免疫细胞化学与浆膜腔积液细胞学诊断

目的解决浆膜腔积液中疑难病例的确诊、分型,探讨免疫细胞化学在积液中鉴别诊断的价值,找出用于诊断的合适抗体。方法选用6种单克隆抗体:钙视网膜素(CAL)、上皮细胞膜抗原(EMA)、癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白17和18(CK17标记鳞癌,CK18标记腺癌)、波形蛋白(VIM),对58例积液标本进行诊断。结果在58例积液标本中,免疫细胞化学鉴别出恶性积液38例,反应性积液20例。结论CAL、EMA、CEA、VIM联合应用可从正反两方面同时证明癌细胞的存在,是积液中免疫细胞化学的较佳抗体组合。CK17、CK18对鉴别积液中鳞癌、腺癌有参考价值。在细胞学检查中应普遍推广免疫细胞化学。     

免疫细胞化学与浆膜腔积液细胞学诊断

目的 解决浆膜腔积液中疑难病例的确诊、分型,探讨免疫细胞化学在积液中鉴别诊断的价值,找出用于诊断的合适抗体。方法 选用6种单克隆抗体：钙视网膜素（CAL）、上皮细胞膜抗原（EMA）、癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋白17和18（CK17标记鳞癌,CK18标记腺癌）、波形蛋白（VIM）,对58例积液标本进行诊断。结果 在58例积液标本中,免疫细胞化学鉴别出恶性积液38例,反应性积液20例。结论 CAL、EMA、CEA、VIM联合应用可从正反两方面同时证明癌细胞的存在,是积液中免疫细胞化学的较佳抗体组合。CK17、CK18对鉴别积液中鳞癌、腺癌有参考价值。在细胞学检查中应普遍推广免疫细胞化学。     

DNA倍体分析在浆膜腔积液诊断中的应用

目的探讨全自动细胞DNA倍体分析系统在良、恶性浆膜腔积液诊断中的应用价值。方法 262例浆膜腔积液标本(胸腔积液169例、腹水78例、心包积液15例)经离心处理后,制片2张,其中1张用于Feulgen染色后,给予全自动细胞DNA倍体分析,另1张用于巴氏染色,同样给予常规的细胞学检查,比较2种不同的检测方法对恶性浆膜腔积液的阳性检出率。结果 262例浆膜腔积液常规细胞学检测出119例(45.4%)异常,而同样标本中DNA倍体分析检测出113例(43.1%)异常,常规细胞学找到肿瘤细胞及可疑肿瘤细胞73例标本,均发现异倍体细胞的存在,而在常规细胞中找到核异质细胞的46例中,仅有34例出现异倍体细胞。结论全自动细胞DNA倍体分析系统有助于提高浆膜腔积液的阳性检出率,可作为细胞学检查的重要辅助手段。     

多指标检测对恶性浆膜腔积液的诊断价值

目的探讨核仁组成区相关嗜银蛋白(AgNOR)、癌胚抗原(CEA)、铁蛋白(Ft)定量分析在良、恶性浆膜腔积液中的鉴别诊断价值。方法采用HPIAS-1000高清晰度图像分析系统定量测定57例良、恶性浆膜腔积液中脱落细胞的AgNOR颗粒12项参数,并对AgNOR形态进行观察分型;同时采用化学发光法测定CEA和Ft水平。结果AgNOR定量分析12项参数有9项参数良、恶性组比较,差异有统计学意义(P<0.01),形态分型有助于诊断,特别是聚集型的出现更具诊断价值,发现了汉字样AgNOR异型颗粒。AgNOR、CEA、Ft的敏感性分别为100.0%、57.1%、52.4%,特异性分别为96.2%、88.5%、69.2%,阳性预测值分别为95.5%、80.0%、57.9%,阴性预测值分别为100.0%、71.9%、64.3%,尤登指数(J)分别为0.96、0.46、0.12。结论浆膜腔积液核仁组成区相关嗜银蛋白(AgNOR)、CEA的联合测定对于良、恶性积液有重要的鉴别诊断价值。     

浆膜腔积液中转移性腺癌与间皮细胞的病理学研究

目的探讨浆膜腔积液中转移性腺癌与反应性间皮细胞增生的鉴别.方法选取胸、腹水转移癌48例及反应性间皮细胞增生30例,采用常规涂片HE染色观察两者形态学特点,并应用免疫细胞化学SP法检测HBME-1、calretinin、E-cadherin、MOC-31和BerEP4的表达.结果腺癌和间皮细胞两者形态各有特点,但是分化好的腺癌和明显增生的间皮细胞仅从常规涂片难以鉴别;免疫细胞化学显示反应性间皮细胞HBME-1和calretinin阳性率为86.7%和76.7%;而腺癌细胞只有少量表达,特异性高达95.8%和100%.MOC-31、E-cadherin和BerEP4对转移性腺癌细胞阳性率为70.8%、77.1%和88.4%,间皮细胞表达很少,特异性分别为90%、93.3%、93%.两者对5种抗体的表现差异显著.结论应用常规涂片和免疫细胞化学相结合的方法对鉴别转移性腺癌和间皮细胞增生有很大的帮助,最好应用一组抗体综合分析判断,HBME-1、Calretinin、E-cadherin、MOC-31及BerEP4是目前非常有效的组合.     

浆膜腔积液细胞块对提高细胞学诊断及开展基因检测的价值

目的：探讨低温冷藏（4℃）过夜离心法制作浆膜腔积液细胞块的可行性,并评估细胞块免疫组化对提高浆膜腔积液细胞学诊断的价值及其作为基因检测新标本来源的可行性。方法收集2011年至2013年间有组织学确诊的积液152例,均采用直接离心和低温冷藏过夜离心制作细胞块,同时均行传统涂片、细胞块HE染色、免疫组化及检测50例非小细胞肺癌积液细胞块EGFR基因突变情况。结果低温冷藏过夜离心法制作细胞块的成功率（100.0%）显著高于直接离心法（75.0%）（χ2=43.43,P＜0.001）;细胞块免疫组化的诊断准确率（92.1%）明显高于传统涂片（67.1%）和细胞块HE染色（72.4%）（χ2=29.99, P＜0.001）;EMA对癌性积液中的癌细胞诊断具有较高敏感性和特异性,TTF-1、CDX-2、CA125、GCDFP-15、P63和CgA分别对肺腺癌、胃肠腺癌、卵巢癌、乳腺癌、鳞癌和小细胞癌具有较高的敏感性和特异性;非小细胞肺癌积液细胞块EGFR基因突变检出率为44.0%。结论低温冷藏过夜离心法制作细胞块成功率高,操作简单,易于推广;细胞块免疫组化极大地提高了浆膜腔积液细胞学的诊断准确性,同时也可为个体化治疗基因检测提供一种新的标本来源。     

自动化仪器在浆膜腔积液细胞计数中的应用

目的探讨哪种自动化分析仪可以代替传统手工计数法检测浆膜腔积液中白细胞的含量。方法对收集的126例浆膜腔积液标本,分别采用光学显微镜直接计数法、IQ-200全自动尿沉渣分析仪、KX-21血细胞分析仪和DiasaysR／s2003尿沉渣定量分析工作站进行白细胞计数并分析。结果采用IQ-200全自动尿沉渣分析仪和KX-21血细胞分析仪所测数据与显微镜人工计数结果相比较,差异有统计学意义（P〈0．05）;采用Diasays R／S2003尿沉渣定量分析工作站所测数据与显微镜人工计数结果相比较,差异有统计学意义（P〉0．05）。结论DiasaysR／S2003尿沉渣定量分析工作站可代替人工计数方法用于浆膜腔积液中的细胞检测,而IQ-200全自动尿沉渣分析仪和KX-21血细胞分析仪均不能完全代替。     

陕西省恶性浆膜腔积液诊治专家共识（2021版）

本共识所言浆膜腔是指心包腔、胸膜腔及腹膜腔,恶性浆膜腔积液是指浆膜腔积液中经脱落细胞学检查发现恶性细胞或浆膜组织活检病理诊断为恶性肿瘤,它是肿瘤转移的一种特殊表现形式,为晚期恶性肿瘤患者常见合并症之一,大量积液时可严重影响患者生活质量,甚至危及生命。我国与欧美国家之诊疗理念存在明显差异,目前全球尚缺乏明确的恶性浆膜腔积液诊疗指南或规范。我国现有2014年发表的《恶性胸腔积液诊断与治疗专家共识》,不包括恶性心包腔与腹膜腔积液,且部分治疗方法（如滑石粉胸膜固定术）在临床上并未广泛应用。本共识主要分为三大部分,一是介绍了目前全球恶性浆膜腔积液治疗现状,欧美国家治疗核心思想,我国治疗进展;二是详细介绍了该病诊断流程,包括病史询问、临床表现、影像学检查、肿瘤标志物检测,重点说明了脱落细胞学或浆膜组织活检病理检查方法,包括近年来兴起的细胞块石蜡包埋切片技术在分子基因检测方面的应用;三是该病治疗流程,包括局部治疗与系统治疗原则,对普通式抽液/引流联合药物灌注治疗方法的适应证、主要药物推荐、药物剂量、灌注时间、不良反应的预防与处理,以及特殊类型的恶性浆膜积液处理方法等进行了详细介绍,对系统治疗原则、全身给药选择亦给予了明确指导;最后简要说明了恶性胸、腹腔积液体外热循环灌注化疗技术的适应证与操作流程。目前,恶性浆膜腔积液诊治的中文期刊报道文献虽众多,但高质量文献极少,更谈不上证据级别,但本共识充分考虑到不同级别的医疗机构条件,具有广泛的普适性、较强的实用性及可操作性。     

计算机图像分析软件在浆膜腔积液细胞测量中的应用

目的对浆膜腔积液间皮细胞（Mes）与巨噬细胞（Mac）的计算机图像参数进行分析，进一步提高细胞图片分析效率和体液细胞诊断水平。方法用血细胞图文分析系统配套软件定量分析图像库中的Mes、Mac及淋巴细胞（Lyre），并比较各参数的统计学差异。结果Mes和Mac面积、周长、胞质面积及核面积和周长均大于Lym（P〈0，01）；Mes的胞体及核面积均明显小于Mac（P〈0，01）；Mes胞质似圆度明显低于Mac，而胞核似圆度高于Mac，P值均小于0，01；两者的周长及核浆比率比较均无统计学意义；Mes细胞的浆灰度均值和核灰度均值及核灰度方差均明显小于Mac（P〈0．01），而浆灰度与Lym细胞相近（P〉0．05）。结论浆膜腔积液细胞定量分析对建立积液细胞识别标准及加强体液细胞质量控制有一定临床价值。     

浆膜腔积液脱落细胞学检测对恶性肿瘤的诊断价值

目的探讨浆膜腔积液脱落细胞学检测对恶性肿瘤的诊断价值。方法对350例不明原因的浆膜腔积液标本常规检测后离心取沉淀推片,瑞氏-吉姆萨染色后观察细胞。结果血性和非血性积液恶性肿瘤检出率比较差异无统计学意义(P>0.05)。350例浆膜腔积液中检出恶性肿瘤细胞89例,对恶性肿瘤的诊断灵敏度为87.1%、特异度为99.2%、阳性预测值为98.9%、阴性预测值为96.7%、总有效率为94.3%。结论浆膜腔积液脱落细胞学检测对恶性肿瘤的诊断具有重要价值。     

恶性肿瘤患者嗜酸性粒细胞增多性浆膜腔积液分析

目的对恶性肿瘤患者嗜酸性粒细胞增多性浆膜腔积液进行分析,探讨嗜酸性粒细胞增多与恶性肿瘤的关系,为临床诊断治疗提供参考。方法浆膜腔积液常规检查的制片采用推片法,以改良的瑞吉复合染色法鉴定细胞。结果40例恶性肿瘤患者嗜酸性粒细胞增多性浆膜腔积液细胞涂片分类嗜酸性粒细胞相对数为10%-86%,均值为28.2%。查见恶性细胞24例,未查见恶性细胞16例。28例已确认远处转移。结论恶性肿瘤患者浆膜腔积液中出现嗜酸性粒细胞增多可能提示疾病的恶化和愈后不良;恶性肿瘤患者的浆膜腔积液嗜酸性粒细胞增多与血液嗜酸性粒细胞不一定平行。     

恶性肿瘤患者嗜酸性粒细胞增多性浆膜腔积液分析

目的对恶性肿瘤患者嗜酸性粒细胞增多性浆膜腔积液进行分析,探讨嗜酸性粒细胞增多与恶性肿瘤的关系,为临床诊断治疗提供参考。方法浆膜腔积液常规检查的制片采用推片法,以改良的瑞吉复合染色法鉴定细胞。结果40例恶性肿瘤患者嗜酸性粒细胞增多性浆膜腔积液细胞涂片分类嗜酸性粒细胞相对数为10%~86%,均值为28.2%。查见恶性细胞24例,未查见恶性细胞16例。28例已确认远处转移。结论恶性肿瘤患者浆膜腔积液中出现嗜酸性粒细胞增多可能提示疾病的恶化和愈后不良;恶性肿瘤患者的浆膜腔积液嗜酸性粒细胞增多与血液嗜酸性粒细胞不一定平行。     

浆膜腔积液检出白血病细胞的观察分析

目的 对1989年5月～2002年4月收集到的浆膜腔积液中查见白病细胞的10例患者的l临床及实验资料进行回顾分析。方法 浆膜腔积液涂片制作采用推片法，涂片染色采用瑞吉染色，有经验的细胞学检验人员鉴定白血病细胞。结果 查见白血病细胞10例，其中急性粒-单核细胞白血病(M4)、慢性粒细胞白血病(CML)、多发性骨髓瘤(MM)各2例，急性粒细胞白血病(M2)、急性单核细胞白血病(M5)、慢性粒-单细胞白血病(CMMOL)、急性淋巴细胞白血病(ALL)各1例，均为渗出液，80％为血性。检出白血病细胞的患者生存时间从7d～14个月，中位生存期为1个月，平均生存期为3．8个月。结论 浆膜腔积液中查见白血病细胞则提示疾病预后不良，开展细胞形态学检查十分重要，对临床判断疾病的进展和调整治疗方案有重要价值。     

浆膜腔积液检出白血病细胞的观察分析

目的　对 1989年 5月～ 2 0 0 2年 4月收集到的浆膜腔积液中查见白血病细胞的 10例患者的临床及实验资料进行回顾分析。方法　浆膜腔积液涂片制作采用推片法 ,涂片染色采用瑞吉染色 ,有经验的细胞学检验人员鉴定白血病细胞。结果　查见白血病细胞 10例 ,其中急性粒 单核细胞白血病 (M4)、慢性粒细胞白血病(CML)、多发性骨髓瘤 (MM)各 2例 ,急性粒细胞白血病 (M2 )、急性单核细胞白血病 (M5)、慢性粒 单细胞白血病(CMMOL)、急性淋巴细胞白血病 (ALL)各 1例 ,均为渗出液 ,80 %为血性。检出白血病细胞的患者生存时间从7d～ 14个月 ,中位生存期为 1个月 ,平均生存期为 3.8个月。结论　浆膜腔积液中查见白血病细胞则提示疾病预后不良 ,开展细胞形态学检查十分重要 ,对临床判断疾病的进展和调整治疗方案有重要价值     

浆膜腔积液中组织蛋白酶D与肿瘤转移的关系

目的研究浆膜腔积液中组织蛋白酶D（CD）与肿瘤转移之间的关系。方法分别采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和化学发光法检测77例患者的浆膜腔积液CD及癌胚抗原（CEA）浓度。结合临床资料和病理诊断,将77例患者的浆膜腔积液标本分为非肿瘤组（22例）和肿瘤组[55例,包括肿瘤细胞阳性组（30例）和肿瘤细胞阴性组（25例）]。比较各组CD及CEA浓度,同时采用受试者工作特征（ROC）曲线评估CD及CEA单项检测和联合检测的诊断价值。结果肿瘤组CD和CEA浓度均明显高于非肿瘤组（P〈0．05）。CEA与CD呈正相关（Kendall相关系数为0．323、Spearman相关系数为0．396,P均〈0．001）,CD、CEA及CEA与CD联合诊断肿瘤的ROC曲线下面积分别为0．763、0．723和0．812。肿瘤细胞阳性组CD浓度明显高于肿瘤细胞阴性组（P〈0．05）,而CEA浓度2组间中差异无统计学意义（P=0．051）,CD、CEA及CEA与CD联合诊断肿瘤转移的ROC曲线下面积分别为0．677、0．654和0．767。结论浆膜腔CD浓度与肿瘤浆膜腔转移相关,可作为肿瘤诊断和转移的辅助指标,联合CEA诊断更佳。     

重组人血管内皮抑素腹腔内给药治疗恶性腹腔积液的实验研究

目的初步探讨血管内皮抑素(ES)腹腔内给药治疗恶性腹腔积液的治疗机制。方法健康BABL/C小鼠,应用S180细胞建立腹腔积液模型。ES分为5.00mg/kg、2.50mg/kg及1.25mg/kg三组;阴性对照组为生理盐水组;阳性对照组为60.00mg/kg顺铂组。S180细胞腹腔注射接种5d后,实验药物隔日腹腔注射。记录小鼠体重作为腹水计量变化指标。计数小鼠存活只数计算存活率。结果 ES治疗癌性腹水的实验结果显示实验各组间小鼠体重具有统计学差异,高剂量组具有明显的优势,并且与顺铂对照组相当,组间比较具有统计学差异(P<0.05)。ES对恶性腹水小鼠存活率的影响提示,除低剂量组与中剂量组之间无统计学差异外,其余各组间均有统计学差异(P<0.05);不同时间存活率各组间比较均有统计学差异(P<0.01)。综合分析结果显示:在各实验组中,低剂量治疗组小鼠存活率显著高于其他各治疗组,低剂量组小鼠,存活时间长。结论重组人ES具有较好的抗肿瘤性腔内积液效果,并可延长腹水小鼠的生存时间,提高生存率。     

联合检测B72.3、癌胚抗原、神经特异性钙结合蛋白、血栓素在浆膜腔积液细胞学鉴别诊断中的价值

目的探讨B72.3、癌胚抗原、神经特异性钙结合蛋白、血栓素组合检测在浆膜腔积液中恶性间皮瘤和增生间皮细胞与腺癌鉴别诊断的价值。方法取123例浆膜腔积液,经活检或临床资料证实为转移腺癌89例、恶性间皮瘤8例、增生间皮细胞26例,并对细胞学标本做特殊处理后常规涂片,做B72.3、癌胚抗原、神经特异性钙结合蛋白、血栓素免疫细胞化学与苏木素-伊红(HE)染色分析。结果123例积液标本中,B72.3、癌胚抗原诊断腺癌的敏感性分别为80.1%、78.7%,特异性分别为97.1%、97.1%,B72.3、癌胚抗原组合检测诊断转移腺癌的敏感性为95.5%(85/89);神经特异性钙结合蛋白、血栓素诊断间皮源性细胞敏感性分别为88.2%、79.4%,特异性分别为95.5%、91.0%,神经特异性钙结合蛋白、血栓素组合检测诊断间皮源性细胞敏感性为94.1%(32/34),其中恶性间皮瘤为100%(8/8)。结论通过对浆膜腔积液细胞学标本的有效处理和制片技术的改进,选择B72.3、癌胚抗原、神经特异性钙结合蛋白、血栓素组合检测和细致的细胞形态学观察,可进一步提高浆膜腔积液中恶性间皮瘤与转移性腺癌的鉴别诊断。