角膜碱烧伤自由基与超氧化物歧化酶实验研究

实验观察兔角膜碱烧伤后角膜组织中脂质过氧化反应与碱烧伤的关系。结果显示，烧伤3天、14天出现角膜中丙二醛含量明显高于正常角膜，P＜0．05。此期内，角膜组织中超氧化物歧化酶活性显著下降，P＜0．01。提示，烧伤后超氧自由基及其代谢产物是造成碱烧伤后组织病理损伤的主要因素之一，超氧化物歧化酶活性相应降低，进一步加重自由基对组织的损伤。     

免角膜碱烧伤后角膜超氧化物歧化酶与电子自旋共振波谱的变化

角膜碱烧伤一直是眼科领域的主要研究课题之一。随着分子生物学的发展,自由基和碱烧伤后病理改变的关系受到了不少学者的关注。利用自由基清除剂或抗氧化剂对动物进行实验性治疗已取得初步效果。但是对烧伤后角膜自由基清除酶——超氧化物歧化酶和角膜电子自旋共振波谱变化的研究尚未见报道。本实验的目的即在这方面做初步探索。材料与方法一、动物模型建立:实验选择新西兰白色家兔,体重2～3公斤,健康无眼病.15％噻胺酮肌注麻醉,每公斤体重15～20mg。取9mm直径滤纸圆片,于2NNaOH溶     

超氧化物歧化酶在角膜碱烧伤中应用的实验研究

本文报导了铜－锌超氧化物岐化酶在角膜碱烧伤中应用的实验结果，指出此药物通过清除自由基加速溃疡愈合，促进上皮修复。阐明了碱烧伤后自由基含量增高及对角膜的破坏作用。     

兔角膜碱烧伤后角膜微量元素的变化

以原子吸收光谱法观察了兔眼角膜严重碱烧伤后角膜铜、锌、钙和镁元素含量的变化及实验治疗的影响。结果角膜烧伤后各治疗组(综合治疗组和甲孕酮组)及对照组角膜中各元素含量均显著增加,一般在1～2周时达高峰,与角膜病变过程和程度相一致。讨论了微量元素在碱烧伤角膜的损伤修复过程中的可能作用。     

超氧化物歧化酶在角膜感烧伤中应用的实验研究

本文报导了铜－锌超氧化物歧化酶在角膜碱烧伤中应用的实验结果。提出此药物通过清除自由基加速溃疡愈合，促进上皮修复。阐明了碱烧伤后自由基含量增高及对角膜的破坏作用。     

大鼠角膜碱烧伤后视网膜丙二醛含量及超氧化物歧化酶活性的变化

目的研究严重眼前段碱烧伤后视网膜组织中丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性的改变。方法Wistar大鼠双眼角膜用1mol／L NaOH溶液烧伤30秒，分别于烧伤后1、3、7、15和30天处死动物，摘除眼球，制作视网膜组织匀浆，检测MDA含量和SOD活性。以正常大鼠作对照。结果碱烧伤后视网膜组织中MDA含量逐渐升高，7天达顶峰，以后逐渐下降，30天时接近正常；SOD活性在碱烧伤后即开始下降，7天时最低，以后逐渐升高，30天时接近正常。结论严重眼前段碱烧伤后视网膜组织中可能存在脂质过氧化反应，其结果将加重视网膜组织的损伤。     

兔角膜碱烧伤后泪液中胶原酶含量变化

目的　观察兔角膜碱烧伤后形态学变化与泪液中胶原酶含量变化间的关系。方法　用兔角膜碱烧伤模型观察角膜形态变化,并测定泪液中所含胶原酶量。结果　碱烧伤后ｄ１ 至ｄ４ 泪液中的胶原酶含量逐渐上升,尔后逐渐下降,至后期又有所上升。结论　角膜碱烧伤后泪液中胶原酶的含量变化与角膜碱烧伤后形成的上皮缺损面积呈正相关。     

兔角膜碱烧伤后不同时期的组织病理学变化

目的：通过动物角膜碱烧伤模型，观察烧伤后不同时期角膜组织病理学的变化。方法：新西兰白兔36只，制作角膜中央部中度碱烧伤模型并依据取材时间完全随机分为12组：分别于烧伤后1，2，3，5，7d；2，3，4，5，6，7，8wk取材，做光镜、电镜观察。结果：角膜碱烧伤后1wk内上皮即修复，但2～3wk再次脱落，炎症细胞2wk后开始浸润，中期PMN较多，晚期淋巴细胞较多。结论：角膜碱烧伤后碱性物质的直接损害，MMP，及免疫反应均参与了对角膜的损害。     

兔前眼部碱烧伤机理的实验研究

兔前眼部碱烧伤后４小时、２４小时和７２小时，房水中丙二醛含量与正常相比明显升高（４小时Ｐ＜０．００１，２４小时和７２小时Ｐ＜０．０５）；ＳＯＤ活力与正常相比明显下降（各时间组Ｐ均＜０．０１）。提示超氧自由基及其代谢产物是导致碱烽伤后组织病理损伤的关键因素。这一次发现有助于指导碱烧伤的治疗。     

牛眼组织中的自由基测定

使用顺磁共振仪,测定比较了真空低温条件下冻干的正常牛眼7种组织中的自由基含量。结果显示,从7种组织中均获得了明确的自由基信号(g因子=2.0048),但不同眼组织中的自由基含量差异颇大。每克干重的虹膜、睫状体、脉络膜、巩膜、视网膜、角膜和晶状体之自由基含量依次为1.74(±0.27)×10~(16)自旋数(N)、1.71(±0.18)×10~(16)N、1.54(±0.23)x10~(16)N、1.00(±0.09)×10~(15)、7.29(±1.43)×10~(14)N,4.45(±0.92)×10~(14)N和1.06(±0.16)×10~(14)N。     

电子自旋共振法检测氩激光光凝后兔视网膜自由基及SOD和丹参的作用

采用电子自旋共振法(ESR)检测了氩激光光凝后视网膜的自由基。12只家兔分为正常、对照、超氧化物歧化酶(SOD)和丹参治疗组。光凝后视网膜组织的ESR 信号积分值明显高于正常组、SOD 组和丹参组,但后两组间无显著差异。提示激光视网膜凝固直接产生大量自由基,SOD 和丹参可部分减低自由基的产生。     

碱烧伤角膜病理学观察及计算机图像分析

对实验性兔角膜碱烧伤做了角膜病理组织学观察,并应用计算机图像分析技术对角膜切片的不同部位进行细胞核数目及细胞核面积的定量分析。很好地显示了角膜基质中炎细胞浸润和纤维细胞增殖的程度,并对综合治疗及甲孕酮治疗组与对照组进行比较,证实对照组炎细胞浸润重,综合治疗组纤维细胞增生活跃,甲孕酮组炎细胞及纤维细胞数目均少。文中讨论了实验治疗的可能作用机理。     

兔角膜碱烧伤后房水及血浆纤维连接蛋白含量变化的观察

采用单向琼脂免疫扩散法,对实验性兔角膜碱烧伤后房水及血浆纤维连接蛋白(简称FN)含量进行了观察。表明房水FN含量增加发生于房水pH增高之后,60分钟时达高峰。此间房水FN与房水总蛋白含量的增高呈正相关,与总蛋白的百分比高于血浆。此后房水FN含量呈降低趋势,与总蛋白的百分比低于血浆。讨论了房水和血浆FN含量变化的意义。     

家兔眼前段碱烧伤后自由基清除酶动态变化的实验研究

家兔眼前段碱烧伤后４、２４和７２小时房水中自由基清除酶ＳＯＤ，ＣＡＴ和ＧＳＨ－Ｐ＿ｘ活力均下降。提示眼前段碱烧伤存在着自由基反应的紊乱，自由基清除酶活性降低，引起角膜组织严重损伤，溃疡难以愈合。     

SOD和脂质过氧化反应在视网膜铜沉着症中的作用

测定了家兔眼球内铜异物伤后,视网膜中的抗氧化酶SOD活性和脂质过氧化反应产物MDA含量,以及玻璃体中铜离子浓度。SOD活性随玻璃体中铜离子浓度的升高而明显下降。7天时下降53.2%,4周时下降93.8%。MDA值在整个观察期间明显增高,最高达对照组的3倍,且与玻璃体中铜离子浓度的升高呈正相关。实验结果表明,脂质过氧化反应和视网膜SOD活性下降可能是眼铜质沉着症视网膜变性的重要因素之一。     

Effects of the Matrix Metalloproteinase Inhibitor GM6001 on the Destruction and Alteration of Epithelial Basement Membrane During the Healing of Post-alkali Burn in Rabbit Cornea

Purpose

To examine the alteration in structure and matrix composition of epithelial basement membrane (BM) during the healing of alkali-burned rabbit cornea, and the roles of matrix metalloproteinases (MMPs) in these alterations.

Methods

The central cornea of one eye of 78 albino rabbits was exposed to 1?N NaOH for 180?s under general and topical anesthesia and allowed to heal with or without subconjunctival injection of GM6001 (an MMP inhibitor). Cryosections of affected corneas were observed by H&;E staining, immunohistochemistry for type IV collagen subtypes, or in situ zymography for detection of localization of MMP activity.

Results

Uninjured corneal epithelial BM exhibited α5 (IV)-immunoreactivity, but lacked the α1/α2-immunoreactivity of collagen IV. Epithelial BM in healing burned cornea transiently exhibited α1/α2-immunoreactivity. Examination by in situ zymography showed an upregulation of MMP activity in the regenerated central epithelium and anterior stroma of the burned corneas at days 7 and 14. GM6001 suppressed degradation of α5-containing epithelial BM in vivo and also in organ culture.

Conclusions

Epithelial BM was degraded by endogenous MMPs during healing following an alkali burn in rabbit cornea. GM6001 had an inhibitory effect on the degradation of the epithelial basement membrane in burned cornea in vivo.?Jpn J Ophthalmol 2006;50:90–95 © Japanese Ophthalmological Society 2006     

Election Spin Resonance Studies of Free Radical Formation and Oxygen Consumption of Lens Epithelium During Ultraviolet Exposure

A long life election spin resonance (ESR) signal at g=2.0006 was observed in the normal lens epithelium and cortical fibers. During ultraviolet (UV) exposure, a new ESR signal at g = 2.0060 was found in the lens epithelium. But this specific signal was not detected in the lens cortical fibers. This suggested that lens epithelial cells were more susceptible to the free radical formation which was induced by UV light. By means of ESR spin probe oxymetry, the oxygen uptake of lens epithelial cells was measured. The more the oxygen uptake, the higher the K value was. The K value of the oxygen consumption of epithelial cell linearly correlated with time of consumption(20-60 min) and increased as a function of UV exposure time(1-5 min). The oxygen consumption rate of lens epithelial cell was approximately 1.38 x 10～6 and increased to 7.1 x 106 O2 molecules per cell per sec. The oxygen consumption rate increased more than 5 times. These results indicates that UV light can accelerate the respiratory function of lens epithelial cells. The necessity of excess oxygen of lens epithelial cells may play a role in the cataract formation induced by UV light