NMP238,HSP70在宫颈鳞癌中的表达及意义

目的探讨NMP238和HSP70在宫颈鳞状细胞癌组织中的表达及意义。方法收集60例病理确诊的宫颈鳞癌标本为试验组,取同时期因子宫肌瘤手术切除的正常宫颈组织30例作为对照。应用免疫组化S-P法检测癌组织及对照组中NMP238,HSP70的表达。统计分析方法采用χ2检验和pearson相关分析。结果NMP238,HSP70在宫颈鳞癌组的阳性表达率分别为85%,71.7%;正常组织分别为43.3%和33.3%。两者在鳞癌组与对照组中的表达差异有显著性(P<0.05);宫颈鳞癌组织中NMP238和HSP70的阳性表达在不同病理分级、临床分期中差异均无显著性(P>0.05),在鳞癌组中,NMP238,HSP70的表达呈显著正相关(P<0.05)。结论宫颈鳞癌中存在NMP238,HSP70的异常表达,表明宫颈鳞状细胞癌的发生发展与NMP238,HSP70的异常表达有关。且两者在宫颈鳞癌组织中表达呈显著正相关(P<0.05),提示二者对宫颈鳞癌的发生、发展可能有协同作用。     

HSP70 siRNA对宫颈癌HeLa细胞HSP70表达及细胞增殖与凋亡的影响

目的通过体外实验观察HSP70的小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对宫颈癌HeLa细胞株增殖及凋亡的影响,探讨HSP70在HeLa细胞增殖和凋亡中的功能。方法针对HSP70基因设计siRNA序列,克隆到空载体pTZU6+1中,转化DH5α菌株,提取质粒,进行酶切鉴定和测序分析。在脂质体2000的介导下转染HeLa细胞,同时转染空载体为阴性对照及不加任何试剂的空白对照。转染48h后,应用半定量RT-PCR,Westernblot检测HeLa细胞HSP70mRNA及蛋白的表达情况;MTT法检测HeLa细胞的生长抑制率;AO/EB染色法观察HeLa细胞形态学变化;流式细胞术检测HeLa细胞的凋亡率和细胞周期分布情况。结果与对照组相比,转染pHSP70-siRNA组HSP70的mRNA及蛋白表达均明显下降(P<0.01),表明Phsp70-siRNA质粒转染能有效降低HSP70的表达;细胞生长抑制率明显增高(P<0.05),且在48h时细胞抑制率达到最大;在荧光显微镜下观察到HeLa细胞出现凋亡形态;流式细胞术结果显示pHSP70-siRNA组细胞凋亡率显著高于对照组,且G0/...     

食管鳞癌组织中热休克蛋白70(HSP70)及其mRNA的表达研究

目的 探讨食管鳞癌及正常食管黏膜组织中热休克蛋白70(HSP70)的表达状况及其意义.方法 取食管鳞癌手术切除标本33例,液氮保存.提取新鲜组织中的蛋白质western blotting检测HSP70蛋白的表达;RT-PCR方法检测HSP70 mRNA的表达,应用Image Tool 3.0图像分析软件对检测结果进行定量分析.结果 食管鳞癌中HSP70 mRNA和蛋白阳性表达率分别为100%和93.9%.与食管正常黏膜相比明显升高(分别为69.7%和45.5%);食管鳞癌组织和正常食管黏膜中的HSP70 mRNA的相对表达量分别为(1.35±0.21)和(0.73±0.19),差异有显著性(P<0.01);HSP70蛋白表达与食管鳞癌淋巴结转移相关,与年龄、性别和浸润深度无关.结论 食管鳞癌组织中HSP70表达水平明显升高,且与淋巴结转移相关,HSP70基因可能参与了食管鳞癌的发生、发展过程.     

精氨酸对热暴露小鼠肝脏HSP70表达的免疫组化研究

用免疫组织化学方法研究了热习服小鼠42℃热暴露50min恢复期0－24h肝脏热休克蛋白70（HSP70）表达的动态变化及L－精氨酸干预的热处理小鼠42℃热暴露50min后恢复期8h肝脏HSP70的表达。结果：（1）HSP70主要定位于肝脏胞质，细胞核中较少；（2）HSP70在热应激后8－12h达高峰；（3）精氨酸对热处理小鼠肝脏HSP70的表达有增强作用。     

子宫内膜癌中HSP70的表达及其与ER、PR相关性探讨

目的：为探讨ＨＳＰ７０与子宫内膜癌预后的关系，肿瘤细胞有ＨＳＰ７０的高度表达。方法：用免疫组化ＡＢＣ法分别检测４４例子宫内膜癌组织ＨＳＰ７０、ＥＲ和ＰＲ的表达。结果示内膜癌ＨＳＰ７０表达阳性率为５６．８２％，ＨＳＰ７０随肿瘤细胞分化程度降低ＨＳＰ７０表达升高。结果：内膜癌ＨＳＰ７０表达与ＰＲ呈明显负相关。结论：ＨＳＰ７０与ＰＲ联合有可能成为内膜癌预后判断的有效指标之一。     

鼻咽癌放疗残灶中HSP70/HSP27蛋白的表达

目的：分析鼻咽癌原发组织HSP70/HSP27蛋白表达与放疗残灶的相关性,探讨HSP70/HSP27表达对鼻咽癌放疗残灶的预测价值。方法：应用SP免疫组织化学法检测58例鼻咽癌原发组织HSP70/HSP27热休克蛋白表达,其中规范放疗后有残存癌灶的28例鼻咽癌为实验组,随访5年无癌灶复发的30例为对照病例。结果：HSP70和HSP27在实验组阳性表达率分别为92.9％(26/28)和53.6%(15/28),而在对照组的阳性表达率为53.3％(16/30) 和53.3%(16/30),HSP70阳性表达率在两组间比较有统计学差异(P<0.05),而HSP27阳性表达率在两组间比较无统计学差异(P>0.05);HSP70和HSP27在实验组共同阳性表达率为50.0%(14/28),对照组为16.7%(5/30),两者比较有统计学差异(P<0.05);两者共同阴性表达率在实验组和对照组分别为3.6%(1/28) 和10.0%(3/30),两者相比无统计学差异（P>0.05）。结论：HSP70在鼻咽癌抗放射损伤中可能起重要作用,检测鼻咽癌组织HSP70蛋白表达对预测鼻咽癌放射后癌灶残存可能有重要价值。     

原发性肾细胞癌中HSP70与MDR1/P-gp的表达及其与预后的关系

目的 :研究原发性肾细胞癌组织中HSP70 和多药耐药基因 1(MDR-1/P gp)的表达情况并分析其与预后的关系。方法 :应用免疫组化SP法检测HSP70 和MDR1/P gp的表达情况。结果 :5例正常肾组织中均可见到HSP70和MDR1/P gp的表达。 6 0例原发性肾细胞癌中HSP70 和MDR1/P gp的阳性率分别为 5 5 %和 71.6 7% ,二者的表达与组织学类型、临床分期无关 ;与分级呈负相关 ,即分级越高 ,表达越低 ;与预后呈正相关 ,阳性表达预后好于阴性表达者 ;HSP70 和MDR1/P gp之间存在相关性。结论 :HSP70 和MDR1/P gp在肾细胞癌中高表达 ,二者可作为判断预后的指标。     

RNAi沉默HSP70基因对宫颈癌HeLa细胞的影响

目的:本研究初步探讨RNAi技术应用于宫颈癌基因治疗的特异性及其作用机理。方法:设计靶向HSP70基因siRNA序列,构建重组表达载体pTZU6+1-siRNA-HSP70,在脂质体介导下瞬时转染宫颈癌HeLa细胞,在体外诱导RNAi沉默HSP70基因,同时设转染空载体pTZU6+1为阴性对照组和不加任何试剂的空白对照组。采用RT-PCR和Western blotting方法检测实验组和对照组中HSP70表达;MTT法检测细胞生长与增殖;流式细胞术检测细胞的凋亡率和细胞周期分布。结果:与对照组相比,实验组转染HeLa细胞后,细胞的HSP70 mRNA和蛋白表达均明显下调(P<0.01);细胞生长抑制率增高(P<0.05);细胞周期相分布发生变化。结论:siRNA明显抑制HSP70的表达及宫颈癌HeLa细胞的增殖,并引起细胞凋亡和细胞周期改变,为进一步研究HSP70基因在宫颈癌细胞凋亡中的作用及其机制奠定了基础。     

同步热放化疗对宫颈癌组织C-myc、HSP70蛋白表达的影响

目的:研究同步热放化疗治疗宫颈癌的疗效及其对宫颈癌组织C-myc、HSP70蛋白表达的影响.方法:将40例宫颈癌Ⅲb期随机分为同步热放化疗组(H+CRT组)和同步放化疗组(CRT组),观察比较局部肿瘤消退情况和1,2,3年无进展生存期;采用免疫组化法检测两组治疗前、中宫颈肿瘤组织中C-myc、HSP70蛋白表达.结果:在完成体外照射45Gy时H+CRT组局部肿瘤完全消退率高于CRT组(P＜0.05),但两组患者的1,2,3年无进展生存期差异无统计学意义(P＞0.05).在治疗前,两组C-myc、HSP70蛋白阳性表达强度差异均无统计学意义(P＞0.05).在治疗中,H+CRT组较CRT组的C-myc蛋白阳性表达强度减弱(P＜0.05);H+CRT组较CRT组HSP70蛋白阳性表达强度增强(P＜0.05);H+CRT组治疗中较治疗前HSP70蛋白表达强度增强(P＜0.05).结论:热疗与同步放化疗具有协同增强作用,但1,2,3年无进展生存期无差异.热放化疗能减弱C-myc蛋白阳性表达强度;可以上调HSP70蛋白阳性表达强度.同步热放化疗是否通过干扰肿瘤细胞HSP70通路诱导或对抗凋亡,有待进一步研究.     

抑制热休克蛋白70表达可增强宫颈癌细胞对顺铂化疗的敏感性

目的 探讨抑制宫颈癌Hela229细胞内热休克蛋白(HSP)70表达对顺铂(DDP)化疗敏感性的影响.方法 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)及集落克隆法测定各因素对Hela229细胞的抑制作用;溴化丙啶(PI)单染法及DAPI检测细胞的凋亡率;JC-1染色法测定线粒体膜电位(△Ψm)的变化;Western blotting测定相关蛋白的表达;建立裸鼠动物模型测定各因素体内的抑瘤作用.结果 宫颈癌细胞较正常宫颈细胞高表达HSP70;当HSP70抑制剂与顺铂合用,细胞的存活率较单用顺铂显著下降(P<0.01);PI与DAPI染色实验表明HSP70抑制剂能增加顺铂诱导的细胞凋亡率;JC-1染色结果显示,HSP70抑制剂处理后顺铂组细胞线粒体膜电位发生了明显的降低.Western blotting实验结果显示HSP70蛋白表达抑制剂与顺铂合用较单用顺铂显著增加促凋亡蛋Bax/caspase-3表达及caspase-3活化;明显降低抑制凋亡相关蛋白Bcl-2表达.裸鼠移植肿瘤模型结果表明HSP70抑制剂与顺铂合用能增强顺铂对模型小鼠肿瘤的抑制作用(P<0.01).结论 抑制HSP70表达可增强宫颈癌细胞对顺铂的敏感性,机制可能是通过抑制HSP70,进而调节凋亡相关蛋白的表达,促进宫颈癌细胞凋亡.HSP70有望成为宫颈癌基因治疗的一个新靶点.     

热休克蛋白70和热休克蛋白27在宫颈鳞癌中的表达及其意义

目的探讨热休克蛋白70(HSP70)和热休克蛋白27(HSP27)在宫颈鳞癌中的表达及其相关性。方法应用免疫组织化学方法检测HSP70、HSP27在60例宫颈鳞癌,18例宫颈上皮内瘤变(C IN),7例正常宫颈组织中的表达。结果宫颈鳞癌组织中HSP70,HSP27阳性表达率与正常宫颈组织相比差异有统计学意义(P<0.05);宫颈鳞癌中HSP70的阳性表达与病理分级、临床分期、淋巴结转移密切相关(P<0.05),HSP27的阳性表达与病理分级密切相关(P<0.05);HSP70与HSP27在宫颈鳞癌中的表达无相关关系(P>0.05)。结论HSP70、HSP27均在宫颈鳞癌发生和发展中起重要作用,HSP70可能作为判断宫颈癌预后的重要指标。     

S100A9和NMP238在同时放化疗 敏感性不同宫颈癌中的表达及意义

目的：初步探讨钙结合蛋白A 9（S100A9）和核质蛋白238（NMP238）的表达在宫颈癌同时放化疗敏感性中的意义。方法：收集治疗前的中晚期宫颈癌组织标本,置-80 ℃超低温冰箱中保存,病理诊断均为中分化鳞癌。在进行同时放化疗后,根据世界卫生组织实体瘤疗效判断标准,将收集的宫颈癌组织标本分为高敏感组和低敏感组。提取组织总蛋白,进行双向凝胶电泳和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）分析鉴定差异表达蛋白。然后分别应用 Western印迹和免疫组织化学方法检测组织中的蛋白表达。 结果：筛选得到在同时放化疗敏感性不同宫颈癌组织中差异表达蛋白S100A9和NMP238, S100A9蛋白在高敏感组中高表达,NMP238在低敏感组中高表达。Western印迹检测结果与蛋白质组学结果一致。免疫组织化学结果显示S100A9在高敏感组中的表达强度和表达率（88.3%)均显著高于低敏感组（28.6%),NMP238在低敏感组中的表达强度及表达率（35.0%)显著高于高敏感组（85.7%)。 结论：S100A9和NMP238的表达与宫颈癌同时放化疗敏感性有关,可能作为同时放化疗敏感性预测的标志物。     

不同切肝量的大鼠血清HSP70变化及其意义

目的 探讨大鼠血清HSP70在评价手术创伤程度中的意义.方法 建立大鼠不同切肝量的手术创伤模型,310只雄性SD大鼠随机分为正常组、轻度切肝创伤组、中度切肝创伤组、重度切肝创伤组及谷氨酰胺干预组,并予术后2、8、12、24和48 h检测大鼠血清中HSP70、皮质醇的浓度和肝功能的变化.结果 手术创伤后2 h血清HSP70表达开始增加,12 h达到高峰,48 h仍高于正常水平.血清皮质醇于术后2 h迅速增加,8 h达到高峰,24 h仍有较高浓度,48 h略高于正常.谷氨酰胺干预后,HSP70在各时相点均增高,皮质醇浓度均有所下降.中、重度切肝手术创伤组术后的ALT、TB均出现异常,经谷氨酰胺干预后两指标均有所改善.结论 手术创伤可以引起血清HSP70和皮质醇浓度的明显升高,随着创伤程度的增加而显著升高.血清中检测HSP70的表达可以作为判断手术创伤程度的指标.术前诱导HSP70的高表达有利于增强时机体的保护作用.     

不同切肝量对大鼠肝脏HSP 70表达的影响

目的探讨大鼠肝脏HSP70在评价手术创伤程度中的意义。方法建立不同肝切量的大鼠创伤模型,160只健康雄性SD大鼠随机分成正常对照组及轻度、中度、重度创伤组,采用western blotting方法,动态观察各创伤组术后2、8、12、24、48 h肝组织中HSP70的表达情况。结果各创伤组伤后HSP70的表达迅速增加,8 h达到峰值后逐渐下降,48 h降至正常水平,随着肝切量的增多这种变化更加明显。结论手术创伤后肝组织HSP70表达升高,于8 h达到峰值,提示HSP70可能是创伤后早期参与肝细胞损伤机制启动的一个重要因素。随着肝切量的增加,HSP70的表达增高,提示HSP70的表达可作为判断肝脏手术创伤程度的一个指标。     

HSP70在内毒素休克大鼠胰腺的表达及其意义

目的:观察内毒素休克大鼠胰腺的病理改变及HSP70的表达情况.方法:33只健康Wistar大鼠随机分为对照组、内毒素小刑量组(5 mg/kg)及大剂量组(10 mg/kg),于处理后1 h及处死时采血测血糖及血清淀粉酶,处死后取胰腺免疫组化法测定HSP70及INs的表达.结果:内毒素休克大鼠血糖及血清淀粉酶正常(P＞0.05);胰腺组织HSP70表达增强,处理组与对照组比较强阳性表达率明显增高(P＜0.01);小剂量组的强阳性率又较大剂量组显著增强(P＜0.01).3组的Ins表达率无显著差异(P＞0.05).结论:内毒素可诱导胰腺HSP70的表达增强,从而使胰腺产生内毒素耐受.     

热消融对甲状腺良性结节组织内HSP70表达的影响

目的探讨甲状腺良性结节射频消融后组织内热休克蛋白70(heat shock protein,HSP70)表达的变化及其潜在意义。方法对50枚甲状腺良性实性结节实施超声引导下射频消融治疗,设定结节的中央区、边缘区和过渡区,于消融前后对应各穿刺取材1次,采用免疫组织化学染色法半定量测定其内HSP70的表达,对比消融前后及消融后不同区域HSP70的表达差异。结果 50枚甲状腺实性结节中央区和边缘区HSP70的表达在消融前、后无明显差异,过渡区HSP70的表达消融后强于消融前(P<0.05);消融治疗后HSP70的表达存在过渡区强于中央区和边缘区(P<0.05),而中央区与边缘区无明显差异。结论热消融治疗过程中存在甲状腺结节周围过渡区HSP70高表达,这可能有助于保护正常腺体组织免受热损伤。     

热休克蛋白70,p53,Bcl-2在宫颈癌组织中的表达及相关性研究

目的探讨宫颈癌组织中热休克蛋白70(HSP70),p53,Bcl-2的表达及相关性研究。方法采用免疫组织化学SP法对46例宫颈癌组织和26例正常组织进行HSP70,p53和Bcl-2基因蛋白检测。结果HSP70,p53和Bcl-2基因蛋白在宫颈癌组织中的表达率显著高于正常对照组(P<0.01);HSP70和p53在宫颈癌组织中的表达呈显著正相关(rS=0.659,P=0.000);HSP70和Bcl-2及p53和Bcl-2在宫颈癌中的表达显著无相关(rS=0.100,P=0.508;rS=0.184,P=0.221)。结论HSP70,p53和Bcl-2的表达与宫颈癌的发病有密切关系,HSP70蛋白和p53蛋白与宫颈癌生物学行为有关,具有显著的相互协同作用。     

重度妊高征胎盘组织细胞凋亡与HSP70, bax的表达

目的: 观察重度妊高征(SPIH)胎盘组织细胞凋亡现象,研究热休克蛋白70(HSP70)及bax在胎盘组织细胞凋亡中的作用.方法: 随机选取SPIH患者及正常晚孕胎盘组织各25例,用光镜、电镜观察细胞凋亡现象.免疫组化观察HSP70, bax在正常妊娠及SPIH胎盘组织中的表达,Western blot检测HSP70在二者之间的蛋白表达差异. 结果: 在晚孕胎盘组织中可见到凋亡细胞,SPIH组细胞凋亡发生率的中位数及四分位数范围为0.36 %(0.20%-0.46%),正常对照组为0.15%(0.09%-0.21%).二者之间有显著性差异(P<0.05). HSP70在SPIH组与对照组的阳性表达率分别为100%和93%,无显著性差异.但在表达强度上有明显的差别(P<0.01).Western blot的结果显示HSP70在SPIH胎盘组织中的表达增强.bax在SPIH组的阳性率为84%,对照组为43%,有显著性差异(P<0.01).结论: SPIH胎盘组织细胞凋亡增多与bax的表达上调有一致性;HSP70不能抑制胎盘细胞凋亡,可能对胎盘的组织细胞有保护调节的作用.