高强度聚焦超声辐照小鼠体内棘球蚴的形态变化

目的探索高强度聚焦超声波(highintensity focused ultrasound,HIFU)对动物体内细粒棘球绦虫棘球蚴的杀伤作用。方法用采自感染包虫病羊肝内棘球蚴的原头节接种小鼠腹腔,建立小鼠棘球蚴病模型。用HIFU照射小鼠腹腔棘球蚴,以肉眼、光镜及电镜观察HIFU杀伤棘球蚴的破坏作用,对照组予以普通超声照射。结果HIFU对棘球蚴有明显的破坏作用,随着HIFU照射时间延长,肉眼观察见棘球蚴囊塌陷变瘪。光镜观察见囊壁撕裂、生发层细胞脱落、细胞层变薄甚至消失,角皮层变薄,但层状结构未中断。扫描电镜显示生发层细胞脱落明显,角皮层板状结构疏松;透射电镜显示生发层细胞脱落、细胞间隙增宽,角皮层未见明显破坏;对照组棘球蚴囊壁结构完整。结论高强度聚焦超声能破坏小鼠体内棘球蚴,使棘球蚴的生发层损伤,但角皮层仍然完整。     

高强度聚焦超声辐照后细粒棘球蚴囊壁的病理变化

目的 观察细粒棘球蚴囊壁在高强度聚焦超声（HIFU）辐照后的病理改变。方法 采集感染细粒棘球蚴的新鲜羊肝，选取囊壁较薄、触摸弹性较好的细粒棘球蚴30个。采用随机抽样方法等分为3组，每组10个包囊。对照组，用普通诊断超声照射2 min。处理组1和处理组2分别用150 W和250 W声功率对细粒棘球蚴包囊进行沿囊壁多层面的环形扫描，层面间距为5 mm，扫描速度为3 mm/s，照射时间2～10 min（根据包囊大小）。取出照射后先肉眼观察细粒棘球蚴包囊大体改变，后取囊壁组织分别制作病理切片和透射电镜切片，观察其病理改变。 结果 HIFU（250 W）辐照后，细粒棘球蚴包囊剪开处内囊壁立即发生卷曲，剥离出的内囊颜色变白、变硬、透光度降低。病理切片显示，HIFU辐照后细粒棘球蚴的内囊壁上角皮层与生发层大部分发生分离。电镜观察结果显示，HIFU辐照后细粒棘球蚴的角皮层纤维纹理明显改变，生发层细胞发生裂解性破坏。 结论 HIFU沿细粒棘球蚴囊壁的多层面的环形照射可明显损害细粒棘球蚴囊壁。     

高强度聚焦超声波对细粒棘球绦虫原头节的杀伤效应

目的 探索高强度聚焦超声波(HIFU)对体外分离的细粒棘球绦虫原头节的急、慢性杀灭作用.方法 实验对象为感染细粒棘球蚴病的羊肝原头节.选择声功率为0(对照组)、25、50、100、200、250 W的超声波辐照离体原头节,每种功率辐照时间分别为5、10、20、30、40、50、60 s,观察HIFU对离体原头节的即刻杀灭作用.以不致即刻杀伤的超声剂量作用原头节后,观察HIFU对原头节的迟发性生长抑制作用.光镜下,根据台盼蓝排斥法染色结果及观察原头节形态变化计算原头节死亡率.结果 HIFU对原头节有明显的急性杀伤作用,在一定的功率和时间范围内有剂量-效应关系,不同功率和辐照时间对原头节死亡率的影响,组间比较差异均有统计学意义(F值分别为5201.59、1865.65,P＜0.05),且功率与辐照时间之间存在交互效应(F=214.50,P＜0.05).随着超声照射剂量增大,其生物学效应越明显,声功率≥200 W的短时照射即可致原头节全部即刻死亡,部分原头节被打碎.以不致原头节即刻杀伤的超声照射后,体外培养2～7 d的原头节死亡率均较对照组明显增高(P＜0.05),随超声剂量的增大抑制原头节生长作用增强,培养第2天开始,50 W×10 s组强于25 W×20 s组(P＜0.05).结论 HIFU能够即刻杀灭原头节并能抑制原头节在体外的生长.     

人源细粒棘球蚴染色体测定

为鉴定棘球地细胞系及棘球绦虫的遗传分类提供依据，本实验测定了人源细粒棘球拗染色体。从外科手术的包虫病人体内获取棘球蚴原头节和生发层细胞，按染色体的常规制备方法并加以改进，制备染色体标本。通过对141个分裂像的观察分析，结果表明细粒棘球蚴染色体组的染色体数在5～20条之间，14～18条占明显优势。每一核型有一对染色体呈大棒状，似呈中间或亚中着丝粒，其余染色体呈方点状，似呈端着丝粒。本实验建立了适合棘球蚴染色体制备的方法，在国内首次测定了人源细粒棘球蚴染色体。     

复频高强度聚焦超声对离体细粒棘球蚴囊壁超微结构的影响

目的 分别用单频和多频聚焦超声体外照射细粒棘球蚴包囊, 观察对其囊壁的损伤情况。 方法 用羊肝细粒棘球蚴原头节接种小鼠, 1年后处死, 自腹腔取出包囊, 选择直径约2 cm的包囊40只随机均分4组。对照组剪破包囊壁, 用3%戊二醛固定并立即冷藏。实验A组包囊用2号单频换能器（4 W）照射, 实验B组用2及3号双频换能器（功率分别为4和5 W）同时照射, 实验C组用1、2及3号3频换能器（功率分别为4、4及5 W ）同时照射。各组均照射 1 min, 然后立即用3%戊二醛固定并冷藏。用肉眼、扫描电镜及透射电镜观察其变化。 结果 肉眼见实验组囊壁变厚, 颜色浑浊。透射电镜观察显示, 随超声频数增加囊壁结构被破坏程度加重, 角皮层纤维增粗、紊乱, 生发层细胞核肿胀破裂, 线粒体明显受损, 微绒毛变短, 断裂或消失。部分区域仅剩细胞碎片和破裂的细胞核。扫描电镜观察显示, 随超声频数增加, 囊壁内外表面被破坏程度加重, 最终正常结构被完全破坏。 结论 在体外, 复频高强度聚焦超声对小鼠细粒棘球蚴囊壁损伤明显, 其损伤程度随超声频数的增加而加重。     

小鼠细粒棘球蚴不育囊的超微结构观察

用透射电镜观察了小鼠细粒棘球蚴不育囊的超微结构。其囊壁由角皮层和生发膜构成,角度层含有纤维基质和不规则形颗粒,生发膜又可分皮层区和细胞区。在皮层区基部见到线粒体,微毛间见到“吞饮泡”样质膜凹陷;在细胞区主要有皮层细胞、肌细胞、含糖原细胞等,在有的含糖原细胞中还见到“核仁管系统。”     

微泡造影剂对高强度聚焦超声杀伤离体棘球蚴的增强作用

目的比较超声造影剂(ultrasound contrast agent,UCA)协同高强度聚焦超声(high intensity focused ultra-sound,HIFU)与单纯HIFU辐照对离体细粒棘球蚴包囊的杀伤效果的不同,探索UCA增强HIFU杀伤棘球蚴的方法。方法采集新鲜包囊按直径大小随机分为6个区组,每组25个,每5个包囊为1试验组随机接受以下试验:普通B超照射的空白对照,0.1mL UCA处理,单纯HIFU辐照,0.1mL UCA+HIFU辐照,0.2mL UCA+HIFU辐照。HIFU辐照后观察分析包囊灰度变化,光镜观察原头蚴形态变化并计数其死亡率。结果 HIFU辐照功率一定时,加入UCA能增加HIFU辐照包囊灰度变化和原头蚴的死亡率,并且该效果随UCA剂量的增加而加强。结论 UCA能增强HIFU对离体细粒棘球蚴杀伤效率,提高对原头蚴的杀伤效果。     

高强度聚焦超声波对细粒棘球绦虫原头节酶活性的影响

目的探索高强度聚焦超声波(HIFU)对体外分离的细粒棘球绦虫原头节的酶活性的影响作用。方法用不致原头节即刻杀伤的高强度聚焦超声剂量照射原头节,行酶组织化学染色观察酸性磷酸酶(ACP)、葡萄糖6-磷酸酶(G-6-P)和琥珀酸脱氢酶(SDH)的活性,了解高强度聚焦超声对体外培养的原头节3种代谢酶活性的影响作用。结果细粒棘球绦虫原头节具有酸性磷酸酶、葡萄糖6-磷酸酶和琥珀酸脱氢酶活性。不致原头节即刻杀伤的高强度聚焦超声波作用后,辐照组原头节葡萄糖6-磷酸酶和琥珀酸脱氢酶活性较对照组明显减弱,而酸性磷酸酶反应产物与对照组相比无明显变化。阴性对照组无酶反应产物产生。结论高强度聚焦超声波辐照对原头节酸性磷酸酶活性无影响,而对葡萄糖6-磷酸酶和琥珀酸脱氢酶的活性有明显的抑制,这可能是影响原头节的代谢功能,最终抑制其增殖的原因之一。     

细胞因子在小鼠细粒棘球蚴包囊形成中的意义

目的观察细粒棘球蚴感染的小鼠体内4种细胞因子水平的变化,研究其对包囊形成的作用.方法小鼠腹腔接种棘球蚴头节,持续观察220d,检测血清中几种细胞因子的水平,同时测定包囊的大小.结果时间延长,成囊率和囊体大小均有增加趋势.GM-CSF在包囊形成初期明显升高,IL-2和IFN-γ在中期明显升高,IL-4在后期明显升高(P<0.05).结论在囊的形成中,一个重要机制是Th2辅助的体液免疫与Th1介导的细胞免疫在不同感染阶段交替活化、共同作用的结果.     

高吸水性树脂对高强度聚焦超声杀伤肝包虫囊的增强效应

目的 探索高吸水性树脂(superabsorbent resin, SAR)增强高强度聚焦超声(high intensity focused ultrasound,HIFU)热效应的可行性及杀伤棘球蚴内原头节效率。方法 将囊径大小为4.5～5 cm的新鲜肝包虫囊分为6个组。空白(采取普通超声照射,无SAR)对照组(Ⅰ组),空白(采取普通超声照射)对照组(囊内注入半饱和量SAR)(Ⅱ组),空白(采取普通超声照射)对照(囊内注入饱和量SAR)(Ⅲ组);单纯HIFU辐照对照组(Ⅳ组),以单纯HIFU辐照,HIFU照射+ SAR半饱和量辐照(Ⅴ组),HIFU照射+SAR饱和量(Ⅵ)。各照射试验组均采用200 w声功率、点扫的方式照射整个包囊。照射后立即测定距包囊5 mm部位肝组织、囊液、囊壁的温度,并抽取囊液涂片,经台盼兰染色后计数原头节的死亡率。结果 HIFU照射后,棘球蚴囊壁、囊液、包囊周围肝组织的温度均有升高,HIFU+SAR作用组的各测量点温度分别为:囊壁(49±0.87)℃和(55±0.81)℃,囊液(38.9℃±1.02)℃和(44.6±1.82)℃,肝(34.5±0.88)℃和(37.88±0.67)℃,均显著高于单纯HIFU照射组和超声假照组(P<0.05)。HIFU照射各组原头节杀伤率明显高于对照组,各组(从Ⅰ到Ⅵ组)原头节死亡率分别为22.94%、23.11%、24.43%、55.28%、63.4%、74.2%,Ⅳ、Ⅴ组(即SAR协同HIFU照射)原头节杀伤效率高于单纯HIFU照射组,且达囊液饱和状态时,其内原头节杀伤效率高于半饱和状态,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 SAR协同HIFU照射能使棘球蚴包囊的囊壁、囊液产生明显的升温效应,协同HIFU杀伤囊液内的游离原头节,SAR的剂量越大,HIFU照射杀伤原头节的效应越强。     

高强度聚焦超声结合微泡造影剂杀伤原头蚴的效果

目的:探讨高强度聚焦超声结合不同比例微泡造影剂对离体原头蚴的杀伤效应.方法:在原头蚴悬液中加入不同比例的微泡造影剂（含氟脂质体微泡）,以相同超声功率及辐照时间作用（治疗声功率为50W,辐照时间为30s）.台盼蓝排斥试验计数原头蚴杀伤率,光镜检测原头蚴形态结构变化.结果:超声剂量一定时,加入适宜比例的微泡造影剂组原头蚴杀...     

高能聚焦超声治疗胰腺癌40例

为了观察FEP—BY01型肿瘤超声治疗机治疗胰腺癌的安全性及近期疗效，应用FEP—BY01型肿瘤超声治疗机治疗胰腺癌40例。结果表明：完全缓解率(CR)20％(8／40)；部分缓解率(PR)70％(28／40)；有效率90％(CR PR)；无效(PD)10％(4/40)。并且能明显缓解癌性疼痛，有效率达80％(32／40)。所有病例治疗时均未出现胰液漏、腹腔内出血、胃肠道穿孔、皮肤烧伤等并发症。高能聚焦超声治疗技术对胰腺癌的治疗安全有效。     

超声造影剂对高强度聚焦超声破坏棘球蚴囊壁的增强作用

目的 观察高强度聚焦超声(high intensity focused ultrasound,HIFU) 联用超声造影剂(ultrasound contrast agent,UCA)辐照细粒棘球蚴包囊后囊壁的损伤情况。方法 15个直径为30 mm左右的包囊随机分为3组:对照组,接受超声假照;单纯HIFU组,接受100 W HIFU辐照;HIFU+UCA组,注入0.1 mL UCA后进行HIFU辐照。辐照后观察超声图像的灰度变化和囊壁的肉眼变化,并取囊壁组织制作病理切片、扫描电镜切片和透射电镜切片,观察其病理改变。结果 100 W HIFU辐照可破坏囊壁的部分生发层和角质层;加入UCA后进行100 W HIFU辐照,生发层几乎无残留,角质层也遭到更严重的破坏。结论 UCA能增强HIFU对离体细粒棘球蚴囊壁的破坏作用。     

Growth kinetics of leukocyte cell lines cultured with hydatid fluid of Echinococcus granulosus equinus

Oxidation of 3,(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) and tritiated thymidine uptake were used to measure, respectively, the viable cell count and the S-phase activity of D10, B9, A20 and p388d leukocytic cell lines cultured in the presence of varying concentrations of fluid from fertile and infertile hydatid cysts of Echinococcus granulosus equinus. Exposure to hydatid fluid raised or lowered the entry of D10 cells into S-phase depending on the concentration of the fluid and of the supporting cytokines. Enlargement of the S-phase population was unaccompanied by increase in viable count indicating that the mitotic cycles induced by hydatid products were not completed. A similar conclusion was reached in respect of the p388d monocytic line, and both changes appear consistent with those occurring in histopathology in vivo. By contrast, the main effect on B9 and A20 B cells was inhibition of entry into S-phase.     

HIFU治疗无法手术切除的胰腺癌21例效果观察

目的探讨高强度聚焦超声（HIFU）对无法手术切除胰腺癌患者的疗效和安全性。方法将同期收治的36例无法手术切除的胰腺癌患者随机分为治疗组21例和对照组15例,两组均予常规对症支持治疗,在此基础上治疗组采用FEP-BY02型HIFU肿瘤治疗机进行治疗。疗程结束后观察两组临床受益反应（CBR）、肿瘤客观疗效、血清CA19-9水平、生存期、生存率及不良反应发生情况。结果治疗组CBR阳性率、单纯疼痛缓解率、总有效率及12、18个月生存率均显著高于对照组,进展（PD）率、不良反应发生率及血清CA19-9水平均显著低于对照组,生存期显著长于对照组,P〈0.05或0.01。结论 HIFU治疗手术无法切除的晚期胰腺癌患者可明显缓解症状、改善生活质量、延长生存期,且安全性高。     

细粒棘球蚴重组抗原rEgferritin诱导宿主抗感染免疫应答的初步研究

目的 初步探讨细粒棘球蚴重组铁蛋白rEgferritin免疫小鼠产生的抗细粒棘球蚴感染的免疫机制.方法 rEgferritin免疫ICR小鼠3次、同时设立佐剂组和对照组,第12w用细粒棘球蚴原头蚴对3组小鼠进行攻击感染,5个月后剖杀小鼠,检查各组小鼠腹腔内包囊个数,根据公式计算保护力.分别于0w,12w,32w取血,制...