可能为：金属络合剂抑制了依赖过渡型金属离子催化的Ｆｅｎｔｏｎ反应速度，减少羟基自由基的产生。     

诱导金属硫蛋白表达对大鼠体外心脏再灌注性心律失常的影响

目的探讨金属硫蛋白表达对大鼠体外心脏再灌注性心律失常的影响。方法将32只SD大鼠随机分成实验组、对照组,每组16只。Western blot法检测金属硫蛋白的表达;测定心肌丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)水平,心肌细胞膜Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性及冠状动脉流出液肌酸激酶同工酶(CK-MB)的漏出率。结果与对照组比较,实验组金属硫蛋白的表达增加;心室颤动及室性心动过速持续时间缩短,心律失常的积分减少;MDA降低,SOD、CAT、GSH-Px升高;Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶增加,CK-MB的漏出率减少(P<0.01)。结论金属硫蛋白表达增加可减少大鼠再灌注性心律失常,其机制可能与金属硫蛋白稳定细胞膜、抑制脂质过氧化及钙超载有关。     

诱导金属硫蛋白合成增强大鼠对心脏缺血再灌注损伤的抵抗

为探讨缺血预处理延迟保护作用的非缺血诱导方式，我们在离体大鼠心脏等容收缩灌流模型上观察到：24小时前腹腔注射ZnS4诱导心肌金属硫蛋白（MT）含量增高1．6倍；与单纯缺血再灌注组比较，诱导MT组显著减少了肌红蛋白漏出和MDA增加，减轻了心肌ATP耗竭，增强了左室做功能力，但不影响冠脉流量。因此我们认为，ZnSO4注射诱导MT合成，能代替缺血预处理，模拟出缺血预处理的延迟保护作用。     

离体大鼠心肌缺血后再灌注损伤及其保护

利用大鼠离体心脏缺血后再灌注模型,用顺磁共振谱仪检测自由基信号及线粒体比表面的测算,研究与比较金属硫蛋白及辅酶Q_(10)对缺血后再灌注损伤的保护作用。结果表明,这两种物质都有明显的细胞保护作用,而金属硫蛋白的清除氧自由基的能力更为明显。金属硫蛋白是个有希望的细胞保护剂。     

热休克蛋白70表达对离体大鼠缺血再灌注损伤心肌的保护作用

本实验旨在观察腹腔注射重酒石酸去甲肾上腺素 (NE)诱导大鼠心肌细胞中热休克蛋白 (HSP)的表达及其对缺血再灌注损伤 (I R)心肌的影响。一、材料和方法1 实验对象及分组 :3月龄Sprague Dawley大鼠2 4只 (由华中科技大学同济医学院动物中心提供 ) ,雌雄不拘 ,体重 2 5 0～ 32 0g ,随机分为 3组 :对照组、E12h组和E2 4h组 ,每组各 8只。2 实验方法 :( 1)对照组 :腹腔注射 0 4ml生理盐水 2 4h后取大鼠建立Langendorff灌注模型 ,平衡灌注 2 0min ,夹闭灌注管全心停灌 4 5min ,再灌注 1h ,其中再灌注 15min时取冠状窦流出液 2ml,冷冻储存…     

不同浓度曲美他嗪对缺血/再灌注大鼠离体心脏的保护作用

目的 明确曲美他嗪在缺血再灌注（I/R）大鼠离体心脏损伤中的保护作用,并寻找最佳的药物浓度。 方法 选取体质量介于（220～250） g的雄性健康SD大鼠,适应性喂养1周后,快速腹腔注射水合氯醛（100 mg/ml）和肝素（500 U/kg）。离体心脏正常灌注开始后,实验随机分为5组,正常对照组,I/R组,5 μmol/L,10 μmol/L和20 μmol/L曲美他嗪处理I/R组。实验全程采用Labchart软件记录左心室内压力的数值,左心室发展压(LVDP)和左心室舒张末压(LVEDP)评价左心室的收缩功能。检测各组心脏释放的乳酸脱氢酶（LDH）的含量,观察心肌梗死面积的变化,检测各组心肌组织中半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）的活性、细胞色素（cytochrome）C和有活性的半胱氨酸蛋白酶3（cleaved caspase-3）的蛋白表达水平。 结果 和I/R组比较,5 μmol/L TMZ处理 I/R组LVDP有升高,左室舒张末压有降低趋势;而10 μmol/L TMZ处理I/R组和20 μmol/L TMZ处理I/R组均能够明显增加LVDP,显著降低左室舒张末压（P<0.05）,但两组间比较无显著差异。和I/R组比较,5 μmol/L TMZ处理I/R组有降低心肌梗死面积、冠脉流出液中LDH的含量、caspase-3活性以及cytochrome c和cleaved caspase-3蛋白表达的趋势;而10 μmol/L TMZ处理I/R组和20 μmol/L TMZ处理I/R组均能够明显降低心肌梗死面积、冠脉流出液中LDH的含量、caspase-3活性以及cytochrome c和cleaved caspase-3的蛋白表达（P<0.05）,但两组间比较无显著差异。 结论 10 μmol/L和20 μmol/L曲美他嗪在I/R离体心脏中具有保护作用。     

不同浓度的乙醇对离体豚鼠心肌动作电位的影响

目的 观察不同浓度的乙醇对豚鼠心肌电生理特性的影响。方法 采用标准玻璃微电极细胞内记录技术,记录离体豚鼠心肌细胞的动作电位。观察12.5,25.0,50.0,100.0及200.0 mmol/L乙醇对心房肌和心室乳头肌动作电位各参数的改变。结果 12.5~100.0 mmol/L 乙醇对心室乳头肌细胞的细胞膜静息电位（RMP）、动作电位幅值（APA）、动作电位时程（APD）、AP复极至50%的时程（APD50）及AP复极至90%的时程（APD90）等参数无明显影响;而200.0 mmol/L乙醇可显著降低APA（P<0.05）,50.0~200.0 mmol/L乙醇可明显延长心房肌细胞APD,APD50和APD90（P<0.05或P<0.01）。结论 乙醇对离体豚鼠心房肌、心室乳头肌电生理特性的影响有着明显差异。心房肌APD的延长可能与心房肌中分布的特殊离子通道被阻滞有关。     

地塞米松对大鼠心肌缺血再灌注后细胞凋亡及金属硫蛋白表达的影响

目的观察地塞米松预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响并探讨其作用机制。方法32只SD大鼠随机分成地塞米松组(16只)和对照组(16只),分别给予地塞米松(0.8mg/kg)和蒸馏水腹腔注射。预处理24h后,构建体外心脏缺血再灌注动物模型,动态观测缺血前期及再灌注期左心室发展压(LVDP)、左心室压力最大上升和下降速率(±dp/dtmax)、冠状动脉流出量(CF);测定冠状动脉流出液肌酸激酶同工酶(CK-MB)的漏出率;TUNEL法检测心肌细胞凋亡;Westernblot法检测金属硫蛋白(MT)、Bcl-2及Bcl-xl蛋白的表达;免疫组织化学法测定半胱天冬酶-3(caspase-3)的水平。结果与对照组比较,地塞米松组大鼠再灌注期LVDP、±dp/dtmax及CF得到改善(P<0.05);CK-MB的漏出率明显降低[(8.69±4.16)U/gvs(18.15±5.59)U/g,P<0.01];心肌细胞凋亡指数(10.18±1.99)%vs(14.66±2.97)%和caspase-3水平明显减少[(18.66±5.15)%vs(27.93±6.23)%,P<0.01],Bcl-xl(4.74±0.66)vs(1.69±0.73)和MT的表达明显增加[(3.09±1.07)vs(1.03±0.02),P<0.05],Bcl-2无明显变化(P>0.05)。结论地塞米松预处理对大鼠缺血再灌注的心肌具有保护作用,上调MT表达及抑制细胞凋亡可能是其机制之一。     

金属硫蛋白与肝纤维化关系研究进展

金属硫蛋白（metallothionein，MT）广泛存在于人及动植物、微生物体内，参与微量元素的储存、转运和代谢；拮抗电离辐射；清除自由基、拮抗脂质过氧化、对生物膜具有保护作用；对重金属有解毒作用；与机体生长发育、延缓衰老及某些疾病发生有关。现就金属硫蛋白近年的研究成果及其与肝纤维化的关系作一综述。