大鼠骨髓内破骨细胞样细胞形成的实验观察

目的建立大鼠骨髓中破骨细胞样细胞（ＯＬＣ）形成的培养方法,观察１,２５（ＯＨ）２Ｄ３和成骨细胞对ＯＬＣ形成的影响。方法Ａ组,单纯骨髓培养作对照;Ｂ组,骨髓和成骨细胞（来自新生大鼠颅骨）共同培养;Ｃ组,单纯骨髓培养加１,以２５（ＯＨ）２Ｄ３（终浓度１０－８ｍｏｌ）;Ｄ组,骨髓细胞和成骨细胞加１,２５（ＯＨ）２Ｄ３共同培养。培养７天后进行抗酒石酸酸性磷酸酶（ＴＲＡＣＰ）（＋）多核细胞作为ＯＬＣ的计数、细胞ＴＲＡＣＰ测定和骨片扫描电镜观察。结果骨髓培养开始各组未见ＯＬＣ。培养后Ａ组仍无ＯＬＣ,Ｂ组、Ｃ组偶见少量ＯＬＣ,而Ｄ组多于Ｂ组和Ｃ组（Ｐ＜０．０１）。Ａ组细胞ＴＲＡＣＰ低于其它三组,Ｂ组和Ｃ组低于Ｄ组（Ｐ＜０．０１）。Ｄ组骨片可见吸收陷窝形成,其它三组未发现。结论骨髓培养中ＯＬＣ的形成需要１,２５（ＯＨ）２Ｄ３存在,骨髓与成骨细胞共同培养对ＯＬＣ形成有明显促进作用。     

CHANGES OF IMMUNE FUNCTIONS AFTER RADIATION，BURNS AND COMBINED RADIATION－BURN INJURY IN RATS

ＣＨＡＮＧＥＳＯＦＩＭＭＵＮＥＦＵＮＣＴＩＯＮＳＡＦＴＥＲＲＡＤＩＡＴＩＯ，ＢＵＲＮＳＡＮＤＣＯＭＢＩＮＥＤＲＡＤＩＡＴＩＯＮ－ＢＵＲＮＩＮＪＵＲＹＩＮ　ＲＡＴＳＹａｎＹｏｎｇｔａｎｇ（阎永堂）；ＲａｎＸｉｎｚｅ（冉新泽）ａｎｄＷｅｉＳｈｕｑｉｎｇ（...     

动脉血酮体比作为肝细胞能量储备功能的评价

动脉血酮体比作为肝细胞能量储备功能的评价ＥＶＡＬＵＡＴＩＯＮＯＦＡＲＴＥＲＩＡＬＫＥＴＯＮＥＢＯＤＹＲＡＴＩＯ（ＡＫＢＲ）ＡＳＡＮＩＮＤＩＣＡＴＯＲＯＦＨＥＰＡＴＩＣＣＥＬＬＵＬＡＲＥＮＥＲＧＹＣＨＡＲＧＥ徐志林，刘占举综述（河南医科大学第二附属医院...     

人骨膜源性成骨细胞的体外培养

目的：探索成骨细胞的体外培养方法，建立人骨膜源性成骨细胞体外实验模型。方法；以人骼骨骨膜为材料，通过植块培养法进行细胞培养，通过形态学观察；细胞的碱性磷酸酶（ＡＬＰ）染色；培养液中骨钙放免分析等进行细胞学鉴定。结果：成骨细胞为成纤维细胞型，，贴壁生长，形态多样化，ＨＥ染色细胞轮廓清晰，核内可见２～３个核仁；细胞的ＡＬＰ染色淡了性；培养液中检测出较高浓度的ＢＧＰ。结论：可以利用人骨膜灯民骨细胞的体外     

THE RELATIONSHIPS BETWEEN ERYTHROBLAST DENUCLEATION AND THE NUCLEAR MATRIX－INTERMEDIATE FILAMENTS

ＴＨＥＲＥＬＡＴＩＯＮＳＨＩＰＳＢＥＴＷＥＥＮＥＲＹＴＨＲＯＢＬＡＳＴＤＥＮＵＣＬＥＡＴＩＯＮＡＮＤＴＨＥＮＵＣＬＥＡＲ　ＭＡＴＲＩＸ－ＩＮＴＥＲＭＥＤＩＡＴＥＦＩＬＡＭＥＮＴＳＭａＷｅｎｌｉ（马文丽）ａｎｄＸｕｅＳｈｅｐｕ（薛社普）；（Ｄｅｐａｒｔ...     

成骨生长肽促进大鼠骨量增加的作用

探讨成骨生长肽（ＯＧＰ）对骨量增加的作用。方法采用低钙饲料饲养成为骨质疏松模型的５０只ＳＤ大鼠,随机分为５组,每组１０只,分别皮下隔日注射,Ａ组（低剂量ＯＧＰ）、Ｂ组（高剂量ＯＧＰ）、Ｃ组（人降钙素）、Ｄ组（鲑鱼降钙素）和Ｅ组（生理盐水）对照,共１２周。测定血清碱性磷酸酶（ＡＬＰ）、骨钙素（ＢＧＰ）、骨密度（ＢＭＤ）,扫描电镜和透射电镜观察。结果ＯＧＰ治疗组碱性磷酸酶、骨钙素和骨密度明显增高（Ｐ＜０．０１）,扫描电镜观察到Ａ、Ｂ组骨小梁粗大、完整、间隙小,表面光滑,对照组骨小梁变细、断裂,空隙大。透射电镜观察到Ａ、Ｂ组成骨相骨细胞较多,Ｅ组退变相骨细胞较多。结论ＯＧＰ能刺激成骨细胞的活性,能提高骨量,有可能成为治疗骨质疏松症的有效药物     

A RAPID ESTIMATION OF CELL CYCLE PARAMETERS：ONE HOUR COUNTINUOUS BROMODEOXYURIDINE（BrdUrd）LABELING METHOD

ＡＲＡＰＩＤＥＳＴＩＭＡＴＩＯＮＯＦＣＥＬＬＣＹＣＬＥＰＡＲＡＭＥＴＥＲＳ：ＯＮＥＨＯＵＲＣＯＵＮＴＩＮＵＯＵＳＢＲＯＭＯＤＥＯＸＹＵＲＩＤＩＮＥ（ＢｒｄＵｒｄ）ＬＡＢＥＬＩＮＧ　ＭＥＴＨＯＤＳｈｉＸｕｅｇｅｎｇ（石学耕）（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＢ...     

SURGICAL TREATMENT OF HALLUX VALGLUS BY RECONSTRUCTION OF METATARSAL ARCH AND MODIFIED MCBRIDE OPERATION （40 CASES REPORT）

ＳＵＲＧＩＣＡＬＴＲＥＡＴＭＥＮＴＯＦＨＡＬＬＵＸＶＡＬＧＬＵＳＢＹＲＥＣＯＮＳＴＲＵＣＴＩＯＮＯＦＭＥＴＡＴＡＲＳＡＬＡＲＣＨＡＮＤＭＯＤＩＦＩＥＤＭＣＢＲＩＤＥＯＰＥＲＡＴＩＯＮ（４０ＣＡＳＥＳＲＥＰＯＲＴ）ＷｅｎｇＸｉｓｈｅｎｇ（翁习生）；Ｈｅ...     

ABNORMAL CARDIOVASCULAR REFLEXES IN PATIENTS WITH ACHALASIA

ＡＢＮＯＲＭＡＬＣＡＲＤＩＯＶＡＳＣＵＬＡＲＲＥＦＬＥＸＥＳＩＮＰＡＴＩＥＮＴＳＷＩＴＨＡＣＨＡＬＡＳＩＡＧｅＦｅｎｇ（戈烽）；ＬｉＺｅｊｉａｎ（李泽坚）ａｎｄＫｅＭｅｉｙｕｎ（柯美云）（ＰＵＭＣＨｏｓｐｉｔａｌ，ＣＡＭＳ＆ＰＵＭＣ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１...     

羟基磷灰石涂层的钛-75合金种植体的犬骨内种植实验

目的：观察评体羟基磷灰石（ＨＡ）烧结涂层的钛０７５（Ｔｉ－７５）合金种植体（ＨＡＴＩ）的生物学性能与生物力学特性。方法：应用穿皮质骨种植模型,以纯钛种植体（ＰＴＩ）作对照,在双侧犬股骨内种植ＨＡＴＩ和ＰＴＩ共３２ 术后３个月和６个月处死动物取村。应用组织学、定量组织学、推出试验、扫描电镜等方法,观察种植体骨界面的结合情况和剪切强度。结果：ＨＡＴＩ与ＰＴＩ均与骨组织形成了骨性结合,ＨＡＴＩ的骨性结合     

恒河猴骨髓基质干细胞与新型可吸收羟基磷灰石及β-磷酸三钙体外相容性的观察

目的观察恒河猴骨髓基质干细胞(rBMSC)与新型可吸收羟基磷灰石(HA)及AO人工骨β-磷酸三钙(β-TCP)的体外相容性．为在灵长类动物体内构建组织工程化骨作材料方面的准备，方法取第三代恒河猴骨髓基质细胞与材料复合培养。实验分3组：A组将rBMSC与HA复合培养；B组rBMSC与β-TCP复合培养：C组为对照，只有细胞不加材料。倒置相差显微镜、扫描电镜观察各组细胞形态及增殖情况．MTT法半定量检测细胞增殖。结果倒置显微镜下见HA组细胞生长良好，与对照组无显著差异。β-TCP组有一些细小颗粒脱落散在分布于板底或细胞表面．有少量细胞脱落死亡。扫描电镜见HA组细胞贴附、增殖良好，β-TCP组细胞贴附率不高。MTT法显示HA组细胞增殖与对照组接近，而β-TCP组则显著低于对照组。结论新型HA与恒河猴BMSc生物相容性好，可用作恒河猴骨组织工程的支架材料．AO人工骨需要作性能上的改进。     

恒河猴骨髓基质干细胞与新型可吸收羟基磷灰石及β-磷酸三钙体外相容性的观察

目的 观察恒河猴骨髓基质干细胞(rBMSC)与新型可吸收羟基磷灰石(HA)及AO人工骨茁-磷酸三钙(茁-TCP)的体外相容性。为在灵长类动物体内构建组织工程化骨作材料方面的准备。方法 取第三代恒河猴骨髓基质细胞与材料复合培养。实验分3组:A组将rBMSC与HA复合培养;B组rBMSC与茁-TCP复合培养;C组为对照,只有细胞不加材料。倒置相差显微镜、扫描电镜观察各组细胞形态及增殖情况,MTT法半定量检测细胞增殖。结果 倒置显微镜下见HA组细胞生长良好,与对照组无显著差异。茁-TCP组有一些细小颗粒脱落散在分布于板底或细胞表面,有少量细胞脱落死亡。扫描电镜见HA组细胞贴附、增殖良好,茁-TCP组细胞贴附率不高。MTT法显示HA组细胞增殖与对照组接近,而茁-TCP组则显著低于对照组。结论 新型HA与恒河猴BMSc生物相容性好,可用作恒河猴骨组织工程的支架材料,AO人工骨需要作性能上的改进。     

骨形态发生蛋白-羟基磷灰石人工听骨的实验研究

目的寻找一种理想的生物人工听骨。方法用骨形态发生蛋白（BMP）复合多孔羟基磷灰石（HA）听骨,植入兔的听泡内置换兔锤砧骨,重建听骨链。分别于术后1,2,4,8,12,16周处死动物,取材作大体及组织病理学观察,了解该种新型听骨（BMP-HA）的成骨效应,并与单纯HA材料听骨相比较。结果BMP-HA听骨植入兔听泡后4周,人工听骨表面被覆与正常粘膜结构一致的上皮细胞,鼓膜面周围有大量间充质细胞生长;12周时在鼓膜与听骨之间有软骨形成,16周发现有新骨生成。各时间组植入材料与听泡骨壁之间无过度纤维组织增生。对照组未见新骨生成。两组材料各期均无明显炎症反应。结论BMP-HA人工听骨是一种具有较强骨诱导能力、生物相容性良好的人工听骨,作为中耳传音结构重建材料,优于单纯羟基磷灰石人工听骨。     

羟基磷灰石/磷酸三钙作为细胞载体的体外实验

目的：探讨羟基磷灰石/磷酸三钙（HA/TCP）复合材料作为组织工程载体的可能;为基质材料表面改性提供实验基础。方法：应用人骨髓基质细胞（hBMSCs）和脐静脉内皮细胞(UVECs)和HA/TCP进行混合培养,应用光学显微镜、荧光显微镜及扫描电子显微镜对其进行观察。结果：人骨髓基质细胞和脐静脉内皮细胞在HA/TCP表面均生长良好,并可观察到细胞长入基质材料微孔内的改变。结论：羟基磷灰石/磷酸三钙（HA/TCP）复合材料可作为细胞移植的载体。     

兔骨髓基质细胞与聚DL-乳酸/羟基磷灰石生物相容性的实验研究

目的检测聚DL-乳酸/羟基磷灰石（PDLLA/HA）复合材料的特性,探讨骨髓基质细胞（BMSCs）与PDLLA/HA的生物相容性,为筛选骨组织工程的支架材料提供依据.方法将BMSCs与PDLLA/HA复合体外培养,通过形态学的观察、细胞增殖率及ALP活性的测定,观察PDLLA/HA对培养细胞的影响.结果复合培养时BMSCs能在PDLLA/HA上贴附、繁殖,其生长及功能不受影响.结论 PDLLA/HA具有良好的细胞相容性,能作为骨组织工程种子细胞的支架材料.     

大鼠成骨细胞与TCP/HA支架材料复合培养的实验研究

目的　为开展骨组织工程研究 ,建立成骨细胞与支架材料的体外复合培养模型。方法　取SD新生大鼠颅骨 ,组织块法培养成骨细胞 ,形态学结合免疫细胞化学鉴定其生物学特征 ,矿化液诱导后 ,茜素红染色显示钙结节形成 ;以磷酸三钙 /羟基磷灰石 (tricalcium phosphate/hydroxyapatite,TCP/HA)为支架 ,相差显微镜下观察纤粘连蛋白对细胞在支架材料上粘附的影响。结果　培养的成骨细胞呈短梭形或多角形 ,抗碱性磷酸酶单抗染色阳性 ;矿化液诱导后 2 0d茜素红染色 ,见红色着色的钙结节 ;纤粘连蛋白能促进成骨细胞在TCP/HA支架上的粘附。结论　本实验成功地建立体外成骨细胞培养方法 ,细胞外基质活性分子的加入能促进细胞与支架材料的粘附。     

静电喷雾法制备聚乳酸-羟基乙酸共聚物/羟基磷灰石微载体的工艺及其效果评价

目的：探讨静电喷雾法制备聚乳酸-羟基乙酸共聚物/羟基磷灰石（PLGA/HA）微载体的工艺过程,阐明PLGA/HA微载体的优势表征。方法：采用HA （20 nm,99.9%）和PLGA （LA/GA=50/50,Mw30k）,利用静电喷雾法制备PLGA/HA微载体,观察不同HA质量浓度（1%、3%、5%）、不同电压（4.0、4.5、>5.0kV）对微载体形貌的影响,获得最佳制球参数。以PLGA微载体为PLGA组,PLGA+1% HA为1% PLGA/HA组,PLGA+3% HA为3% PLGA/HA组,PLGA+5% HA为5% PLGA/HA组,单纯细胞作为空白对照组。采用扫描电镜（SEM）、细胞增殖实验、细胞荧光染色实验和傅里叶红外光谱（FTIR）等检测PLGA/HA微载体表征。结果：SEM观察,PLGA/HA微载体颗粒均匀,均为椭圆形或圆形,无异常形态球,表面光滑,无锐利边缘,球体之间无粘连、无聚集,不同浓度配比微载体之间无明显差别。细胞增殖实验检测,黏附细胞数量5% PLGA/HA组 > 3% PLGA/HA组 > 1% PLGA/HA组 > PLGA组 > 空白对照组（P<0.05）,细胞数量随HA浓度增加而升高,5% PLGA/HA组微载体对细胞亲和性最佳,微载体无细胞毒性。细胞荧光染色实验检测,MC3T3-E1细胞在微载体上黏附状态良好。FTIR检测显示HA特征吸收峰,表明复合微载体中含有PLGA与HA。结论：成功利用静电喷雾技术建立PLGA/HA微载体的制备工艺,该方法操作简单便捷,制球效果优良,在骨组织工程方面有广泛应用前景。     

富血小板纤维蛋白和羟基磷灰石复合物的制备方法及其性能评价

目的：探讨“三明治”法制备富血小板纤维蛋白（PRF）/羟基磷灰石（HA）复合物的工艺流程,并对其性能进行评价。方法：采用700 r·min-1×3 min和1 300 r·min-1×14 min的离心参数,分别制备可注射型PRF (I-PRF)和改良型PRF (A-PRF),并采用“三明治”法将其与HA复合。冷冻干燥PRF/HA复合物后,扫描电子显微镜（SEM）观察其微观结构;模拟体液（SBF）浸泡材料,在第2、4、8和16天分别观察HA表面类骨层的生长情况,评价其矿化能力;采用PRF/HA复合物浸提液和完全培养基与小鼠前成骨MC3T3-E1细胞共培养作为实验组和对照组,在共培养第1、3和5天,CCK-8法检测各组前成骨MC3T3-E1细胞增殖活性。在日本大耳白兔的颅骨矢状缝两侧对称建立2个直径为6 mm的全层骨缺损区域,一侧不植入任何材料作为对照组,另一侧植入PRF/HA复合物作为实验组;术后4和8周时X射线平片及锥形束CT (CBCT)扫描术区,根据成像结果评价2组白兔体内的成骨效果。结果：成功制备出具有“三明治”结构的PRF/HA复合物,外侧为A-PRF,中间为包裹了HA颗粒的...     

骨髓基质细胞与壳聚糖-聚磷酸三钙复合材料的生物相容性

目的：研究壳聚糖-聚磷酸三钙复合材料对离体培养的骨髓基质细胞黏附及增殖的影响,探讨二者的生物相容性,为骨组织工程中生物材料的选择提供实验依据。 方法：采用冻干法制备壳聚糖-聚磷酸三钙复合材料,培养兔骨髓基质细胞,传代扩增后接种到材料表面,体外继续培养,用倒置光学显微镜、扫描电镜观察细胞的黏附和生长情况,用MTT方法检测种植后2、4、6及8 d细胞的增殖情况。 结果：种植2 d后细胞呈梭形纤维细胞样,平均每100倍视野下,有生物材料的实验组与无材料的对照组胞数分别为(360±20)个和(76±18)个,二者比较差异有显著性（P＜0.01）。MTT法检测结果显示,两组细胞均保持持续增殖。且实验组增殖最快,接种后2、4 、6及8 d光吸收值与对照组比较,差异均有显著性（P＜0.01）。扫描电镜下可见材料呈多孔网状结构,兔骨髓基质细胞紧密贴附在材料表面,细胞可沿材料的孔隙活跃生长。 结论：壳聚糖-聚磷酸三钙复合材料能促进骨髓基质细胞的增殖;兔骨髓基质细胞与复合材料具有良好的生物相容性,可作为骨髓基质细胞的载体应用于组织工程。     

人胎盘间充质干细胞复合多孔羟基磷灰石支架的体内异位成骨效果

目的:探讨多孔羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)支架作为人工骨替代材料的异位成骨效果。方法:将人胚胎间充质干细胞与多孔HA支架混合培养7 d,取出细胞支架复合体移植入比格犬背肌内为实验组,同时植入未与细胞共培养的多孔HA支架于比格犬背肌内为对照组,在植入第12周时取出体内异位成骨组织进行成骨效果检测。结果:植入第12周时的异位成骨组织内均有新生血管形成,新生骨组织实验组明显多于对照组。结论:多孔HA支架在体内有很好的异位成骨能力,人胚胎间充质干细胞能促进新骨的形成。