PGC-1β调节大鼠ALAS-1基因表达机制的初步探讨

目的 检测PGC-1β在人肝癌细胞（Hep G2）和大鼠肝原代细胞中调节大鼠ALAS-1基因表达。方法 在Hep G2细胞中瞬时转染PGC-1β,用双荧光报告系统,检测过表达PGC-1β时,大鼠ALAS-1启动子报告基因的活性变化。同时构建了5'端顺式元件系列截短和突变的ALAS-1启动子报告基因,检测并分析介导PGC-1β作用的转录因子结合元件。分离肝原代细胞并检测PGC-1β对ALAS-1转录的影响。构建干扰NRF-1基因的siRNA腺病毒,证明,NRF-1介导PGC-1β激活ALAS-1启动子转录的作用。结果 在Hep G2细胞中,过表达PGC-1β显著促进ALAS-1表达。分别构建了FoxA2和NRF1结合元件突变的ALAS-1启动子,发现PGC-1β对NRF1突变的ALAS-1启动子的激活作用显著下降,而FoxA2作用不明显。在肝原代细胞中过表达PGC-1β促进了ALAS-1的转录。当用小RNA干扰NRF-1的表达后,则抑制了PGC-1β对ALAS-1转录的促进作用。结论 在Hep G2 和大鼠肝原代细胞中,PGC-1β能够促进ALAS-1基因的表达,并且这种作用是通过NRF-1介导完成的。     

白细胞相关免疫球蛋白样受体研究进展

白细胞相关免疫球蛋白样受体(leukocyteassociatedimmunoglobulinlikereceptor,LAIR)是表达于多种免疫细胞上的重要受体,它的主要功能是抑制效应细胞对靶细胞的杀伤,并在造血细胞的分化、增殖中具有重要的调节作用。人可溶型LAIR-1(solublehumanLAIR-1,shLAIR-1)还与某些疾病的病情、病程有一定的联系。文章拟对该分子的研究进展作一综述。     

Distinct Kinetics Features of LFA-1 and Mac-1 in Neutrophil Activation

LFA-1 and Mac-l, two [32 integrin members constitutively expressed on neutrophils, mediate leukocyte recruitment cascade by binding to the same ligand of ICAM-1. The slow rolling and firm adhesion of leukoeytes rely on LFA-1 while the cell crawling is dependent on Mac-1. We hypothesized that their distinct roles were likely attributed to the differences in the binding kinetics or in the diverse responses of outside-in and inside-out signaling. In this study, we compared the ICAM-1 binding features between soluble or membrane-expressed LFA-1 and Mac-1 with different affinity conformations using optical trap technique. Our data indicate that the affinity up-regulation from wide type （WT） to high affinity （HA） is off-rate dependent for LFA-1 but on-rate dependent for Mac-1. The structural bases of this new finding were found to be consistent with our previous simulations. These results furthered our understanding on their function differences under shear flow.     

晚期胃癌中PD-1/PD-L1的表达及其单抗治疗的临床现状

随着对肿瘤免疫逃逸机制研究的不断深入,PD-1及其配体PD-L1构成的PD-1/PD-L1通路被证实与晚期胃癌患者生存期相关,且PD-L1作为疗效预测标志物具有一定临床价值。在晚期胃癌的局部维持治疗、二线治疗及部分一线治疗的临床试验中,PD-1/PD-L1抑制剂均获得了较好的治疗效果。PD-1/PD-L1抑制剂联合放化疗、细胞因子与其他免疫抑制剂及JAK2/STAT1/IRF-1信号通路靶向治疗也有一定成效。文章就PD-1/PD-L1免疫检查点抑制剂用于晚期胃癌治疗的现状进行回顾,并对其假定的生物标志物,正在进行的试验以及今后的发展进行讨论。     

结直肠癌中HSF1、SIRT1与MDR1蛋白表达的相关性及其临床病理意义

目的探讨结直肠癌组织中热休克转录因子HSF1与SIRT1、MDR1蛋白表达的相关性及其临床病理意义。方法应用免疫组化和Western blot检测结直肠癌组织和正常结直肠黏膜组织中HSF1、SIRT1、MDR1的表达,分析三者之间的相关性及其与临床病理特征、预后的关系。结果 (1)结直肠癌组织中HSF1、SIRT1、MDR1的表达水平高于正常结直肠黏膜组织,差异有显著性(P0.05);(2)HSF1阳性组的结直肠癌中,MDR1的表达高于HSF1阴性组,差异有统计学意义(P0.01),Spearman相关分析显示,HSF1与MDR1的表达呈正相关(r=0.478,P0.01);(3)HSF1与SIRT1均阳性的结直肠癌组中MDR1的表达高于其他组,差异有显著性(P0.01),Spearman相关分析显示,HSF1阳性组中MDR1的表达与SIRT1呈正相关(r=0.316,P0.01);(4)HSF1、SIRT1的表达水平与肿瘤分化程度、淋巴结转移有相关性,且HSF1的表达与肿瘤的浸润深度相关;三者均是结直肠癌预后的独立危险因素。结论结直肠癌中HSF1与MDR1的表达有相关性,参与肿瘤多药耐药性;SIRT1可影响HSF1对MDR1的调控;HSF1、SIRT1的表达与肿瘤的生物学行为有关,三者可作为评估结直肠癌患者预后及个性化治疗的潜在分子标志物。     

抑郁症患者中升高的前列腺素E1与抑郁样行为相关

目的研究在抑郁症(MDD)患者队列外周血及慢性不可预知温和型应激(CUMS)小鼠模型大脑组织中前列腺素E1(PGE1)浓度及其代谢通路上的关键基因(PLA2、PTGS1、PTGS2和PTGES)表达量的改变,以明确PGE1的改变与MDD疾病间的关系。方法用高效液相色谱(HPLC)检测受试者外周血浆和CUMS小鼠脑组织中PGE1和PGE2的浓度;用RT-qPCR检测PLA2、PTGS1、PTGS2和PTGES的mRNA表达水平。结果在MDD患者中,血浆PGE1浓度和PTGS1的表达水平均显著上升(P0.05)。这一结果在CUMS小鼠外周血和大脑杏仁核组织中得到了有效验证。结论 PGE1在MDD中的上升,可能与前列腺素合成通路的功能亢进有关。     

α4整合素及其配体的分子结构和功能

整合素(Integrin)分子由α和β两个亚基组成,α4整合素有α4β1和α4β7两种,它们的配体分别是VCAM-1(vascular cell adhesion molecule-1)和MAdCAM-1(mucosal adressin cell ad-hesion molecule-1)。α4整合素及其配体通过介导淋巴细胞与内皮细胞的相互作用,参与了多种生理和病理过程。抗α4的单克隆抗体(mAb),已成功地用于治疗和预防实验诱导的一些疾病。     

韩国人CYP450 1A1、CYP450 2E1和GSTM1、GSTT1、GSTP1基因座遗传多态性分析

目的 调查代谢相关的CYP4501A1、CYP4502E1和GSTM1、GSIT1、GSTP1基因座在韩国人群中的遗传多态性分布状况。方法 采用多重聚合酶链式反应、聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性技术，分析300名韩国健康大学生的CYP1A1基因3′端限制性内切酶Msp Ⅰ位点、CYP2E1基因5′端转录调节区Pst Ⅰ位点和GSTM1、GSTT1缺失与存在、GSTP1基因第5外显子BsmA Ⅰ位点的基因型，计算基因型和基因频率。结果 CYP1A1基因型频率为ml／ml型39．7％、ml／m2型49．7％、m2／m2型10．7％，基因频率为ml 0．645、m2 0．355。CYP2E1基因型频率为cl／cl型66．7％、cl／c2型30％、c2／c2型3．3％，基因频率为C1 0．818、C2 0．182。GSTM1基因缺失型频率为53．3％。GSTT1基因缺失型频率为54．7％。GSTP1基因型频率为Ile／Ile型62％、Ile／Val型34．3％、VaL／Val型3．7％，基因频率为Ile 0．792、Val 0．208。基因分布符合Hardy-Weirtberg平衡定律。结论 韩国人CYP1A1、CYP2E1、GSTM1、GSTT1基因分布与我国人群较为相近，半数以上人缺乏GSTM1和GSTT1基因，纯合缺失型频率超过印度人的3倍。     

2型糖尿病患者单核巨噬细胞胆固醇外流的降低与ABCG1表达下调相关

目的 研究2型糖尿病患者巨噬细胞内胆固醇外流的变化及ABCA1、ABCG1和SR-B1的表达情况。方法 选取2型糖尿病患者30例（包括合并冠心病组与单纯糖尿病组各15例）和正常对照组15例。分离外周血单核细胞进行巨噬化培养,应用Real-time PCR与Western blot方法测定细胞ATP结合盒受体A1（ABCA1）、ATP结合盒受体G1（ABCG1）和清道夫受体B1（SR-B1）的mRNA及蛋白表达。以5%自身血清及标准血清为接受体测定巨噬细胞胆固醇流出率。 结果ABCG1在2型糖尿病患者巨噬细胞的mRNA与蛋白表达显著低于对照组,而ABCA1与SR-B1的表达在各组间无差异。2型糖尿病患者巨噬细胞的胆固醇流出率也显著低于对照组（P＜0.01）;ABCG1的mRNA表达与巨噬细胞胆固醇外流率呈显著正相关（r=0.552,r=0.630,P＜0.01）。结论 2型糖尿病患者巨噬细胞的胆固醇外流功能明显降低,与ABCG1表达下调相关。     

脑海绵状血管瘤的研究进展

脑海绵状血管瘤是一种常见的多发病,在临床上可分为家族性遗传和散发性病例两大类。由于致病基因和发病机制尚未完全探明,治疗十分困难。但发病率高,拥有广阔的治疗前景,所以对脑海绵状血管瘤的研究已经成为医学和分子遗传学研究领域的热点之一。现已取得了一些进展,主要包括:已经定位出一些致病座位(locus),克隆出一个致病基因,并在可能的发病机制方面通过多种方法进行了初步研究。本文将结合汉族人群中相关病例对该病的研究进展作一综述,以期为国内对脑海绵状血管瘤的研究提供参考资料。     

长链非编码RNA HNF1A-AS1靶向has-miR-1对膀胱癌细胞生长和侵袭的调节作用及机制研究

目的：探究长链非编码RNA HNF1A-AS1通过靶向miR-1对膀胱癌细胞增殖和侵袭的作用。方法：荧光定量检测膀胱癌细胞系和正常泌尿道上皮细胞HNF1A-AS1和miR-1的表达情况;分别过表达或沉默HNF1A-AS1和miR-1,荧光定量检测miR-1的表达情况;荧光素酶报告实验确定HNF1A-AS1与miR-1的靶向关系;分别沉默HNF1A-AS1和miR-1,MTT和侵袭实验检测细胞活性和侵袭能力,免疫印迹检测细胞增殖及侵袭相关蛋白的表达。结果：根据预实验结果选择253J细胞系进行后续实验。HNF1A-AS1过表达可明显抑制miR-1表达(P<0.05),减弱miR-1 mimic对miR-1表达的促进作用(P<0.05)。沉默HNF1A-AS1可显著促进miR-1表达(P<0.05),减弱miR-1 inhibitor对miR-1表达的抑制作用(P<0.05);同时,HNF1A-AS1还可明显减弱带有miR-1片段野生型质粒的荧光素酶活性(P<0.05);此外,沉默HNF1A-AS1可显著抑制膀胱癌细胞增殖及侵袭(P<0.05),并且还能显著抑制细胞增殖相关蛋白Ki67、PCNA和侵袭相关蛋白MMP-9、VEGF的表达(P<0.05);抑制miR-1表达可明显减弱shRNA对癌细胞增殖和侵袭的抑制作用(P<0.05)。结论：沉默HNF1A-AS1可通过靶向上调miR-1表达减弱膀胱癌细胞的增殖和侵袭能力。     

中国首例甲型H1N1流感二代病例的临床特征

目的了解2009年我国首例甲型H1N1流感二代病例的流行病学、临床、病原学检查特点及预后转归。方法对患者流行病学及临床资料进行回顾性分析,并采用实时荧光聚合酶链反应测定甲型H1N1流感病毒核酸。结果患者与甲型H1N1流感输入病例接触1天后发病。以发热、咽痛、咳嗽起病,白细胞及CD4＋T淋巴细胞计数降低,无肺炎等并发症。多级机构检测咽拭子甲型H1N1流感病毒核酸阳性确诊甲型H1N1流感。RT-PCR测序证实其病毒核苷酸序列与一代输入病例的一致,同源性为100%。经奥司他韦抗病毒及对症治疗痊愈出院。结论本病例的传染源明确,为我国首例报告的甲型H1N1流感二代确诊病例,其临床表现轻,病情恢复快。未发生院内感染,早隔离早诊断等防控措施有效。     

白细胞介素-1信号转导调控研究进展

白细胞介素 1 (interleukin 1, IL 1 )是一种主要由巨噬细胞产生的促炎性细胞因子, 是体内调节免疫和炎症反应的中心介质, 在许多慢性炎症和其他一些自身免疫病中, 无论是在疾病引发的起始阶段还是在炎症反应发展的过程中, 若是产生在不恰当的位置或是含量不适当都将对机体产生负面的效应, 诸如关节炎、多肽骨髓瘤等许多疾病都是由IL 1引起的。为了避免IL 1所产生的负面效应对机体造成的伤害, 必须对机体中的IL 1进行多层面的严格调控。以往许多用来调控IL 1生物效应的常规策略都是基于天然调控途径, 如使用亲和力较强的IL 1受体拮…     

重组HMGB1对DEN2感染Ana-1细胞分泌TNF-α及NO的影响

目的:观察不同浓度重组高迁移率族蛋白1(recombination high mobility group box protein 1,r HMGB1)对DEN2感染鼠源单核巨噬细胞Ana-1分泌TNF-α、NO及DEN复制的影响。方法:直接免疫荧光法鉴定DEN2吸附Ana-1细胞;qRTPCR检测不同时间胞内病毒载量变化;双抗体夹心ELISA法检测感染不同时间TNF-α的分泌水平,Griess试剂检测细胞释放NO变化。结果:不同剂量r HMGB1处理Ana-1细胞后,对DEN2感染细胞的病毒抑制率(%)分别为41.53±2.12﹑55.30±1.59﹑74.75±1.12﹑86.35±1.42,差异有统计学意义(P0.05)。r HMGB1处理后,感染细胞分泌TNF-α和NO水平均有所下降,差异有统计学意义(P0.05)。结论:r HMGB1可有效调节DEN2感染Ana-1细胞的TNF-α和NO分泌,并抑制DEN2的增殖。     

IL-1R AcP的研究进展

IL-1是一重要的炎性细胞因子.它参与介导类风湿关节炎、系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病的病理过程.IL-1受体家族有IL-1RI、IL-1RⅡ和IL-1RAcP(IL-1 receptor accessory protein,白细胞介素1受体辅助蛋白).IL-1RI是功能性受体,IL-1RⅡ是"伪受体".IL-1RAcP是近年来发现的参与IL-1信号传导的重要分子,它的表达与否与细胞对IL-1的反应相关.本文综述了IL-1RAcP对IL-1与IL-1R结合的影响,IL-1RAcP参与的信号转导及其可能的调节机制.     

流感病毒H1N1感染后宿主细胞MTH1基因表达的研究

目的观察H1N1型流感病毒诱导的MDCK细胞抗氧化相关修复基因MTH1表达量的变化。方法 MDCK细胞培养后,H1N1型流感病毒感染0、1、3、6、12、24、48h,在各时间点经RT-PCR反应检测细胞内MTH1基因的相对表达量。结果甲型H1N1流感病毒感染后0、6、12h,MTH1基因的表达量与正常对照组差异无统计学意义;感染后1、3hMTH1基因的表达量显著高于正常对照组;感染后24、48h表达量显著低于正常对照组。结论 H1N1流感病毒感染细胞的MTH1基因表达的增加,可能增加细胞对DNA氧化损伤的修复能力,在流感发生和防御机制中起到作用。     

一例Rotor综合征患儿的基因变异分析

目的探讨1例Rotor综合征患儿的遗传学病因。方法收集患儿的临床资料,应用高通量测序技术对患者行全外显子组测序并进行Sanger测序验证。用单管三引物PCR分析法检测SLCO1B3基因第5内含子长散布元件-1(long-interspersed element-1,LINE-1)的插入情况。结果高通量全外显子组测序发现患儿携带SLCO1B1基因c.1738C>T纯合无义变异。SLCO1B3基因第5内含子中LINE-1的纯合插入,导致第5外显子或第5~7外显子跳跃,并在SLCO1B3转录本中引入了终止密码子。结论SLCO1B1基因c.1738C>T纯合变异以及SLCO1B3基因第5内含子LINE-1的纯合插入可能是该Rotor综合征患儿的致病原因。     

Notch1/Hes1信号通路在调控低分化胃腺癌细胞钙离子和侵袭能力中的作用

目的 探讨Notch1/Hes1信号通路对胃癌细胞钙离子水平的影响及其与侵袭的关系.方法 采用免疫组化法检测32例原发性低分化胃腺癌组织及32例癌旁正常组织中Notch1、Hes1、Calpain-1和E-cadherin蛋白的表达.将MGC-803细胞分为对照组、Lipofectamine 2000组、Notch1 ...     

2009年泉州市H1N1流感监测及基因特性分析

目的 了解2009年泉州地区H1N1流感监测情况,分析泉州市H1N1流感病毒的HA和NA基因特征,探讨该病毒的遗传变异及分子特性.方法 对泉州市H1N1流感监测期间的病人咽拭子采用real-time RT-PCR方法检测病毒核酸,MDCK细胞培养进行病毒分离、鉴定,并提取其中2株代表性毒株病毒RNA;采用RT-PCR扩增病毒HA和NA基因,纯化产物进行核苷酸序列测定;用DNAStar Megalign软件进行序列分析.结果 1020份咽拭子中有200份为H1N1流感病毒核酸阳性,70份季节性流感病毒核酸阳性,其中53份为H3N2亚型,14份为H1N1亚型,3份为B型,并分离到29株甲型H1N1流感病毒株.HA基因经核苷酸序列测定显示,该毒株与北美流行株高度同源,由HA基因核苷酸序列推导的氨基酸系列与疫苗株A/Brisbane/59/2007相比,有22个位于抗原决定簇的氨基酸位点发生变异,但受体结合特异性仍为人样受体.NA基因耐药性位点分析,显示对达菲药物依然敏感.结论 2009年泉州市H1N1流感流行毒株与北美流行株高度同源,相对于疫苗代表株出现了HA蛋白抗原性的改变.     

中国人CYP1A1和GSTM1基因多态性及其对个体肺癌易感性的联合效应

目的 在中国江苏肺癌患者和对照人群中,检测CYP1A1 Ile/Val,GSTM1 /0遗传多态性的各基因型及其联合基因型的分布,探讨这些基因型与肺癌个体易感性的关系。方法 配对的病例－对照组各106例,静脉血制备DNA。分别应用等位基因特异性（allele-specific,AS)-PCR和多重差别（multidifferential,MD)-PCR,检测CYP1A1 Ile/Val和GSTM1＋／0的等位基因型。结果 CYP1A1少见等位基因Val/Val纯合子及其与GSTM1基因缺失纯合子（0／0）的联合基因个体,与对照常见基因型个体相比,增加了对肺癌的易感性,其相对危险度（odds ratio,OR)分别为4．02（P＝0．03）和9．38（P＝0．04）;GSTM10／0纯合子及其与CYP1A1 Ile/Val杂合子的联合基因型个体,显著增加了肺癌易感性,其OR值分别是1．92（P＝0．019）和3．27（P＝0．01）。结论 中国江苏人群中,少见基因型CYP1A1 Val/Val,GSTM10/0增加了个体肺癌易感性,在肺癌发生中,上述两种易感基因型间存在协同或相乘作用。