基质金属蛋白酶与颈动脉粥样硬化关系研究进展

基质金属蛋白酶（MMPs）是一簇在细胞外基质降解中起重要作用的锌离子依赖性蛋白酶超家族,其酶活性的失调或许参与了颈动脉粥样硬化的发生发展,现对MMPs与颈动脉粥样硬化的关系进行综述。     

降脂药物对小鼠颈动脉粥样硬化斑块内基质金属蛋白酶3表达的影响

目的研究降脂药物对小鼠颈动脉粥样硬化斑块内基质金属蛋白酶(MMP)-3表达的影响,分析降脂药物对颈动脉粥样硬化斑块的作用。方法对照组:10只28周龄SPF级普通雄性小鼠,给予普通饮食,喂养12 w。实验组:20只28周龄载脂蛋白E基因(Apo E)敲除雄性小鼠,给予高脂饮食,喂养12 w后,随机分为非治疗组(10只),直接进入实验程序;治疗组(10只)给予阿托伐他汀钙片灌胃+普通饮食,继续喂养12 w,进入实验程序:检测各组小鼠血清MMP-3,并分离各组小鼠颈动脉,通过免疫组化分析斑块内MMP-3的表达。结果与对照组比较,非治疗组血清MMP-3明显升高(P0.01)。非治疗组斑块内MMP-3的表达明显增加(P0.01)。与非治疗组比较,治疗组血清MMP-3明显下降(P0.05)。治疗组斑块内MMP-3的表达明显下降(P0.05)。结论动脉粥样硬化发展过程中,MMP-3起到重要作用,动脉粥样硬化斑块的不稳定与MMP-3的表达增高密切相关。降脂治疗可使斑块内MMP-3降低,使斑块缩小。     

基质金属蛋白酶-9与颈动脉粥样硬化斑块稳定性的关系

目的研究基质金属蛋白酶(MMP)-9与颈动脉粥样硬化斑块稳定性的关系。方法应用彩色多普勒超声仪探测48例颈动脉粥样硬化患者(ACA组)及20例健康体检者(NC组)的双侧颈动脉粥样硬化情况,采用酶联免疫吸附法检测各组血清MMP-9水平。结果 NC组未检出颈动脉粥样硬化斑块。ACA组血清MMP-9水平明显高于NC组(P0.05);ACA组中,易损斑块亚组血清MMP-9水平明显高于稳定斑块亚组,稳定斑块亚组血清MMP-9水平明显高于无斑块亚组(均P0.05)。结论 MMP-9水平升高可作为反映颈动脉粥样硬化斑块稳定性的血清学检测指标。     

氟伐他汀对家兔颈动脉粥样斑块巨噬细胞和基质金属蛋白酶的影响

目的观察高胆固醇血症家兔颈动脉粥样斑块内炎性巨噬细胞与MMP-2、MMP-9的表达情况，并研究氟伐他汀干预对巨噬细胞聚集和基质金属蛋白酶（MMPs）表达的影响，探索他汀类药物在稳定颈动脉斑块中的作用及机制。方法24只家兔随机分为对照组、高脂组和治疗组，每组8只，分别给予普通饲料、高脂饲料和高脂饲料加氟伐他汀喂养，测定不同时间点血清总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平。喂养第12月时处死动物，取颈动脉进行石蜡切片，测量并计算颈动脉I／M比值，SP法进行CD68、MMP-2和MMP-9免疫组织化学染色。结果治疗组血清TC、LDL-C浓度明显低于高脂组（P〈0．01）。治疗组I／M比值明显低于高脂组（P〈0．01）。高脂组颈动脉斑块中见大量CD68阳性细胞，而治疗组CD68阳性细胞数显著少于高脂组（P〈0．01）。颈动脉斑块中MMP-2、MMP-9阳性细胞和染色强度明显增加，治疗组MMP-2和MMP-9的表达较高脂组显著减少（P=0．002和P=0．016）。结论氟伐他汀治疗可以抑制高胆固醇血症家兔颈动脉粥样斑块的形成．减轻斑块内巨噬细胞的浸润并抑制MMP-2和MMP-9的产生，从而起到稳定斑块的作用。     

颈动脉粥样硬化家兔血脂变化及基质金属蛋白酶-2表达的研究

2004年1～7月，我们通过建立兔颈动脉粥样硬化模型，动态观察其血脂及血糖变化，并对颈动脉标本行免疫组织化学染色，观察基质金属蛋白酶-2表达。现报告如下。     

基质金属蛋白酶及其抑制剂与颈动脉粥样硬化斑块稳定性的关系

近年研究发现,许多脑缺血事件源于动脉粥样硬化不稳定斑块,也称易损斑块.易损斑块会造成不同程度的缺血性卒中或血管性痴呆,甚至严重血管狭窄.     

基质金属蛋白酶-2与颈动脉粥样硬化的研究进展

基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2，MMP-2)又称白明胶酶A，它表达广泛，能够降解明胶、多种胶原和基底膜成分，对于平滑肌细胞的增殖和迁移起着重要作用。这些作用推动了颈动脉粥样硬化(carotid atherosclerosis，CAS)的形成和进展。本文将MMP-2及其与颈动脉粥样硬化关系的研究进展作如下综述。     

基质金属蛋白酶-2及其抑制物在慢性肝炎和肝硬化肝组织中的表达

为进一步探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-2组织抑制因子（TIMP-2）在肝纤维化发生，发展过程中的作用，用免疫组织化学方法检测慢性肝炎和肝硬化肝组织中MMP-2和TIMP-2的表达及分布状态，并作定位及半定量分析。     

基质金属蛋白酶-9和金属蛋白酶组织抑制物-1在IgA肾病肾组织中的表达

目的 探讨基质金属蛋白酶－9（MMP－9）／金属蛋白酶组织抑制物－1（TIMP－1）系统在IgA肾病肾组织中的表达及其对IgA肾病的进展的影响。方法 采用免疫组织化学和原位杂交技术,分别在蛋白质和基因水平检测38例IgA肾病患者肾组织中的MMP－9和TIMP－1的变化。结果 MMP－9在正常肾脏肾小球的脏层上皮细胞和内皮细胞有少量表达,在肾小管上皮细胞和间质血管壁也有少量表达;在IgA肾病中,MMP－9在系膜增殖性肾小球和间质血管壁的表达均明显增多（P＜0．001）,而在硬化肾小球内的表达则明显减少,肾小管细胞的MMP－9表达无明显变化。TIMP－1在正常肾组织中不能检出,在IgA肾病患者具有系膜增殖性病变的肾小球中有微量表达,在增殖在很重但尚未完全硬化的肾小球内表达增多,在肾小管间质表达最为明显（P＜0．001）,其主要见于肾小管细胞、间质细胞和血管内皮细胞。肾组织中的TIMP－1表达与血清肌酐水平呈显著相关（P＜0．05）,与肾小管间质的纤维化和炎细胞浸润程度亦明显相关（P值均＜0．01）。肾小球中的MMP－9表达与尿蛋白无明显相关性,但与血清肌酐水平呈显著负相关（P＜0．05）。结论 MMP－9和TIMP－1的异常表达可能是影响IgA肾病进展的因素之一。     

基质金属蛋白酶在肺气肿兔肺组织中的表达

了解基质金属蛋白酶（MMPs）／金属蛋白酶组织抑制因子（TIMP）在免吸入中性弹力酶所致肺气肿组织中的表达。材料和方法（l）实验动物和分组：雄性大白兔20只，体重l一回．5kg，随机分为2组。对照组：经环甲膜穿刺气管内注入无菌生理盐水lml，每周注射1次，间隔2周重复注射1次，共注射3次。肺气肿组：气管内注1％硝酸05nil，间隔2周后再每周注射3％弹力酶0．snd，共注射2次。于注药后3－4个月用于实验观察。（2）方法：用抗生物素．生物素一过氧化酶复合物技术进行MMPI、MMPZ和TIMP免疫组织化学染色。抗MMPI、MMPZ和TIMP单克隆…     

颈动脉粥样硬化斑块的形态学及炎性反应与临床表现的观察

目的评价颈动脉粥样硬化斑块形态学变化、炎性反应及其与临床症状的关系。方法选择9例症状性颈动脉粥样硬化性狭窄患者,通过经颅多普勒超声检测,示4例患者有栓子脱落,5例无栓子脱落。对患者均行颈内动脉内膜切除术,取动脉粥样硬化斑块标本,一部分行常规HE染色,观察常规形态学改变;另一部分做免疫组化染色,观察CD3、CD45RO、CD20、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况;并观察炎性细胞浸润程度与栓子脱落的关系。结果①光镜下结果显示,在斑块的肩部和纤维帽内可见一些新生小血管、不同程度的炎性细胞浸润及平滑肌细胞减少。炎性细胞主要分布在新生小血管周围,血管增生越明显,浸润的炎性细胞越多,平滑肌细胞减少越明显。②免疫组化染色结果显示,浸润的炎性细胞为CD3和CD45RO染色阳性的T淋巴细胞,主要分布在新生小血管周围;α-SMA在斑块纤维帽内的表达呈不均匀性,部分区域没有表达。PCNA染色呈阳性,证实细胞增殖处于活跃期。③有栓子脱落患者的颈动脉粥样硬化斑块具有更明显的炎性细胞浸润。结论在颈动脉粥样硬化斑块内,以T淋巴细胞为主的炎性反应对斑块的不稳定性起重要作用。     

辛伐他汀对动脉粥样硬化斑块中MMPs及TIMPs表达的影响

目的 :观察辛伐他汀对动脉粥样硬化斑块中基质金属蛋白酶 （MMPs）及其组织抑制因子 （TIMPs）表达的影响。方法 :新西兰大白兔 48只随机分为试药组和对照组 ,用 PTCA球囊导管拉伤腹主动脉 ,高脂饮食喂养 4周后 ,试药组 （2 4只 ）给予辛伐他汀 5m g· kg- 1· d- 1,对照组 （2 4只 ）以淀粉为对照 ;每组按实验终点 （给药后 2、4和 8周 ）随机分为 3个亚组 ,继续高脂饮食喂养至实验结束。动物高脂喂养前、每周和处死前取静脉血 2 ml检测血脂变化 ,取拉伤段动脉用于总 RNA提取和组织病理检测。结果 :高脂饮食喂养 1周后 ,2组动物血脂水平在正常的 5～10倍 ,组间无显著差异 （P>0 .0 5） ;用药后 2周 ,试药组血脂明显低于对照组 ;用药后 4周 ,试药组血管组织MMP1,2低于对照组 ,TIMP1/ MMP1明显大于对照组 （P <0 .0 5,P<0 .0 1） ,TIMPs表达两组无显著差异 （P >0 .0 5）。结论 :辛伐他汀通过选择性地改变局部 MMPs和 TIMPs表达 ,减少基质分解破坏 ,增加局部斑块的稳定性     

兔颈动脉粥样硬化狭窄模型的建立及天冬酰胺内肽酶的表达

目的探讨兔颈动脉粥样硬化(AS)狭窄模型中天冬酰胺内肽酶(AEP)的表达。方法将14只新西兰大白兔按随机数字表法分成模型组(8只)和假手术组(6只),模型组通过手术损伤颈动脉内膜。术后两组均给予含镁高脂饲料饲养兔10周,每2周进行体质量称量及血脂检验,术后第5周和第10周末均行MRI观察斑块形成及管腔狭窄情况,术后第10周末收集标本后切片,苏木素-伊红(HE)染色观察病理变化,免疫组化染色分析AEP表达水平。结果模型组1只兔损伤颈动脉死亡。高脂饲养后,两组兔体质量、血脂水平均较术前升高(P0.01)。模型组术后第5周和第10周末两次MRI示管腔狭窄率分别为(16±11)%和(53±20)%,组内差异有统计学意义(t=-4.83,P0.01);假手术组两次MRI均未见管腔狭窄。模型组HE染色可见内膜增生,AS斑块形成,斑块内脂质沉积,巨噬细胞、平滑肌细胞迁移浸润形成泡沫细胞;假手术组未见AS形成。AEP在模型组兔颈动脉组织中高表达,在假手术组中很少表达,吸光度值分别为0.072 0±0.028 0和0.002 0±0.000 9,差异有统计学意义(t=6.61,P0.01)。结论通过损伤颈动脉内膜联合含镁高脂饲料饲养的方法可以确切、可靠、迅速地建立兔颈动脉AS狭窄模型;AEP在颈动脉AS性狭窄病变中呈高表达,可能参与了AS斑块的形成。     

白藜芦醇对兔动脉粥样硬化血脂及反映斑块稳定性的MMP-9/TIMP-1比值的影响

目的:观察白藜芦醇对动脉粥样硬化兔血脂代谢、主动脉过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响。方法:将70只雄性新西兰白兔随机分为5组:A组喂普通饲料,B组喂高脂饲料,C、D、E组喂高脂饲料的同时分别给予白藜芦醇4mg/kg.d、8mg/kg.d、16mg/kg.d进行干预。于12周末取血测定血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清MMP-9、TIMP-1水平。取完整胸主动脉,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)观察主动脉PPARγ、MMP-9、TIMP-1mRNA的表达。结果:病理对照组(B组)TG[(2.46±0.32)mmol/L∶(0.42±0.23)mmol/L]、TC[(30.19±3.98)mmol/L∶(1.07±0.22)mmol/L]、HDL-C[(1.74±0.50)mmol/L∶(0.63±0.30)mmol/L]、LDL-C[(16.82±1.95)mmol/L∶(0.53±0.15)mmol/L]、PPARγ[(0.78±0.07)∶(0.59±0.05)]、TIMP-1[(91.80±9.23)ng/ml∶(68.49±9.04)ng/ml]、MMP-9[(341.96±9.94)ng/ml∶(164.04±7.08)ng/ml]水平均明显高于正常对照组(A组)(P均0.01);随着白藜芦醇剂量的增大,血清TG、TC、LDL-C水平,MMP-9及其mRNA表达,和MMP-9/TIMP-1比值显著降低,HDL-C、TIMP-1及其mRNA表达显著升高,在中、高剂量组(D、E组)更为明显(P0.05～0.01),呈一定的剂量依赖性。结论:白藜芦醇可改善兔动脉粥样硬化血脂代谢紊乱,通过降低MMP-9/TIMP-1比值稳定粥样硬化斑块。     

心力衰竭犬心房组织Ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶-2及组织抑制因子与心房纤维化和颤动的关系

目的探讨心力衰竭(心衰)实验犬心房组织Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其组织抑制因子(TLMP-2)的基因表达与纤维化及心房颤动(房颤)发生的关系。方法选择健康成年杂种犬14只,随机分为心室快速起搏致心衰组和健康对照组,Burst 刺激诱发房颤,Mallory 染色测定纤维化程度,RT-PCR 和免疫组化检测左右心房各基因的 mRNA 和蛋白表达。结果心衰组左室射血分数(LVEF)由(67.4±6.0)%降至(29.2±7.8)%;发生房颤及持续性房颤分别由2只和0只增至7只和5只,房颤持续时间由(0.57±0.57)s 延长至(462.12±181.43)s;左右心房纤维化程度分别增加268.8%和190.35;Col Ⅰ及 MMP-2的表达均明显上调(在左、右心房中,Col Ⅰ mRNA 和蛋白表达分别上调56.2%、132.2%和37.4%、78.0%,MMP-2则为100.0%、115.7%和65.7%、96.8%);TIMP-2的 mRNA 在左心房中下调46.3%,蛋白表达在左、右心房中均无明显改变,但 MMP-2/TIMP-2和其蛋白表达在左、右心房中分别显著升高285.3%、143.8%和106.1%、134.7%;在心衰组中,房颤持续时间与左心房纤维化程度、Col Ⅰ的基因表达量呈正相关,同时左心房MMP-2/TIMP-2比值与 Col Ⅰ的基因表达及纤维化程度呈正相关。结论心房组织 MMP-2、TIMP-2和 Col Ⅰ的基因表达改变可能是心衰时房颤发生与维持的分子机制之一,而 MMP-2/TIMP-2的失衡引起 Col Ⅰ的分子重构,可能是心衰时发生心房纤维化的重要机制之一。     

基质金属蛋白酶抑制物-2基因转移对家兔动脉粥样硬化斑块的影响

目的探讨局部转染金属蛋白酶抑制物(pcDNA3TIMP2)基因对动脉粥样硬化斑块的影响。方法内皮剥脱加高脂饮食建立兔动脉粥样硬化动物模型,基因球囊局部转染pcDNA3TIMP2,RT PCR和Westernblot分别检测动脉粥样硬化斑块局部外源基因转移效果,Zymography检测动脉粥样硬化斑块局部基质金属蛋白酶(MMPs)活性,病变股动脉组织行HE和苦味酸酸性品红染色,全自动图像分析仪行图像处理,测量血管腔面积、胶原成分含量。结果基因转染组术后2周动脉粥样硬化局部TIMP2基因表达即明显高于空白载体对照组(P<0.01),术后4周达高峰;术后2、4、8周TIMP2蛋白表达也明显高于空白载体对照组(P<0.01),MMP2和MMP9活性低于对照组。局部转染TIMP2基因组动物,动脉粥样硬化斑块纤维帽厚度和病变局部胶原含量均明显高于对照组,但病变血管腔面积与对照组差异则无统计学意义。结论动脉粥样硬化局部转移TIMP2基因可明显抑制病变局部MMP2和MMP9活性,增加动脉粥样硬化斑块纤维帽厚度和病变局部胶原含量,但对动脉粥样硬化所致血管腔狭窄程度无明显影响。     

急性冠状动脉综合征患者MMP-9、MMP-2的临床意义

目的观察不同冠心病患者的血清的基质金属蛋白酶(MMPs)及其演变,探讨MMPs与急性冠状动脉综合征的关系。方法用酶联免疫吸附法(ELISA)检测了32例急性心肌梗死(AMI),30例不稳定型心绞痛,20例稳定型心绞痛和16例健康对照者血清MMP-9,MMP-2和组织型基质金属蛋白酶抑制物-2(TIMP-2)水平,并比较上述指标与不同类型冠心病的关系及其演变。结果AMI患者血清MMP-9水平高于不稳定型心绞痛组、稳定型心绞痛组和对照组,分别为(191.91±150.10)ng/ml,(110.84±96.29)ng/ml,(69.30±55.85)ng/ml和(80.13±34.94)ng/ml。MMP-2、TIMP-2四组间比较差异无显著性。MMP-9在AMI患者中发病早期升高后持续到3~5d。MMPs与心肌损伤标志物无相关关系。结论血清MMP-9是预示斑块破裂中的主要MMPs之一,但它不能预测心肌坏死的程度。     

Reduced perlecan expression and accumulation in human carotid atherosclerotic lesions

Heparan sulfate in the extracellular matrix of the artery wall has been proposed to possess anti-atherogenic properties by interfering with lipoprotein retention, suppression of inflammation, and inhibition of smooth muscle cell growth. Previously, the amount of heparan sulfate in atherosclerotic lesions from humans and animals has been shown to be reduced but the identity or identities of the heparan sulfate molecules being down regulated in this disease are not known. In this study, atherosclerotic lesions were retrieved from 44 patients undergoing surgery for symptomatic carotid stenosis. Normal iliac arteries from organ donors were used as controls. Analysis of the specimens by gene microarray showed a selective reduction in perlecan gene expression, whereas, expression of the other heparan sulfate proteoglycans in the artery wall, agrin and collagen XVIII, remained unchanged. Expression of the large chondroitin sulfate proteoglycan, versican, also remained unchanged. Real-time PCR confirmed the decrease in perlecan gene expression and the unchanged expression of versican. The findings were supported by immunohistochemical analysis demonstrating a reduced accumulation of both perlecan core protein and heparan sulfate in carotid lesions. The study demonstrates a reduction of perlecan mRNA-expression and protein deposition in human atherosclerosis, which in part explains the low levels of heparan sulfate in this disease.     

心力衰竭犬心房组织MMP-2和TIMP-1、2的基因表达及其与心房扩大及心房颤动的关系

目的探讨心力衰竭(简称心衰)犬心房组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其组织抑制因子1、2(TIMP-1、2)的基因表达及其与心房扩大及心房颤动(简称房颤)发生维持的关系。方法选健康成年杂种犬14只随机分为心室快速起搏致心衰组和对照组,采用Burst刺激诱发房颤,逆转录-聚合酶链式反应技术和免疫组化方法检测两组左右心房组织MMP-2和TIMP-1、2的mRNA和蛋白表达,采集心房标本前超声心动图测定左右心房收缩末期面积。结果心衰组左室射血分数下降、房颤的诱发和维持时间增加,左右心房均扩大。MMP-2的mRNA和蛋白表达在左右心房中均上调;TIMP-2的mRNA在左右心房中无明显改变,但MMP-2/TIMP-2的mRNA和蛋白的比值在左右心房中均升高(P<0.01);TIMP-1的mRNA和蛋白表达在左右心房中均下调。心衰组,房颤持续时间与左房面积呈正相关。结论心房组织MMP-2和TIMP-1、2的基因表达改变以及MMP-2/TIMP-2表达失衡可能是心衰时心房扩大及房颤发生与维持的分子机制之一。     

心力衰竭犬心房组织MMP-2和TIMP-1、2的基因表达及其与心房扩大及心房颤动的关系

目的探讨心力衰竭（简称心衰）犬心房组织基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及其组织抑制因子1、2（TIMP-1、2）的基因表达及其与心房扩大及心房颤动（简称房颤）发生维持的关系。方法选健康成年杂种犬14只随机分为心室快速起搏致心衰组和对照组，采用Burst刺激诱发房颤，逆转录-聚合酶链式反应技术和免疫组化方法检测两组左右心房组织MMP-2和TIMP-1、2的mRNA和蛋白表达，采集心房标本前超声心动图测定左右心房收缩末期面积。结果心衰组左室射血分数下降、房颤的诱发和维持时间增加，左右心房均扩大。MMP-2的mRNA和蛋白表达在左右心房中均上调；TIMP-2的mRNA在左右心房中无明显改变，但MMP-2／TIMP-2的mRNA和蛋白的比值在左右心房中均升高（P〈0．01）；TIMP-1的mRNA和蛋白表达在左右心房中均下调。心衰组，房颤持续时间与左房面积呈正相关。结论心房组织MMP-2和TIMP-1、2的基因表达改变以及MMP-2／TIMP-2表达失衡可能是心衰时心房扩大及房颤发生与维持的分子机制之一。