凋亡素2配体对食管癌细胞株Eca-109放射敏感性的影响

目的 研究凋亡素2配体(Apo-2 ligand,Apo2L),又称肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)对体外培养食管癌细胞株Eca-109放射敏感性的影响。方法 MTT法检测TRAIL对Eca-109细胞的毒性;克隆形成实验检测TRAIL对Eca-109细胞的放射增敏作用;流式细胞仪(FCM)技术分析TRAIL对凋亡率及细胞周期的影响。结果 100~800 μg/ml TRAIL随浓度升高对Eca-109细胞的增殖抑制率增大,药物浓度与细胞抑制率正相关(r=0.981,P<0.01),50%抑制浓度(IC₅₀)为637 μg/ml;200 μg/ml TRAIL能增加Eca-109细胞的放射敏感性,放射增敏比为1.219;不同剂量(0~8 Gy)照射后,给药组的凋亡率均高于单照射组(F=16.97、76.65、92.86、209.66,P<0.05),给药组G₂/M期细胞比例较单照射组增加(F=9.40、84.99、87.61、2025.85,P<0.05)。结论 TRAIL可以抑制Eca-109细胞的生长,诱导细胞凋亡和G₂/M期阻滞,后者可能与TRAIL的放射增敏机制有关。     

X线分次照射大鼠腹部后小肠葡萄糖吸收的变化和辐射后期效应

大鼠腹部X线分次照射40Gy后,小肠对葡萄糖吸收明显减少,吸收障碍的持续时间较长,在照后9个月内尚未恢复正常.辐射所引起的后期效应,主要表现为体重增长受到抑制、血红蛋白含量降低和后期动物死亡.     

125I粒子持续低剂量率照射对人食管癌细胞系KYSE150抑制作用及其机制研究

目的 研究¹²⁵I粒子持续低剂量率照射对人食管癌细胞系KYSE150的抑制作用及其机制。方法 根据不同照射方式,将KYSE150细胞分成空白对照组、高剂量率单次外照射组（SDR,1.052 Gy/min）、持续低剂量率照射组（¹²⁵I-CLDR,2.77 cGy/h）。克隆形成实验衡量KYSE150细胞对两种照射方式的敏感性,计算¹²⁵I-CLDR的相对生物学效应（RBE）。流式细胞仪分析不同照射方式对细胞凋亡和周期的影响。蛋白免疫印迹法检测不同照射方式下KYSE150细胞内γ-H2AX和Bax的蛋白表达量变化。结果 KYSE150细胞对¹²⁵I-CLDR的放射敏感性高于SDR,¹²⁵I-CLDR的相对生物学效应约为1.56;与SDR相比,¹²⁵I-CLDR能更显著地诱导KYSE150细胞的早期和晚期凋亡（t=4.07,11.08,P<0.05）,提高G₂/M期细胞比例（t=11.25,P<0.05）;¹²⁵I-CLDR组DNA损伤信号蛋白γ-H2AX和促凋亡蛋白Bax的表达水平显著升高。结论 与SDR相比,¹²⁵I-CLDR对人食管癌细胞KYSE150的抑制作用更为显著,其主要机制可能是电离辐射后肿瘤细胞克隆形成能力受损,DNA损伤严重,细胞凋亡增多,而G₂/M期细胞比例升高,细胞放射敏感性增强。     

Fas和Bcl-2在受照射小鼠脾淋巴细胞中的表达及与细胞凋亡的关系

目的　探讨Fas和Bcl 2蛋白在受大剂量60 Coγ射线照射后小鼠脾淋巴细胞中的表达及与细胞凋亡的关系。方法　小鼠全身一次性γ射线照射 ,吸收剂量分别为 0、6、9、12、15和 2 0Gy ,于照射后 3、6、12、2 4h、3、7、14和 2 8d活杀取材 ,免疫组化LSAB染色观察后进行定量分析。结果　照射后 6h ,Fas的表达呈强阳性 ,6～ 12Gy剂量范围内阳性表达更明显 ,而随时间递增表达逐渐减少 ,但无明显的剂量效应关系 ,7d后表达明显减弱。Bcl 2的表达于 6h几乎为阴性 ,在 <12Gy剂量组更为明显。至照射后 2 8d依然未恢复。 结论　在受大剂量照射小鼠脾淋巴细胞中Fas癌基因蛋白表达升高与细胞凋亡有较好相关关系 ,即Fas蛋白可能有促进凋亡的作用。而在相同剂量照射后 ,Bcl 2抑制凋亡的作用被减弱甚至消失。上述两种癌蛋白对受大剂量60 Coγ射线照射的小鼠脾淋巴细胞凋亡均具有重要调控作用     

5.21Gy软X线局部照射后伤口组织细胞凋亡的时相变化及其与创伤愈合的关系

目的研究5.21Gy软X线局部照射后大鼠伤口组织细胞凋亡的时相变化及其与创伤愈合速度的关系.方法采用大体观察、图像分析等方法观察大鼠伤口愈合速度变化.采用PI染色,结合流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡.结果 5.21Gy软X线局部照射后,照射侧愈合速度明显下降,3～6天时段最显著;9天以后逐渐增加,12～15天时愈合速度最快.在3～9天时间段内,照射侧伤口组织细胞凋亡百分数明显高于对照侧;与之相反,在12～22天时间段内,照射侧伤口组织细胞凋亡百分数明显低于对照侧.结论 5.21Gy软X线局部照射后,伤口组织细胞凋亡率增加可能是影响创伤愈合早期的机制之一.     

125I粒子持续低剂量率照射对人喉癌细胞系Hep-2的抑制作用

目的 探讨¹²⁵I粒子持续低剂量率照射对人喉癌细胞Hep-2的抑制作用及其机制。方法 实验分为空白对照组、X射线单次高剂量率照射组（SDR组）、¹²⁵I粒子持续低剂量率照射组（¹²⁵I-CLDR组）。克隆形成实验检测Hep-2细胞在两种照射方式下的放射敏感性,并计算¹²⁵I-CLDR的相对生物学效应。锥虫蓝染色计数两种照射方式下Hep-2细胞的增殖情况。流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期阻滞情况。Western blot检测细胞内总γ-H2AX的表达水平。结果 Hep-2细胞对¹²⁵I-CLDR的放射敏感性高于SDR,¹²⁵I-CLDR相对生物学效应约为1.61,且α/β比值高于SDR。SDR和¹²⁵I-CLDR均能抑制Hep-2细胞增殖（t=30.9、40.7,P<0.05）,且后者的抑制作用更为明显（t=9.8,P<0.05）。¹²⁵I-CLDR诱导细胞凋亡和G₂/M期细胞阻滞的效应强于SDR（t=5.8、19.8, P<0.05）。结论 ¹²⁵I-CLDR对Hep-2细胞的抑制作用高于SDR,主要机制是降低Hep-2细胞的DNA损伤修复能力,促进细胞死亡;诱导细胞凋亡和G₂/M期阻滞,抑制细胞再增殖。     

NADH对正常肝细胞株L02辐射后p53和bax表达的影响

放射治疗在于最大程度地杀伤肿瘤细胞和尽可能地减小正常组织细胞的损伤。但临床上往往对正常组织造成损伤，从而限制了肿瘤的放射治疗剂量的提高，特别是对于亚临床病灶的放射治疗。为此，减小正常组织细胞的放射损伤成为放射生物学研究的重要领域。本研究通过还原型辅酶NADH对辐射诱导的细胞凋亡及其凋亡信号传递分子p53、bax表达的影响，探讨NADH抗辐射诱导的细胞凋亡作用及其作用机理。     

香兰素衍生物BVAN08对人脑胶质瘤细胞的放射增敏作用及机制研究

目的 研究香兰素衍生物6-溴异香兰素(BVAN08)对人脑胶质瘤细胞的增殖影响、放射增敏作用和相关机制,为开发新的放射增敏抗癌药物提供实验依据。方法 采用MTT法、克隆形成率法检测BVAN08对U-251细胞增殖活性和⁶⁰Coγ射线敏感性的影响(照射剂量率为2.3 Gy/min);光学显微镜观察BVAN08作用后细胞形态学变化;透射电镜检测细胞自吞噬死亡;流式细胞术检测细胞周期和凋亡的变化;Western blot检测DNA修复蛋白DNA-PKcs的表达变化。结果 6-溴异香兰素BVAN08对U-251细胞增殖有显著抑制作用(t=1.83～3.07,P＜0.05),在10～100 μmol/L浓度范围内呈剂量和作用时间依赖性,药物作用48和72 h的IC50分别为55.3 和52.7 μmol/L。60 μmol/L BVAN08作用4 h后,U-251细胞产生明显的G₂/M期阻滞, 12 h达到峰值,G₂/M阻滞达到63.3 %,并开始同时出现细胞凋亡和自吞噬死亡。BVAN08对U-251细胞有明显的放射增敏作用,而且在照射前12 h给药的增敏效果最好,20 μmol/L浓度对2 Gy照射杀伤U-251细胞的增强比为3.14。Western blot检测表明BVAN08能显著抑制DNA-PKcs的表达。结论 香兰素衍生物BVAN08具有明显抑制人脑胶质瘤U-251细胞增殖和辐射增敏作用、并同时诱发凋亡和自吞噬死亡。BVAN08对U-251细胞的辐射增敏作用可能与G₂/M期阻滞和DNA双链断裂修复关键蛋白DNA-PKcs表达的抑制敏感性有关。     

Fas和Bcl2在受照射小鼠脾淋巴细胞中的表达及与细胞凋亡的关系

目的：探讨Ｆａｓ和Ｂｃｌ－２蛋白在受大剂量＾６０Ｃｏγ射线照射小鼠脾淋巴细胞中的表达及与细胞凋亡的关系。方法小鼠全身一次性γ射线照射,吸收剂量分别为０、６、９、１２、１５和２０Ｇｙ,于照射后３、６、１２、２４ｈ、３、７、１４和２８ｄ活杀取材,免疫组化ＬＳＡＢ染色观察后进行定量分析。结果照射后６ｈ,ｆａｓ的表达呈强阳性,６－１２Ｇｙ剂量范围内阳性表达更明显,而随时间递增表达逐渐减少,但无明显的剂量效     

香兰素衍生物BVAN08对人脑胶质瘤细胞的放射增敏作用及机制研究

Objective To provide more convincing evidences and experimental data for exploring vanillin derivative BVAN08,6-bromine-5-hydroxy-4-methoxy-benzaldehyde,as a new anticancer drug,and to investigate the effect on the growth,radiosensitization of human glioma cell line U-251 and the relative mechanism.Methods The effect of BVAN08 on cell proliferation of U-251 and radiosensitivity to 60Co γ-rays (irradiation dose rate 2.3 Gy/min) were analyzed with MTT and colony-forming ability assay.Change in cellular morphology was observed by using light microscope.Change in cell cycle and apoptosis was detected with flow cytometry.The autophagy was observed by using TEM (irradiation dose rate is transmission electron microscope).DNA-PKcs protein level was detected through Western blot analysis.Results BVAN08 exhibited a dose- and time-dependent inhibition on the proliferation of U-251 cells during the concentration range of 10-100 mol/L (t = 1.83-3.07,P ＜ 0.05).IC50 at 48 h and 72 h after administration with BVAN08 were 55.3 and 52.7 mol/L,respectively.Obvious G2/M arrest was induced in U-251 cells after 4 h administration with BVAN08,and reached peak at 12 h.The G2/M population reached 63.3% in U-251 cells after 12 h administration of 60 μmol/L BVAN08 and kept increasing with the time,while both apoptosis and autophagic cell death were induced.The most effective radiosensitization time for BVAN08 treatment was 12 h before irradiation.The enhancement ratio of radiosensitivity was 3.14 for 20 μmol/L of BVAN08 12 h before 2 Gy irradiation.Conclusions BVAN08 can nduce apoptosis as well as autophygic cell death of U-251 cells,and sensitize U-251 cells.The mechanism of its radiosensitizing effect might be associated with the induction of G2/M arrest and inhibition of DNA-PKcs expression.BVAN08 seemed to be a romising radiosensitizing anticancer drug.     

辐射对宫颈癌细胞EGFR核转运的影响

目的 观察辐射对宫颈癌细胞表皮生长因子受体(EGFR)核转运的影响,并初步探讨EGFR核转运在宫颈癌细胞辐射抵抗当中的作用。方法 通过免疫印记检测法分析了EGFR在宫颈腺癌细胞HeLa和Siha以及宫颈鳞癌细胞Caski中的表达,以及X线照射4 Gy后Caski细胞核内EGFR和细胞浆内EGFR不同时间点的表达。并且分析了Cetuximab (C225)对辐射诱导的Caski细胞EGFR核表达影响及其生存分数的影响。结果 3株宫颈癌细胞中Caski细胞系EGFR呈高表达。受照的Caski细胞核内EGFR受体表达随时间增多,胞质内EGFR受体减少。C225预处理后,辐射诱导的EGFR核表达明显降低并且生存分数降低。结论 辐射能够诱导宫颈癌细胞EGFR核转运,并且EGFR核表达可能和放疗抵抗相关,核内EGFR在宫颈癌细胞放疗抵抗中的作用尚需进一步研究。     

照射后不同p53基因状态胃癌细胞的G1期阻滞和凋亡

目的　评价抑癌基因ｐ５３（ 野生型ｐ５３） 对照射后人胃癌细胞系（ＢＧＣ８２３） 的Ｇ１ 期阻滞和凋亡的控制作用。方法　３ 种具有不同ｐ５３ 状态的人胃癌细胞系,即转染人野生型ｐ５３ 基因的ＢＧＣ８２３ｗｔｐ５３ 细胞、转染人突变型ｐ５３ 基因的ＢＧＣ８２３ｍｕｔｐ５３ 细胞和转染无ｐ５３ 基因的空载质粒的ＢＧＣ８２３ｖｅｃｔ 细胞,用流式细胞计分析细胞,４Ｇｙ 照射后０、８ 和２４ 小时后各细胞时相分布和凋亡的反应。结果　照射４Ｇｙ 后８ 小时和２４ 小时后的ＢＧＣ８２３ｗｔｐ５３ 细胞出现强烈的Ｇ１ 期阻滞（分别占原细胞总数的６７－９％ 和６１－１ ％） ,而ＢＧＣ８２３ｍｕｔｐ５３ 、ＢＧＣ８２３ｖｅｃｔ 细胞几乎没有Ｇ１ 期阻滞;照射４Ｇｙ 后８ 小时和２４ 小时后的ＢＧＣ８２３ｗｔｐ５３ 细胞出现明显的预示凋亡的亚Ｇ１ 峰,凋亡细胞比例分别达１３－０ ％ 和１５－３ ％ ;而ＢＧＣ８２３ｍｕｔｐ５３ 和ＢＧＣ８２３ｖｅｃｔ 细胞几乎没有出现亚Ｇ１ 峰和凋亡细胞比例都为零。结论　野生型ｐ５３ 基因具有促进照射后肿瘤细胞的Ｇ１ 期阻滞和凋亡作用,而ｐ５３ 变异和缺失则减低了肿瘤细胞对放射线的反应。     

3.5Gy X射线对小鼠间充质干细胞的损伤及其机制的研究

目的 探讨中等剂量X射线对小鼠间充质干细胞的损伤及其机制.方法 小鼠间充质干细胞株C3H10T1/2行3.5 Gy X射线照射,于照射后3、6、12、24、48和72 h及照射后1周采用Hoechst33258染色和Annexin V-FITC/P1染色检测细胞凋亡.于照射后24、48和72 h及照射后1周采用SA-β...     

极低频磁场联合X线对人肝癌细胞株BEL-7402作用的机制研究

目的 研究极低频磁场联合X线对人肝癌细胞株BEL-7402的作用机制。方法 人肝癌细胞株BEL-7402经0、2、4、6、8、10 Gy X线照射后,用极低频磁场处理(100 Hz、0.7 mT、30 min、3 d)后,利用扫描电镜作形态观察,流式细胞仪、基因芯片研究细胞凋亡机制。结果 扫描电镜形态显示,极低频磁场联合X线组肝癌细胞株BEL-7402发生凋亡改变。流式细胞仪观察结果显示,当X线剂量是2、4、6、8、10 Gy, 极低频磁场联合X线凋亡率为10.0%、14.5%、4.3%、5.1%、7.1%,X线组凋亡率是0.1%、8.10%、0.1%、0.4%、 2.2% (P<0.05)。基因芯片结果显示,极低频磁场联合X线组共有1465条出现上调,1108条出现下调。其中比值≥2倍的基因共有336条,上调262条,下调74条。与凋亡相关基因共110条,上调基因71条,下调基因39条。涉及CDC25、CHK1、ATM、p38、PTEN、p53、G₁/S、Fas、G₂/M、Cell Cycle、Apoptosis、Caspase基因通路中的基因。极低频磁场加X线组差异表达结果中有13条同时出现在极低频磁场组。42条同时出现在X线组。结论 极低频磁场与X线通过不同的基因通路影响细胞凋亡。极低频磁场与X线对人肝癌细胞株BEL-7402凋亡有协同作用。     

Cancer: A cell cycle defect

Cell homeostasis is regulated by proliferation, growth arrest and apoptosis. Negative growth rate controls such as growth arrest and apoptosis are vital pathways governing aberrant development in the contribution to malignancy. Apoptosis provides the mechanism by which damaged or superfluous cells are effectively removed from the cell pool. As the cell progresses from one phase to another it is tightly regulated by a number of controls. Defects of these surveillance checkpoints may lead to an accumulation of DNA abnormalities and subsequent pathological disorders.This review considers an overview of the intricate and complex regulation of the cell cycle with potential therapeutic targets. The roles of key players are highlighted in an attempt to provide an insight into the ever increasing body of evidence of interplay and pathways of cell progression, arrest and death with deregulation leading to initiation of tumourigenesis.     

磁共振成像对宫颈癌的诊断与分期研究

目的 探讨MRI在宫颈癌诊断和分期中的临床价值：方法回顾性分析了35例宫颈癌患者的MRI分期，并与临床分期和手术结果对照。结果 MR能清晰显示宫颈癌的准确部位、实际大小、以及与周围的关系。对Ib-Ⅳ期宫颈癌MRI术前分期的准确度为78．6％（22／28）。对宫旁浸润区分的准确度为94．3％，特异度为958％，敏感度为90．9％。结论官颈癌的MR诊断与分期明显优于临床，能为手术方案的制定提供依据。     

Use of interstitial brachytherapy in pelvic recurrence of cervical carcinoma: Clinical response,survival, and toxicity

Purpose

The purpose of this study was to evaluate clinical response, postrecurrence survival, disease-free survival (DFS), and toxicity related to reirradiation in pelvic recurrence of cervical carcinoma.

直线加速器小剂量X线照射对BALB/c小鼠T细胞亚群影响的动态观察研究

目的：观察小剂量X线照射对BALB/c小鼠T细胞亚群的影响。方法：小鼠按实验分组经直线加速器2和3 Gy X线照射,流式细胞仪动态测定T细胞亚群变化。结果：照射后,小鼠外周血CD3＋、CD4＋、CD8＋细胞呈进行性降低,至第3、4周出现逐渐恢复迹象,4、5周后恢复正常。在同一时间,3 Gy较2 Gy照射所导致的细胞亚群降低的程度更为明显（P〈0.05）。结论：BALB/c小鼠经照射后T细胞亚群下降明显,4~5周后恢复正常。     

CD44+/CD24+宫颈癌细胞对X射线照射诱导凋亡的抗拒性

目的 探讨CD44+/CD24+宫颈癌细胞的放射抗拒性机制。方法 体外培养人宫颈鳞癌(Siha)细胞,6 MV X射线给予8、16、30 Gy照射,流式细胞仪分选出CD44+/CD24+细胞。采用克隆形成实验拟合细胞存活曲线,比较细胞的放射敏感性;Hochest 33258荧光染色和透射电镜观察细胞形态变化;流式细胞术(FCM)分析细胞凋亡率;凝胶电泳观察凋亡细胞的DNA条带;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测细胞凋亡相关基因mRNA的表达。结果 随着剂量的增加,CD44+/CD24+宫颈癌细胞比例逐渐增加;CD44+/CD24+细胞放射敏感性下降(t=93.99~400.45,P<0.05);CD44+/CD24+细胞中bcl-2、survivin、Oct4基因表达水平较亲代Siha细胞升高(t=221.35、941.65、82.27,P<0.01);Hochest 33258、透射电镜、DNA片段凝胶电泳及流式细胞定量研究显示, Siha细胞出现明显细胞凋亡改变,而Siha CD44+/CD24+细胞则未出现。结论 CD44+/CD24+宫颈癌细胞抵抗放疗的机制是抗拒射线诱导的细胞凋亡。     

电离辐射对EL-4细胞凋亡与坏死的影响

目的 研究不同剂量电离辐射对EL－4细胞凋亡和细胞坏死的影响。方法 采用PI和Hoechst 33342双染、流式细胞术检测。结果 实验结果表明：给予50－200mGy低剂量照射后6h,EL－4细胞凋亡和坏死较对照组没有升高,而给予1．0－8．0Gy大剂量X射线照射后6h,细胞凋亡较对照组有明显升高,4．0Gy以上剂量,细胞坏死显著升高。结论 一定剂量的电离辐射不仅可以诱导凋亡的产生,而且可直接导致细胞坏死,即细胞的死亡模式与受照剂量有关。