乙醇对小鼠胚胎内皮型一氧化氮合酶表达影响

目的 探讨乙醇对胚胎中枢神经系统内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因和蛋白表达的影响.方法 应用器官发生期小鼠全胚胎培养模型,8.5d小鼠胚胎以1.0,2.0,4.0和8.0mg/ml乙醇体外染毒48h后,对胚胎中枢神经系统发育进行评分,并以半定量RT-PCR和蛋白印迹(westernblot)方法检测胚胎中脑组织内皮型一氧化氮合酶基因和蛋白表达.结果 随乙醇染毒剂量增加,胚胎头长逐渐减小,中枢神经系统的前脑、中脑和后脑发育评分均逐渐降低,畸形主要表现为神经管闭合不全.乙醇抑制胚胎中脑组织内皮型一氧化氮合酶基因和蛋白表达.结论 乙醇对中枢神经系统的致畸作用可能与诱导胚胎组织内皮型一氧化氮合酶过量表达、造成组织NO含量过多,进而对发育中的胚胎组织造成氧化损伤有关.     

微囊藻毒素-LR对小鼠肝甲基转移酶活性影响

目的 观察微囊藻毒素-LR(MCLR)暴露对小鼠肝组织DNA甲基转移酶(DNMTs)活性的影响。方法 80只昆明小鼠,雌雄各半,随机分为4组,每组20只,即对照组(生理盐水)及MCLR低、中、高剂量组(MCLR 5、10、20 μg/kg),1次/d经腹腔注射染毒,分别于染毒第11、21 d测定肝功能生化指标,观察肝脏组织形态学变化,检测DNMTs酶活性。结果 染毒11 d时,与对照组比较,低剂量MCLR组小鼠肝脏谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)无明显变化,高剂量组ALT、AST、ALP酶活性均升高,差异有统计学意义(P<0.05);染毒21 d时,与对照组比较,各剂量MCLR组小鼠肝脏ALT和AST水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05);染毒11、21 d时,低、中、高MCLR组小鼠DNMTs酶活性分别为(89 135.7±14 334.7)、(92 645.8±15 962.3)、(70 481.3±15 621.3)和(59 115.6±9 884.6)、(83 310.7±15 066.3)、(86 612.5±20 572.8)RFU/(h·mg),均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MCLR 暴露可引起ALT、AST、ALP水平升高,肝组织DNMTs酶活性升高。     

三价砷甲基转移酶mRNA相对表达与砷甲基化关系的研究

目的观察三价砷甲基转移酶[As(Ⅲ)MT]mRNA在砷中毒患者、病区对照和非病区对照人群中的表达及其与尿砷甲基化水平的关系。方法选取饮水型砷中毒中重度患者、轻度患者、病区对照和非病区对照各6例,采用实时定量RT-PCR技术测定研究对象的淋巴细胞中三价砷甲基转移酶As(Ⅲ)MTmRNA表达,采用原子荧光AFS-9130、形态分析SAP-10检测尿无机砷(iAs)、一甲基胂酸(MMA)、二甲基胂酸(DMA)、总砷(TAs)含量。按PMI=(MMA+DMA)/TAs,SMI=DMA/(MMA+DMA)分别计算一甲基化指数和二甲基化指数。结果中重度组,轻度组、病区对照组人群iAs、MMA、DMA、Tas、PMI、As(Ⅲ)MTmRNA均显著高于非病区对照人群(P<0.05);As(Ⅲ)MTmRNA分别与MMA%(r=0.485,P=0.041)和PMI(r=0.476,P=0.046)呈显著正相关。结论砷暴露可能促进As(Ⅲ)MTmRNA高表达进而引起PMI水平增高导致MMA产生过多。     

亚砷酸钠及其代谢产物对A549细胞中环状基因表达的影响

分别用浓度为20、40、60μmol/L的亚砷酸钠(NaAsO₂)溶液和无机砷的代谢产物一甲基胂酸(MMA)、二甲基胂酸(DMA)对处于对数生长期的人肺腺癌A549细胞处理48 h,提取RNA并逆转录为cDNA,用聚合酶实时荧光定量反应(qRT-PCR)检测hsa＿circ＿0004448、hsa＿circ＿0027493、hsa＿circ＿0000416、circRELB、circFOXN2、circATXN2 6个环状基因(circRNAs)的相对表达量。结果表明,与对照组比较,不同浓度的NaAsO₂溶液均可引起A549细胞中上述circRNAs表达量升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,DMA仅使hsa＿circ＿0004448和circATXN2表达量升高,差异有统计学意义(P<0.05)。经MMA染毒后,上述6个circ-RNAs的相对表达量均无变化,差异无统计学意义(P>0.05)。与NaAsO₂组比较,MMA组和DMA组中6个circRNAs表达量均降低,差异有统计学意义...     

硫酸镍对大鼠睾丸细胞损伤作用

目的 探讨硫酸镍( NiSO4)对雄性大鼠生殖系统损伤的可能机制.方法 选择雄性大鼠32只,随机分为4组,对照组,NiSO41.25、2.50、5.00 mg/kg组;采集附睾和睾丸样本,分别检测精子活率和密度,睾丸细胞活性氧自由基(ROS)荧光强度及其Bax、caspase -3蛋白表达水平.结果 NiSO4 2.50和5.00 mg/kg组大鼠精子活率(分别为68.29％ 、65.29％)和密度(分别为3.03、2.85×106/mL)均明显低于对照组(82.34％和4.80×106/mL)(P＜0.05);睾丸细胞ROS荧光强度(98.59和96.43)则明显高于对照组(62.54)(P＜0.01).与对照组比较,NiSO4 2.50和5.00 mg/kg组Bax蛋白表达量明显升高(P＜0.01),各NiSO4组大鼠睾丸细胞caspase -3前体蛋白表达量明显升高(P＜0.05),且均出现caspase -3切割片段,后者呈剂量效应关系.结论 过量NiSO4暴露可诱导睾丸细胞内大量生成ROS,进而上调Bax蛋白表达并激活caspase -3蛋白,终致生殖损伤发生.     

铅对小鼠海马一氧化氮含量及合酶活性影响

目的探讨不同浓度铅对小鼠脑海码中一氧化氮合酶（NOS）活性和一氧化氮（NO）含量的影响。方法铅暴露组母鼠在小鼠出生第1d时，开始通过饮水饲以不同浓度醋酸铅：2．4，4．8，9．6mmol／L。分别在7，14，28，42d处死小鼠。测定NO含量和NOS活性。结果铅暴露组NOS活性为下降（14，28，42d）趋势。7d，铅暴褥组NOS活性均高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05），出生28d和42d时，4．8，9．6mmol／L铅暴露组NOS活性均低于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。铅暴露组NO含量均比正常对照组小鼠相应期NO含量低。28，42d铅暴露组NO含量明显低于对照组。差异有统计学意义（P〈0．01）。结论铅暴露组小鼠脑海马NO含量和NOS活性变化可能是铅中毒的分子机制之一。     

低剂量亚砷酸[As(Ⅲ)]和卷烟烟气总粒相物联合作用对人肺癌A549细胞氧化应激的影响

目的 研究低剂量亚砷酸[As(Ⅲ)]和卷烟烟气总粒相物(total particulate matter,TPM)联合作用对人肺癌A549细胞氧化应激的影响.方法 将人肺癌A549细胞分为4组:阴性对照组(含0.75％DMSO)、低剂量As(Ⅲ)单独作用组(0.88μg/mL,含0.75％DMSO)、卷烟烟气TPM单独...     

长期噪声暴露对海马NMDAR2B及Tau蛋白磷酸化影响

目的 探讨长期噪声暴露对大鼠海马的影响及其机制。方法 24只雄性SD大鼠分为对照组与噪声暴露组(100 dB,白噪声,4 h/d×30 d),检测噪声暴露组动物中海马的N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基(NR2B)的表达和tau蛋白的磷酸化状态;为了探讨其可能机制,用DNA 断裂原位末端标记法检测海马神经细胞凋亡状态。结果 长期噪声暴露后,实验组与对照组相比海马中NR2B的表达下降达41%,tau蛋白发生过度磷酸化的程度升高2.1倍和海马神经细胞凋亡数量占总神经元细胞数量的0.5%~1%;免疫组织化学结果显示海马中tau蛋白发生过度磷酸化的区域主要在齿状回(DG)区和安蒙氏角(CA)1区。结论 长期噪声暴露引起大鼠神经递质系统异常及 tau蛋白过度磷酸化可能诱发神经细胞凋亡和认知障碍。     

14例甲基丙二酸血症患儿临床表型、基因变异分析及治疗效果评价

目的 对14例甲基丙二酸血症(MMA)患儿的临床表现、基因突变类型、治疗效果及预后进行分析总结,为筛查及治疗MMA积累经验。方法 选取2016年10月～2020年4月在山西省儿童医院经串联质谱技术、基因测序确诊为MMA的14例患儿作为研究对象,其中男9例,女5例,发病年龄16 h～7岁不等。7例合并型MMA患儿给予药物治疗,5例单纯型MMA患儿给予饮食控制治疗(2例患儿于治疗前已死亡)。结果 14例MMA患儿中9例(64.3%)通过新生儿筛查发现,5例(35.7%)为发病后临床诊断。14例患者均接受基因检查,并均检出突变,其中MUT基因突变6例,MUT基因与MMAA基因复合杂合突变1例,MMACHC基因突变5例,MMAA基因突变1例,CD320基因单杂合突变1例。14例患儿均接受了随访,最长随访时间4年,3例患儿已死亡,存活的11例患者中,4例患儿生长发育基本正常,7例患者有不同程度的智力低下。经过不同治疗方法后,7例合并型MMA患儿的血丙酰肉碱C3水平[治疗前：(6.99±0.94)umol/L,治疗后：(4.19±2.04)umol/L]、丙酰肉碱与乙酰肉碱比值C3/C2[治疗前：...     

电脑辐射对精液活性氧含量及精子质量影响

目的 探讨电脑辐射对男性精液活性氧含量及精子质量的影响。方法 56例成年男性按照电脑使用情况分成2组:未使用电脑者为对照组,每天使用电脑>2 h者为暴露组;按照WHO标准方法对研究对象的精液常规参数、精液活性氧含量、精子顶体酶活性及精子去透明带穿卵率进行检测,并对2组的各项参数进行比较分析。结果 2组比较,电脑暴露组的精液活性氧[分别为(24.2±17.1)、(12.2±8.1)]含量升高,精子顶体酶活性[分别为(78.9±19.8)、(110.3±23.3)]和精子去透明带穿卵率[分别为(24.2±17.1)、(47.4±19.6)]降低,2组差异有统计学意义(P<0.05);电脑暴露组与对照组的精液常规参数比较,pH、精液量、精子密度、精子活率、活力、活动率差异无统计学意义(P>0.05),但精子形态正常率差异有统计学意义(P<0.05)。结论 电脑辐射可使精液活性氧含量增高,改变精子形态和受精功能。     

汽车尾气诱导小鼠体内氧化损伤与遗传毒性的研究

目的 探讨汽车尾气导致小鼠体内氧化损伤与遗传毒性的关系。方法 将受试小鼠随机分为4组，即对照组与汽车尾气、：10，1：20，1：30稀释度染毒组，采用动式染毒装置，使小鼠暴露不同稀释度汽车尾气，每天暴露2h，连续暴露5d，测定受试组小鼠体内血、肝、肺、睾丸中活性氧族（ROS）、丙二醛（MDA）含量以及超氧化物歧化酶（SOD）活性与微核率的变化。结果 染毒组小鼠血、肝、肺、睾丸ROS与肺、睾丸DA含量和骨髓细胞微核率明显升高，与对照组比较，其差异均有显著性意义（P＜0.01），其中小鼠骨髓细胞微核率呈现一定剂量－效应关系。血、肝、肺ROS含量与微核率呈明显相关关系。结论 汽车尾气可导致机体氧化与抗氧化系统平衡紊乱；并能引起细胞染色体损伤。汽车尾气导致机体组织的氧化损伤可能在细胞遗传毒性作用中起重要作用。     

黄芩苷对油酸所致急性呼吸窘迫综合征大鼠的作用

目的 验证中药黄芩苷的抗氧化能力以及对油酸所致急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的改善作用。方法 将雄性SD大鼠随机分为对照组、油酸组和黄芩苷低、中、高剂量(150、300、450mg/kg) 组,分别在染毒后10min、1h、2h、6h不同时间点采集动脉血测定氧分压(PaO2),同时检测血常规、动脉血气分析、肺组织内髓过氧化物酶(MPO)和活性氧(ROS)等指标及进行组织病理学检查。结果 染毒2h时油酸组的氧合指数达到最低值(189.45±43.03)mmHg,符合ARDS的诊断(<200mmHg),与对照组相比, P<0.01;黄芩苷中剂量组(治疗组)氧合指数改善最为明显。此外,油酸组大鼠WBC、中性粒细胞计数(N)和百分比(N%)与对照组相比,升高具有统计学意义, 治疗组这些指标出现峰值的时间晚于油酸组;油酸组和治疗组大鼠肺组织ROS含量均高于对照组,但治疗组ROS峰值低于油酸组,6h时接近对照组;MPO浓度具有相同的变化规律。HE染色和病理评分显示,治疗组肺损伤程度较油酸组轻。结论 适宜剂量的黄芩苷可能通过减少中性粒细胞在肺内的集聚和ROS产生发挥抗氧化作用,进而改善ARDS的缺氧状态。     

PM2.5对BEAS-2B细胞脂质过氧化损伤作用

目的 用大气细颗粒物(PM_2.5)刺激人支气管上皮细胞(BEAS-2B细胞),探讨其脂质过氧化作用。方法 PM_2.5采自河南省郑州市;实验细胞为人支气管上皮细胞。用0、12.5、25 μg/mL的PM_2.5刺激BEAS-2B细胞4 h后,使用流式细胞仪检测其活性氧(ROS)水平;刺激BEAS-2B细胞8 h,用丙二醛试剂盒和超氧化物歧化酶活性测定试剂盒分别检测细胞裂解液中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果 PM_2.5作用于BEAS-2B细胞4 h,12.5、25 μg/mL染毒组ROS水平分别为(6 074.69±41.65)、(7 338.58±168.34),均明显高于对照组的(5 816.66±114.69)(P<0.01);刺激BEAS-2B细胞8 h,12.5、25 μg/mL染毒组MDA含量分别为(195.44±35.58)、(334.11±26.75) μmol/mg,均明显高于对照组的(71.14±4.21) μmol/mg(P<0.01),同时染毒组SOD活力分别为(100.08±7.54)、(80.03±7.61) U/mg,均低于对照组的(159.91±10.59) U/mg(P<0.01)。结论 PM_2.5可以引起BEAS-2B细胞脂质过氧化损伤。     

单宁对小鼠辐射损伤保护作用的研究

目的:观察单宁对小鼠经γ一辐照所致氧化损伤的防护作用。方法:将50只二级昆明小鼠随机分为阴性对照组、单纯辐射组和三个不同剂量单宁给药组,单宁给药组每天采用不同浓度单宁水溶液灌胃,2 d后除阴性对照组外其余各组实验动物均用60Co γ射线全身照射,照后继续饲2d,灌胃给药同前,至照射后D3,处死实验动物,测定实验前后动物体重变化,取全血、血清和肝脏分别测定血常规、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性和总蛋白含量。结果:单纯照射组动物外周血白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血小板(PLT)的数量,血红蛋白(Hb)以及红细胞压积(HCT)与阴性对照组相比较显著降低(P<0.05),而不同剂量的单宁给药组相应指标均有不同程度的升高。单纯照射组血清和肝组织MDA含量较阴性对照组显著升高(P<0.05),各单宁给药组的血清和肝脏的MDA较单纯辐射组均有不同程度的降低,并随着单宁剂量的增加而降低显著(P<0.05)。单纯照射组血清和肝脏SOD活性较阴性对照组显著降低(P<0.05),各单宁给药组血清和肝脏的SOD活性与单纯照射组比较有不同程度的升高,并且存在着一定的剂量效应关系,结论:单宁对于辐射引起的氧化损伤有较好的防护作用。     

丹参对大鼠化学性ARDS的防治作用

目的 探讨丹参对化学性急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的防治作用及可能机制。方法 经股静脉注射油酸复制大鼠ARDS模型,应用电子自旋共振(ESR)技术观察大鼠肺内活性氧(ROS)自由基的生成情况,同时检测血浆丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化,进行肺湿干重、肺系数测定及肺组织病理学检查,并与使用丹参组大鼠结果进行比较。结果 丹参组ARDS大鼠肺内ROS含量显著降低,SOD活力升高,MDA生成减少,肺湿干重、肺系数及病理学指标亦得到显著改善。结论 丹参对化学性ARDS具有防治作用,其机制之一与减少体内活性氧自由基的生成有关。     

茶多酚对甲基汞致大鼠大脑皮质神经元氧化损伤的防护作用

目的探讨茶多酚(tea polypheonols,TP)对甲基汞(methylmercury,MeHg)所致大鼠大脑皮质神经元氧化损伤的防护作用及机制。方法进行大鼠大脑皮质神经元原代培养,细胞成熟后给予0.01、0.1、1、2μmol/L MeHg分别处理0.5、1、3、6、12 h,通过测定培养液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活力来进行MeHg细胞毒性分析;根据测定结果选择最具代表性的1μmol/L MeHg暴露6 h作为MeHg染毒组。应用同样方法进行TP预处理组选定,向培养液中分别加入终浓度为5、10、20及40μmol/L TP,分别预处理0.5、1、3及6 h后,再加入终浓度为1μmol/L MeHg,继续培养6 h后测定培养液LDH漏出,根据实验结果选定5、10、20μmol/L预处理3 h作为TP预处理剂量及时间;细胞经各剂量TP预处理后,再暴露于1μmol/L MeHg 6 h,测定神经元细胞凋亡率、非蛋白巯基(non-protein sulfhydryl,NPSH)含量、活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)水平及Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase活力。结果与对照组比较,随着染MeHg剂量的升高,培养液中LDH活力逐渐升高,呈现剂量和时间依赖性的效应关系。TP预处理后,LDH活力逐渐降低,在10、20μmol/L TP预处理组显著降低(P0.05或P0.01);1μmol/L MeHg导致神经元凋亡率显著升高,NPSH含量显著降低,ROS水平显著升高,Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase活力显著降低,差异均有统计学意义(P0.01),TP预处理对上述指标的拮抗作用呈现剂量-效应关系,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论 TP对MeHg所致大鼠大脑皮质神经元氧化损伤具有一定的防护作用。     

氢醌/Cu2+对小鼠骨髓细胞线粒体氧化损伤的研究

目的 研究在Cu^2 存在的条件下,氢醌（HQ）对小鼠骨髓细胞线粒体的氧化损伤。方法 染毒：（1）在1μmol/LCu^2 存在的条件下,小鼠骨髓细胞用0、10、20和40μmol/LHQ染毒30min;（2）1μmol/LCu^2 存在的条件下,20μmol/LHQ染毒30、60、120min。观察骨髓细胞死亡率（CDR）、活性氧（ROD）生成、线粒体酶活力和线粒体电位（MMP）的改变。结果 在1μmol/LCu^2 存在的条件,HQ正最低剂量组（10μmol/L)和最染毒时间（30min,20μmol/L）即表现出ROS生成增加（为对照组的374％和541％）、CDR增加（为对照组的115％和117％）、线粒体酶活力下降（为对照组的54％和30％）和存在剂量、时间的依赖关系（ROS：r=0.941,r=-0.981;CDR:r=0.886,r=0.886;线粒体酶活力：r=-0.842,r=-0.902;MMP：r=-0.844,r=-0.961),ROS生成与MMP、CDR和线粒体酶活力间相关密切（r分别为－0。902,0。943,－0。977）。结论 在Cu^2 存在的情况下,HQ可导致小鼠骨髓细胞线粒体氧化损伤。细胞内ROS生成增加致线粒体氧化损伤可能是HQ诱导小鼠骨髓细胞毒性的重要途径之一。     

几丁聚糖对氯化镉诱导HepG2细胞产生ROS水平的影响

目的研究不同浓度几丁聚糖对氯化镉诱导HepG2细胞产生活性氧(ROS)的清除作用。方法实验分设6组:正常对照组(仅含10%新生牛血清的培养液,无氯化镉和几丁聚糖)、20μmol/L氯化镉组、0.50mg/ml几丁聚糖组、20μmol/L氯化镉+几丁聚糖三个联合作用组(浓度分别为0.02、0.10和0.50mg/ml)。HepG2细胞处理时间为4h。以氯化镉诱导HepG2细胞产生ROS,运用DCFH-DA作为荧光探针,采用流式细胞检测技术检测几丁聚糖与氯化镉联合作用下HepG2细胞内ROS水平。结果20μmol/L氯化镉可使HepG2细胞内ROS水平显著增加(P<0.01);0.50mg/ml几丁聚糖处理HepG2细胞后,细胞内ROS水平较正常对照组略有降低,但并无显著性差异;与氯化镉染毒组相比,几丁聚糖和氯化镉联合作用组细胞内ROS水平随几丁聚糖浓度的增加,其DCF密度值由275.593逐渐降低到174.597,并且在中、高剂量几丁聚糖(0.1mg/ml和0.5mg/ml)和氯化镉联合作用组差异有极显著性(P<0.01)。结论几丁聚糖对HepG2细胞内由氯化镉诱导而产生的ROS水平具有明确的调节作用。     

光合细菌抗氧化特性的体外实验研究

目的研究类球红细菌(Ⅱ)、沼泽红假单胞菌(2c)、深红红螺菌(rub)3株光合细菌(photosynthetic bacteria,PSB)的体外抗氧化特性,为PSB制品的功效定位提供资料和菌株材料。方法用试剂盒测定由3株PSB分别制备的菌液、菌液破碎液、菌体、菌体破碎液样品体外产生T-SOD,GSH,MDA水平,超氧阴离子和羟自由基的清除能力,以及总抗氧化能力及测定3株PSB菌悬液对3种活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)的抗性。结果体外试验结果表明,3株PSB制品对羟自由基、超氧阴离子自由基均具有抑制和清除作用,由高到低的趋势是:菌液破碎液→菌体破碎液→菌液→菌体,其之间的差异有显著性(P<0.05,P<0.01)。同一菌株不同样品的总抗氧化能力,T-SOD、GSH活性由高到低的趋势是:菌液破碎液→菌体破碎液→菌液→菌体,其之间的差异有显著性(P<0.05,P<0.01)。菌株2c体外抗氧化作用最强,菌液和菌液破碎液的T-AOC分别是〔(2.822±0.105)(、4.306±0.128)U/mg pro〕,在所有菌株中最高。所有样品的MDA含量均较低。Fenton反应所产生的羟自由基对菌株rub、Ⅱ的活菌数有显著影响(P<0.05,P<0.01),对菌株2c活菌数无显著影响。结论3种PSB菌株都具有抗氧化作用,但具有菌株特异性;PSB抗氧化特性能增加菌株对ROS的抗性。可将PSB制品的功效之一定位于抗氧化,选择菌株2c作为后续研发材料。     

烹调油烟冷凝物对细胞的氧化损伤研究

目的 通过测定细胞内和细胞上清液中活性氧(reactive oxygen species，ROS)水平。以及细胞膜上ATP酶的含量，对烹调油烟冷凝物(COFC)诱发永生化人支气管上皮细(BEAS-2B)产生ROS及其对细胞膜损伤进行研究。方法 采用分光光度法检测细胞外活性氧，荧光标记细胞内活性氧及ATP酶。结果 在烹调油烟染毒的细胞内ROS的产生与ATP酶的活性降低有关。结论 CA3F引起细胞膜损伤时，ROS的大量产生可能是ATP酶活性降低的主要因素，Ca^2 -ATP酶及Mg^2 -ATP酶对ROS敏感性强。