基质金属蛋白酶-9的表达变化与实验性家兔脊髓空洞前状态的关系

目的 探讨家兔脊髓空洞症模型脊髓基质金属蛋白酶(MMP)-9的表达变化与脊髓空洞前状态中脊髓水肿形成的关系,评价强力霉素对脊髓空洞前状态水肿形成的抑制作用.方法 中国白兔96只,随机分为4组:Kaolin组、强力霉素组、生理盐水组、假手术组各24只.家兔在麻醉后,行经皮枕大池穿刺术,Kaolin组和强力霉素组动物注入37 ℃ 25%Kaolin悬浊液0.6 ml;依同样方法生理盐水组动物仅注入37℃生理盐水0.6 ml;强力霉素组动物给予强力霉素25 mg·kg-1·d-1胃管内注入,持续14 d;假手术组只做枕大池假穿刺术,既不注射Kaolin也不注入生理盐水.在第1、3、7、14天,各时间点随机抽取Kaolin组、强力霉素组、生理盐水组、假手术组动物各6只处死后,取出颈髓,应用干湿法测定脊髓空洞前状态中脊髓含水量,应用免疫印迹和免疫组织化学方法测定脊髓中MMP-9表达含量.结果 各时间点Kaolin组动物颈髓组织中MMP-9表达和脊髓含水量与生理盐水组和假手术组相比明显增高(P＜0.01);强力霉素治疗组与Kaolin组相比第1天差异无统计学意义(P＞0.05);余各时间点动物脊髓含水量及颈髓组织中MMP-9表达与Kaolin组比较有明显降低(P＜0.01).结论 在实验性家兔脊髓空洞症模型中,脊髓MMP-9高表达在脊髓空洞前状态水肿形成中起重要作用,强力霉素具有临床应用治疗脊髓空洞前状态的可能性.     

实验性脊髓空洞前状态蛋白激酶C的活性变化及意义

目的 探讨蛋白激酶C(PKC)在脊髓空洞前状态中活性变化及其作用.方法 用新西兰兔56只制作模型.术后1、3、7、14、21 d用光镜、干湿重法观察上颈髓病理学演变、脊髓含水量,应用底物磷酸化法测定胞膜、胞浆PKC活性.结果 高岭土组动物于术后第1天脊髓含水量即有明显增加[(68.35±0.70)%],第7天达到高峰[(72.92±0.86)%],持续到第14天,至第21天时稍有缓解[(70.03±0.77)%];组织学观察发现术后3 d上颈髓轻度水肿,7～14 d水肿达到高峰期,21d略有缓解;胞膜PKC活性术后1 d出现增加(5.67±0.26 pmol·mg-1·min-1),7～14 d达到最高水平(13.27±3.15 pmol·mg-1·min-1),21 d开始回落(8.85±1.56pmol·mg-1·min-1),胞浆的PKC活性则呈相反趋势.结论 脊髓空洞前状态形成中出现PKC移位激活.参与了缺血、缺氧性脊髓水肿的形成.     

新西兰兔脊髓内水通道蛋白-4的定位与表达

目的:探讨正常新西兰大白兔脊髓水通道蛋白-4(AQP4)的定位与表达,为研究其在脊髓水代谢中的作用提供理论基础.方法:选用正常成年新西兰大白兔,采用免疫组化和原位杂交技术检测脊髓AQP4蛋白及其mRNA的定位及表达.结果:免疫组织化学染色和原位杂交结果显示胶质细胞、前角运动神经元、中央管室管膜细胞、软脊膜上皮细胞均表达阳性,AQP4主要分布于细胞膜,其中,胶质细胞和中央管室管膜细胞表达存在极性,前者主要分布在与毛细血管内皮细胞接触的一侧,后者主要分布在中央管室管膜细胞的基底侧膜.结论:AQP4在正常兔脊髓内具有广泛的表达,其表达的解剖定位提示AQP4在脊髓内主要参与水分子的转运及平衡调节、电解质代谢,并受局部调节以适应特殊的功能需求.     

银杏提取物对实验性脊髓空洞症神经元凋亡的影响

目的评价银杏提取物(GBE)对实验性脊髓空洞症神经元凋亡的影响。方法30只中国白兔随机分为3组。24只动物经皮枕大池穿刺缓慢抽出0．6ml脑脊液后注入等量25％kaolin，其中12只于当日起给予银杏注射液静脉滴注为银杏组：12只以等量生理盐水静脉滴注为盐水组；6只动物为假手术组作为对照。术后不同时间点灌注处死动物，取脊髓行HE、TUNEL、Bcl-2及Bax观察。结果组织切片对比发现同一时间点银杏组脊髓组织水肿及神经元变性坏死均较盐水组为轻，银杏组脊髓神经元凋亡率、Bax反应阳性细胞率低于盐水组，而Bcl-2反应阳性细胞率高于盐水组。神经元凋亡在术后7d达高峰。结论银杏提取物可改善实验性脊髓空洞kaolin性肉芽肿引起的上颈髓缺血水肿，阻止脊髓神经元凋亡。     

浅谈脊髓空洞症患者的临床诊疗

目的浅谈脊髓空洞症的临床诊疗.方法 根据患者的临床特征与检查结果结合进行诊断并治疗.结论 脊髓空洞症治疗仍较为困难.使用脊髓空洞症-腹腔或脊髓空洞症-蛛网膜下分流术,抽除空洞,据说对此病有益.     

银杏提取物对实验性脊髓空洞症神经元凋亡的影响

目的 评价银杏提取物(GBE)对实验性脊髓空洞症神经元凋亡的影响。方法 30只中国白兔随机分为3组。24只动物经皮枕大池穿刺缓慢抽出0.6ml脑脊液后注入等量25%kaolin,其中12只于当日起给予银杏注射液静脉滴注为银杏组;12只以等量生理盐水静脉滴注为盐水组;6只动物为假手术组作为对照。术后不同时间点灌注处死动物,取脊髓行HE、TUNEL、Bcl-2及Bax观察。结果 组织切片对比发现同一时间点银杏组脊髓组织水肿及神经元变性坏死均较盐水组为轻,银杏组脊髓神经元凋亡率、Bax反应阳性细胞率低于盐水组,而Bcl-2反应阳性细胞率高于盐水组。神经元凋亡在术后7d达高峰。结论 银杏提取物可改善实验性脊髓空洞kaolin性肉芽肿引起的上颈髓缺血水肿,阻止脊髓神经元凋亡。     

脊髓空洞症病人的心理护理

脊髓空洞症（Syringomyelia，SM）是一种进行缓慢的脊髓退行性病变，起病隐潜，病人数年甚至十几年都毫无察觉，确诊时常常已呈进行性加重趋势。其患病率约为8．4／10万，多发生于青壮年，男性多于女性，病程数月至四十年（薛庆澄，主编．神经外科学、天津：天津科学技术出版社，1990：661），多以躯体感觉和运动功能障碍为主要表现。无论保守治疗还是手术只能延迟疾病进程，绝大多数无法彻底治愈已造成的机体损伤，严重影响病人的生存质量，病人身心长期受病痛煎熬，哀叹脊髓空洞症是不死的癌症。     

脑脊髓多发性血管网状细胞瘤并脊髓空洞1例

1病例简介患者,男,15岁,学生。于2000年11月30日入院,患者近3个月间隙性头痛,以后枕部为重,伴右侧肢体麻木及酸痛,右侧听力下降,声嘶、偶有饮水呛咳。查体:视乳头边界稍模糊,右侧面部痛觉减退,右侧听力、视力减低,咽反射迟钝,伸舌偏向右,右舌肌萎缩,右侧肢体痛,触觉、温度觉减退,深感觉正常。MRI示:延髓右背侧见1.5cm×1.5cm×2cm稍短T1;较长T2信号影,下缘有2cm×3cm×3cm短T1、长T2信号影相连;右侧小脑半球可见稍长T1信号,长T2信号不规则、边界欠清。C5脊髓内可见一结节样稍短T1、较长T2信号,增强效应均明显,C2-T6脊髓内可见长条状囊…     

自发2型糖尿病模型OLETF大鼠肾周脂肪组织水通道蛋白7的表达

目的：观察自发2型糖尿病动物模型OLETF（Otsuka Long-Evans Tokushima Fatty）大鼠不同糖尿病病程阶段肾周脂肪组织水通道蛋白7 mRNA和蛋白表达的变化,探讨其在肥胖和糖尿病发生中的作用。方法：以OLETF大鼠30只为实验组,同种系非糖尿病LETO（Long- Evans Tokushima Otsuka）大鼠18只为正常对照。8周（基线）时两组大鼠各处死6只。随后OLETF大鼠分为未治疗组（OLETF组）12只及盐酸二甲双胍治疗组（OLETF/M组）12只。观察各组大鼠8、18、28周时的体重、血清甘油三酯、胆固醇、丙三醇、葡萄糖耐量试验的血糖与胰岛素水平以及肾周脂肪组织水通道蛋白7（aquaporin7,AQP7）mRNA和AQP7蛋白含量的变化。用Real time PCR测定AQP7 mRNA水平, Western blotting测定AQP7蛋白含量。结果：（1）OLETF组18周均发展为糖尿病［60分钟血糖（25.67±6.78）mmol/L,120分钟血糖（16.19±2.98）mmol/L］。OLETF组大鼠随周龄增加,其体重、血糖、胰岛素、血清甘油三酯均明显增加。血清丙三醇水平先增高后下降,8、18和28周的水平分别为（52.61±11.80）、 （156.03±39.56） 和（130.84±25.46）μmol/L。（2）OLETF/M组18周时达糖尿病标准［60分钟血糖（18.64±6.67）mmol/L,120分钟血糖（14.13±5.21）mmol/L］,但血糖水平低于OLETF组;28周时血糖下降均恢复为糖耐量异常［60分钟血糖（11.72±3.06）mmol/L,120分钟血糖（12.42±2.30）mmol/L］。OLETF/M组的甘油三酯、胆固醇和丙三醇浓度较OLETF组降低。OLETF/M组与OLEFT组比较具体值为：甘油三酯18周（0.88±0.14） vs. （1.09±0.44）mmol/L,28周（1.06±0.51） vs. （2.20±1.51）mmol/L;胆固醇18周（2.18±0.14） vs. （2.30±0.21）mmol/L,28周（1.90±0.19） vs. （2.36±0.35）mmol/L,P<0.05;丙三醇18周（77.28±9.06） vs. （156.03±39.56）μmol/L,P<0.05, 28周（58.44±14.03） vs. （130.84±25.46）μmol/L,P<0.01。（3）增加肾周脂肪组织AQP7 mRNA及蛋白表达：随周龄及肥胖增加,18及28周OLETF组AQP7 mRNA表达较同组8周龄大鼠分别上调了67.5％和41.7％,AQP7蛋白表达较同组8周龄大鼠分别上调了21.9％和8.9％;18及28周OLETF/M组AQP7 mRNA表达较同组8周龄大鼠分别上调了25％及8.3％,AQP7蛋白表达较同组8周龄大鼠分别上调了14.6％及1.6％。OLETF及OLETF/M组均呈先增高而后下降的趋势,于18周时增高,28周下降,与血清丙三醇变化趋势一致。OLETF/M组AQP7 mRNA及蛋白表达水平低于同周龄OLETF组,但两组差异无统计学意义。OLETF/M组的体重、胰岛素与OLETF组差异无统计学意义。OLETF/M组AQP7 mRNA及蛋白表达水平低于同周龄OLETF组,但两组差异无统计学意义。结论：内脏脂肪AQP7参与了糖脂代谢,与2型糖尿病和肥胖发病相关。二甲双胍可改善OLETF大鼠的脂代谢和糖代谢紊乱,但对AQP7 mRNA及蛋白表达未见明显影响。     

局部亚低温对大鼠脑出血后水通道蛋白4表达的影响

目的观察局部亚低温对大鼠自体血注入法脑出血模型水通道蛋白4(AQP-4)mRNA及蛋白质表达的影响,探讨局部亚低温减轻脑出血后水肿的可能机制。方法雄性W istar大鼠240只,随机分为脑出血(ICH)组和脑出血加局部亚低温(ICH+H)组。每组分为对照、脑出血后6、24、72 h,5、7 d共6个亚组,ICH+H组于注血后给予4 h的局部亚低温治疗,各亚组分别进行血脑屏障(BBB)通透性、脑水含量的检测以及应用逆转录(RT)-PCR及W estern印迹对AQP-4进行测定。结果ICH组大鼠脑组织水含量、BBB通透性以及AQP-4 mRNA表达的增加始于脑出血后6 h,AQP-4蛋白质表达的增加始于脑出血后24 h,均至72 h达高峰(P<0.01)。AQP-4 mRNA及蛋白质表达的变化与BBB通透性的变化呈正相关(r=0.78和r=0.76)。ICH+H组的脑组织水含量和BBB通透性在各时间点与ICH组相比明显下降,而AQP-4 mRNA吸光度值(A)在脑出血后48 h与ICH组相比开始较低,在72 h,由ICH组的1.25±0.03降至1.04±0.02(P<0.01),AQP-4蛋白质A值在各时间点与ICH组相比明显下降,在72 h,由ICH组的0.77±0.08下降至0.25±0.04(P<0.01)。结论脑出血后BBB完整性的破坏可以导致AQP-4表达的上升。局部亚低温可以抑制脑出血后AQP-4 mRNA和蛋白质表达的增加。局部亚低温可能既通过减轻BBB完整性的破坏在转录水平抑制AQP-4 mRNA表达的增加,也可以在翻译水平直接抑制AQP-4蛋白质的表达,来减轻脑出血后的脑水肿形成。     

用电解损毁方法制备大鼠的脊髓损伤模型

目的：建立一种简便实用、稳定可靠的脊髓损伤动物模型。方法：采用电解损毁法,主要损伤大鼠第１０胸椎节段脊髓双侧皮质脊髓束纤维,在术后不同时间观察受损脊髓组织学变化及大鼠运动功能改变,并用ＨＲＰ逆行标记技术,以大脑运动皮层标记神经元计数来反映皮质脊髓束受损情况。结果：１ｍＡ,２１０ｓ的损伤电流,可在脊髓后索造成神经组织坏死,形成空腔,使双侧皮质脊髓束纤维受损;术后１周、２周、３周观察,电损毁组大鼠运动功能显著低于假手术组,表现为后肢运动评分下降,Ａｓｈｗｏｒｔｈ肌张力评分增大,斜板实验角度下降;电损毁组运动皮质标记神经元计数也显著低于假手术组。结论：电解损毁在适宜参数下能损伤双侧脊髓皮质脊髓束,引起双后肢的不完全性截瘫,结果稳定可靠,操作简便,为脊髓损伤的实验研究奠定了基础。     

糖尿病大鼠脊髓损伤后血小板衍化生长因子的表达研究

目的观察糖尿病大鼠脊髓机械性损伤后损伤处脊髓血小板衍化生长因-7-（PDGF）在星型胶质细胞中的表达量,以探讨脊髓损伤过程中PDGF的作用。方法将36只大鼠随机分为假手术对照组、脊髓损伤组和糖尿病脊髓损伤组并制作相关模型,观察脊髓损伤24h和7d后大鼠运动功能的改变、损伤脊髓的病理变化及PDGF在星型胶质细胞中的表达情况。采用UTHSCSA Image Tools 3．0图像分析处理系统进行分析,统计各张切片单位面积（mm^2）内PDGF阳性细胞的数量和光密度：BIO-RAD软件Quantityone测定并用相对灰度值表示PDGF蛋白的表达量：然后对所得数据进行分析。结果脊髓损伤24h后,两组大鼠均出现严重运动功能障碍,BBB功能评分分别为（0.7±0．4）、（0．7±0.5）分：损伤7d后,脊髓损伤组大鼠恢复为（6．7±1.2）分,而糖尿病脊髓损伤组仅恢复为（3．9±0.7）分,两组差异有统计学意义（P〈0．01）：而假手术对照组大鼠运动自如,术后24h和7d评分均为（21．0±0．0）分,与另两组比较差异均有统计学意义（均P〈0．01）。术后24h脊髓损伤组和糖尿病脊髓损伤组脊髓损伤部位白质中可见肿胀的轴突和大量空泡。灰质中存在极少量的神经元和胶质细胞;7d后损伤范围确定,损伤段变细,脊髓内有空洞形成,其中糖尿病脊髓损伤组的空洞大于脊髓损伤组,并且周围有炎性细胞浸润。PDGF阳性表达部位为星形胶质细胞,术后24h、7d假手术对照组PDGF表达少,没有太大的变化：24h后脊髓损伤组和糖尿病脊髓损伤组损伤部位的PDGF表达增多,且脊髓损伤组明显多于糖尿病脊髓损伤组（P〈0．01）：7d后脊髓损伤组PDGF持续高表达,仍明显多于糖尿病脊髓损伤组（P〈0．01）。在Western blot检测中,假手术对照组在两个时段均仅有少量PDGF蛋白表达,24h后脊髓损伤组PDGF表达明显多于糖尿病脊髓损伤组（P〈0．01）,损伤7d后脊髓损伤组PDGF持续高表达,仍明显高于糖尿病脊髓损伤组（P〈0．01）。结论糖尿病脊髓损伤大鼠脊髓损伤后BBB评分明显低于脊髓损伤组大鼠,PDGF表达量亦明显减少,可能与高血糖状态加重脊髓的损伤以及抑制其损伤后恢复有关。     

脑缺血再灌流中血压对自由基脑损害影响的实验研究

本实验通过对45只兔血和脑组织中丙二醛(MDA)和超氧化物岐化酶(SOD)含量变化及组织病理改变的观测,探讨了脑缺血再灌流时不同水平血压对自由基脑损害的影响。结果提示,正常血压组动物的脑损害较轻,略低血压组次之,高血压及超高血压组脑损害较重。因此,于脑缺血后再灌流时,将血压控制在90～130mmHg范围内,有益于减轻自由基脑损害。     

早期脊髓复苏在急性颈脊髓损伤治疗中的临床意义

目的评价早期脊髓复苏在急性脊髓损伤治疗中的临床意义。方法对86例急性颈脊髓损伤患者,其中脊髓完全性损伤17例,脊髓不完全性损伤69例。早期脊髓复苏方案包括：①保持呼吸道通畅和足够有效的血容量,维持平均动脉血压在100mmHg以上,血氧饱和度在95％以上。②应用大剂量甲基强的松龙或地塞米松等药物治疗。③行颅骨牵引制动或复住颈椎。④早期进行颈椎减压植骨融合内固定术。⑤术后早期应用高压氧治疗。结果死亡6例,失访4例,76例获得12～54个月的随访。随访病例中56例神经功能获得改善,其中完全性损伤组有效率为23．5％,不完全性损伤组有效率为73．9％,总有效率为65．1％。结论颈脊髓损伤后,早期复苏治疗是保留和恢复残存脊髓神经功能较为有效的措施,应在临床积极推广应用。     

急性脊髓损伤后某些血清元素变化的实验研究

目的：探讨不同程度脊髓损伤后动物血清钙、镁、铜、锌、铁元素含量的变化及转归。方法：将体重2．5～3．0kg健康成年家兔26只,随机分为A组(n=10),B组(n=10)和对照组C组（n=6)。A、B两组用Allen氏法致脊髓伤,能量分别为100gcf和60gcf。通过连续测定术前及术后30min、24h、72h和7d时血清钙、镁、铜、锌、铁元素的含量,结合平行进行的动物后肢神经功能学检查和电生理学(SEP)检查,观察它们在脊髓损伤后及功能恢复过程中的变化。结果：脊髓损伤后血清钙、铜含量升高,镁、锌、铁含量下降。脊髓损伤重者,血清元素变化更明显且持续时间更长。体感诱发电位(SEP)检测A、B两组均表现不同程度的波幅降低或消失,潜伏期延长．结论：急性脊髓损伤早期即可出现某些血清元素的变化。这些变化与脊髓损伤程度、功能恢复情况及SEP变化相一致。     

家猫视神经损伤的病理学改变

目的:动态观察视神经损伤后的病理学改变。方法:选取健康成年家猫20只,以自身左眼为对照,用自制损伤器撞击右眼视神经管,建立视神经损伤模型。在光镜与电镜下观察视神经损伤后1、3、7、14d的形态学改变。结果:光镜下视神经损伤主要表现为不同程度的神经纤维空泡样变性,电镜下视神经损伤主要表现为轴突内空泡样变性、髓鞘松解、微丝微管消失等。结论:家猫外伤性视神经损伤的动物模型与人类有很强的相似性,并有可操作性。视神经震荡伤后的病理变化以变性为主,早期施行减压手术可能挽救视力。     

吡拉西坦对实验性脊髓损伤大鼠AQP4表达的影响

目的探讨吡拉西坦氯化钠注射液对大鼠实验性脊髓损伤后水通道蛋白4（Aquaporin 4,AQP4）表达的影响。方法将120只健康SD大鼠随机分为对照组（A组）、手术组（B组）、吡拉西坦组（C组）,采用改良Allen法制备脊髓损伤模型,分别在6 h、24 h、72 h和5 d时取大鼠脊髓组织,用免疫组织化学染色法和Western-blot法观察各组AQP4蛋白表达情况。结果与A组相比,B组、C组均从6 h开始出现脊髓水肿,72 h达到高峰,且C组脊髓水肿低于B组。同样AQP4表达在手术后开始升高,72 h后达到高峰,且B组较A组和C组明显增高（P〈0.05）。结论 AQP4与脊髓水肿形成有关,吡拉西坦可以抑制脊髓组织内AQP4的基因表达。     

TrK A在成年猫脊髓的表达

为探讨ｔｒｋＡ在成年猫脊髓的分布,用成年健康雄猫的腰段脊髓制作 ２０μｄ厚冰冻切片并行ＡＢＣ免疫组化染色,ＤＡＢ棕色反应显色。结果：ｔｒｋＡ的阳性反应物主要分布在脊髓背角Ⅱ板层的神经膨体,灰质一些神经元以及白质轴索内。结果提示这些部位存在ｔｒｋＡ。