MMP7蛋白及mRNA在卵巢上皮性肿瘤中的表达及意义

目的 探讨MMP7在上皮性卵巢癌组织中的表达及临床意义。方法 采用免疫组化方法及原位杂交方法检测10例正常卵巢组织、10例良性上皮性卵巢肿瘤组织和54例上皮性卵巢癌组织中MMP7蛋白的表达。结果 正常卵巢组织及良性卵巢肿瘤组织中,MMP7蛋白不表达;上皮性卵巢癌组织中,MMP7阳性表达率为88.89%。MMP7的表达与上皮性卵巢癌的临床分期和病理分级有关,与淋巴结转移无关。MMP7的mRNA与蛋白表达呈正相关(P＜0.0001)。结论 上皮性卵巢癌组织中,MMP7蛋白高度表达。MMP7蛋白在上皮性卵巢癌的发生过程中发挥着重要的作用,MMP7蛋白及mRNA表达水平可以作为判断卵巢癌预后的指标。     

EphA2在脑胶质瘤中的表达及意义

目的：探讨酪氨酸蛋白激酶受体EphA2在人脑胶质瘤中的表达及其与胶质瘤微血管生成之间的相关性。方法：用免疫组化方法检测66例人脑胶质瘤组织，2株成胶质细胞瘤细胞系（U251和U87）和10例正常脑组织中EphA2蛋白的表达情况。并用Western blot方法进一步验证高级别成胶质细胞瘤组织和正常脑组织中EphA2的表达情况。通过CD34免疫组化染色方法来计算胶质瘤组织中的微血管数（MVC），探讨EphA2的表达水平与胶质瘤的微血管生成之间可能存在的关系。结果：免疫组化结果表明：在所有检测的66例胶质瘤中，除3例低级别胶质瘤（Ⅰ～Ⅱ）未检测到EphA2表达外，其余均有不同程度的EphA2表达，阳性率为95．5％（63／66）；而10例正常脑组织中EphA2蛋白表达均为阴性，二者差异显著（P〈0．01）。并且高级别脑胶质瘤（Ⅲ～Ⅳ）中EphA2强阳性表达率为63％（29／46），明显高于低级别胶质瘤30％（6／20）的阳性表达率，二者差异显著（P〈0．01）。此外，肿瘤组织内微血管内皮细胞也有EphA2蛋白表达。Westernblot结果也进一步证实了成胶质细胞瘤组织和细胞系U251高表达EphA2蛋白，且U87表达水平明显低于U251，正常脑组织中检测不到EphA2蛋白条带。胶质瘤的微血管密度与EphA2蛋白表达水平有显著相关性（r=0．713，P〈0．01），EphA2表达强阳性的肿瘤区域有较高的微血管密度。结论：EphA2特异地表达于高级别胶质瘤中，而正常脑组织中则检测不到EphA2表达，提示EphA2有可能是恶性胶质瘤的一个新的标志物，或可作为分子治疗的靶点，并且EphA2可能参与胶质瘤的血管生成，在胶质瘤的发病和恶性进展中起重要作用。     

Mig-7与血管生成拟态在胶质瘤中的表达及其临床意义

目的:探讨迁移诱导蛋白7(migration inducing-protein 7,Mig-7)和血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)在胶质瘤组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学法和蛋白质印迹法检测胶质瘤组织和正常对照组(外伤脑组织)中Mig-7的表达,CD34和PAS(periodic acid-Schif)双重染色法检测胶质瘤组织的VM,分析Mig-7的表达和VM与胶质瘤患者临床病理特征之间的关系,以及Mig-7的表达水平与胶质瘤患者生存期之间的关系。结果:胶质瘤组织中Mig-7的阳性表达率为56.7%(34/60),正常对照组脑组织中Mig-7的阳性表达率为0%(0/10)。Ⅰ+Ⅱ级胶质瘤组织中Mig-7的表达水平明显低于Ⅲ级和Ⅳ级胶质瘤组织(P<0.001)。胶质瘤组织中VM的阳性率为70%(42/60),正常对照组脑组织中VM阳性率为0%(0/10)。Ⅰ+Ⅱ级胶质瘤组织中的VM数明显低于Ⅲ级和Ⅳ级胶质瘤组织(P=0.003,P<0.001)。Mig-7和VM与胶质瘤患者的级别有关(P<0.001,P=0.011)。Mig-7低表达组、中表达组和高表达组患者的中位生存时间分别为85.00、36.00和10.00个月(P<0.05)。结论:胶质瘤组织中存在Mig-7的表达,其表达水平与胶质瘤的级别有关;Mig-7可能促进VM的形成,且影响患者的预后。     

抑癌基因PTEN功能失活促使神经胶质瘤表达B7-H1并介导肿瘤免疫抵抗

肿瘤免疫抵抗是原发性脑肿瘤的特征之一。美国每年新发脑肿瘤患者达到2万人，其中多形性神经胶质瘤是一种来源于神经胶质细胞的恶性肿瘤，其恶性程度极高，传统治疗手段疗效差，5年存活率小于2％。新近临床上倾向于使用实验性免疫治疗手段尝试治疗，因此探讨肿瘤免疫抵抗及逃逸机制有着重大意义。[第一段]     

神经肿瘤干细胞在恶性胶质瘤放射治疗中的研究进展

脑胶质瘤是最常见的神经系统原发肿瘤。放射治疗是目前脑胶质瘤综合治疗最重要的治疗手段之一。然而经过放射治疗以后,部分肿瘤又会复发。随着肿瘤干细胞学说的确立,神经肿瘤干细胞的成功筛选和分离,研究者开始对其生物学特性进行了一系列基础研究,从肿瘤干细胞角度解释其放射生物学行为。放射肿瘤学研究者探求从治疗上特异于杀伤神经肿瘤干细胞,靶向作用于其相关信号转导通路,以期能为临床诊疗提供新的思路,最终使恶性胶质瘤临床放射治疗受益。     

人类mir-7-3基因慢病毒表达载体的构建及其在胶质瘤中的表达

 目的　构建人类mir-7-3基因慢病毒表达载体,为进一步研究mir-7-3基因的功能及其在肿瘤治疗中的应用奠定基础。方法　采用反转录-聚合酶链（RT-PCR）技术从含有mir-7-3基因的质粒pENTR-MIRNA VECTOR扩增目的基因mir-7-3,并将基因克隆到慢病毒载体表达质粒Lenti-GFP-RNAi VECTOR [含增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因]中,构建慢病毒载体表达质粒Lenti-GFP-mir-7-3,酶切、测序验证mir-7-3基因后,将Lenti-GFP-mir-7-3质粒和包装质粒pRsv-REV、pMDlg-pRRE、pMD2G共同转染人类胚胎肾上皮细胞系293T细胞,获得携带mir-7-3基因和EGFP基因的重组慢病毒FIV-CMV-EGFP- mir-7-3,取浓缩纯化后的病毒上清感染293T细胞和人类胶质瘤细胞U251,荧光显微镜观察293T细胞的荧光表达,RT-PCR鉴定U251细胞中mir-7-3基因的表达水平。结果　Lenti-GFP-mir-7-3共转染包装细胞293T能产生高浓度的重组慢病毒FIV-CMV-EGFP-mir-7-3,荧光显微镜下能直接观察到EGFP,FIV-CMV-EGFP-mir-7-3中携有正确的mir-7-3基因,目的基因mir-7-3能被重组慢病毒高效地转导入U251。结论　成功构建了携带mir-7-3基因的重组慢病毒载体;为进一步从分子水平探讨mir-7-3基因治疗胶质瘤奠定了基础。     

Survivin在脑胶质瘤组织中表达意义的研究

目的：探讨Survivin在脑胶质瘤组织中的表达及其与肿瘤异质性之间的联系。方法：应用免疫组织化学方法检测54例不同病理分级的脑胶质瘤组织Survivin蛋白的表达。结果：Survivin的表达程度随肿瘤级别升高而升高（P〈0.01）,而在正常脑组织中Survivin的表达为阴性。同时,不同级别胶质瘤Survivin蛋白表达的光密度值差异有统计学意义,组织级别越高,Survivin蛋白平均光密度值越大（P〈0.01）。恶性胶质瘤周边浸润组织中也有Survivin表达,但低于瘤体中心。结论：胶质细胞瘤恶性程度与Survivin表达相关;Survivin的表达可作为胶质瘤恶性程度和浸润性的评估指标之一。     

EGFL7在人脑胶质瘤中的表达及其意义

目的 探讨EGFL7基因在人脑胶质瘤组织中的表达及其意义。方法 收集36例新鲜胶质瘤标本,其中包括21例低度恶性(Ⅰ~Ⅱ级)及15例高度恶性者 (Ⅲ~Ⅳ级),用RT-PCR检测其EGFL7 mRNA的表达。另收集45例胶质瘤石蜡标本,其中包括24例低度恶性(Ⅰ~Ⅱ级)及21例高度恶性者(Ⅲ~Ⅳ级),用免疫组织化学检测EGFL7蛋白的表达情况。并分析EGFL7蛋白表达与胶质瘤病理分级的关系。结果EGFL7 mRNA及其蛋白在人脑胶质瘤中存在表达,EGFL7蛋白表达主要定位于肿瘤细胞及血管内皮细胞的胞质。其表达与肿瘤的恶性程度有明显的相关性(t＝4.399,P<0.01);EGFL7在正常脑组织中没有表达。结论人脑胶质瘤中肿瘤细胞及其血管内皮细胞EGFL7均呈增高表达并且与其肿瘤恶性程度具有明显相关性,提示EGFL7在胶质瘤的发生发展中发挥重要作用。     

人类mir-7-3基因慢病毒表达载体的构建及其在胶质瘤中的表达

目的 构建人类mir-7-3基因慢病毒表达载体,为进一步研究mir-7-3基因的功能及其在肿瘤治疗中的应用奠定基础.方法 采用反转录-聚合酶链(RT-PCR)技术从含有mir-7-3基因的质粒pENTR-MIRNA VECTOR扩增目的 基因mir-7-3,并将基因克隆到慢病毒载体表达质粒Lenti-GFP-RNAiVECTOR[含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因]中,构建慢病毒载体表达质粒Lenti-GFP-mir-7-3,酶切、测序验证mir-7-3基因后,将Lenti-GFP-mir-7-3质粒和包装质粒pRsv-REV、pMDlg-pRRE、pMD2G共同转染人类胚胎肾上皮细胞系293T细胞,获得携带mir-7-3基因和EGFP基因的重组慢病毒FIV-CMV-EGFP-mir-7-3,取浓缩纯化后的病毒上清感染293T细胞和人类胶质瘤细胞U251,荧光显微镜观察293T细胞的荧光表达,RT-PCR鉴定U251细胞中mir-7-3基因的表达水平.结果 Lenti-GFP-mir-7-3共转染包装细胞293T能产生高浓度的重组慢病毒FTV-CMV-EGFP-mir-7-3,荧光显微镜下能直接观察到EGFP,FIV-CMV-EGFP-mir-7-3中携有正确的mir-7-3基因,目的 基因mir-7-3能被重组慢病毒高效地转导人U251.结论 成功构建了携带mir-7-3基因的重组慢病毒载体;为进一步从分子水平探讨mir-7-3基因治疗胶质瘤奠定了基础.     

人类mir-7-3基因慢病毒表达载体的构建及其在胶质瘤中的表达

目的 构建人类mir-7-3基因慢病毒表达载体,为进一步研究mir-7-3基因的功能及其在肿瘤治疗中的应用奠定基础.方法 采用反转录-聚合酶链(RT-PCR)技术从含有mir-7-3基因的质粒pENTR-MIRNA VECTOR扩增目的 基因mir-7-3,并将基因克隆到慢病毒载体表达质粒Lenti-GFP-RNAiVECTOR[含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因]中,构建慢病毒载体表达质粒Lenti-GFP-mir-7-3,酶切、测序验证mir-7-3基因后,将Lenti-GFP-mir-7-3质粒和包装质粒pRsv-REV、pMDlg-pRRE、pMD2G共同转染人类胚胎肾上皮细胞系293T细胞,获得携带mir-7-3基因和EGFP基因的重组慢病毒FIV-CMV-EGFP-mir-7-3,取浓缩纯化后的病毒上清感染293T细胞和人类胶质瘤细胞U251,荧光显微镜观察293T细胞的荧光表达,RT-PCR鉴定U251细胞中mir-7-3基因的表达水平.结果 Lenti-GFP-mir-7-3共转染包装细胞293T能产生高浓度的重组慢病毒FTV-CMV-EGFP-mir-7-3,荧光显微镜下能直接观察到EGFP,FIV-CMV-EGFP-mir-7-3中携有正确的mir-7-3基因,目的 基因mir-7-3能被重组慢病毒高效地转导人U251.结论 成功构建了携带mir-7-3基因的重组慢病毒载体;为进一步从分子水平探讨mir-7-3基因治疗胶质瘤奠定了基础.     

隔蛋白7逆转裸鼠移植胶质瘤的恶性表型

目的探讨隔蛋白（SEPT）7对胶质瘤恶性表型的影响。方法建立SEPT7表达缺失的人胶质瘤TJ905细胞的裸鼠皮下移植瘤模型，将荷瘤鼠分为治疗组（SEVIT／pcDNA3）、空载体组（pcDNA3）和对照组（PBS），观察各组肿瘤的大小及生长速度；采用免疫组化法检测各组肿瘤组织标本中SEPT7、增殖细胞核抗原（PCNA）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、侵袭相关因子[基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9]、细胞周期因子（CDK2、CDK4、cyclinD1、cyclinE、p21、p16）以及凋亡相关因子（bcl-2、caspase-3）的表达；原位末端标记（TUNEL）法检测肿瘤细胞的凋亡。结果治疗组肿瘤的生长速度明显减慢，6d后肿瘤体积明显小于对照组和空载体组（P〈0．05）；治疗组肿瘤标本中SEV17、p21、p16和caspase-3的表达上调，PCNA、MMP-2、MMP-9、CDK2、CDK4、cyclinD1、cyclinE和bcl-2的表达下降，且GFAP呈阳性表达；TUNEL法检测治疗组肿瘤细胞凋亡增加。结论SEPT7可抑制肿瘤生长、增殖和侵袭，并诱导肿瘤细胞凋亡，对胶质瘤的恶性表型具有逆转作用。     

Expressions of Beta-catenin, E-cadherin and MMP-7 in ovarian epithelial tumors

Objective： To investigate the expressions of Beta-catenin, E-cadherin and MMP-7 and their implications in ovarian epithelial tumor. Methods： Immunohistochemical staining with SP method was conducted to identify the expressions of Beta-catenin, E-cadherin and MMP-7 in ovarian epithelial tumor in 66 cases. Results： The abnormal expression rate of Beta-catenin in malignant ovarian epithelial tumor was higher than those in borderline and benign epithelial tumors （P〈0.05）. The positive rates of E-cadherin in benign and borderline ovarian epithelial tumors were significantly greater than that in malignant epithelial tumor. The expression rates of MMP-7 in malignant and borderline ovarian epithelial tumors were higher than that in benign epithelial tumor （P〈0.05）. Conclusion： The abnormal expressions of Beta-catenin, E-cadherin and MMP-7 might be used to indicate the malignance transform of ovarian epithelial tumors, but they have no significant correlation with peritoneal dropsy invasion, caul invasion and appendant invasion in ovarian epithelial tumor.     

FBXW7 is involved in the acquisition of the malignant phenotype in epithelial ovarian tumors

FBXW7 is a ubiquitin ligase that mediates ubiquitylation of oncoproteins, such as c‐Myc, cyclin E, Notch and c‐Jun. FBXW7 is a known tumor‐suppressor gene, and mutations in FBXW7 have been reported in various human malignancies. In this study, we examined the sequences of the FBXW7 and p53 genes in 57 ovarian cancer clinical samples. Interestingly, we found no FBXW7 mutations associated with amino acid changes. We also investigated FBXW7 expression levels in 126 epithelial ovarian tumors. FBXW7 expression was negatively correlated with the malignant potential of ovarian tumors. That is to say, FBXW7 expression levels in ovarian cancer samples were significantly lower than those in borderline and benign tumors (P < 0.01). FBXW7 expression levels in serous carcinoma samples were the lowest among four major histological subtypes. In addition, p53‐mutated ovarian cancer samples showed significantly lower levels of FBXW7 expression compared with p53 wild‐type cancer samples (P < 0.001). DNA methylation arrays and bisulfite PCR sequencing experiments revealed that 5′‐upstream regions of FBXW7 gene in p53‐mutated samples were significantly higher methylated compared with those in p53 wild‐type samples (P < 0.01). This data indicates that p53 mutations might suppress FBXW7 expression through DNA hypermethylation of FBXW7 5′‐upstream regions. Thus, FBXW7 expression was downregulated in ovarian cancers, and was associated with p53 mutations and the DNA methylation status of the 5′‐upstream regions of FBXW7.     

蛋白酪氨酸激酶PTK7在卵巢浆液性肿瘤中的表达及意义

背景与目的：新近发现的蛋白酪氨酸激酶-7(protein tyrosine kinase-7,PTK7)基因与多种肿瘤的发生、发展和浸润有关。本研究旨在探讨PTK7在卵巢浆液性肿瘤中的表达及其与临床分期、组织学分级、转移和预后等指标的关系,分析PTK7表达在卵巢浆液性肿瘤中的诊断及预后价值。方法：制备3株卵巢癌细胞系(HO8910、SKOV3、A2780)爬片,并收集14例正常输卵管上皮组织,6例良性浆液性卵巢肿瘤,51例交界性浆液性卵巢肿瘤和97例卵巢浆液性癌组织蜡块,采用免疫组化EliVision两步法检测PTK7蛋白的表达,结合相关病理指标,采用χ²检验、Fisher确切概率法、Kaplan-Meier法进行统计分析。结果：PTK7在卵巢癌细胞株HO8910及A2780中呈阴性表达,在SKOV3中成弱阳性表达。PTK7在92.86%(13/14)的正常输卵管上皮、83.33%(5/6)的良性浆液性卵巢肿瘤、45.10%(23/51)的交界性浆液性卵巢肿瘤和28.87%(28/97)的浆液性卵巢癌中阳性表达。正常输卵管上皮与良性浆液性肿瘤、良性浆液性肿瘤与交界性浆液性肿瘤之间PTK7表达差异无统计学意义(P=0.521,P=0.102)。浆液性卵巢癌与正常输卵管上皮、良性浆液性肿瘤以及交界性浆液性肿瘤之间PTK7表达差异有统计学意义(P=0.000,P=0.012,P=0.048)。PTK7在交界性浆液性卵巢肿瘤中的表达与其临床分期、淋巴结和(或)腹膜转移情况有关(P=0.038,P=0.038),与其发生部位、年龄无关(P=0.088,P=0.896)。PTK7在卵巢浆液癌中的表达与其临床分期、WHO分级、MDACC病理分级有关(P=0.011,P=0.004,P=0.000),与其发生部位、转移情况、肿瘤直径、年龄无关(P=0.326,P=0.524,P=0.588,P=0.584)。卵巢浆液癌中PTK7阳性组的生存率显著高于阴性组(P=0.017)。结论：PTK7在输卵管正常上皮、良性浆液性卵巢肿瘤、交界性浆液性卵巢肿瘤和浆液性癌中表达呈逐步下调趋势。PTK7表达与卵巢上皮性浆液性肿瘤的较晚临床分期、高组织分级、预后差呈正相关,可能成为卵巢浆液性肿瘤辅助诊断及临床预后的新指标。     

let-7与高迁移率族蛋白A在肿瘤中的研究进展

高迁移率族蛋白A(HMGA)在多种肿瘤的发生发展中起着重要的作用,其表达水平会随肿瘤恶性程度的增高或转移潜能的增大而异常增高.let-7是一类内源性非编码的微小RNA,可作为肿瘤抑制因子对HMGA基因进行负性调控.在对多种肿瘤的研究中已经观察到let-7表达水平的下降,并伴随HMGA表达水平的上升,这对肿瘤的早期诊断提...     

Let-Ta2在肺腺癌中表达状况的研究

目的探讨let-7a2在肺腺癌中的表达状态及其意义。方法采用实时定量PCR技术,以U6为内参,对15例手术切除的肺腺癌组织和正常组织进行let-7a2基因表达的检测,检测的数据采用2-△△Cr法进行分析。结果采用配对t检验进行统计学处理。结果在15例患者中,let-7a2在肺腺癌组织中的表达为0．8733±0．4821,较正常肺组织（2．4527±1．0111）明显下调,差异有统计学意义（t=6．816,P〈0．001）。结论let-7a2在肺癌组织中的表达明显下调,可能参与了肺癌发生、发展过程。     

微小染色体维持蛋白7与消化系统肿瘤

微小染色体维持蛋白7（MCM7）是DNA复制的重要调节因子,在DNA复制起始和延伸过程中发挥重要作用.近年来研究表明,MCM7与消化系统肿瘤的发生发展密切相关.检测MCM7蛋白的表达,可为消化系统肿瘤的早期诊断、治疗及评估预后提供新的思路.     

MicroRNA let-7家族与肿瘤的研究进展

MicroRNA作为生物小分子参与调控机体内环境稳态和许多疾病发生与发展的过程。Let-7是目前研究最为广泛microRNA之一,在多种肿瘤中表达下调,提示let-7与肿瘤存在一些重要的联系。本文主要讨论let-7家族与肿瘤的研究进展,以进一步了解肿瘤发病机制,为肿瘤的预防和诊治提供新思路。     

B7-H6在恶性肿瘤中的研究进展

B7-H6是新近发现的免疫球蛋白超家族成员,是NK细胞表面活化性受体NKP30的膜结合配体.B7-H6较特异地表达于多种肿瘤组织,并且其表达水平与多种临床病理参数及预后显著相关.细胞表面B7-H6胞外域脱落后形成可溶性B7-H6,下调NKP30介导的NK细胞毒性及细胞因子的分泌.研究发现B7-H6通过蛋白酶抑制剂、My...