巴豆油体外抗结核分枝杆菌作用实验研究

目的：观察巴豆油体外对结核杆菌的生长抑制作用。方法：在用新鲜的人型结核分枝杆菌标准菌株(H37RV),分别接种于含有不同浓度巴豆油、食用色拉油、链霉素和空白对照的豆浸液结核分枝杆菌培养基,观察各组、各管结核分枝杆菌的生长情况。结果：空白对照组、色拉油组菌落生长情况正常,各浓度巴豆油组(1：10～1：5120)均对结核菌生长有抑制作用,其中,1：10～1：160组到培养终止期(40d)仍无细菌生长。巴豆油1：160组的抗菌效果与含链霉素(100μg／mL)培养基基本相似。将无细菌生长的巴豆油培养基表面颗粒状物接种到空白对照培养基经恢复培养,均无结核菌生长。结论：巴豆油有体外抗结核菌的作用,一定浓度的巴豆油对结核菌有不可恢复的杀灭作用。     

三种中草药抗结核分枝杆菌作用的实验研究

目的观察三种中草药在单味和多味药组合下对结核分枝杆菌的抗菌活性。方法采用琼脂绝对浓度法,在罗氏培养基中加入蜈蚣1∶10;山楂1∶5;沙棘1∶5浓度的单味和蜈蚣山楂混合液1∶20;蜈蚣沙棘混合液1∶20;山楂沙棘混合液1∶10;蜈蚣山楂沙棘混合液1∶40的多味中草药,将结核分枝杆菌（H37RV株）接种在其表面,在37℃下培养一个月。并接种2支无药的罗氏培养基作为阴性对照。结果蜈蚣1∶10;山楂1∶5;沙棘1∶5有抑制结核菌生长作用;蜈蚣山楂混合液1∶20;蜈蚣沙棘混合液1∶20;山楂沙棘混合液1∶10;蜈蚣山楂沙棘混合液1∶40均有抑制结核分枝杆菌生长的作用。结论三种中草药在实验条件下均有抗结核分枝菌的作用,联合药效比单味药的作用更强。     

肺痨康对结核杆菌体内抑菌实验研究

[目的]观察肺痨康对结核杆菌体内抑菌作用。[方法]小鼠随机分为空白组,模型组,阳性组(RFP,灌胃150mg/kg),肺痨康高、中、低剂量组6组,空白组,模型组给予等容积的生理盐水。实验当天,将结核菌配制成1mg/ml生理盐水菌悬液,尾静脉注射0.2ml/只。于第二天灌胃药物。一周后死亡的动物作解剖记录;观察肝,脾,肺的重量指数及每个脏器的结核结节,脏器的病理形态学变化(HE染色)与结核菌数(Z-N染色)。观察并记录各组动物的存活时间。[结果]肺痨康高剂量对感染肺结核小鼠有明显的治疗效果,中剂量组有较明显的疗效。[结论]肺痨康高剂量、中剂量有较好的抗结核杆菌的作用。     

杨氏欣痨宁胶囊抗结核小鼠模型的实验研究

目的研究杨氏欣痨宁(YLN)胶囊对ICR小鼠结核病模型的抗结核作用.方法建立ICR小鼠结核模型,研究YLN对结核分枝杆菌H37RV感染ICR小鼠结核病模型的体内抗结核作用.结果YLN对ICR小鼠结核病模型有明显的抗结核作用:①YLN高、中、低剂量组[1.0 g/(kg.d)、0.5 g/(kg.d)和YLN0.25 g/(kg.d)]ICR小鼠ST50明显大于模型空白对照组,其中YLN高剂量组最显著.YLN用药组不及西药组,YLN高剂量组ST50明显大于猫爪草组,INH YLN联合用药组存活率高于单用药组;②YLN各剂量组体重明显提高,尤以YLN高剂量组最为显著;YLN单用药组增加体重效果不及阳性西药对照组,YLN高剂量组作用接近猫爪草组,INH YLN联合用药组作用优于YLN中剂量组;③除YLN低剂量组肝致病指数无影响外,其余各用药组致病指数明显降低,尤以YLN高剂量组最显著.YLN高剂量组作用优于猫爪草组,而肝致病指数与EMB组接近,INH YLN联合用药组作用优于单用药组.结论YLN各剂量组对ICR小鼠结核模型具有明显的抗结核作用,尤以高剂量组抗结核作用最为明显.     

结核清注射剂抗结核及抗菌实验研究

目的通过研究中药复方注射剂结核清（TBQ）的体内外抗结核及抗菌作用,为研发新型抗结核中药TBQ注射剂奠定实验基础．方法建立结核小鼠模型,设定不同给药方案,研究TBQ的体内抗结核疗效及体外抑杀菌效应测定．结果TBQ可延长结核小鼠STSO,改善结核小鼠肺部结核病变,体外体现一定的抗结核杆菌作用及对常见微生物具广谱抑菌作用．结论TBQ在体内外均具有一定的抗结核效应同时具有广谱抗菌作用．     

不同毒力菌株与感染途径在树造结核动物模型中的作用

采用标准毒力的Ｈ３７ＲＶ菌株和经Ｌ－Ｊ培基传代减毒的菌株，对Ｃ５７ＢＬ／６Ｎ小鼠进行尾静脉注射和腹腔注射感染，就树造动物各器官的结核菌实验模型进行了探讨。结果表明，树造胸腔器官（肺和心脏）的动物模型以尾静脉感染为好，树造肝、脾和腹股沟淋巴结结核的动物模型以腹腔注射感染为宜。如要成功地树造结核感染的动物模型，最好将所购回的标准菌株在实验动物体内恢复毒力后再使用。     

TBQ注射剂抗结核的实验研究

目的:研究TBQ注射剂的抗结核作用。方法:在体外抑菌实验基础上,通过三种不同的给药方案,观察TBQ注射剂对结核病模型小鼠ST50及脏器结核病变面积的影响。结果:TBQ注射剂能在一定程度上降低结核病模型小鼠的脏器结核病变面积,延长其ST50。结论:TBQ注射剂在体内外均具有一定的抗痨抑菌作用,进一步深入研究可望将TBQ开发成为新型抗结核中药制剂。     

中草药抗结核分枝杆菌的实验研究

目的:在实验条件下观测部分中草药在单味和复方组合下,对结核分枝菌的抗菌活性.方法:采用琼脂绝对浓度法,加入不同浓度的单味或复方中草药,接种结核分枝杆菌(HV37株),在37℃下培养一个月.结果:大蒜液1:10;百部液1:5;夏枯草液1:5有抑制结核茵生长作用;而大蒜百部混合液1:20;夏枯草大蒜混合液1:20;夏枯草百部混合液1:10;大蒜夏枯草百部混合液1:40均有抑制结核分枝杆菌生长的作用.结论:三种中草药在实验条件下均有抗结核分枝茵的作用,联合药效比单药的作用强.     

Mad1对膀胱肿瘤作用的体内实验研究

目的:在原位建立膀胱肿瘤的大鼠模型,观察转染Mad1表达质粒后对膀胱肿瘤增殖的抑制作用.方法:MNU对SD大鼠进行膀胱灌注诱发膀胱肿瘤,荷瘤动物随机分为3组:Mad1转染组(A组),空载体转染组(B组)和生理盐水转染组(C组).通过大鼠重量(RBW)、膀胱绝对重量(BAW)、膀胱相对重量(BRW)、Mad1和TERT mRNA表达水平等指标,用流式细胞仪等检测手段,比较转染前后Mad1和TERT的表达差异、观察Mad1对膀胱肿瘤增殖的抑制作用以及探讨相应的机理.结果:成功在原位建立膀胱肿瘤的大鼠模型.A组与B、C两组相比RBW无显著性差异(P＞0.05),但BAW和BRW分别有非常显著差异性(P＜0.01)及显著差异性(P＜0.05);Mad1mRNA相对表达量明显增加;TERT mRNA相对表达量明显降低;流式细胞仪显示G0/G期细胞显著增加(P＜0.01),S期细胞显著减少(P＜0.01).结论:高表达的Mad1能抑制膀胱肿瘤的增殖.     

叶下珠复方体内抗鸭乙型肝炎病毒作用的实验研究

分别给鸭乙型肝炎病毒实验感染的广州麻鸭和樱桃谷鸭灌服叶下珠复方，前者两个剂量组分别为１０ｇ／ｋｇ和５ｇ／ｋｇ，后者为１０ｇ／ｋｇ，１天次，连续给药１４ｄ，并设病毒模型组和无环岛甙治疗组作为对照。     

结核分枝杆菌L型感染对结核病患者痰菌阴转率的影响

目的分析深圳市罗湖辖区结核病患者结核分枝杆菌（Mycobacteriumtuberculosis,MTB）及其L型（MTB—L）的感染状况,探讨MTB—L感染对结核病患者痰菌阴转率的影响。方法采用抗酸染色法检测辖区内2010—2011年收治的960例结核病确诊患者（初治916例、复治44例）的痰液标本并分析其治疗期间MTB和MTB—L的阳性检出率。计算结核病痰菌涂阳患者2、3月末痰菌阴转率,比较MTB阳性、MTB＋MTB．L阳性以及MTB．L阳性患者痰菌阴转率的差异。结果916例初治患者中MTB阳性患者411例、MTB＋MTB．L阳性患者130例、MTB-L阳性患者129例,初治结核病患者中MTB阳性患者2、3月末痰菌阴转率（90．3％、99．5％）均分别高于MTB＋MTB-L阳性患者（46．9％、89．2％）及MTB-L阳性患者（45．7％、89．1％）,差异均有统计学意义（Pl〈0．05）;而MTB＋MTB-L阳性患者2、3月末痰菌阴转率与MTB-L阳性患者比较差异均无统计学意义（尸〉0．05）。44例复治结核病患者中MTB阳性患者12例、MTB＋MTB-L阳性患者19例、MTB-L阳性患者13例,MTB阳性患者2月末痰菌阴转率（83．3％）分别高于MTB＋MTB-L阳性患者（42．1％）及MTB．L阳性患者（38．5％）,差异均有统计学意义（P〈0．05）;MTB阳性患者3月末痰菌阴转率（91．7％）分别略高于MTB＋MTB-L阳性患者（73．7％）及MTB-L阳性患者（76．9％）,但差异均无统计学意义（P〉O．05）;MTB＋MTB-L阳性患者2、3月末痰菌阴转率与MTB-L阳性患者比较差异均无统计学意义（尸〉0．05）。结论MTB-L感染可能是结核病患者痰菌阴转率低的重要原因．加强MTB-L感染监测是当前结核病防控的重要策略之一．     

ino1反义寡核苷酸对结核分枝杆菌的抑制作用

目的选取合适的靶点，探讨利用反义技术抑制结核杆菌的新方法。方法选取分枝杆菌ino1基因为靶基因，设计并合成3段反义寡核苷酸，将不同浓度的反义寡核苷酸加入细菌的培养液中，观察ino1的mRNA表达情况，结核杆菌分枝硫醇的水平以及结核杆菌的生长情况。结果当反义寡核苷酸的浓度达到20μmol/L时，可以特异性地抑制ino1的表达，此浓度水平时ino1 mRNA的量和对照组的比值为0.67，40μmol/L时的比值则为0.45。分枝硫醇的合成以及分枝杆菌的生长也相应地受到抑制。反义寡核苷酸的浓度为20μmol/L时，分枝杆菌浓度的对数值下降1.3，40μmol/L时下降1.7。结论利用反义技术抑制分枝杆菌是完全可行的，并且ino1可以作为反义寡核苷酸的靶基因。     

正常人CIK细胞对卵巢癌SKOV3ip细胞抗肿瘤的活性

目的　观察正常人CIK(cytokine inducedkiller)细胞对人卵巢癌细胞株SKOV3ip的体外细胞毒活性以及对卵巢癌腹水瘤模型的体内抗肿瘤作用。方法　取正常人的外周血单个核细胞 (PBMC) ,加入细胞因子γ IFN、IL 2、抗 -CD3单抗和IL - 1,体外诱导成CIK细胞 ,用MTT法测定CIK细胞体外对人卵巢癌细胞株SKOV3ip的细胞毒活性 ,并与CD3AK作对比。在Babl/c裸小鼠腹腔内接种卵巢癌SKOV3ip细胞 ,观察CIK细胞对荷瘤鼠的抑瘤作用。结果　体外实验证明 ,CIK细胞对SKOV3ip有明显的细胞毒活性 ,对比CD3AK其抑瘤率为 89.7%与 6 7.1% (P <0 .0 5 )。裸鼠卵巢癌腹水瘤模型体内实验表明 ,CIK细胞能够显著抑制癌性腹水生长 ,其抑制率可达 10 0 %。结论　CIK细胞是一种新型、高效的免疫活性细胞 ,具有较强的体内外抗卵巢癌细胞活性 ,具有明显的抑制癌性腹水生长的作用 ,有可能用于临床上卵巢癌腹水的过继性免疫治疗     

神舒胶囊药效学试验

为验证神舒胶囊滋贤柔肝、养心安神的功效，利用相关的动物模型，对神舒胶囊进行了镇好、催眠、抗激怒、益智等药效学试验，结果表明神舒胶囊具有镇好、催眠、安定、益智的作用。     

活动性结核病铁过载小鼠模型建立及相关指标分析

目的 建立一种外源性铁过载结核病小鼠模型。方法 采用完全随机法将20只C57BL/6N小鼠分为阴性对照、低剂量、中剂量和高剂量组,每组5只,分别经腹腔注射右旋糖酐铁溶液(0、3.75、7.50、15.00 mg/次,3 次/周,共4周)。建模结束后对铁过载小鼠的器官组织形态及体质量进行评估,ELISA法检测血清铁、铁蛋白、转铁蛋白及可溶性转铁蛋白受体含量。心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏和小肠等器官进行组织铁含量和铁沉积病理分析。经尾静脉注射结核分枝杆菌(Mtb)标准株H37Rv感染中等剂量铁过载小鼠建立活动性结核病铁过载小鼠模型,采用HE染色和Mtb培养分析肺、脾脏和肝脏等组织结核性病变和荷菌量。结果 铁过载小鼠肝脏颜色加深,呈暗褐色,其他脏器组织无明显颜色和形态改变。阴性对照组,低、中、高剂量组小鼠的体质量增长百分比分别为25.47%、25.22%、24.74%、21.36%,其中,高剂量组的体质量增长明显低于阴性对照组(F=17.235,P=0.027)和低(F=15.206,P=0.031)、中剂量组(F=11.061,P=0.036)。肝脏组织铁含量最高,其他依次为脾脏、肾脏和小肠,低剂量组小鼠心脏和肺组织铁含量与阴性对照组相比差异无统计学意义(F=19.023,P=0.715;F=23.193,P=0.902)。铁过载小鼠外周血血清铁和铁蛋白水平随铁剂注射量增加而升高,转铁蛋白和可溶性转铁蛋白受体无明显变化。各脏器组织HE染色与普鲁士蓝染色结果发现,铁过载动物各脏器均出现不同程度铁沉积,且高剂量铁剂引发小鼠肝肾损伤。铁过载Mtb感染组小鼠的肺(F=23.227,P=0.017)、脾脏(F=19.023,P=0.021)和肝脏(F=17.392,P=0.009)细菌培养报阳时间明显低于Mtb感染对照组,肺(F=21.012,P=0.007)、脾脏(F=20.173,P=0.002)和肝脏(F=19.091,P=0.005)荷菌量明显高于Mtb感染对照组。结论 腹腔注射中等剂量(7.50 mg/次,3 次/周,共4周)右旋糖酐铁溶液成功构建与临床铁过载疾病患者症状类似的外源性铁过载小鼠模型,通过尾静脉注射Mtb可构建活动性结核病铁过载小鼠模型。     

结核分枝杆菌基因分型及其耐药性分析

目的探讨四川地区结核患者结核分枝杆菌基因分型及其与耐药性关系。方法采用PCR和琼脂糖凝胶电泳技术,对124株结核分枝杆菌的6个可变重复位点进行检测,并应用Gel-Proanalyzer3.0软件和BioNumerics（Version3.0）软件对检测结果进行基因型分析,同时分析其基因型与耐药之间的关系。结果124株结核分枝杆菌共分为37个不同的VNTR类型,成簇基因型占74.19%（92/124）,单一基因型占25.81%（32/124）。耐药菌株在成簇类型和单一类型的分布上存在统计学差异。结论四川地区结核患者的结核分枝杆菌具有明显的基因多态性,成簇类型是主要流行菌株,应加强流行结核菌株的监控。     

初治培阳肺结核患者起始耐药情况分析

目的了解肺结核患者结核分枝杆菌起始耐药情况,制定科学的防治对策。方法采用世界卫生组织制定的结核分枝杆菌耐药监测方案进行结核分枝杆菌耐药监测。使用绝对浓度法对山东省胸科医院住院的1184例培阳肺结核患者的耐药性进行测定。结果 1184例培阳肺结核患者中,全敏感834例(70.44%),耐药350例(29.56%)。其中起始耐药157例(44.86%),复治耐药193例(55.14%)。在起始耐药病例中,单耐药结核病(MonoDR-TB)53例(33.8%),其中耐链霉素的病例最多(38例,24.2%);多耐药结核病(PDR-TB)72例(45.9%);耐多药结核病(MDR-TB)20例(12.7%);广泛耐药结核病(XDR-TB)12例(7.6%);无全耐药结核病(TDR-TB)患者。结论山东省胸科医院住院肺结核患者结核分枝杆菌起始耐药现状十分严重。实现抗结核防治方案的统一管理、全程督导化疗势在必行。     

小鼠巨噬细胞转染Rv0901基因后活性的改变

目的 将重组结核分枝杆菌Rv0901基因的重组质粒pcDNA3.1-Rv0901转染小鼠腹腔巨噬细胞,研究结核分枝杆菌Rv0901基因在结核分枝杆菌感染巨噬细胞的过程中所起的作用.方法 制备小鼠腹腔巨噬细胞,分别将pcDNA3.1、pcDNA3.1-Rv0901质粒DNA与绿色荧光蛋白(GFP)的质粒DNA混合,以脂质体转染的方式共转染小鼠腹腔巨噬细胞.转染后72 h,分别收集细胞用流式细胞仪检测GFP的表达和细胞凋亡的发生情况,用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测质粒的转染情况.收集转染72 h后的细胞培养液上清,检测细胞NO、IFN-γ的释放水平.结果 pcDNA3.1和pcDNA3.1-Rv0901转染的巨噬细胞中均检测到了GFP的表达,转染后的巨噬细胞RT-PCR能扩增出Rv0901的目的 片段,pcDNA3.1-Rv0901转染巨噬细胞后细胞的凋亡率高于空载体对照组[(56.4±2.0)% vs (19.9±1.5)%,P＜0.05], pcDNA3.1-Rv0901转染巨噬细胞后细胞培养液上清中NO和IFN-γ的释放量高于空载体对照组[NO:(40.4±3.0) μmol/L vs (27.5±3.2) μmol/L, IFN-γ:(2.11±0.031) ng/mL vs (0.62±0.025) ng/mL,P均＜0.05].结论 pcDNA3.1-Rv0901转染小鼠巨噬细胞后使巨噬细胞的凋亡增加,NO和IFN-γ的释放量增加,提示结核分枝杆菌Rv0901基因可能导致巨噬细胞的活性增强,与结核分枝杆菌感染巨噬细胞的机理有关.