巨噬细胞集落刺激因子应用于抗白念珠菌感染的研究进展

巨噬细胞集落刺激因子是近年来国外学者密切关注的具有抗白念珠菌感染作用的细胞因子 ,它能促进骨髓造血祖细胞分化发育成单核巨噬细胞 ,并增强巨噬细胞粘附吞噬白念珠菌的能力。实验室及临床Ⅰ /Ⅱ期研究表明 ,巨噬细胞集落刺激因子在临床抗白念珠菌感染方面具有良好的应用前景。     

细胞因子与白念珠菌感染

白介素、γ干扰素、α肿瘤坏死因子、集落刺激因子β转化生长因子在白念珠菌感染过程中的变化和作用，以及影响上述因子分泌的菌体成分和其他因素，有助于进一步阐明宿主抗白念珠菌免疫反应机制以及临床上应用细胞因子的治疗前景。     

IFN-γ、GM-CSF增强巨噬细胞抗白念珠菌活性的研究

目的: 确定小鼠重组γ-干扰素(rmuIFN-γ)和小鼠重组粒巨噬细胞集落刺激因子(rmuGM-CSF)对巨噬细胞抗白念珠菌活性的调节.方法: 分别将不同浓度的rmuIFN-γ、rmuGM-CSF与小鼠腹腔渗出巨噬细胞共同培养2天,然后测定巨噬细胞的抗白念珠菌活性.结果: 两种细胞因子都有增强巨噬细胞抗白念珠菌活性的作用,rmuGM-CSF对巨噬细胞抗白念珠菌活性的增强效应强于rmuIFN-γ(其抑菌率分别为44.49%、35.77%,P<0.01).结论: IFN-γ与GM-CSF均有增强巨噬细胞抗白念珠菌活性的作用,两者联合应用有协同效应.     

细胞因子与白念珠菌感染

白介素、γ干扰素、α肿瘤坏死因子、集落刺激因子、β转化生长因子在白念珠菌感染过程中的变化和作用,以及影响上述因子分泌的菌体成分和其他因素,有助于进一步阐明宿主抗白念珠菌免疫反应机制以及临床上应用细胞因子的治疗前景。     

重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子与伊曲康唑联合对白念珠菌抗菌作用的实验研究

目的 研究重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)与伊曲康唑联合抗白念珠菌的作用。方法 体内实验:制备系统性白念珠菌感染小鼠模型,用不同剂量伊曲康唑单独或与rhGM-CSF联合应用于感染小鼠,观测其28d内的存活情况。体外实验:分离鼠外周血中性粒细胞及腹腔巨噬细胞,分别将其与不同浓度的伊曲康唑及伊曲康唑加rhGM-CSF与白念珠菌共同培养,通过计数菌落形成单位(cfu)来判定伊曲康唑单独或与rhGM-CSF联合应用的抗白念珠菌效果。结果 伊曲康唑1.0mg/kg与rhGM-CSF25μg/kg联合应用能显著延长小鼠28d内的存活期,效果与单用伊曲康唑2.5mg/kg相等,而rhGM-CSF25μg/kg与伊曲康唑5mg/kg联合应用时效果相当于单用伊曲康唑10mg/kg。体外实验亦显示rhGM-CSF与伊曲康唑联用能减少白念珠菌数量。结论 rhGM-CSF与伊曲康唑联合应用对抗小鼠系统性白念珠菌感染有较好的协同作用。     

抗白念珠菌保护性抗体免疫

许多临床资料及实验室研究结果显示，在白念珠菌感染中，存在有保护性抗体免疫。现就抗体免疫在抗白念珠菌感染中的地位，抗体免疫的保护作用，抗白念珠菌保护性抗体的研究进展及其抗体免疫的保护机理综述如下。     

抗白念珠菌保护性抗体免疫

许多临床资料及实验室研究结果显示,在白念珠菌感染中,存在有保护性抗体免疫。现就抗体免疫在抗白念珠菌感染中的地位、抗体免疫的保护作用、抗白念珠菌保护性抗体的研究进展及其抗体免疫的保护机理综述如下。     

抗Dectin-1单克隆抗体在白念珠菌刺激小鼠腹腔巨噬细胞释放TNF-α和NO中的作用

目的探讨抗Dectin-1单克隆抗体在白念珠菌刺激小鼠腹腔巨噬细胞释放肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和一氧化氮(NO)中的作用。方法①体外培养小鼠腹腔巨噬细胞,设置处理组(抗Dectin-1单克隆抗体组)、阴性对照组与空白对照组,分别给予灭活或活的白念珠菌刺激。②刺激1h,3h,6h,8h后用酶联免疫吸附试验检测各组分泌的TNF-α水平,③刺激6h后Griess法检测各组产生NO的水平。结果①刺激1h后抗体浓度为20μg/mL处理组分泌的TNF-α水平(79.82±11.74pg/mL)低于阴性对照组(105.15±12.36pg/mL)(P<0.05),3h,6h,8h后各浓度处理组TNF-α水平均低于阴性对照组(P均<0.01),且呈浓度依赖性;②6h后各浓度处理组NO水平(61.24±8.85μmol/L,45.36±3.92μmol/L,36.37±2.58μmol/L)均低于阴性对照组(87.65±9.17μmol/L)(P<0.05)。结论抗Dectin-1单克隆抗体在白念珠菌刺激小鼠巨噬细胞释放TNF-α和NO中发挥抑制作用。     

白念珠菌保护性单抗的研究

目的 探讨抗白念珠菌单克隆抗体在系统性念珠菌感染动物中的保护作用。方法 制备抗白念珠菌单抗,观察单抗对系统性念珠菌感染小鼠存活时间,组织病理改变以及组织中菌落形成单位的影响。结果 制备出3株抗白念珠菌胞壁外膜抗原单克隆抗体-1B5、3E8、4C7;1B5、3E8两株单抗能显著延长致死量白念珠菌感染小鼠存活时间,减少感染小鼠主要脏器组织中白念珠菌菌落形成单位,减轻组织病理改变;1B5单抗能识别白念珠菌胞壁外膜上相对分子质量约为32000抗原;并在体外能抑制白念珠菌孢子对人颊粘膜上皮细胞,胎儿脐静脉内皮细胞的粘附。结论 1B5、3E8是具有保护作用的抗白念珠孢子对人颊粘膜上皮细胞,胎儿脐静脉内皮细胞的粘附。结论 1B5、3E8是具有保护作用的抗白念珠菌单抗;其中1B5是抗白念珠菌胞壁外膜上相对分子质量为32000的抗原的单抗;1B5单抗可通过抑制白念珠菌对上皮细胞,内皮细胞的粘附,降低该菌的侵袭力。     

肿瘤坏死因子和γ干扰素对调节中性粒细胞抗白念珠菌活性的研究

通过检测白念珠菌菌落形成单位的方法，观察人类肿瘤坏死因子（Ｈｕ－ＴＮＦ和重组人类　干扰素（ｒＨｕ－ＩＦＮ－　）对人嗜中性粒细胞（ＰＭＮ）抗白念珠菌活性的调节。发现Ｈｕ－ＴＮＦ和ｒＨｕ－ＩＦＮ－　本身不能直接影响白念珠菌生长，但能增强人ＰＭＮ抗白念珠菌生长的活性，这种作用的强弱与其预培养时间有关；此外这两种细胞因子具有协同增强ＰＭＮ抗白念珠菌活性的作用。这对于增强免疫损伤患者抵抗条件致病真菌感染的能力具有一定的指导意义。     

抗白念珠菌唑类耐药体外实验研究进展

唑类药物是临床上治疗念珠菌病的首选药物。近年来,白念珠菌唑类耐药比例不断升高。针对这一趋势,不少学者提出了新的药物联合治疗方案或合成特异性抗耐药的新药,并进行了大量的白念珠菌抗耐药或逆转耐药的体外实验加以验证。本文就近年来抗白念珠菌唑类耐药体外实验研究的新进展进行整理分析,以期为今后进一步研究更优化的抗耐药方案和临床治疗耐药白念珠菌感染提供依据。     

颗粒细胞、巨噬细胞集落刺激因子的皮肤反应:3例报告和文献复习

颗粒细胞、巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)为23kD的糖蛋白,是集落刺激因子的一种。体外试验表明,该因子能刺激多潜能骨髓干细胞生长,体内试验显示它能增加循环颗粒细 胞、原核细胞的数目,能使骨髓功能不全者的网织红细胞及血小板升高,临床已可用于治疗多种疾病。     

白念珠菌孢子相、菌丝相胞壁提取物SDS-PAGE分析

白念珠菌是一种重要的双相性条件致病性真菌。在念珠菌感染的组织中，目前认为，相变是白念珠菌的毒力因子之一。Ashman等认为，白念珠菌孢子相向菌丝相转变，表达于细胞表面的抗原有质和量的变化。我们采用梯度十二烷基磺酸钠—聚丙烯凝胶电泳(SDS—PAGE)技术，对临床分离的6株白念珠菌孢子相和菌丝相(带芽管的孢     

抗白念珠菌卵黄免疫球蛋白对白念珠菌生长及黏附的影响

白念珠菌黏附于宿主上皮是其在宿主中形成集落及入侵体内的第一步,也是其具有强致病性的标志,因此,抑制其黏附和生长是防治念珠菌病的有效途径。抗白念珠菌卵黄免疫球蛋白（immunoglobulin of egg yolk,IgY）是白念珠菌免疫产蛋母鸡后从鸡蛋中提取的一种卵黄抗体,能与白念珠菌特异性结合。为此,笔者通过黏附试验观察了IgY对白念珠菌黏附于人口腔颊黏膜细胞的影响,并观察IgY对体外培养白念珠菌生长的影响．现报告如下。     

SLE患者血清中的肿瘤坏死因子

肿瘤坏死因子α(TNF)是活化的单个核细胞及巨噬细胞所产生的一种发挥细胞间信息传递作用的肽,除了在抗寄生物感染、抗肿瘤方面有作用外,亦于各类炎症过程中发挥各种效应。如刺激成纤维细胞生长;活化中性粒细胞;增加细胞表面MHC Ⅰ类抗原的表达;刺激单个核细胞-巨噬细胞集落刺激因子、血小板活化因子及 IL-1的产生;诱发实验动物的休克、发热、恶病质、贫血、炎症等。有报告,小鼠自身免疫狼疮性肾炎中 TNF的产生能力紊乱,血中 TNF 水平降低,经用重组     

TGF-β1对巨噬细胞抗白念珠菌活性影响的实验研究

目的：探讨转化生长因子-β1（TGF-β1）对巨噬细胞（MΦ）抗白念珠菌活性的影响及其影响机制。方法：分离纯化小鼠腹腔巨噬细胞，与不同浓度重组人TGF-晶（rhTGF-晶）共同培养24h，收集上清，酶联免疫法测定TNF—α浓度，Griess反应法测定NO的活性；收集培养后的细胞与一定浓度的白念珠菌共同培养4h后，检测每毫升中白念珠菌菌落形成单位（cfu／mL）。结果：rhTGF-β1在10n/mL及100ng／mL时，对MΦ抗白念珠菌活性具有明显抑制作用（P〈0．05），而其在0．1ng／mL-100ng/mL时对MΦ产生TNF—α具有明显抑制作用（P〈0．05）；rhTGF-β1在1ng／mL-100ng／mL时，对MΦ产生NO具有明显促进作用（P〈0．05）。结论：rhTGF-β1可以抑制MΦ的抗白念珠菌活性，这种抑制作用可能与rhTGF-β1抑制MΦ的杀伤活性和影响MΦ的分泌功能有关。     

TLR4在白念珠菌刺激小鼠巨噬细胞释放TNF-α和NO中的作用研究

目的　探求Toll样受体 4(TLR4)在白念珠菌刺激小鼠巨噬细胞系RAW 2 64 .7释放肿瘤坏死因子 α(TNF α)和一氧化氮 (NO)中的作用。方法　①体外培养RAW 2 64 .7,设置处理组 (抗TLR4单克隆抗体组 )、阴性对照组与空白对照组 ,分别给予白念珠菌刺激。②刺激 1h ,3h ,6h ,8h后用酶联免疫吸附试验检测各组分泌的TNF α水平。③刺激 6h后Griess法检测各组产生NO的水平。结果　①刺激 1h后抗体浓度为 2 0 μg/ml处理组分泌的TNF α水平低于阴性对照组 (P <0 .0 5 ) ,3h ,6h ,8h后各浓度处理组TNF α水平均低于阴性对照组 (P均 <0 .0 1) ,且呈浓度依赖性 ;② 6h后各浓度处理组NO水平与阴性对照组比较差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　TLR4在白念珠菌刺激小鼠巨噬细胞释放TNF α中发挥作用 ,而对NO释放没有直接作用。     

真菌病

２００１０７９０重要条件致病真菌感染组织免疫组化研究／狄梅（北京大学一院皮肤科）…／／中华皮肤科杂志．－２０００，３３（５）．－３２４～３２６ 对实验小鼠白念珠菌感染组织的可疑念珠菌、隐球菌和曲霉感染的临床组织病理标本进行ＰＡＳ染色和免疫组化染色，并比较了两种方法的敏感性。结果表明，兔抗白念珠菌多抗、新生隐球菌多抗和鼠抗曲霉单抗可分别鉴定组织中的白念珠菌、新生隐球菌和曲霉。免疫组化和ＰＡＳ染色的敏感性差异无显著性。说明免疫组化方法有助于临床诊断。参９（张孝友）２００１０７９１玻璃珠－盐析法提取常…     

细胞因子在条件性致病真菌感染治疗中的应用

由于皮质激素，免疫抑制剂，广谱抗生素的广泛应用用以及艾滋病的出现，条件性致病真菌的感染日益增多，单纯使用抗真菌治疗往往不有取得满意的疗效，故免疫抑制状态的逆转十分重要，近年发现许多细胞因子可调节增强机体的免疫功能，该文综述了白介素，集落刺激因子，干扰素及肿瘤坏死因子在念珠菌，曲霉等条件致病真菌感染中的治疗作用。     

特比萘芬与氟康唑或伊曲康唑联合治疗系统性耐药性白念珠菌感染小鼠模型研究

目的研究特比萘芬与氟康唑或伊曲康唑联合治疗系统性耐药性白念珠菌病的疗效。方法建立小鼠系统性白念珠菌感染模型,应用特比萘芬与氟康唑或伊曲康唑联合治疗系统性白念珠菌感染。结果联合用药组小鼠的存活时间比单用药组明显延长(P<0.05),肾组织真菌计数显示联合治疗组明显低于单用药组(P<0.05)。结论特比萘芬与氟康唑或伊曲康唑联合疗法可增强抗白念珠菌效能,具有临床应用的潜能。