免疫组化双重染色技术在非小细胞肺癌PD-L1检测中的应用

目的 探讨免疫组化双重染色技术应用于非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)PD-L1表达检测的价值.方法 建立PD-L1/TTF-1和PD-L1/p40免疫组化双重染色技术,分析TTF-1和p40阳性癌细胞中PD-L1肿瘤比例评分(tumor proportion score,...     

免疫组化和组织化学双重染色技术在组织芯片上的应用

组织芯片是从组织块中挑选典型部位的组织以获得数百个圆柱状的样本，并按次序排列在一个新的石蜡块上，制作成HE切片，然后按研究的需要进行免疫组化及原位杂交等研究。组织芯片技术最重要的特点是：一次可以同时对多个组织块检测研究而对原来的组织材料破坏很小。此外，利用组织芯片仪还可以进行组织切片的精确定位和多种类型的分子生物学分析。     

晚期胃癌中PD-1/PD-L1的表达及其单抗治疗的临床现状

随着对肿瘤免疫逃逸机制研究的不断深入,PD-1及其配体PD-L1构成的PD-1/PD-L1通路被证实与晚期胃癌患者生存期相关,且PD-L1作为疗效预测标志物具有一定临床价值。在晚期胃癌的局部维持治疗、二线治疗及部分一线治疗的临床试验中,PD-1/PD-L1抑制剂均获得了较好的治疗效果。PD-1/PD-L1抑制剂联合放化疗、细胞因子与其他免疫抑制剂及JAK2/STAT1/IRF-1信号通路靶向治疗也有一定成效。文章就PD-1/PD-L1免疫检查点抑制剂用于晚期胃癌治疗的现状进行回顾,并对其假定的生物标志物,正在进行的试验以及今后的发展进行讨论。     

PD-1/PD-L1免疫抑制剂在肺癌临床治疗和病理检测中的研究进展

以程序性细胞死亡蛋白-1(programmed death-1, PD-1)及其配体(programmed death-ligand 1, PD-L1)抑制剂为代表的免疫治疗,在多种肿瘤(包括肺癌)的治疗上有出色的表现。对于非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)的治疗,除了基于驱动基因突变的靶向治疗,其耐药后及驱动基因野生型患者的下一步治疗可以根据检测相关标志物进行PD-1/PD-L1免疫治疗;对于小细胞肺癌(small cell lung cancer, SCLC),除了化疗方案,近些年陆续有多种PD-1/PD-L1免疫抑制剂获批用于SCLC的适应症。对可能预测PD-1/PD-L1抑制剂疗效的相关病理检测指标,目前并未达成一致的结论。该文就近年来对PD-1/PD-L1相关的免疫治疗在NSCLC和SCLC治疗和病理检测中的研究进展作一综述。     

溶瘤病毒联合PD-1/PD-L1抑制剂的研究进展

溶瘤病毒常以两种方式与程序性死亡受体1/程序性死亡受体-配体1(PD-1/PD-L1)为代表的免疫检查点抑制剂联合使用,一种为PD-1/PD-L1抑制剂联合基因重组修饰以及天然弱毒性的溶瘤病毒,另一种则是携带PD-1/PD-L1抗体基因的基因重组溶瘤病毒.     

PD-1/PD-L1在卵巢癌化疗耐药机制中的相关研究进展

卵巢癌患者确诊时多已为晚期,治疗时的高复发率及多药耐药一直是临床亟需解决的问题.改善晚期卵巢癌患者的生存情况是抗肿瘤治疗的最终目的.目前越来越多的证据表明,卵巢癌是一种免疫原性疾病,免疫逃逸机制在肿瘤发生、发展中扮演重要角色.近年有关PD-1/PD-L1的靶向治疗和免疫治疗在临床研究中获得突破性进展,不仅明确PD-1/...     

RNAscope原位杂交技术在胃癌PD-1、PD-L1表达分析中的应用

目的 探讨RNAscope原位杂交技术在检测胃癌程序性死亡受体-1(programmed death 1, PD-1)及程序性死亡配体-1(programmed death-ligand 1, PD-L1)表达中的应用价值。方法 利用RNAscope原位杂交技术检测255例胃癌中PD-1、PD-L1 mRNA表达水平;应用免疫组化EnVision法检测255例胃癌中PD-1、PD-L1蛋白表达水平。结果 RNAscope检测结果显示：PD-1、PD-L1 mRNA阳性为细胞质或细胞核中有棕黄色颗粒状物。PD-1 mRNA阳性定位于肿瘤间质免疫细胞,PD-L1 mRNA阳性定位于肿瘤细胞或肿瘤间质免疫细胞。PD-1 mRNA阳性率为20.39%(52/255),PD-L1 mRNA阳性率为14.12%(36/255)。免疫组化检测显示：PD-1阳性定位于细胞质,PD-1主要表达于肿瘤间质免疫细胞;PD-L1可表达于肿瘤细胞或肿瘤间质免疫细胞,肿瘤细胞PD-L1阳性定位于细胞膜(部分或完全膜染色),免疫细胞PD-L1阳性定位于细胞质或细胞膜。PD-1蛋白阳性率为14.12%(36/255)...     

应用基因芯片筛选慢性乙型肝炎患者PD-1/PD-L通路基因差异表达

目的 应用基因芯片技术筛选慢乙肝病人PD-1/PD-L通路差异性表达的基因.方法 应用基因芯片技术筛选4例慢乙肝病人与2例健康人外周血,获得差异性表达的基因,结合初步构建的PD-1/PD-L信号通路,挑选出一致的转录因子或调控蛋白,并应用Western blot方法检测CD 40L、Bcl-10、GATA-3、NFAT蛋白的水平的表达.结果 与健康人相比,慢乙肝患者有838个异常表达的基因,其中高表达的基因有150个,低表达的基因有688个.在这些异常表达基因中,有13个基因属于所构建的PD-1/PD-L信号通路中的转录因子或调控蛋白,其中表达上调的6个分别是BCL-10、AP、SRY、MYOD1、ELK4、NFAT,表达下调的7个分别是CD 40L、GADS、PDK1、IL-4、GATA3、CREB、RARG.Westem blotting法证实慢乙肝组高表达BCL-10,低表达CD 40L、GATA3,NFAT但与病毒载量不相关.结论 CD40L、BCL-10、GATA3、NFAT在慢性乙型肝炎患者PD-1/PD-L信号传导通路中可能有重要的调控作用,可以做深入的功能分析研究.     

胸腺瘤免疫组化研究

使用17种抗体对20例胸腺瘤进行免疫组化标记,结果显示:6例上皮型胸腺瘤中,3例为癌胚抗原(CEA)、Keratin、EMA阳性;2例为FN、Vimentin和A_1-AT阳性;1例为NSE和S-100蛋白质阳性。11例淋巴细胞型胸腺瘤中,8例为MB_2和免疫球蛋白轻、重链阳性。3例混合型胸腺瘤中,2例为NSE和S-100蛋白质阳性;1例Vimentin和FN阳性;淋巴细胞均为多克隆性。因此,本文提出对胸腺瘤免疫标记的研究及其重新分类是必要的。     

PD-1/PD-L1在非小细胞肺癌中的研究进展及展望

PD-1(programmed cell death-1,程序性死亡受体1)与其配体PD-L1(programmed cell death-ligand 1,程序性死亡配体1)属于CD28/B7家族,是一对共刺激分子,具有负性调控作用。PD-1通过与其配体PD-L1结合调节肿瘤的微环境,使肿瘤细胞免于机体免疫系统的监视和清除。目前已有较多研究显示PD-1/PD-L1在非小细胞肺癌组织中的表达水平与患者的临床病理因素及预后存在显著的相关性。在非小细胞肺癌的治疗领域,以PD-1/PD-L1为代表的免疫治疗成为继手术治疗、化疗、放疗、分子靶向治疗之后的新焦点。PD-1/PD-L1抑制剂在一系列非小细胞肺癌临床试验中也显示出了巨大的临床潜力。本文就PD-1/PD-L1的生物学结构及其在非小细胞肺癌中的作用机制、研究进展及展望作一综述。     

高温高压处理在消除双重免疫组化染色交叉反应中的应用

双重免疫组化染色可以在同一张组织切片上清晰地观察到2种不同抗原的表达,更便于病理医生进行观察及诊断.然而,在进行双重免疫组化染色的时候,常常会因为后一种免疫染色所用的抗体系统可能与前一种染色所用的抗体系统发生交叉反应,影响观察,失去双重免疫组化染色的准确性和意义[1].     

胸腺上皮性肿瘤中PD-L1的表达及意义

目的探讨PD-L1在胸腺上皮性肿瘤(thymic epithelial tumors,TETs)中的表达及与其临床病理特征的关系。方法收集南京市胸科医院2012～2017年手术切除的胸腺瘤上皮性肿瘤标本124例,根据WHO(2015)将TETs分成A、AB、B1、B2、B3型胸腺瘤和胸腺癌。采用免疫组化En Vision两步法检测PD-L1蛋白表达。结果 124例TETs中,39例PD-L1阳性:A型胸腺瘤1例,AB型胸腺瘤2例,B1型胸腺瘤7例,B2型胸腺瘤9例,B3型胸腺瘤10例,胸腺癌10例。PD-L1蛋白在B2、B3型胸腺瘤及胸腺癌中的表达高于A、AB、B1型胸腺瘤(P 0. 001),在Masaoka临床分期Ⅲ+Ⅳ期中的表达高于Ⅰ+Ⅱ期(P 0. 05),与患者性别、年龄等临床特征均无统计学意义(P 0. 05)。结论 PD-L1表达与TETs组织学类型有关,随着胸腺肿瘤上皮细胞增多,病理分级的增高,表达也增高,因此抗PD-1/PD-L1免疫治疗药物在有些胸腺瘤及胸腺癌中可能会有一定帮助。     

胸腺上皮性肿瘤中PD-L1与MMR的表达及临床意义

目的探讨PD-L1、错配修复(mismatch repair, MMR)蛋白在胸腺上皮性肿瘤(thymic epithelial tumors, TET)中表达及与临床病理特征的关系。方法收集TET标本60例,其中胸腺瘤46例,胸腺癌14例。采用免疫组化法检测PD-L1和MMR蛋白的表达。结果 60例TET中PD-L1阳性率为58.33%,PD-L1在B3型胸腺瘤和胸腺癌中的表达高于其他类型胸腺瘤(P0.05),与患者性别、年龄、肿瘤大小等临床特征之间均无统计学意义(P0.05)。60例TET中11例MMR蛋白缺失,以MLH1和PMS2联合缺失为主。MMR蛋白缺失在A型胸腺瘤中高于其他类型胸腺瘤和胸腺癌(P0.05),与患者性别、年龄、肿瘤大小等临床特征之间均无统计学意义(P0.05)。PD-L1表达与MMR蛋白缺失之间无相关性(P0.05)。结论 PD-L1表达与TET组织恶性程度高相关,MMR蛋白缺失主要为A型胸腺瘤;PD-L1表达与MMR蛋白缺失之间无相关性。     

介绍一种PAS与免疫组化双重染色技术

用过碘酸-无色晶红法与免疫组化SP法双重染色可同时显示胃肿瘤中癌细胞成分及组织中腺体所分泌的黏液成分,能更好的进行鉴别诊断。     

抗PD-1及PD-L1在肿瘤治疗中的进展北大核心CSCD

程序性死亡受体-1（PD-1）与其配体（PD-L1、PD-L2）对T淋巴细胞的抑制、＂耗竭＂以及诱导免疫耐受发挥着至关重要的作用。在肿瘤患者体内,PD-1/PD-L1的高表达能够增强肿瘤的转移能力、导致患者死亡率上升,抑制PD-1/PD-L1信号通路成为新近研究的热点。     

布鲁氏菌病患者中PD-1 和PD-L1 的表达

目的:研究程序性死亡受体1(PD-1) / 与配体(PD-L1) 以及相关细胞因子转化生长因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β)和白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)在布鲁氏菌病(Brucellosis)患者中的变化。方法:选取60 例布鲁氏菌病患者与60 例健康志愿者,采用流式细胞术分别检测其外周血单个核细胞(PBMC)中CD3+ T 细胞、CD4+ T 细胞、CD8+T 细胞中PD-1 的表达,以及树突状细胞(Dendritic cell,DC)中PD-L1 的表达,同时采用流式液相多重蛋白定量技术(Cytometric bead array,CBA )检测血清中TGF-β和IL-10 的变化,采用Pearson 法分析布鲁氏菌病患者体内PD-1 与TGF-β及IL-10 的相关性,并对34 例布鲁氏菌病治愈患者进行了追踪随访。结果:与正常对照组相比,布鲁氏菌病患者组外周血中PD-1、PD-L1 的表达及血清中TGF-β和IL-10 的水平均明显升高(P<0.01),而治愈组外周血中PD-1、PD-L1 的表达及血清中TGF-β和IL-10 的水平较治疗前明显降低(P<0.01),并且布鲁氏菌病患者组PD-1 的表达与TGF-β(r =0.817,P<0.01)及IL-10 均呈正相关(r = 0.835,P<0.01)。结论:PD-1/ PD-L1 及TGF-β和IL-10 在布鲁氏菌病患者体内高表达,可能共同参与了布鲁氏菌对宿主免疫应答的负性调控作用。     

人胰岛内分泌细胞的双重免疫组化研究

本文采用单酶双标法对成人胰岛内分泌细胞进行了双重免疫组化染色．结果发现：（1）成人胰岛为鞘型胰岛．即A、D细胞位于胰岛的周围部形成鞘．且二者间存在位置分布上的一致性；B细胞位于胰岛的中央部。（2）即使由于有结缔组织隔将胰岛分隔成不同的“亚单位”．其每一“亚单位”的周围部仍为A、D细胞，中央部仍为B细胞。     

PD-1/PD-L1参与NK细胞调控抗肿瘤免疫的作用机制

NK细胞以其特有的免疫应答在抗肿瘤免疫中倍受重视。作为肿瘤免疫治疗的“明星分子”PD-1/PD-L1在NK细胞及其抗肿瘤免疫中的作用尚不明确。该文通过分析PD-1/PD-L1分子在NK细胞中的表达,为PD-1/PD-L1分子在NK细胞抗肿瘤免疫中的作用、机制以及应用价值提供新思路。