青藤碱对豚鼠单个心室肌细胞膜钠,钙离子通道？…

应用膜片钳全细胞记录技术研究青藤碱对酶解分离的豚鼠单个心室肌细胞膜钠离子电流（ＩＮａ）,Ｌ型钙电流（ＩＣａ－Ｌ）的影响。发现１,５,１０μｍｏｌ／Ｌ的Ｓｉｎ分别使ＬＮａ峰值（ＩＮａｍａｘ）较用药前下降２３．２％,３６．１％和６０％（ｎ＝８,Ｐ均〈０．０５）,使ＩＣａ－Ｌ峰值（ＩＣａ－Ｌｍａｘ）较用药前下降１２．８％,３５．９％和４６．９％。     

青藤碱对豚鼠单个心室肌细胞膜钠、钙离子通道的阻滞作用

应用膜片钳全细胞记录技术研究青藤碱 (Sin)对酶解分离的豚鼠单个心室肌细胞膜钠离子电流 (INa)、L型钙电流 (ICa L)的影响。发现 1,5 ,10 μmol/L的Sin分别使INa峰值 (INamax)较用药前下降 2 3.2 %、36 .1%和 6 0 % (n =8,P均 <0 .0 5 ) ;使ICa L峰值 (ICa Lmax)较用药前下降了 12 .8% ,35 .9%和 46 .9% (n =8,P均 <0 .0 1)。Sin使INa及ICa L电流 电压曲线上移 ,但不使其峰值电位偏移。Sin还浓度依赖性减慢钠通道灭活后恢复过程。当刺激频率分别为 0 .5 ,1,2Hz时 ,5 μmol/LSin使INamax较用药前分别下降了 36 .1%、41.5 %和 48.0 % (n =8,P均 <0 .0 1)。结果表明 ,Sin对INa具浓度和频率依赖性阻滞作用 ,可能作用于其失活状态 ;Sin对ICa L具浓度依赖性阻滞作用。这可能为其抗心律失常的重要机制。     

心肌肽素对豚鼠心室肌细胞内向整流钾电流的影响

目的研究心肌肽素对豚鼠心室肌细胞内向整流钾电流(IK1)的影响,探讨心肌肽素抗心律失常的作用机制。方法用急性酶解法分离豚鼠心室肌细胞,用标准的全细胞膜片钳技术,观察不同浓度的心肌肽素对内向整流钾电流的影响。结果在测试电压100mV的条件下,观察豚鼠心室肌细胞IK1内向电流对心肌肽素的影响。10μg/ml心肌肽素使IK1从给药前21.0±6.3pA/pF降低到给药后18.4±5.4pA/pF(P<0.05),抑制率为(20±3)%。50μg/ml心肌肽素使IK1从给药前22.8±5.5pA/pF降低到给药后16.0±3.8pA/pF(P<0.01),抑制率为(32±6)%。50μg/ml心肌肽素没有改变IK1的电流密度电压曲线形态。结论心肌肽素抑制豚鼠心室肌细胞IK1,可能是其抗心律失常作用的机理之一。     

莲心碱对豚鼠心室肌细胞钙离子通道的阻滞作用(摘要)

莲心碱对豚鼠心室肌细胞钙离子通道的阻滞作用（摘要）赵颖＊李庚山△张永珍△梁爱玲△莲心碱（Ｌｉｅｎｓｉｎｉｎｅ，Ｌｉｅ）是从睡莲科植物莲（Ｎｅｌｕｍｂｏｎｕｃｉｆｅｒａｇａｅｒｔｎ）成熟种子的绿色胚芽中提取的一种生物碱，它具有比较广泛的抗实验性心律失常...     

乙酰胆碱对豚鼠支气管平滑肌细胞膜钙、钾通道的影响

目的　从电生理角度探讨乙酰胆碱 (Ach)在哮喘发病中的作用 ,为哮喘发病机制及治疗寻找理论依据。方法　用膜片钳技术观察了钙钾离子通道特性变化。结果　 (1 )静息跨膜电位差值降低。 (2 )钾通道开放时间常数的快慢成分下降到正常对照组的 30 1 7% ,1 9 1 7% ,开放概率下降到正常的 1 6 44%。 (3)钙通道开放时间延长到正常的 1 73倍 ,开放概率增加了 41 67%。结论　支气管平滑肌细胞的钙钾离子通道特性在炎性介质的作用下发生改变 ,是气道高反应性支气管痉挛的重要环节。     

盐酸关附甲素对豚鼠心室肌细胞膜钠通道的阻断作用

目的 研究盐酸关附甲素（GFA）对分离的单个豚鼠心室肌细胞钠电流（ⅠNa）的影响，旨在探讨其抗心律失常机制。方法 用急性酶解法分离获得单个豚鼠心室肌细胞。用标准的全细胞膜片钳技术记录离子通道电流，观察不同浓度的GFA对豚鼠心室肌细胞ⅠNa的影响。结果 在测试电压-20mV的条件下，50、150、500、750μmol／LGFA使ⅠNa峰值电流密度与用药前比较分别降低了24．24％±2．78％、42．84％±1．39％、61．23％±1．34％和100％±0，各浓度用药前后对比差异均有统计学意义，P〈0．05；GFA对ⅠNa半数抑制浓度（IC50）为184．38μmol／L150μmol／LGFA使ⅠNa的电流密度-电压（I-U）曲线上移，但不改变其激活、峰值和反转电位，不影响ⅠNa的稳态激活曲线；150μmol／LGFA使氏。的稳态失活曲线左移，即向更负的方向移动；150μmol／LGFA使ⅠNa的失活后恢复曲线明显右移，明显减慢钠通道失活后恢复过程；150μmol／LGFA抑制ⅠNa呈使用依赖性。结论 GFA在50～750μmol／L范围内对ⅠNa具有浓度依赖性阻滞作用，而且该作用具有使用依赖性；GFA对钠通道激活态无影响；GFA抑制ⅠNa是作用于失活态而发挥作用；GFA减慢钠通道失活后恢复过程。GFA对ⅠNa的阻滞作用为其抗心律失常作用的主要机制。     

内皮素对豚鼠心室肌细胞触发电活动的影响

应用玻璃微电极技术和膜片钳全细胞记录，研究出皮素（ＥＴ－１）致豚鼠心室肌细胞早期后除极（ＥＡＤｓ）的作用及发生机制。结果显示：５０ｎｍｏｌ／Ｌ ＥＴ－１灌流能明显延长动作电位时程ＡＰＤ５０，诱发ＥＡＤｓ。产生ＥＡＤｓ基础可能在于促进心室肌细胞Ｌ－型钙内流（Ｌ－Ｉｃａ），使稳态激活曲线左移，其作用呈浓度依赖性。     

小檗碱衍生物CPU86035对豚鼠心室肌钾离子通道的影响

目的观察小檗碱衍生物溴苄基四氢小檗碱(CPU86035)对豚鼠心室肌细胞钾离子流的影响,探讨其抗心律失常的离子通道机制。方法20只健康豚鼠,雌雄不拘,体重250-300 g,双酶法酶解获取单个豚鼠心室肌细胞,采取用药前后自身对照及全细胞膜片钳记录方法观察CPU86035 对正常豚鼠心室肌细胞快速激活延迟整流钾离子流(IKr)和缓慢激活延迟整流钾离子流(IKs)、内向整流钾离子流(IK1)的影响。结果CPU86035对豚鼠单个心室肌细胞快速激活(IKr)和缓慢激活延迟整流钾离子流(IKs)均呈浓度依赖性抑制作用,半数抑制浓度(ID50)分别为32μM和56 μM;CPU86035 对Ix1无明显影响。结论CPU86035对正常豚鼠心室肌细胞快速激活延迟整流钾离子流(Ikr)和缓慢激活延迟整流钾离子流(IKs)均有阻断作用,具有复合Ⅲ类抗心律失常药物的特点。     

氧化苦参碱对豚鼠心室肌细胞膜L-型钙通道的影响

研究氧化苦参碱 (Oxy)对豚鼠心室肌细胞膜L 型钙通道的影响 ,探讨Oxy在离子通道水平的药理作用机制。用急性酶解法分离豚鼠心室肌细胞 ,应用膜片钳全细胞记录技术 ,观察不同浓度的Oxy对L 型钙通道的影响。结果 :用 0 .0 1 ,0 .1 ,1 ,1 0 μmol/L可浓度依赖性地增加L 型钙电流 (ICa L)。在 0 .1 μmol/L时 ,给药后电流密度增加约 31 %(P <0 .0 1 ) ,可使心肌细胞钙电流 电压曲线下移 ,但激活电位、峰电位及反转电位无改变 ;Oxy使激活曲线向负电位方向变化 ,半数激活电压增加 ;对失活曲线无明显影响 ,未改变ICa L失活特性。结论 :Oxy可浓度依赖性和电压依赖性地增加心肌细胞膜L 型钙通道电流     

牛磺酸对低氧条件下豚鼠心室肌细胞内向整流钾电流的影响

目的:研究牛磺酸对低氧条件下豚鼠心室肌细胞内向整流钾电流(Ik1)的影响。方法:酶解法分离单个豚鼠心室肌细胞和建立离体低氧模型,采用全细胞膜片钳记录技术记录牛磺酸对急性低氧条件下豚鼠心室肌细胞Ik1的作用。结果:在钳制电压-40 mV下,给予20 mmol/L牛磺酸使Ik1的电流峰值降低,抑制率(45.61±10.70)%;洗脱后,Ik1能够部分恢复(P<0.05)。牛磺酸影响了Ik1的电流-电压曲线。结论:牛磺酸可明显阻滞低氧条件下豚鼠心室肌细胞膜上Ik1电流,这可能是其抗心律失常作用的电生理机制之一。     

低渗性肿胀对豚鼠心室肌细胞动作电位及延迟整流钾电流的影响

观察单个豚鼠心室肌细胞动作电位和主要复极期电流延迟整流钾电流(IK)的变化,探讨急性心肌缺血再灌注室性心律失常发生的离子机制。采用全细胞膜片钳记录技术,观察低渗液(200mOsm/kg)灌流胶原酶分离的单个豚鼠心室肌细胞发生肿胀后的动作电位各参数的变化,同时记录IK及其快、慢两种激活成分(IKr及IKs)的变化。结果:低渗液灌流后心室肌细胞迅速发生肿胀,动作电位幅度(APA)、静息膜电位(RMP)及阈电位水平无明显变化;而动作电位时程(APD)在600,1000和3000ms三种基础起搏周长(BCL)刺激时均缩短(P<0.05),尤以APD复极达50%和90%时缩短更为明显。APD生理性频率适应性消失且离散度增大。低渗性肿胀状态下IK电流幅度在3000ms长去极化保持时间(主要成分为IKs)刺激时从1134.33±150.17pA增加至1621.98±234.95pA(P<0.001,n=10);而在100ms短去极化保持时间(主要成分为IKr)刺激时从693.44±96.44pA降低至294.06±71.79pA(P<0.05,n=8);并且使IK的IV曲线向上移位。结论:低渗性肿胀的心室肌细胞IK特别是IKs的增加是引起APD缩短的重要因素,是急性心肌缺血再灌注室性心律失常发生的离子机制之一。     

利多卡因对离体大鼠心室肌细胞内向整流钾电流的影响

目的研究利多卡因对大鼠心室肌细胞内向整流钾电流的影响,探讨局麻药毒性反应中利多卡因导致心率变慢是否与抑制Ikl有关。方法酶消化法急性分离大鼠心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术,记录不同浓度利多卡因对大鼠心室肌细胞内向整流钾电流的影响并做出浓度效应曲线,求得其半数抑制浓度。结果保持电压-40 mV,钳制电压-120 mV条件下,局麻药毒性反应浓度的利多卡因100μmot／L使Ikl的电流幅值降低(21．1±7．4)％(P<0．05),但不改变Ikl翻转电压以及电流-电压曲线的形状;冲洗后,Ikl能够完全恢复。500,1000,5000μmoL／L的利多卡因抑制Ikl电流呈浓度依赖性,电流抑制率分别为(32．4±5．7)％,(71．8±8．9)％,(84．5±4．9)％,其IC50为1426．4μmoL／L。结论局麻药毒性反应中,利多卡因呈浓度依赖性抑制大鼠心室肌细胞Ikl,可能延长动作电位时程导致心率变慢。     

当归提取液对豚鼠心室肌细胞钠、钙离子通道的影响

应用膜片钳全细胞记录技术观察当归提取液（ＥＡＳ）对酶解分离的单个豚鼠心室肌细胞膜钠通道电流（ＩＮａ）、Ｌ型钙通道电流（ＩＣａ－Ｌ）的影响。当ＥＡＳ为１３２，１１６和１８时，使ＩＮａ峰值（ＩＮａｍａｘ）从６．９８±１．３２ｎＡ分别降至５．７７±１．３３，５．２８±１．１５和３．８２±１．４５ｎＡ（ｎ＝６，Ｐ＜０．０１）；使ＩＣａ－Ｌ的峰值（ＩＣａ－Ｌｍａｘ）从１００５．０±１９６．５ｐＡ分别降至８８０．１±１０５．８，５９７．０±１１０．５和３６４．２±９８．３ｐＡ（ｎ＝６，Ｐ＜０．０１）。ＥＡＳ使ＩＮａ、ＩＣａ－Ｌ的电流－电压曲线上移，但均不改变其激活、峰值和反转电位。以上结果表明ＥＡＳ对ＩＮａ和ＩＣａ－Ｌ具浓度依赖性阻滞作用，这可能是ＥＡＳ具有某些药理效应的离子基础。     

The Effect of Extrogenous Phosphocreatine on L-type Calcium Current in Ischemic Guinea Pig Ventricular Myocytes

Objectives Heart failure （HF） is one of the most common outcome for all kinds of heart diseases, the effects of energetic therapy on HF remains controversial, especially to ischemic HF. The aim of this study was to explore the effect of exogenous phosphocreatine with different concentration on L-type calcium（I Cc-L） current in ischemic ventricular myocytes of guinea pig and to investigate its underlying electrophysiological mechanism for the treatment of ischemic HF. Methods Single ventricular myocytes were isolated enzymatically from left ventricle of guinea pig. Peak I Ca-L current were recorded using patch clamp techniques in the whole-cell configuration when myocytes had been superfused with normal Tyrode solution, simple ischemic solution, ischemic solution containing phosphocreatine with different concentration for 10 minutes respectively. Results Peak I Ca-L current density of myocytes superfused with simple simulated ischemic solution was remarkably inhibited by 80.6 ± 5.2% compared with myocytes superfused with normal Tyrode solution（P〈0.05）. Ischemic solution containing phosphocreatine of 5, 10, 20, 30mmol/L inhibited Peak I Ca-L current density by （53.8±6.7）%, （41.8 ± 8.2）%, （38.1±7.4）%, （36.6±9.7）% respectively. There was no statistical significance among phosphocreation of 10, 20, 30 mmol / L. Conclusions Extrogenous phosphocreatine could reverse the inhibition of I Ca-L current under ischemic condition, which could be the ionic basis for the treatment of ischemic heart failure. 0-10 mmol/L phosphocreatine exerted significant dose-effect relationship which no longer existed as concentration more than 10 mmol/L. It is supposed that phosphocreatine increased I Ca-L current by many pathways rather than simple substrate for ATP synthesis.     

肺静脉肌袖心肌细胞短暂外向钾电流特性研究

研究单个肺静脉肌袖心肌细胞短暂外向钾电流 (Ito)特性 ,探讨其在肺静脉电活动触发心房颤动 (AF)中的作用。采用全细胞膜片钳技术记录并比较单个肺静脉肌袖心肌细胞与心房心肌细胞Ito及其动力学特性。在各指令电位下 ,两种心肌细胞Ito电流大小、稳态激活与失活动力学特性无显著性差异 ,异丙肾上腺素灌注后 ,前者Ito减小 ,后者Ito增大 ,指令电位在 +5 0mV时 ,前者由 4 .4 5± 0 .71nA减少到 3.4 7± 0 .4 0nA(P <0 .0 5 ,n =6 ) ,后者由 4 .5 1±0 .75nA增加到 5 .35± 0 .5 9nA(P <0 .0 5 ,n =6 )。结论 :异丙肾上腺素使肺静脉肌袖心肌细胞与心房心肌细胞Ito产生异质性 ,并因此影响细胞的电生理特性 ,此可能是参与AF发生的电生理基础之一     

人右心室心外膜下细胞瞬间外向钾电流的初步研究

两例终末期心脏来源于心脏移植的受体病人 ,用酶解分离法获得心外膜下 (Epi)细胞 ,在全细胞钳制条件下观察人右心室Epi细胞瞬间外向钾电流 (Ito1 )的电生理特性。结果发现 :①Epi细胞具有强大的Ito1 ,在 0 .2Hz、+70mV和 37℃条件下 ,Epi细胞的峰值Ito1 离子流强度和密度分别达 1 940± 440pA、1 2 .9± 2 .6pA/pF ;②温度对Ito1 强度的影响明显 ,在 +70mV、0 .2Hz、2 2℃和 37℃条件下 ,Epi细胞峰值Ito1 强度和密度分别为 1 1 90± 31 0pA和 7.7±1 .8pA/pF、1 960± 465pA和 1 3 .1± 2 .8pA/pF ,差异有显著性 (P均 <0 .0 1 ) ;③Epi细胞Ito1 离子流强度表现出明显的频率依赖性 ,在 37℃和 +70mV、刺激频率分别为 0 .2 ,0 .5 ,1和 2Hz时 ,Epi细胞Ito1 离子流强度分别为 1 91 0±42 0 ,1 660± 360 ,1 4 1 0± 2 50 ,830± 1 4 0pA ,差异均有显著性 (P均 <0 .0 1 )。结论 :人右心室Epi细胞存在强大的Ito1 ,此为人右心室Epi细胞复极 1期一个突出的电生理特点 ,可能是Brugada综合征等疾病所致恶性心律失常的重要离子基础之一。