大麻素受体在心血管疾病中作用的研究进展

大麻素受体（CBR）是内源性大麻素系统的重要组成部分,介导了内源性大麻素或外源性大麻类似物的胞内信号转导,广泛参与心血管疾病的发生发展过程。CBR主要包括经典的1型及2型大麻素受体,以及新型的瞬时受体电位香草酸亚型1、过氧化物酶体增殖物激活受体和其他G蛋白耦联受体。该文综述了CBR的结构及组织分布特点,以及CBR在高血...     

大麻素受体1和细胞外信号调节激酶在肝纤维化小鼠肝组织中的表达及意义

目的研究大麻素受体1(CB1)mRNA在肝纤维化形成过程中表达的变化,从基因转录水平探讨其与细胞外信号调节激酶(ERK)的关系。方法采用10%四氯化碳腹腔注射制备肝纤维化模型,分别于造模第2、4、6、8周留取小鼠的肝组织及血清。通过病理对肝组织进行形态学观察,荧光定量RT-PCR检测CB1 mRNA和ERK mRNA水平,生化法检测血清中ALT和AST的含量,放射免疫法检测血清中透明质酸(HA)的含量。结果与正常对照组相比,各模型组小鼠肝组织中CB1 mRNA和ERK mRNA含量显著升高(P<0.05),而且随造模时间的延长,CB1 mRNA和ERK mRNA含量亦逐渐增高,各组之间差异有统计学意义(P<0.05)。各模型组小鼠血清中ALT、AST及HA的水平随造模时间延长而不断升高,各组间差异具有统计学意义(P<0.05)。CB1 mRNA的含量不但与血清中ALT、AST、HA的含量呈显著正相关(r=0.741、0.763、0.769,P均<0.01),而且与肝组织中ERK mRNA含量也呈显著正相关(r=0.789,P均<0.01)。结论CB1可能通过激活ERK,以ERK通路诱导肝星状细胞(HSC)增殖,促进肝纤维化的形成。     

非酒精性脂肪性肝病药物治疗进展

非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是我国肝酶异常和慢性肝病的常见原因之一,其治疗包括控制饮食、运动锻炼和药物治疗。目前,临床上治疗NAFLD的药物包括减肥药、胰岛素增敏剂、抗氧化剂、抑制肾素血管紧张素系统的降压药、调脂药、细胞因子调节剂和具有良好前景的大麻素受体拮抗剂。在此对NAFLD治疗药物的近期发展作一综述。     

慢性胃食管反流大鼠背根神经节中辣椒素受体1和大麻素受体的表达

背景：食管痛觉高敏参与胃食管反流病（GERD）的发病,而辣椒素受体1（TRPV1）和大麻素系统的激活在疼痛调控中发挥双向作用。目的：检测慢性胃食管反流大鼠相应节段背根神经节（DRG）中TRPV1和大麻素受体（CB1、CB2）的表达情况,探讨两者在GERD中的作用。方法：雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为反流组（R组）、对照组（S组）。采用胃底结扎联合幽门限制法构建慢性胃食管反流模型。采用免疫荧光法和蛋白质印迹法检测大鼠DRG中TRPV1和CB1、CB2的表达,并分析TRPV1蛋白表达与CB1、CB2蛋白表达的相关性。结果：免疫荧光法示R组DRG中TRPV1表达较S组显著上调（905.24±134.82对648.43±135.13,P=0.000）;而CB1（677.06±123.75对836.89±101.00,P=0.013）、CB2（513.99±79.80对709.63±43.25,P=0.000）表达显著下调。蛋白质印迹法亦显示,R组TRPV1蛋白表达显著高于S组（0.98±0.01对0.64±0.09,P=0.001）,CB1（0.86±0.05对0.96±0.06,P=0.013）、CB2（0.75±0.03对0.81±0.05,P=0.019）蛋白表达显著低于S组。TRPV1蛋白表达与 CB1蛋白表达呈负相关（r=－0.836,P=0.001）,而与CB2蛋白表达无关（r=－0.351,P=0.263）。结论：慢性胃食管反流大鼠中TRPV1蛋白表达上调与CB1蛋白表达下调密切相关,酸在调节受体分子中起关键作用。     

非酒精性脂肪性肝病大鼠肝脏脂联素受体的表达

目的 探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝脏脂联素受体(AdipoR)mRNA的表达.方法 喂养高脂饲料建立NAFLD大鼠模型,分别于2、4、8、12周检测血清生化指标,并取肝组织测肝指数(肝湿重/体重),以RT-PCR法检测肝脏AdipoR1和AdipoR2 mRNA的表达,肝组织冰冻切片苏丹Ⅲ脂肪染色、石蜡切片苏木素-伊红常规染色和Masson三色纤维染色,镜下观察.结果 模型组大鼠2、4、8、12周肝脏AdipoR1 mRNA表达逐步上升,AdipoR2 mRNA表达逐步下降,两者分别于4周、2周开始显著差异于对照组(P均<0.01).模型组肝脏AdipoR2表达与肝指数(r=-0.431,P=0.006)、纤维化评分(r=-0.353,P=0.025)均呈显著负相关.结论 NAFLD大鼠肝脏AdipoR1 mRNA表达增加,AdipoR2 mRNA表达减少,提示肝脏AdipoR表达异常可能参与NAFLD的发病机制.     

大麻素1型受体在应激大鼠内脏敏感性调节中的作用

目的 研究大麻素1型受体(CB1R)对急性部分束缚应激大鼠内脏敏感性的调节作用.方法 将30只Sprague-Dawley大鼠均分成空白对照组(假性应激)、应激对照组和激动剂组.于实验第1、2、5、8天以测定结直肠气囊扩张(CRD)后腹壁肌电图(EMG)放电频率表示大鼠内脏感觉功能的变化.通过RT-PCR方法 检测实验第8天各组肠道CBIR mRNA表达水平.结果 实验第1天,三组大鼠腹壁肌电放电频率基础值差异均无统计学意义(P值均>0.05).实验第2天,激动剂组大鼠在40、60、80 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)压力下的腹壁肌电放电频率[分别为(22.37±1.49)、(42.24±3.03)、(69.09±5.54)次/min]较应激对照组大鼠[分别为(39.71±1.84)、(84.45±8.85)、(112.56±11.66)次/min]显著降低(P<0.05).实验第5天,应激对照组大鼠在40、60、80 mm Hg压力下的腹壁肌电放电频率[分别为(104.12±6.77)、(158.07±18.68)、(193.58±25.69)次/min]较空白对照组[分别为(36.33±5.42)、(74.07±8.25)、(102.94±7.95)次/min]和激动剂组[分别为(74.66±6.44)、(140.10±4.68)、(160.39±5.60)次/min]增多,差异均有统计学意义(P值均<0.05).实验第8天各组大鼠同一压力下的腹壁肌电放电频率差异均无统计学意义(P值均>0.05).应激对照组大鼠回盲部、近端结肠和远端结肠CB1R mRNA表达水平(分别为2.53±0.52、2.29±0.42、2.54±0.29)均显著高于空白对照组(分别为0.56±0.15、0.73±0.12、0.82±0.09),差异均有统计学意义(P值均<0.05).CB1R激动剂干预对大鼠肠道CB1RmRNA表达无影响.结论 CB1R在束缚应激所致大鼠内脏高敏感中起重要的保护性调节作用.     

大麻素受体1、FAKmRNA在小鼠肝纤维化形成过程中肝组织中的表达及相互关系

目的研究大麻素受体1（CB1）mRNA在肝纤维化形成过程中表达的变化,从基因转录水平探讨其与黏着斑激酶（FAK）的关系。方法采用10％四氯化碳腹腔注射制备肝纤维化模型,分别于造模第2、4、6、8周留取小鼠的肝组织及血清。通过肝组织病理对肝纤维化程度进行评分,荧光定量PCR检测CB1mRNA和FAKmRNA水平,ELISA方法检测血清中转化生长因子（TGF）β1的含量。结果与正常对照组相比,各模型组小鼠肝组织中CB1mRNA和FAKmRNA含量显著升高（P〈0．05）,而且随造模时间的延长,CB1mRNA和FAKmRNA含量亦逐渐增高,各组之间差异有统计学意义（P〈0．05）。CB1mRNA的含量不但与肝纤维化评分呈显著正相关（r=0．747）,而且与肝组织中FAKmRNA含量也呈显著正相关（r=0．907）,P值均〈0．01。各模型组小鼠血清中TGF[M的水平随造模时间延长而不断升高,各组间差异具有统计学意义（P〈0．05）。肝组织中CB1mRNA的含量与血清TGF[M水平呈显著正相关（r=0．542,P〈0．01）。结论CB1可能通过激活FAK,以磷脂酰肌醇-3-激酶（P13K）通路诱导肝星状细胞（HSC）增殖并分泌大量TGFβ1,从而促进肝纤维化的形成。     

非酒精性脂肪性肝病大鼠肝X受体α基因表达变化及意义

目的研究NAFLD大鼠肝X受体α(LXRα)基因表达变化及意义。方法建立高脂饮食诱导NAFLD大鼠模型后,采用RT-RCR和Western blot法动态观察NAFLD大鼠肝组织中LXRα表达变化。结果4周时模型组大鼠血清游离脂肪酸含量达(0.33±0.03)mmol/L,对照组为(0.24±0.03)mmol/L,差异有统计学意义(P<0.05),随喂养时间延长逐渐升高,12周时模型组大鼠血清游离脂肪酸含量达(0.61±0.06)mmol/L,对照组为(0.25±0.01)mmol/L,差异有统计学意义(P<0.01)。血清ALT和AST含量在8周时模型组分别为75.8 U/L和138.9 U/L,对照组分别为54.8 U/L和81.4 U/L,差异有统计学意义(P<0.01),12周时模型组分别为102.3 U/L和179.1 U/L,对照组分别为54.3 U/L和79.2 U/L,差异有统计学意义(P<0.01)。2周时模型组大鼠肝组织中LXRα基因表达相对含量为0.62,对照组为0.33,差异有统计学意义(P<0.01),随着高脂饮食喂养时间的延长表达进一步增强,12周时模型组大鼠高达1.31,对照组为0.34,差异有统计学意义(P<0.01)。模型组大鼠肝组织中LXRα蛋白表达与基因表达趋势相同,与脂肪肝进展程度一致。结论LXRα基因表达变化与NAFLD的形成密切相关。     

糖皮质激素对大鼠胫骨近端干骺端破骨细胞中大麻素受体1表达的作用

目的 探讨糖皮质激素(GC)性骨质疏松症(GIOP)发病的分子机制.方法 32只雌性SD大鼠按体重随机分为3组:基线组(10只)、GC治疗组(11只)和对照组(11只).干预9周.双能X射线吸收法测量骨密度(BMD);显微CT定量分析右侧胫骨的松质骨BMD和结构;原位杂交和免疫组化检测左侧胫骨近端干骺端大麻素受体1(CB1R)的表达.结果 实验结束时,对照组活体全身BMD[(0.156±0.008)g/cm2]较基线组[(0.147±0.006)g/cm2]显著升高,GC治疗组活体全身BMD[(0.147±0.006)g/cm2]和离体股骨整体BMD[(0.220±0.011)g/cm2]较对照组[(0.156±0.008)g/cm2和(0.240±0.024)g/cm2]明显降低.与基线组和对照组比较,GC治疗组骨小梁体积BMD和组织BMD以及骨小梁的数目和连接度明显下降(P<0.05),而骨小梁的分离度显著增大(P<0.05),骨小梁厚度也增加;GC治疗组破骨细胞中CB1R mRNA和蛋白表达显著增加(P<0.05),且与部分微结构参数密切相关(P<0.05).结论 GC可使大鼠BMD降低,骨微结构衰败.GC上调破骨细胞中CB1R的表达水平,可能是GIOP发病的分子机制之一.     

瘦素在大鼠非酒精性脂肪性肝病中的作用

目的探讨瘦素与非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）肝脂肪变性程度和炎症活动度的关系。方法40只SD大鼠随机分为4组：正常对照组、非酒精性脂肪肝模型：A组（高脂喂养8周）、B组（高脂喂养12周）、C组（高脂喂养16周）。测定各组血清瘦素、白介素10（IL-10）、白介素12（IL-12）、白介素15（IL-15）;评价各组大鼠肝脂变程度和炎症活动度积分水平。结果模型组脂肪变性明显,炎症活动度记分均显著高于正常对照组（P〈0.01）,模型C组炎症活动度记分水平显著高于模型A、B组（P〈0.01）。模型组瘦素水平均显著高于正常对照组（P〈0.01）,模型B组瘦素水平显著高于模型A组（P〈0.01）。模型C组IL-10水平显著低于模型A、B组及正常对照组（P〈0.01）;模型C组IL-12水平显著高于模型A、B组及正常对照组（P〈0.01）;模型C组IL-15水平与模型A、B组有显著差异（P〈0.05）。瘦素与NAFLD肝脂肪变性程度有相关性（R2=0.378,P〈0.05）;IL-10、IL-12、IL-15与NAFLD炎症活动度相关（R2=0.551,P〈0.01）。结论本实验初步认为,瘦素可能是影响NAFLD肝脂肪变性程度的重要因素;IL-10、IL-12、IL-15对NAFLD炎症活动可能有一定影响。     

瘦素受体基因Gln223Arg多态性与非酒精性脂肪性肝病的关系

目的 探讨瘦素受体基因多态性与非酒精性脂肪肝患者临床表型间的关系.方法 以非酒精性脂肪肝患者和正常对照人群为研究对象,应用聚合酶链反应及限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP),对167例中国人(包括85例非酒精性脂肪肝患者和82例正常对照)的瘦素受体基因Gln223Arg进行研究,同时进行临床参数的检测.结果 (1)非酒精性脂肪肝患者和正常对照组人群中Gln223Arg基因型频率和等位基因频率差异无显著性(P>0.05).(2)非酒精性脂肪肝男性患者中AA AG基因型者TC、BMI高于GG基因型(P<0.05).(3)进一步用Logistic回归分析发现:在非酒精性脂肪肝男性患者中该基因变异与TC相关(P=0.019).结论 非酒精性脂肪肝男性患者瘦素受体基因Gln223Arg多态性与TC水平相关.瘦素受体基因Gln223Arg可能参与非酒精性脂肪肝的脂质代谢.     

Serum leptin and soluble leptin receptor in non-alcoholic fatty liver disease

AIM： To determine the role of leptin system in non-alcoholic fatty liver disease （NAFLD） development by delineating the changes in serum levels of leptin and soluble leptin receptor （sOB-R）.
METHODS： Blood samples were collected from 30 consecutive patients with liver-biopsy-proven NAFLD and 30 patients with cholecystolithiasis （stationary phase） as controls. Serum leptin levels were determined by radioimmunoassay and concentration of sOB-R was measured by ELISA. Body mass index （BMI） was calculated for all subjects, and serum insulin, C-peptide, and lipoprotein levels were also detected.
RESULTS： Mean serum leptin level and BMI in the NAFLD group were significantly higher than in the controls （both P 〈 0.001）, but mean sOB-R level was lower in the NAFLD group when compared to the controls. Both men and women in the NAFLD group had higher mean serum leptin levels and lower sOB-R levels than did the men and women in the control group （all P 〈 0.001）. There was a significant negative correlation between serum leptin and sOB-R levels （r = -0.725, P 〈 0.001）. Multivariate analysis showed that the percentage of hepatocyte steatosis, sex, BMI, and homeostasis model assessment of insulin resistance （HOMA IR） were independently related to serum leptin levels.
CONCLUSION： Elevated serum leptin seems to be afeature of steatosis, and serum leptin seems to increase as hepatocyte steatosis develops. An enhanced release of leptin is accompanied by an decrease in sOB-R concentration, which suggests higher resistance of peripheral tissues towards the action of leptin.     

非酒精性脂肪肝与胰岛素抵抗的关系

探讨非酒精性脂肪肝(NAFL)发病与胰岛素抵抗的关系。对63例受检者用放免法测定血清胰岛素,稳态模型法计算胰岛素抵抗指数。同时选择20例无脂肪肝肥胖者作为对照组。脂肪肝组与对照组比较,血清胰岛素、胰岛素抵抗指数显著性增高(P<0.001),重度脂肪肝与中度脂肪肝、轻度脂肪肝比较,血清胰岛素、胰岛素抵抗指数也存在明显增高(P<0.05)。胰岛素抵抗可能系脂肪肝发病的原发因素,而非继发性改变。     

檞皮素对大鼠酒精性脂肪肝核转录因子表达的影响

目的:探讨檞皮素对大鼠酒精性脂肪肝的防治作用及其可能机制。方法:wistaur(?)鼠48只,随机分为:正常对照、酒精性脂肪肝模型、檞皮素处理、纳洛酮处理4组,实验4 wk末,处死所有大鼠,检测血AST,ALT和TNF-α,并行肝脏病理组织学及核转录因子(NF-ΚB)表达的检测。结果:檞皮素和纳洛酮组血AST,ALT和TNF-α明显低于模型组(檞皮素组:150.7±23.6 U/L,57.4±8.4 U/L,0.83±0.27μg/L;纳洛酮组:148.3±21.4 U/L,55.2±7.3 U/L,0.85±0.34μg/L vs 205.0±31.5 U/L,70.5±9.2 U/L,4.08±1.23μg/L;P<0.05),而高于正常对照组(127.6±17.8 U/L,47.9±7.1 U/L,0.22±0.10μg/L;P<0.05).檞皮素和纳洛酮组肝脏脂肪变程度较模型组轻,且懈皮素组肝内NF-ΚB表达水平显著低于模型组(60.27个/HP vs 28.49个/HP,P<0.05)。结论:檞皮素可能通过抑制NF-ΚB及TNF-α的表达,发挥防治酒精性脂肪肝的作用.     

PNPLA3基因多态性与非酒精性脂肪性肝病关系的研究进展

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)已成为西方发达国家慢性肝病的首要病因,在我国已成为仅次于慢性病毒性肝炎的第二大肝病.但是其发病机制尚不清楚,目前仍然没有有效的治疗方式,有研究指出NAFLD与遗传、环境、精神心理因素有关,而且接触相似危险因素的个体间NAFLD的发病率差异较大,疾病进程亦不尽相同,这一事实提示遗传因素及基因多态性与NAFLD发病及进程有关.全基因组关联研究发现PNPLA3(patatin - like phospholipase domain containing 3)基因多态性与NAFLD的遗传易感性及进展有着密切的联系.本综述主要从PNPLA3的结构特征、PNPLA3基因的生物学特征及PNPLA3基因多态性与NAFLD的相关性几个方面进行探讨,从而有利于NAFLD发病机制的阐明,对NAFLD的预防和治疗提供可能.     

胆囊切除与非酒精性脂肪肝关系的初步探讨

目的探讨人群中胆囊切除与非酒精性脂肪肝的关系。方法选用广州地区2011年1月-2013年12月在南方医科大学第三附属医院参加体检的110例胆囊切除患者为研究对象,均无病毒性肝炎和大量酒精摄入史。为明确非酒精性脂肪肝,所有患者均行CT扫描,并且检测血液中甘油三酯和胆固醇的水平。结果 110个胆囊切除患者中非酒精性脂肪肝的患病率为38.18%(42人),其中男性的患病率为45.90%(28人),女性的患病率为28.59%(14人)。所有入组对象中血脂升高者占70.91%(78人),血脂正常者为29.09%(32人)。结论胆囊切除可能是非酒精性脂肪肝发病的一个危险因素。     

Noninvasive investigations for non alcoholic fatty liver disease and liver fibrosis

Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) includes a spectrum of diseases that have insulin resistance in common and are associated with metabolic conditions such as obesity, type 2 diabetes mellitus, and dyslipidemia. NAFLD ranges from simple liver steatosis, which follows a benign course, to nonalcoholic steatohepatitis (NASH), a more severe entity, with necroinflmmation and f ibrosis, which can progress to cryptogenic cirrhosis and end-stage liver disease. Liver biopsy remains the gold standard for evalu...     

瘦素及脂联素与非酒精性脂肪性肝病

非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）作为代谢综合征在肝脏的表现,是一个多因素共同作用的结果,近年来已成为临床高发疾病之一。除了胰岛素抵抗（IR）在本病发生发展过程中起着重要作用外,脂联素（APN）、瘦素（LP）水平变化与胰岛素抵抗以及与NAFLD的关系受到关注。本文就脂联素（APN）、瘦素（LP）在NAFLD发病中的作用予以综述。