1,5-二羟维生素D3对棕榈酸诱导巨噬细胞炎症因子表达的影响

目的研究1,25-二羟维生素D₃（1,25（OH）₂D₃）对棕榈酸（PMA）诱导THP-1巨噬细胞炎症因子表达的影响及其机制。方法用1,25（OH）₂D₃（10 nmol/L）和/或PMA（250μmol/L）处理THP-1巨噬细胞6 h,采用荧光定量PCR和酶联免疫吸附法（ELISA）法检测肿瘤坏死因子α（TNFα）、白细胞介素（IL）-1β、IL-6和IL-10的表达水平;用1,25（OH）₂D₃和/或PMA处理THP-1巨噬细胞60 min,采用免疫印迹（Western-blot）法检测AMPKα1和磷酸化AMPKα1（p-AMPKα1）水平。结果 1,25（OH）₂D₃（10μmol/L）)明显抑制PMA（250μmol/L）作用下THP-1巨噬细胞TNFα、IL-1β和IL-6的表达,并上调IL-10的表达;1,25（OH）₂D₃显著上调THP-1巨噬细胞AMPKα1的磷酸化水平。结论 1,25（OH）₂D₃抑制PMA诱导的THP-1巨噬细胞炎症因子表达,该效应可能与其激活AMPKα1有关。     

不对称二甲基精氨酸对THP-1源性巨噬细胞表达MIF和分泌TNF-α、IL-8的影响(英文)

目的观察不对称二甲基精氨酸(ADMA)对THP-1源性巨噬细胞表达巨噬细胞移动抑制因子(MIF)和分泌TNF-α、IL-8的影响。方法用PMA诱导单核细胞THP-1分化为巨噬细胞。将分化后的THP-1源性巨噬细胞用不同浓度的ADMA作用24 h后,分别采用RT-PCR、Western blot和ELISA方法检测MIF mRNA和蛋白表达水平及培养上清中TNF-α与IL-8的含量。结果 ADMA剂量依赖性的上调了THP-1源性巨噬细胞内MIF mRNA和蛋白表达,15μmol/L ADMA对MIFmRNA和蛋白表达的上调作用最明显。随着ADMA浓度增加,THP-1源性巨噬细胞培养上清中TNF-α和IL-8的水平逐渐升高,在15μmol/LADMA作用时达到峰值。结论 ADMA能够上调巨噬细胞内MIF的表达,促进TNF-α和IL-8的分泌。     

1,25-二羟基维生素D_3对溃疡性结肠炎小鼠免疫调节机制的研究

目的探讨1,25-二羟基维生素D_3[1,25(OH)_2D_3]对溃疡性结肠炎模型小鼠IL-23/IL-17的免疫调节机制。方法 2009年1—12月在河北中医药研究所,将30只小鼠随机分为1,25(OH)_2D_3干预组、模型组、对照组,前2组建立慢性期肠炎模型;观察小鼠一般情况及结肠病理变化,应用免疫组织化学染色测定结肠组织TNF-α、TGF-β炎性因子的变化;Western blot检测结肠组织IL-17、IL-23蛋白的表达。结果模型组小鼠结肠黏膜缺损,腺体破坏或消失,显微镜下可见黏膜、黏膜下层甚至肌层大量炎性细胞浸润;但1,25(OH)_2D_3干预后小鼠一般情况明显改善,炎性细胞浸润减少,炎性反应程度较模型组明显减轻;与模型组比较,干预组结肠组织TNF-α、TGF-β阳性细胞染色面积明显减小(F=280.48、358.75,P<0.01),结肠组织中IL-17、IL-23蛋白表达量显著降低(F=1 447.52、1457.57,P<0.01)。结论 1,25(OH)_2D_3对溃疡性结肠炎模型小鼠的肠黏膜组织及其IL-23/IL-17具有免疫调节作用。     

Inhibition of Proliferation of Human Megakaryoblastic Leukemic Cells by 1,25-Dihydroxyvitamin D_3 and Retinoic Acid

The effect of 1,25-dihydroxyvitamin D_3 [1,25(OH)_2D_3] and13-cis-retinoic acid(RA)on the proliferation of a novel human megakaryoblasticleukemia cell line(HIMeg)was investigated.At the concentration of 10~9 10~6mol/L,1,25(OH)_2D_3 and RA showed significant inhibition of the proliferation of themegakaryoblastic leukemic cells,which was demonstrated by the count of survival cells,incorporation of~3H-TdR and~3H-UR,and cloning efficiency in dose-dependent and time-dependent manners.The results can further explain the mechanism of differentiation-inducing agents and the effect of 1 ,25(OH)_2D_3 on myelofibrosis.It is possible for1,25(OH)_2D_3 and RA to be used to treat malignant megakaryocytic diseases.     

儿童支气管哮喘血清1,25二羟维生素D_3水平与支气管肺泡灌洗液MMP-9、TNF-α、TGF-β1、IL-6含量的关系

目的探究儿童支气管哮喘血清1,25二羟维生素D_3[1,25-(OH)_2D_3]水平与支气管肺泡灌洗液中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1 (TGF-β1)、白细胞介素-6 (IL-6)含量水平的关系。方法回顾性分析2015年12月至2016年11月于荥阳市妇幼保健院收治的儿童支气管哮喘患儿66例的临床资料,将其作为观察组,根据哮喘病情分成轻度、中度和重度,每组分别为20例、22例和24例,并收集同时期就诊30例非哮喘患儿资料作为对照组。比较儿童血清1,25-(OH)_2D_3水平及支气管肺泡灌洗液MMP-9、TNF-α、TGF-β1、IL-6含量变化及其相关性,以及支气管肺泡灌洗液细胞总数、巨噬细胞、炎症细胞数目变化。结果哮喘患儿血清1,25-(OH)_2D_3水平之间关系为轻度哮喘中度哮喘重度哮喘,而MMP-9、TNF-α、TGF-β1和IL-6水平则为重度哮喘中度哮喘轻度哮喘(P0.05);支气管哮喘患儿支气管肺泡灌洗液MMP-9、TNF-α、TGF-β1、IL-6水平与血清中1,25-(OH)_2D_3之间的关系均为负相关(r=-0.539,-0.447,-0.461,-0.384;P0.05);两组患儿支气管肺泡灌洗液细胞总数、炎症细胞数目进行比较,观察组患儿多于对照组,观察组巨噬细胞明显少于对照组(P0.05)。结论支气管哮喘患儿血清1,25-(OH)_2D_3水平下降,支气管肺泡灌洗液中MMP-9、TNF-α、TGF-β1、IL-6水平上升,这种变化趋势对儿童支气管哮喘治疗具有重要的指导意义。     

IL-10对TNF-α诱导的泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1表达的抑制作用

目的:观察白介素-10(IL-10)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)表达的干预作用.方法:THP-1单核细胞经诱导转化为巨噬细胞源性泡沫细胞后随机分为4组:对照组,培养液中不加任何其他物质;TNF-α组,培养液中加10μg/L TNF-α;IL-10组,培养液中加10μg/L IL-10;IL-10 TNF-α组,培养液中加10μg/L IL-10预先孵育2 h后,再加10μg/L TNF-α.采用RT-PCR和Western-Blot检测各组0 h、6 h、12 h、24 h、48 h ABCA1 mRNA和蛋白表达.结果:TNF-α组ABCA1 mRNA和蛋白表达呈时间依赖性降低(F=782.94,F=768.12,P均＜0.05).IL-10组ABCA1 mRNA表达在24 h和48 h有轻微增加(P＜0.05),但ABCA1蛋白表达在各时间点无明显变化.IL-10 TNF-α组ABCA1 mRNA和蛋白表达也呈时间依赖性降低(F=697.23,F=749.64,P均＜0.05),但同TNF-α组相比,其下降程度有所减轻(P＜0.05).结论:IL-10可部分抑制TNF-α所引起THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1表达的下调.     

乳酸杆菌对LPS诱导的THP-1细胞炎症性细胞因子释放的调节作用

目的:探讨副干酪乳酸杆菌(Lactobacillus paracasei,L.para)与嗜酸性乳酸杆菌(Lactobacillus acidophilus,L.acid)对脂多糖(LPS)诱导THP-1细胞分泌肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-12 p40、转化生长因子(TGF)-β的调节作用。方法:先将THP-1细胞在佛波酯(PMA)的刺激作用下活化、分化为巨噬细胞样细胞,再进行LPS诱生炎性细胞因子实验,实验分为空白对照组、LPS处理组、单独L.para处理组、L.para与LPS共处理组、单独L.acid处理组及L.acid与LPS共处理组。以RT-PCR法检测THP-1细胞TNF-αmRNA水平的表达;以ELISA法检测细胞培养上清中TNF-α、IL-12 p40和TGF-β水平的变化;以Western blot方法检测胞内未磷酸化及磷酸化IκB-α蛋白水平的表达;细胞免疫荧光技术观察NF-κB p65的亚细胞定位,TransAM核蛋白定量分析法检测THP-1细胞核内NF-κB(p65/p50)的水平。结果:①LPS能显著刺激PMA诱导分化的THP-1细胞分泌炎性细胞因子TNF-α、I...     

脂肪因子chemerin促进巨噬泡沫细胞形成

目的观察脂肪因子chemerin是否调节巨噬泡沫细胞形成,以及对巨噬泡沫细胞CD36、ATP结合盒转运子A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)表达和炎症因子释放的影响。方法 100nmol/L佛波酯(phorbolmyristate acetate,PMA)诱导THP-1单核细胞分化为巨噬细胞,随机分组,Chemerin不同浓度和作用时间下联合相同浓度(50μg/mL)氧化型低密度脂蛋白与THP-1源性巨噬细胞共孵育。油红O染色观察细胞内脂滴变化,Western blot和实时PCR检测CD36、ABCA1的mRNA和蛋白水平的表达。ELISA法检测培养液中炎症因子———肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)和白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)的浓度,酶法检测细胞内胆固醇含量。结果Chemerin诱导巨噬细胞内脂滴蓄积,下调CD36和ABCA1mRNA及蛋白的表达,增加培养液中促炎因子TNF-α的释放而降低抗炎因子IL-10的释放,提高细胞内胆固醇的含量,且有浓度和时间依赖性。结论 Chemerin通过下调CD36和ABCA1基因的mRNA及蛋白的表达,诱导THP-1巨噬细胞内脂滴蓄积和泡沫细胞形成;ABCA1表达下调可能与促炎因子TNF-α释放增加和抗炎因子IL-10释放减少有关。     

1,25(OH)_2D_3类似物MC903对人原始巨核白血病细胞系生长分化的影响

作者观察了1,25-二羟维生素D_3[1,25(OH)_2D_3]的类似物MC903对人原始巨核白血病细胞系(HIMeg)生长分化的影响。结果显示,MC903可以明显地抑制HIMeg的生长并诱导其分化,MC903(10~(-10)～10~(-6)mol/L)几乎完全抑制了HIMeg细胞的克隆形成能力;经MC903作用4d后,细胞周期分布也发生明显改变,表现为G_0+G_1期细胞百分数明显增多,而S期及G_2+M期细胞百分数减少。MC903对HIMeg细胞生长分化的影响具有剂量和时间依赖性特点,且其作用效应强于1,25(OH)_2D_3。本文结果提示,MC903和1,25(OH)_2D_3对巨核细胞系的生长分化调节过程具有重要作用。     

早期糖尿病肾病患者1,25-(OH)_2D_3及炎性因子的变化及骨化三醇胶丸的干预作用

目的观察维生素D代谢物1,25-二羟维生素D_3[1,25-(OH)_2D_3]对早期糖尿病肾病(DN)患者炎性因子TGF-β、TNF-α、IL-6、hs-CRP水平的影响。方法2型糖尿病患者150例,其中单纯糖尿病患者60例为DM组,早期DN 90例为DN组。DN组再随机分为治疗亚组和对照亚组各45例。对照亚组常规治疗,治疗亚组常规治疗+骨化三醇胶丸,疗程均3个月,比较各组1,25-(OH)_2D_3、24 h尿蛋白定量及相关炎性因子的变化。结果治疗前,DN组1,25-(OH)_2D_3水平低于DM组(P<0.05);TGF-β、TNF-α、IL-6、hs-CRP,24 h尿蛋白定量、SCr水平均高于DM组(P<0.05);治疗亚组治疗后TGF-β、TNF-α、IL-6、hs-CRP水平及24 h尿蛋白定量均较治疗前降低(P<0.05),1,25-(OH)_2D_3水平较前升高(P<0.05)。对照亚组与治疗亚组不良反应发生率比较差异无统计学意义(11.1】%vs.11.11%,P>0.05)。结论早期DN患者1,25-(OH)_2D_3缺乏,炎性因子水平增高,补充骨化三醇胶丸可以改善炎性反应状态。