精子DNA损伤对常规体外受精-胚胎移植结局的影响

目的探讨精子DNA损伤对精液参数及常规体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)结局的影响。方法选择2012年10月至2014年11月在四川省妇幼保健院行IVF-ET的169对不孕夫妇的资料,用精子染色质扩散实验(sperm chromatin dispersion,SCD)测定男性患者精子DNA碎片率(DNA fragmentation index,DFI),同时行常规精液分析;按DFI值将男性患者分为A组(DFI30%)148例和B组(DFI≥30%)21例,比较两组精液参数、受精率、正常受精率、卵裂率、可利用胚胎率、优质胚胎率、临床妊娠率和着床率。结果 B组男性平均年龄高于A组(P0.05);B组精子浓度、前向运动精子百分比、正常形态率、受精率、正常受精率均显著低于A组(P0.05);卵裂率、可利用胚胎率、优质胚胎率、临床妊娠率、着床率两组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论精子DNA损伤随男性年龄增加而增加,与精子浓度、前向运动精子百分比、正常形态率有关,对IVF-ET中的受精情况有负面影响。     

男性精液参数和精子DNA碎片指数与年龄的相关性分析

探讨男性精液参数和精子DNA碎片指数与年龄之间的关系。采用横断面抽样调查设计, 选取2019年1月至2021年6月在郑州大学第三附属医院生殖男科就诊的3 203例男性患者作为研究对象, 年龄范围18～57岁、中位年龄为30岁, 通过分位数回归分析, 呈现年龄与男性精液参数及DNA碎片指数(DFI)的相关关系。将研究人群分为≤30岁组和>30岁组, 并分别比较两组的年龄与精液体积、精子浓度、精子总数、前向运动精子活力、总活力、正常形态精子百分率及DFI水平之间的相关性。结果显示, 不同年龄组间前向运动精子活力、总活力及DFI水平差异有统计学意义(χ2=-4.608、-4.604、-7.719, P均<0.05);精液体积、精子浓度、精子总数及正常形态精子百分率差异无统计学意义(χ2=-1.712、-1.203、-0.149、-0.175, P均>0.05)。>30岁年龄组中, 男性年龄与精液体积、前向运动精子活力及总活力呈极弱负相关(r=-0.137、-0.101、-0.056, P均<0.05), 男性年龄与精子浓度及精子DFI水平呈极弱正相关(r=0.0...     

精子DNA完整性与精液常规参数相关性分析

目的探讨精子DNA完整性与精液参数间的相关性,探讨精子DNA完整性检测在评估男性生育力中的应用价值。方法对206例男性不育患者行精液常规分析,并采用精子染色质扩散法(sperm chromatin dispersion,SCD)检测精子DNA完整性情况,计算精子DNA碎片指数(DNA fragmentation index,DFI),对DFI与各项精液常规参数(浓度、活力和形态等)的相关性进行分析。结果将DFI值按DFI≤10%、10%DFI≤30%和DFI30%分为3组,发现3组间禁欲时间、前向运动精子、不动精子、头/颈部缺陷精子和存活率等差异均有统计学意义(P0.05)。双变量相关分析表明精子DFI与不动精子、头/颈部缺陷精子、精子畸形指数(sperm deformity index,SDI)和畸形精子指数(teratozoospermia index,TZI)存在正相关,而与前向运动精子、正常形态精子、精子浓度和存活率存在负相关。结论精子DNA损伤可能会影响精子形态学异常和活力下降,在分析精液常规的同时,检测精子DNA完整性并将二者结合能够更好的评估患者的生育力。     

精子DNA碎片指数、精液常规参数与人工授精助孕结局的相关性

分析精子DNA碎片指数、精液常规参数与人工授精助孕结局的相关性。方法 选取鹤壁市某医院2019年5月—2021年4月诊疗的232例男性不育患者为调查对象，对调查对象进行精子DNA碎片指数及精液常规检查（精液体积、精子浓度、精子总数、前向运动精子数、活动精子数、正常形态率），统计调查对象人工授精助孕结局，分析调查对象人工授精助孕结局影响因素，分析调查对象精子DNA碎片指数与精液常规参数的相关性。结果 232例男性不育调查对象中，与其配偶人工授精助孕成功率为48.71%（113/232），失败率为51.29%（119/232）。不同人工授精助孕结局男性不育调查对象前向运动精子数、活动精子数、正常形态率、精子DNA碎片指数比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。Pearson相关分析结果显示：精子DNA碎片指数与前向运动精子数、活动精子数、正常形态率呈负相关关系（P＜0.05）。多因素Logistic多元回归分析结果显示：前向运动精子数、活动精子数、正常形态率是男性不育调查对象配偶人工授精助孕成功的保护因素，精子DNA碎片指数是男性不育调查对象配偶人工授精助孕失败的独立危险因素（P＜0.05）。结论 精子DNA碎片指数、精液常规参数与人工授精助孕结局关系密切，精子DNA碎片指数低、运动精子数及活动精子数多、精子正常形态率高的男性不育患者人工授精助孕成功率较高，此结果对临床人工授精助孕方案的选择具有指导作用。     

精浆生物大分子氧化损伤与精液参数的相关性研究

目的:探讨精浆中生物大分子氧化损伤与精液参数的相关性。方法:收集96名因不孕不育就诊的男性为研究对象,经过培训的调查员使用结构式调查表对就诊男性进行面对面询问调查。手淫法采集精液样本,用计算机辅助精子分析系统进行精液常规分析。采用酶联免疫吸附试验检测精浆中的羰基衍生物(PC)浓度及8-异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)浓度以反映蛋白质氧化损伤及脂质氧化损伤。根据精子浓度、前向运动精子率和畸形精子率是否正常,将研究对象分为正常组和异常组,研究精液常规指标与氧化损伤指标的关系。结果:异常组8-iso-PGF2α水平高于正常组(P0.05),PC水平差异两组间无统计学意义(P0.05)。前向运动精子率及畸形精子率正常组和异常组间8-iso-PGF2α和PC水平差异均无统计学意义。Pearson相关分析显示,8-iso-PGF2α与精子浓度负相关(r=-0.254,P=0.018),与其他精液参数无统计学相关性;PC水平与各精液参数无统计学相关性。多重线性回归分析显示,8-iso-PGF2α水平每增加1ng/ml,精子浓度平均减少7×10~4/ml。结论:精子浓度低可能与脂质氧化损伤有关。     

男性不育患者精浆锌含量与精液主要参数相关性研究

目的:探讨不育男性精浆的锌含量与精液质量的关系。方法:回顾性分析2011年8月～2012年1月在广西壮族自治区妇幼保健院生殖中心就诊的343例男性不育患者的相关资料,依据精浆锌含量分为正常A组(n=274例)和异常B组(n=69例),比较两组间精液参数的差异;同时根据精液黏稠度分为黏稠C组(n=54例)与非黏稠D组(n=289例),比较两组间精浆锌含量及其他精液参数的差异。结果:A组与B组患者年龄比较差异无统计学意义(P>0.05)。A组的精液量、每次射精精子总数、前向运动精子总数显著高于B组,而黏稠精液的比例明显低于B组,差异均有统计学意义(P<0.05)。其他精液各指标比较差异无统计学意义(P>0.05);C组与D组精液圆细胞浓度、精液量、精子浓度、精子总数比较差异无统计学意义(P>0.05);D组的前向运动精子百分率、前向运动精子总数、活动率、精浆锌明显高于C组,差异有统计学意义(P<0.05)。精浆锌含量与精液量、每次射精精子总数、前向运动精子总数显著正相关,与其他参数无显著相关性。结论:精浆锌含量直接影响精液量、精子总数、前向运动精子总数和精液黏稠度,精浆锌含量是男性生殖力的重要评估指标。     

全面二孩政策实施后准备生育二孩的男性精液质量分析

目的 对二孩政策全面实施后准备生育二孩的丈夫精液常规参数、精子畸形率进行分析。 方法 将纳入标准的研究对象分为意向生育二孩组(二孩组,n=232)、试管婴儿组(试管组,n=120)、正常生育组(正常组, n=82),精液标本充分液化后严格按照《WHO人类精液检查与处理实验手册(第五版)》进行精液常规分析, 采用改良巴氏染色法, 严格按照Kruger标准检测研究对象精子畸形率。 结果 ① 二孩组、试管组、正常组的年龄分别为(37.1±5.7)、(33.0±6.2)、(28.2±3.8)岁;精液量分别为(2.8±1.7)ml、(2.8±3.5)ml、(3.1±0.9)ml;精子浓度分别为(73.4±53.6)×10⁶/ml、(45.7±49.7)×10⁶/ml、(79.8±48.0)×10⁶/ml;精子总活力分别为(60.9±18.8)%、(30.7±13.0)%、(71.8±14.8)%;精子前向运动率分别为(51.2±17.9)%、(23.5±10.8)%、(61.9±15.9)%;精子畸形率分别为(87.8±5.8)%、(93.6±6.1)%、(86.5±6.7)%。② 三组间进行两两比较,二孩组的精子浓度、精子总活力、精子前向运动率和正常形态精子百分比方面明显优于试管组,差异有统计学意义(P＜0.01),精液量均值与试管组相同,但差异有统计学意义(P＜0.05);与正常组相比,二孩组在精液量、精子总活力、精子前向运动率方面低于正常组,差异有统计学意义(P＜0.01),但精子浓度、精子总畸形率方面差异无统计学意义(P＞0.05);正常组在精液量、精子浓度、精子总活力、前向运动率、精子形态方面明显优于试管组,差异有统计学意义(P＜0.01)。 结论 准备生育二孩的男性精液质量较正常生育者差异不明显,但要明显优于进行试管婴儿的男性。     

磁性活性细胞分选法对新鲜和冷冻精液优化效果的研究

目的 探讨比较磁性活性细胞分选法(MACS)对新鲜精液和冷冻精液的优选效果,为MASC在辅助生殖实验室的应用提供可靠的数据基础。方法 招募科研志愿者,收集健康男性精液,每份精液分为两份,每份1 mL,设置两个实验组,每组20例,一组做新鲜精液的MACS优化(新鲜精液组),一组制备为冷冻精液,解冻后进行冷冻精液的MACS优化(冷冻精液组)。比较分析各组优选前后精子浓度、前向运动精子活动率、膜完整性、正常形态率及DNA完整率等的差异。结果 MACS优化后,新鲜精液组前向运动精子活动率[优选前(56.29±12.94)%vs.优选后(65.21±14.55)%]和冷冻精液组[优选前(34.13±17.01)%vs.优选后(22.71±13.51)%]优选前后无显著性差异(P>0.05),且冷冻精液组优化后前向运动精子活动率较优化前略低;新鲜精液组正常形态率[优选前(16.78±3.57)%vs.优选后(25.78±1.95)%]优化前后有显著性差异(P<0.05),冷冻精液组正常形态率[优选前(7.90±3.80)%vs.优选后(13.72±4.58)%]略有改善,但无显著性差异...     

精子活性氧与精液参数的关系研究

目的 探讨精子活性氧(reactive oxygen species, ROS)与男性年龄、常规精液参数的相关性。方法 检测2020年7月至2020年9月在上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院就诊的405例男性精子ROS和精液参数,根据精子ROS的含量分为高ROS组和低ROS组,分析两组间精液参数差异及精子ROS与精液参数的相关性。结果 高ROS组与低ROS组相比,年龄差异无统计学意义(P>0.05);但高ROS组精子浓度、精子存活率和正常精子形态率均低于低ROS组(P<0.01)。Spearman相关性分析提示精子ROS与精子浓度、精子存活率和正常精子形态率存在负相关(P<0.05)。结论 精子ROS含量与男性年龄无明显相关性,与精子浓度、精子存活率和正常精子形态率存在相关关系,具有协同评估精液质量的价值。     

男性年龄对精子氧化应激水平、核DNA损伤的影响

目的:研究男性年龄对人精子氧化应激水平、核DNA损伤的影响。方法:选择因女方原因行体外受精-胚胎移植的男性精液标本95例,按男方年龄分为3组,年龄<35岁组40例、35～39岁组34例,≥40岁组21例,观察不同年龄对人精子氧化应激水平、核DNA损伤情况。结果:3组精液量、精子浓度、精子正常形态差异均无统计学意义(P>0.05),≥40岁组的a+b级精子的百分率低于<35岁组(P<0.05),精浆活性氧水平为(17.66±7.73)%,高于<35岁组和35～39岁组(均P<0.05),精子DNA损伤率为(21.12±11.01)%高于<35岁组(P<0.05)。经Pearson相关系数分析,精子氧化应激水平、核DNA损伤与男性年龄均呈正相关(r分别为0.43和0.27,P<0.05)。结论:男性年龄增加可能导致前向运动精子比率降低,精子氧化应激水平、核DNA损伤升高。精子氧化应激水平、核DNA损伤与男性年龄存在正相关。在生育过程中,男性年龄因素应引起临床关注。     

A comparative evaluation of migration sedimentation method for sperm preparation

The effectiveness of semen preparation using the migration-sedimentation (MS) method was evaluated, and compared to density gradient centrifuge and swim-up combination (DGC+SU). Sperm selection using MS is based on motility, thus, deleterious effects for which centrifugation has been blamed, are believed to be avoided. Normozoospermic male patients who had more than 10% forward progressive motile sperm in their ejaculate were included in the study. Spermatozoa selected by two different methods were investigated and compared according to sperm motility, concentration, morphology, vitality, DNA fragmentation, and presence of persistent histones. The concentration and motility of sperm in the MS group was improved when compared to the DGC+SU group, but the difference between groups was not significant. The proportion of sperm with normal morphology was found to be 12.19 ± 6.45% vs. 10.67 ± 5.44%, vitality rate was 74.09 ± 16.65% vs. 70.45 ± 16.78%, DNA fragmentation rate was 3.91 ± 3.96%, vs. 2.95 ± 3.33%, presence of persistent histone proportion was 10.59 ± 13.40%, vs. 8.86 ± 7.89% in DGC+SU and MS groups respectively, without significance. The simple technique avoids centrifuge-based damage.     

流产患者丈夫精子因素初步分析

目的:探讨流产的精子因素。方法:采用精液常规分析、精子形态分析、吖啶橙荧光染色方法对156例自然流产1～4次患者的丈夫及80例正常生育男性的精子进行分析。结果:对照组与流产组a级精子百分率、a+b级精子百分率、精子密度、精子活率、正常形态精子百分率、异常形态精子百分率、尾部异常精子百分率和精子DNA完整率方面差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:精子运动参数、形态参数、精子DNA损伤可能与流产有关。     

精液白细胞与形态正常精子百分率关系研究

目的:探讨精液白细胞对形态正常精子百分率的影响。方法:按WHO精液参数检测方法计数精液白细胞,采用精子形态检测系统下人工修正方法进行精子形态分析。结果:精子形态异常组精液白细胞>5个/HP百分率明显高于精子形态正常组精液白细胞>5个/HP百分率,两组间比较差异显著(P<0·05)。白细胞>5个/HP组形态正常精子百分率明显低于白细胞<5个/HP组形态正常精子百分率(P<0·05)。白细胞>5个/HP组小头精子、锥形头精子百分率明显高于白细胞<5个/HP组(P<0·05)。精液白细胞计数与形态正常精子百分率呈显著负相关;与大头精子、小头精子、锥形头精子呈显著正相关;与梨形头精子、其它畸形精子呈显著负相关。结论:精液白细胞可影响精子形态,小头精子数和锥形头精子数显著增加。     

The influence of semen quality on male pronucleus demethylation process during ICSI cycle

There is growing evidence that the spermatozoon’s epigenetic structure is of the utmost importance in the health of the future embryo. Following fertilization, sperm chromatin undergoes epigenetic reprogramming including DNA demethylation and remethylation, which resets gene expression. In some infertile patients, it is inevitable that sperm cells that are not within the range of normal human sperm parameters will be used for intracytoplasmic sperm injection. Understanding the relationship between the human sperm parameters and male pronucleus DNA demethylation seems necessary. We hypothesized that demethylation of the male pronucleus might be altered in zygotes conceived from a spermatozoa obtained from a sample exhibiting an abnormal semen analysis profile. To test the hypothesis, sperm cells from normal and abnormal human semen samples were injected into mouse oocytes. A group of cultured zygotes was fixed before the onset of DNA demethylation and the other group was fixed after DNA demethylation. Both groups were then labeled with a 5 methylcytosine antibody and the level of pronuclei methylation was detected as a function of fluorescent intensity. The level of demethylation was then determined as the difference between 5 methylcytosine fluorescent intensity before and after DNA demethylation. A negative correlation (p<0.05) was observed between sperm motility, morphology, percentage of head defects, protamine deficiency, and DNA demethylation level. However, no correlation was found between the demethylation level and sperm count. In conclusion, these observations suggest that demethylation is altered in the male pronucleus when low quality sperm samples are used.     

精子DNA碎片率对男性生育力评估的预测价值

目的：探讨精子DNA碎片率（DFI）对男性生育力评估方面的预测价值。方法：选择2016年1月-2018年7月于上海市第十人民医院生殖医学中心就诊的460例男性不育患者纳入观察组,同期107例正常生育男性纳入对照组。计算机辅助精液分析系统（CASA）检测精液常规,精子染色质结构分析检测精子DFI。将精液常规结果分为精液正常、少精子、弱精子和少弱精4类。比较观察组和对照组的精液常规构成比和精子DFI;比较不同年龄（＜30岁,30～39岁,≥40岁）患者精子DFI水平的变化趋势及不同水平精子DFI（≤15%,15%～30%,≥30%）患者的体外受精（IVF）/胞浆内单精子注射（ICSI）的生殖结局。结果：观察组中精液正常、少精子、弱精子、少弱精所占比列分别为22.17%、13.26%、52.62%和11.95%,对照组分别为60.96%、34.59%、1.75%和2.70%。与对照组相比,观察组精液正常比例下降,少精子、弱精子和少弱精比例增加,差异有统计学意义（P＜0.05）。与对照组相比,观察组精子DFI≤15%所占比例下降,DFI≥30%比例增加,差异有统计学意义（P＜0.05）。随着年龄增加,精子DFI≤15%患者所占比例下降,精子DFI（15%～30%）与精子DFI≥30%患者所占比例增加,3组间精子DFI的分布比例差异有统计学意义（P＜0.05）。精子DFI≥30%来源的IVF或ICSI胚胎,其早期流产率显著升高（31%和25%,均P＜0.05）,但受精率、卵裂率、生化妊娠率、临床妊娠率、着床率等指标差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论：不育男性的精子DNA碎片率更高,并且随年龄的增加而增加。DFI≥30%的精子受精的胚胎早期流产率较高,影响辅助生殖技术的妊娠结局,因此DFI对不育男性的生育力评估有实用参考价值。     

影响宫腔内人工授精临床妊娠结局的相关因素

目的:通过对宫腔内人工授精(IUI)临床资料的回顾性分析,探讨男性因素与IUI妊娠结局的关系。方法:回顾性分析2010年1～12月在河南省人民医院生殖医学中心进行的329个IUI治疗周期的临床资料。按照IUI结局分为妊娠组、非妊娠组,比较各组患者在男方年龄、女方年龄、不孕病史、精子参数等方面的差异。分别按照男方年龄、女方年龄、不孕年限、精子参数等指标进行分组,比较各组患者妊娠率的差异。结果:妊娠组和非妊娠组的男女双方年龄、不孕年限等指标差异均无统计学意义(P>0.05);女方年龄>35岁组临床妊娠率低于≤35岁组(P<0.05),处理后前向运动精子数<2×106条组临床妊娠率低于处理后前向运动精子数≥2×106条组(P<0.05),其余各组临床妊娠率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在输卵管通畅的情况下,处理后前向运动精子数≥2×106条男性不育者应尽可能采用IUI进行治疗,处理后前向运动精子数<2×106条或女方年龄偏大时可考虑IVF或ICSI。     

电脑辐射对精液活性氧含量及精子质量影响

目的探讨电脑辐射对男性精液活性氧含量及精子质量的影响。方法 56例成年男性按照电脑使用情况分成2组:未使用电脑者为对照组,每天使用电脑>2 h者为暴露组;按照WHO标准方法对研究对象的精液常规参数、精液活性氧含量、精子顶体酶活性及精子去透明带穿卵率进行检测,并对2组的各项参数进行比较分析。结果 2组比较,电脑暴露组的精液活性氧[分别为(24.2±17.1)(、12.2±8.1)]含量升高,精子顶体酶活性[分别为(78.9±19.8)(、110.3±23.3)]和精子去透明带穿卵率[分别为(24.2±17.1)(、47.4±19.6)]降低,2组差异有统计学意义(P<0.05);电脑暴露组与对照组的精液常规参数比较,pH、精液量、精子密度、精子活率、活力、活动率差异无统计学意义(P>0.05),但精子形态正常率差异有统计学意义(P<0.05)。结论电脑辐射可使精液活性氧含量增高,改变精子形态和受精功能。