S-腺苷蛋氨酸对慢性乙肝患者血清中TGF-β1和PDGF的影响

目的研究S-腺苷蛋氨酸对慢性肝病患者血清中的TGF-β1和PDGF的影响,为临床使用S-腺苷蛋氨酸抗纤维化提供理论基础。方法选择乙肝表面抗原和HBV-DNA阳性的慢乙肝患者随机分为治疗组及对照组,用ELISA法观察2组患者在治疗前后血清中的TGF-β1和PDGF的浓度的变化情况。结果治疗组肝病患者治疗后TGF-β1和PDGF较治疗前均有下降,有显著性意义（P〈0.05）。对照组肝病患者血清TGF-β1和PDGF治疗前后比较,无统计学差异。结论 S腺苷蛋氨酸通过降低慢性乙肝患者血清中TGF-β1和PDGF的浓度,而发挥抗肝纤维化的作用。     

S-腺苷蛋氨酸不良反应的系统评价

【摘要】 目的 探讨S 腺苷蛋氨酸(SAM)不良反应的规律和特点,为临床合理用药提供参考。方法 检索Pubmed、Elsevier、中国知网、维普、万方数据库自建库至2017年收载的SAM致不良反应,对患者年龄、性别及用药剂量,不良反应发生时间等进行统计分析评价。结果 SAM致不良反应中青年人多于老年患者,男性患者多于女性。不良反应涉及多个系统,但以心血管系统、皮肤及附属器、呼吸系统为主,严重程度为一般病例多于严重病例,且尚未被说明书记载。上述不良反应发生时间范围较广。结论 SAM致药品不良反应（ADR）分布广泛,中青年男性可能好发,虽严重程度多为一般,但新的ADR占比较大,且用药过程中均可发生,临床在用药过程中应重视其发生特点,保证用药安全。     

S-腺苷蛋氨酸治疗慢性肝病合并抑郁的疗效观察

目的研究S-腺苷蛋氨酸（SAMe）的抗抑郁作用、护肝作用和不良反应。方法将96例慢性肝病合并抑郁的患者随机分为2组,治疗组给予SAMe 1000 mg/d＋复方甘草酸苷、多烯磷脂酰胆碱、苦黄注射液治疗,对照组仅给予复方甘草酸苷、多烯磷脂酰胆碱、苦黄注射液治疗,疗程28 d,采用Hamilton抑郁量表（HAMD,17项）评分评定临床疗效。结果在治疗第14和28天,治疗组HAMD评分均明显低于对照组（均〈0.01）;治疗组在治疗前后HAMD总分下降,有效率为64.6%（31/48）;治疗第28天,治疗组生化指标下降值明显大于对照组（〈0.05）。治疗组无一例因药物不良反应导致治疗中断。结论慢性肝病患者中抑郁的发生率高,SAMe能达到护肝、抗抑郁的双重功效。     

S-腺苷蛋氨酸的研究进展及其临床应用

1概述 S-腺苷蛋氨酸（英文名为S-adenosyl-L-methion-ine,SAM,SAMe或AdoMe）,是一种辅酶,参与甲基的转运,存在于所有的真核细胞中。     

探讨半枝莲醇提物对小鼠细胞色素P450酶和谷胱甘肽S-转移酶活性的影响

目的探讨半枝莲醇提物对小鼠细胞色素P450酶和谷胱甘肽S-转移酶活性的影响。方法于2017年2月将40只雄性SD小鼠随机分为4组,分别为对照组(10只)和试验组(30只)。试验组每天按照1 g/kg、5 g/kg、10 g/kg的用药量给所有小鼠进行灌胃,持续给药5 d。对照组予以等量生理盐水,第6天采用颈椎脱臼法处死小鼠,收集肝脏组织供后续研究,检测肝脏组织中细胞色素P450以及谷胱甘肽S-转移酶活性。结果与对照组相比,试验组低剂量组细胞色素P450含量和活性不存在差异(P0.05),而中剂量组和高剂量组小鼠细胞色素P450含量和活性出现显著下降趋势(P0.05)。与对照组相比,试验组小鼠谷胱甘肽S-转移酶活性没有出现显著差异(P0.05),但中剂量组和高剂量组活性出现下降趋势。结论半枝莲醇提物对小鼠细胞色素P450酶和谷胱甘肽S-转移酶的活性有一定的抑制作用,且抑制作用随着浓度增长而不断增大,即半枝莲醇提物浓度越高,对小鼠细胞色素P450酶和谷胱甘肽S-转移酶活性抑制程度越高。     

S-腺苷蛋氨酸对内毒素性肝损害的保护作用

目的 探讨S-腺苷蛋氨酸(S-adenosylmethionine, SAM)对内毒素(lipolmlysaccharide, LPS)性肝损害的保护机制.方法 100只BABL/c小鼠随机数字法均分为2组,LPS组:腹腔注射10 mg/kg的LPS;SAM组:在注射10 mg/kg LPS前2 h于小鼠腹腔内注射100 mg/kg SAM.记录两组小鼠存活率;光镜和电镜观察组织病理学改变;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10)的浓度;免疫组织化学法(SABC)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝组织中Toll样受体4(TLR4)和肝X受体α(LXRα)的蛋白表达水平.结果 两组24、48、72、120 h存活率比较,SAM组显著高于LPS组[(80.0%、70.0%、60.0%、50.0%) vs (50.0%、40.0%、30.0%、30.0%),P<0.05],肝脏病理损害程度减轻;SAM组血清中TNF-α水平显著低于LPS组,差异有统计学意义[(1791.79±122.19)pg/ml对(718.83±53.27)pg/ml,P<0.05];SAM组血清中IL-10增加且高峰前移,与LPS组比较差异有统计学意义[(418.69±38.77)pg/ml对(347.09±31.37)pg/ml,P<0.05];SAM组肝组织中LXRα表达明显增加,而TLR4表达则明显减少,两者与LPS组比较差异均有统计学意义{Western blot灰度值[TLR4:(1.550±0.034)对(1.365±0.017),LXRα:(1.605±0.027)对(1.375±0.014)],P<0.05}.结论 SAM能明显减轻LPS所致的肝损害,其机制可能与其降低肝脏各种细胞TLR4的表达,增强LXRα的表达,最终导致TNF-α水平降低和IL-10水平增高有关.     

S-腺苷蛋氨酸在肝脏疾病发生发展中作用的研究进展

S-腺苷蛋氨酸(S-Adenosylmethionine,SAMe)存在于所有生物体有核细胞中,参与着多种重要的生化反应,对人体产生多种影响。在临床上,SAMe广泛应用于治疗肝硬化所致肝内胆汁淤积、妊娠期肝内胆汁淤积等,而对SAMe在肝纤维化、肝硬化和肝癌发生发展中的作用关注相对较低。近年来随着研究的逐步深入,人们发现SAMe还有很多重要的生理功能,如抑制肝纤维化、预防肝脏肿瘤发生等,作者对近年来有关SAMe生物学功能及其在肝脏疾病发生、发展中作用的研究进行综述。     

人S-腺苷蛋氨酸脱羧酶α亚基的克隆、表达与纯化

目的：构建人S 腺苷蛋氨酸脱羧酶(SAMDC)的α亚基的原核表达载体,诱导该质粒在大肠杆菌中表达并纯化表达的重组蛋白。方法：从大肠癌细胞中提取总RNA,RT PCR方法扩增人SAMDCα亚基的cDNA片段801?bp,经TA克隆及亚克隆方法构建原核表达载体pTriEx 4 SAMDC α。将重组表达质粒转化入E.coli JM109(DE3)中,经IPTG诱导表达,SDS PAGE电泳和Western blot鉴定表达蛋白,并通过6×His•Tag,利用亲和层析法纯化表达的融合蛋白。结果：酶切鉴定和DNA测序显示,人SAMDC α亚基的cDNA片段成功插入表达载体pTriEx 4且方向正确,SDS PAGE电泳显示表达出32kD的外源蛋白。Western blot检测结果显示,表达出的蛋白为6×His•Tag的融合蛋白,且Ni NTA亲和层析法纯化了该重组蛋白。结论：成功构建、表达且纯化了重组SAMDC α亚基,为制备抗SAMDC抗体、研究SAMDC基因与结直肠肿瘤的关系提供了必要的工具。     

中药对细胞色素P450 2E1影响的研究进展

细胞色素P450 2E1(CYP2E1)不仅参与药物代谢，还能催化许多前毒物和前致癌物的活化过程。近年发现许多中药能抑制或诱导CYP2E1活性，从而导致有益的和不利的药物相互作用。以近年国内外文献报道以及相关研究为依据，综述了中药有效成分、提取物和单复方对CYP2E1的影响，以及CYP2E1介导的中药药物相互作用，并对其影响机制进行简要介绍。以期为中药的临床合理使用，提高其有效性和安全性提供参考。     

补骨脂素对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的改善作用

研究补骨脂素（psoralen,PSO）对四氯化碳（CCl₄）致小鼠急性肝损伤的改善作用及其机制。雌性C57BL/6J小鼠连续灌胃补骨脂素或阳性对照药烯丙基化硫（DAS） 4 d,第4天腹腔注射CCl₄,建立CCl₄致急性肝损伤小鼠模型。检测血清生化指标丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）水平;HE染色观察肝脏病理学变化;Western blot检测细胞色素P450 2E1（CYP2E1）的蛋白水平;免疫组织化学染色（IHC）检测CYP2E1的蛋白水平;RT-PCR检测CYP2E1以及炎症因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6 （IL-6）的基因水平。与模型组相比,补骨脂素能够改善CCl₄引起的炎性细胞浸润以及肝细胞坏死情况,显著降低血清ALT、AST水平,下调炎症因子TNF-α和IL-6的水平,抑制CYP2E1的蛋白表达。结果表明,补骨脂素对CCl₄致小鼠急性肝损伤具有改善作用,其机制可能是通过抑制CYP2E1的蛋白表达发挥药效作用。     

利福平致大鼠肝损伤模型肝组织CYP2E1表达的动态观察

目的:动态观察利福平肝损伤大鼠肝组织中CYP2E1的表达。方法:健康清洁级SD大鼠48只,雌雄各半,随机分成正常组和利福平组两组,各24只。利福平组实验大鼠每天以利福平混悬液50mg/(kg.d)灌胃,正常组大鼠每天以去离子水灌胃。分别在实验7、14、21天末及停药后14天末各取6只实验大鼠脱臼处死,迅速打开腹腔,取部分肝组织置4%多聚甲醛溶液中固定24小时,石蜡包埋切片,进行CYP2E1免疫组化染色。结果:利福平组大鼠肝组织CYP2E1表达跟正常组比较明显增强,差异有统计学意义(P0.05),其中第14天时达到最高点。利福平组CYP2E1表达在21天时有所下降,停药14天后,CXP2E1表达明显下降,跟实验第7、14天时比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论:利福平所致肝毒性有一定蓄积效应,这种效应可随着停药而改善。CYP2E1表达可反应利福平致肝组织损伤的程度。     

甘遂配伍甘草对大鼠肝脏CYP2E1表达及活性的影响

目的通过检测细胞色素氧化酶CYP2E1的表达和活性变化,从分子水平探讨中药配伍禁忌"十八反"理论中甘遂配伍甘草的药理机制.方法利用RT-PCR检测大鼠肝脏CYP2E1 mRNA水平;通过Western blot检测大鼠肝脏CYP2E1蛋白表达;采用高效液相色谱(HPLC)法测定CYP2E1酶活性.结果甘遂组、甘草组和甘遂甘草配伍组均明显诱导大鼠肝脏CYP2E1的表达与活性上升,并发现甘草组和甘遂甘草配伍组对CYP2E1活性的诱导作用显著高于甘遂组.结论甘遂可能通过诱导肝脏CYP2E1的表达与活性上升,促使其所含的前致癌物质和前毒物转化成为致癌物和毒物,导致对机体的毒性作用;甘遂甘草配伍使用时,甘草对CYP2E1活性的诱导能力更强,故而甘草可促进甘遂所含前致癌物质和前毒物转化成为致癌物和毒物的过程,并导致对机体毒性作用的增强,从而表现出"十八反"中药物配伍禁忌的特征.     

内质网应激预处理对丙烯腈氧化性损伤的保护作用

目的: 利用内质网应激诱导剂2-脱氧葡萄糖（2-deoxy-D-glucose,2-DG）预处理探究内质网应激对丙烯腈氧化性损伤的保护效应及其作用机制。方法: 将36只SD雄性大鼠随机分为6组,即空白组、2-DG组、50 mg/kg丙烯腈组、75 mg/kg丙烯腈组、2-DG+50 mg/kg丙烯腈组、2-DG+75 mg/kg丙烯腈组。采取腹腔注射的方式给予2 DG预处理和急性丙烯腈染毒,空白组注射生理盐水。2-DG预处理为100 mg/kg每天定时腹腔注射1次,持续1周,随后丙烯腈染毒;丙烯腈组腹腔注射丙烯腈(质量浓度为50、75 mg/kg)1 h后麻醉大鼠并断头处死,迅速在冰上分离脑和肝,利用蛋白印迹法检测葡萄糖调节蛋白78（glucose-regulated protein, Grp78）的表达,同时测定肝脏和大脑中丙二醛、还原性谷胱甘肽（GSH）含量和SOD活性。结果： 与空白组比较,2-DG对大鼠肝脏和大脑中Grp78的表达具有明显的诱导作用（P＜0.05）,丙烯腈染毒明显增加大鼠肝脏和大脑中丙二醛含量（P＜0.05）,但却明显降低GSH含量和SOD活性（P＜0.05）。经2-DG预处理后丙烯腈染毒大鼠肝、脑中的丙二醛含量增加幅度减小,且GSH含量和SOD活性的降低也有所缓解。结论： 内质网应激诱导能拮抗丙烯腈诱导的氧化性损伤。     

小鼠CYP2E1基因靶向miRNA表达载体的构建及鉴定

目的 设计并构建靶向小鼠CYP2E1基因的miRNA干扰质粒,为探索CYP2E1基因功能奠定基础.方法 应用invitrogen设计软件设计两条干扰小鼠CYP2E1基因的靶向miRNA序列,合成相应的回文DNA序列,退火后分别连接到pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR载体上,构建两套miRNA真核表达载体CYP2E1-miR1和CYP2E1-miR2,并使用该载体特有的串联方法将两载体上的miRNA前体寡核苷酸序列进行串联成为CYP2E1-miR1-miR2;将上述重组载体分别与构建的pcDNA3.1(+)-CYP2E1表达质粒共转染入293T细胞,RT-PCR法鉴定其干扰效果.结果 经酶切及测序鉴定,针对鼠CYP2E1基因的miRNA干扰质粒构建成功,并能够有效抑制共转染入293T细胞的pcDNA3.1(+)-CYP2E1质粒的表达,且串联质粒CYP2E1-miR1-miR2优于单独的干扰质粒CYP2E1-miR1及CYP2E1-miR2.结论 小鼠CYP2E1基因的靶向miRNA表达载体构建成功.     

酒精性肝病细胞凋亡的相关机制研究

目的探讨大鼠酒精性肝病细胞凋亡与细胞色素P4502E1、TNF-α及氧自由基的关系。方法采用灌胃法制备大鼠酒精性肝病(ALD)模型,模型组用40%酒精8g/(kg·d)分2次灌胃,共8周,对照组灌等量的生理盐水。采用TUNEL法检测肝细胞的凋亡、用PCR法测定细胞色素P4502E1的表达、放射免疫法检测血清TNF-α含量、硫代巴比妥酸(TBA)法测血清丙二醛(MDA)的含量、黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)的活力。结果模型组凋亡的肝细胞明显增多,主要分布在中央静脉周围、点状和灶状坏死区。CYP2E1表达:对照组c1基因频率为91.65%、c2基因频率为8.35%;模型组c1基因频率为53.35%、c2基因频率为46.65%,差异均有显著性(P<0.05)。血清TNF-α水平与肝细胞凋亡指数及SOD与MDA水平之间有相关性(TNF:AI,r= 0.836;SOD:MDA,r=-0.582)。结论长期酒精摄入可引起肝细胞凋亡增多,CYP2E1基因PstI及RsaIRFLPs与酒精性肝病有关,其中c2基因可能与大鼠酒精性肝病的发生有关,TNF-α和氧自由基及脂质过氧化损伤在酒精性肝病的肝细胞凋亡过程中起一定作用。     

CYP2E1基因多态性与肺癌遗传易感性的关系

目的 研究CYP2E1基因多态性与中国四川汉族人群肺癌遗传易感性之间的相关性.方法 应用PCR-RFLP技术检测150例中国四川汉族肺癌患者和152例健康人的CYP2E1基因Rsa Ⅰ/Pst Ⅰ和Dra Ⅰ多态性的分布频率,并分析了这两种基因多态性与中国四川汉族人群肺癌遗传易感性之间的相关性,以及与吸烟在肺癌易感性中的交互作用.结果 ①CYP2E1基因Rsa Ⅰ/Pst Ⅰ和Dra Ⅰ多态基因型分布频率在2组间比较无显著性差异(分别为x2=3.186,P=0.203和x2=1.756,P=0.416);②按照吸烟因素分层,携带c1/c1基因型的不吸烟个体较携带突变基因型的个体肺癌风险显著增加(OR=2.453,95%CI=1.140～5.276,P=0.022);③与携带至少1个突变c2基因型的个体比较,携带c1/c1基因型的个体患肺腺癌的风险显著增加(OR=2.440,95%CI=1.235～4.820,P=0.01);④没有发现Dra Ⅰ多态性与肺癌风险之间的相关件.结论 ①CYP2E1的c1/c1基因型为中国四川汉族人群肺癌易感基因型;②Rsa Ⅰ/Pst Ⅰ多态性与中国四川汉族人群患肺腺癌的风险显著相关;③Dra Ⅰ多态性与中国四川汉族人群肺癌风险无相关性.     

细胞色素p450基因多态性与肝癌遗传易感性的关系

【目的】探讨CYP1A1和CYP2E1基因多态性与肝癌发生的关系。【方法】分别以PCR和PCR-RFLP方法分析CYP1A1和CYP2E1基因多态性。【结果】病例组Val/Val基因型比例为15.9%(10/63),高于对照组的7.0%(6/86)。携带Val/Val基因型比Ile/Ile基因型患肝癌的风险性高2.68倍。而CYP2E1基因各基因型构成两组未见显著性差异。【结论】CYP1A1基因中携带Val/Val基因型的个体更易发生肝癌,而CYP2E1基因各基因型与肝癌的发生无关。     

代谢酶基因多态性与胃癌遗传易感性的研究进展

胃癌的发生是一个遗传和环境等多因素共同作用的过程,人体对内外源性致癌物的代谢能力影响个体对胃癌的易感性。影响胃癌遗传易感性的代谢酶基因主要有:与Ⅰ相代谢有关的CYP1A1、CYP2E1基因和与Ⅱ相代谢有关的GSTM1、GSTT1基因等。代谢酶基因多态性在胃癌发病中的重要作用已被越来越多的研究所证实。     

壮骨关节丸对大鼠肝微粒体P450的影响

[目的] 考察壮骨关节丸对大鼠肝微粒体细胞色素P450的影响。[方法] 壮骨关节丸及其两个新工艺按含生药2.1 g/kg连续给大鼠灌胃7 d,末次药后24 h断头处死大鼠并取肝脏,用钙沉降法制备肝微粒体。在体外用含氨苯砜、非那西丁、奥美拉唑、氯唑沙宗的cocktail探针代谢来考察肝微粒体CYP3A、CYP1A2、CYP2C19、 CYP2E1的活性。[结果] cocktail探针在体外肝微粒体系统中代谢1 h后,包括壮骨关节丸及其两个新工艺的给药组剩余氯唑沙宗浓度显著高于对照组,而奥美拉唑、非那西丁、氨苯砜浓度与对照组之间差异无统计学意义。[结论] 壮骨关节丸可以抑制大鼠肝脏CYP2E1活性,但对CYP1A2、CYP3A及CYP2C19无显著影响。     

吉林女性人群GSTM1及CYP2E1 PstⅠ基因多态性分析

目的 检测吉林女性人群GSTM1及CYP2E1 PstⅠ基因多态性,为研究这两个基因多态性与乳腺癌易感性的关系提供基础.方法 用PCR直接和PCR-RFLP检测吉林正常女性人群GSTM1和CYP2E1 PstⅠ基因型.结果 共检测107例正常女性GSTM1和CYP2E1 PstⅠ基因型,其中GSTM1非缺失型54例,占...