肝素结合性表皮生长因子在生殖医学中的研究进展

肝素结合性表皮生长因子(heparin-binding epithelial growth factor,HB-EGF)是表皮生长因子家族中的一员,是一种跨膜蛋白膜固定型HB-EGF(pro HB-EGF)。proHB-EGF在特殊的金属蛋白酶作用下可水解产生可溶性HB-EGF(s HB-EGF)。proHB-EGF不仅是sHB-EGF的前体,而且本身也是生物活性分子。proHB-EGF与膜蛋白形成复合体,此复合体定位于细胞间连接区,暗示proHB-EGF可能是通过近分泌机制实现其在细胞间的信号传导功能。在一个试管模型中,proHB-EGF表达为生长抑制活性,而sHB-EGF表达为生长激活活性。这些特性指出pro HB-EGF和sHB-EGF是通过不同的通路发挥作用。proHB-EGF和sHB-EGF在人体内的功能尚不明确,但他们在许多生理过程中起重要作用,HB-EGF在生殖内分泌领域的研究受到极大关注,如黄体细胞的分裂与凋亡、卵泡发育、胚胎移植等。     

表皮生长因子受体与卵巢癌血管生成

肿瘤的生长、侵袭和转移依赖丰富的血供.新生血管不仅向肿瘤组织输送营养物质和排泄代谢废物,而且是肿瘤细胞转移的主要环节之一.卵巢癌恶性程度高、易转移、预后差,与癌组织血管丰富关系密切.表皮生长因子受体(EGFR)与肿瘤的发生、发展及恶性行为关系密切,其异常表达和活化,能增强血管生成分子的表达,其介导的信号转导在血管生成中发挥关键作用.血管内皮生长因子(VEGF)对卵巢癌血管内皮细胞的增殖迁移及腹水产生发挥重要作用,是促进卵巢癌血管生成的关键因子,而EGFR可以通过上调VEGF的表达影响肿瘤的血管生成.     

表皮生长因子受体与卵巢癌血管生成

肿瘤的生长、侵袭和转移依赖丰富的血供。新生血管不仅向肿瘤组织输送营养物质和排泄代谢废物,而且是肿瘤细胞转移的主要环节之一。卵巢癌恶性程度高、易转移、预后差,与癌组织血管丰富关系密切。表皮生长因子受体(EGFR)与肿瘤的发生、发展及恶性行为关系密切,其异常表达和活化,能增强血管生成分子的表达,其介导的信号转导在血管生成中发挥关键作用。血管内皮生长因子(VEGF)对卵巢癌血管内皮细胞的增殖迁移及腹水产生发挥重要作用,是促进卵巢癌血管生成的关键因子,而EGFR可以通过上调VEGF的表达影响肿瘤的血管生成。     

肝素结合性表皮生长因子在生殖医学的研究进展

肝素结合性表皮生长因子（Heparin-binding EGF-like growth factor ,HB-EGF）是表皮生长因子家族中的一员,由膜固定型（proHB-EGF）合成,proHB-EGF在特殊的金属蛋白酶作用下可水解产生sHB-EGF。proHB-EGF不仅是sHB-EGF的前体,而且本身是生物活性分子。proHB-EGF与膜蛋白形成复合体,此复合体定位于细胞间连接区,暗示proHB-EGF在细胞间的信号传导功能可能是通过近分泌的机制。在一个试管模型中,proHB-EGF表达为生长抑制活性,而sHB-EGF表达为生长激活活性。这些特性指出proHB-EGF和sHB-EGF是通过不同的通路起作用的。proHB-EGF和sHB-EGF在人体内的功能尚不明确,但他们在许多生理过程中起重要作用,HB-EGF在生殖内分泌领域的研究受到极大关注,如黄体细胞的分裂与凋亡、卵泡发育、胚胎移植等。     

正常妊娠及妊娠期高血压疾病的晚期胎盘组织中肝素结合性表皮生长因子免疫组化分析

目的:研究肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)在正常妊娠及妊娠期高血压疾病胎盘中的表达,并探讨HB-EGF在妊娠期高血压疾病病因中的作用。方法:采用免疫组化链霉菌抗生物素—过氧化物酶(SP)连接法检测正常妊娠期妇女及各种程度妊娠期高血压疾病患者妊娠晚期胎盘组织中HB-EGF的表达。结果:正常妊娠组与妊娠期高血压疾病组胎盘组织内均有HB-EGF表达,妊娠期高血压疾病组胎盘组织HB-EGF表达明显减弱(t=3.096,P=0.003,P<0.01),重度妊娠期高血压疾病组HB-EGF表达显著减弱(t=3.691,P=0.0006,P<0.01)。结论:胎盘产生的HB-EGF在正常妊娠及妊娠期高血压疾病妊娠晚期胎盘的表达有明显差异,妊娠期高血压疾病胎盘组织内HB-EGF表达水平显著低于正常妊娠,HB-EGF在妊娠期高血压疾病的发病及病理生理过程中有重要的作用,胎盘组织内HB-EGF的减少有可能是发生妊娠期高血压疾病的原因之一。     

表皮生长因子增高Hela细胞对顺铂敏感性作用的研究

0.1、1、10μg/L表皮生长因子(EGF)24h预处理及同时处理均增高Hela细胞对顺铂敏感性尤以EGF预处理更明显;10μg/LEGF24h预处理可增高Hela细胞对铂(Pt)的摄入速率.提示Pt摄入速率增高可能是细胞对顺铂敏感性增高的原因.     

外周血ERCC1表达及基因多态性与局部晚期直肠癌新辅助放化疗疗效的关系

目的 观察外周血切除修复交叉互补基因（ERCC1）表达水平及基因多态性对局部晚期直肠癌患者术前新辅助放化疗/化疗疗效的影响。方法 选取2017年3月～2020年5月在河北北方学院附属第一医院94例术前接受CapeOX方案化疗或新辅助放化疗的中低位直肠癌患者。治疗前留取患者外周血样本,实时荧光PCR检测其mRNA表达水平,PCR-LDR进行基因分型,分析ERCC1mRNA表达量及基因多态性与疗效的关系。结果 肿瘤组织中ERCC1 mRNA相对表达量高于血液中的表达量,肿瘤组织与外周血中ERCC1的表达呈正相关（r=0.619,P=0.004）。肿瘤组织与外周血ERCC1基因型完全一致。以外周血表达量的中位数0.25将患者分为高表达组和低表达组,采用新辅助放化疗的ERCC1低表达组有效率高于高表达组,但组间差异无统计学意义（P> 0.05）,采用新辅助化疗的ERCC1低表达组有效率高于高表达组,组间差异有统计学意义（P <0.05）。新辅助放化疗、新辅助化疗不同基因型疗效差异无统计学意义（P> 0.05）。结论 晚期直肠癌外周血ERCC1mRNA高表达患者CapeOX新辅...     

C-erbB-2与HB-EGF在卵巢癌组织中的表达及临床意义

目的分析、研究在卵巢癌组织中促癌基因C-erb B-2与肝素结合样表皮生长因子(HB-EGF)的表达情况及临床意义。方法以正定县人民医院2014年3月-2016年12月期间行卵巢肿瘤手术的75例患者为研究对象,将其中上皮性卵巢癌患者设为卵巢癌组,交界性卵巢瘤患者设为交界组,良性卵巢瘤患者设为良性组,每组各25例,取所有对象的卵巢组织进行检测,对比分析组织中C-erb B-2、HB-EGF的表达情况。结果卵巢癌组C-erb B-2、HB-EGF阳性细胞率及平均荧光强度较之良性组及交界组均显著升高,组间比较差异有统计学意义(P0.05),且C-erb B-2、HB-EGF在卵巢癌Ⅲ~Ⅳ期组织中表达高于Ⅰ~Ⅱ期(P0.05)。结论 C-erb B-2、HB-EGF参与卵巢癌的发生发展当中,且与病情严重程度呈正相关关系,二者可以作为卵巢良恶性肿瘤鉴别诊断的辅助指标,二者联合检测可以更准确反映卵巢癌病情。     

依达拉奉对卵巢癌顺铂耐药细胞系A2780CP耐药性的影响

目的研究依达拉奉对卵巢癌耐药细胞株A2780CP增殖、凋亡及其对顺铂敏感性的影响。方法选取顺铂和依达拉奉的血药峰值浓度作为联合用药的基础,将实验分为顺铂处理A2780细胞组、顺铂处理A2780CP细胞组、依达拉奉处理A2780CP细胞组、顺铂及依达拉奉联合处理A2780CP细胞组,对照组。培养一定时间后用MTT法检测细胞相对活性,流式细胞仪分析细胞的凋亡状况。结果顺铂及依达拉奉联合处理的A2780cP细胞生长明显慢于单独2780CP细胞,顺铂及依达拉奉联合处理的A2780CP细胞对顺铂的敏感性增加（P=0．016〈0．05）;AnnexinV—FITC／P1分析显示,药物作用24小时后,顺铂及依达拉奉联合处理A2780CP细胞能提高细胞凋亡率（P=0．037〈0．05）。结论依达拉奉能显著提高A2780CP细胞对顺铂的敏感性,对顺铂耐药性有一定逆转作用。     

sHB-EGF在上皮性卵巢癌患者腹水中水平测定及临床相关性研究

目的:检测sHB-EGF在上皮性卵巢癌患者腹水中水平,以探讨其临床意义。方法:采用酶联免疫吸附实验分别测定10例上皮性卵巢良性肿瘤患者,10例慢性盆腔炎患者,46例上皮性卵巢癌患者腹水sHB-EGF水平。结果:上皮性卵巢癌腹水中sHB-EGF水平(5.1410±4.0984)ng/ml显著高于上皮性卵巢良性肿瘤组(0.5888±0.0992)ng/ml(P<0.05),上皮性卵巢良性肿瘤组与慢性盆腔炎组(2.5139±4.1963)ng/ml,无显著性差异(P>0.05)。上皮性卵巢癌患者中低分化组(3.5848±3.1170)ng/ml,中分化组(6.0122±3.9187)ng/ml,高分化组(5.0681±6.7513)ng/ml腹水sHB-EGF浓度差异无显著性意义(P>0.05)。腹水中sHB-EGF浓度与临床分期及病理分型无显著性关联(P>0.05)。结论:腹水sHB-EGF浓度可作为卵巢良恶性肿瘤鉴别指标之一。     

EGFR酪氨酸激酶域基因突变和非小细胞肺癌的靶向治疗

EGFR靶向抑制剂，是目前NSCLC靶向治疗的研究热点之一。临床研究表明，患者对EGFR靶向抑制剂的疗效存在明显的差异。本文就EGFR酪氨酸激酶域基因突变与NSCLC靶向治疗的相关性进行了回顾，探讨预示其疗效的标志物，有助于EGFR抑制剂在NSCLC治疗中的最优化使用。     

多囊卵巢综合征患者血清瘦素水平和胰岛素抵抗之间的关系

目的:研究多囊卵巢综合征(PCOS)患者与正常人群瘦素水平的差异,探讨瘦素与肥胖和胰岛素抵抗之间的关系。方法:以45例PCOS患者作为观察组,20例正常人群作为对照组,采用ELISA方法测量两组的瘦素水平,用内环境稳定模型评估胰岛素抵抗程度。结果:观察组瘦素水平、空腹血糖、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数均高于对照组(P<0.05),瘦素水平与胰岛素抵抗指数呈正相关(P<0.05)。结论:PCOS多囊卵巢综合征患者血清瘦素水平显著升高,且与胰岛素抵抗有明显相关性。     

抗EGFR/VEGF双特异性单链抗体的构建及其抗卵巢癌SKOV-3的研究

目的 将表皮生长因子受体(EGFR)和血管内皮生长因子(VEGF)同时进行靶向治疗,可协同抑制作用,增强抗肿瘤效果.方法 使用重叠聚合酶链式反应(PCR)手段,西妥昔单抗的可变区和贝伐珠单抗的可变区通过G4S柔性肽连接在一起,获得同时靶向EGFR和VEGF的双特异性单链抗体(scDb);通过酶联免疫吸附测定(ELISA)检测scDb与EGFR和VEGF的结合活性,并计算亲和力常数;流式细胞术检测scDb对受体过表达的卵巢癌细胞系SKOV-3的结合能力;MTT法检测scDb对卵巢癌细胞系SKOV-3的增殖抑制;Western Blot研究与单独给药相比 scDb对 SKOV-3相关信号通路的影响;建立卵巢癌SKOV-3细胞荷瘤小鼠动物模型,检测scDb的体内抗肿瘤活性.结果 通过重叠PCR手段和毕赤酵母X-33表达,成功获得scDb,经Western blot鉴定验证了scDb的分子量为55kD,证明表达及装配正确.ELISA检测scDb与EGFR和VEGF均有结合活性,通过EC50计算,得到scDb与EGFR的亲和力常数为1.27nM,与VEGF的亲和力常数为0.75nM.流式细胞术检测scDb与SKOV-3的结合率为72.00%.MTT实验,亲本抗体组与双特异性单链抗体组对SKOV-3均有抑制作用.通过Western blot实验表明,scDb能同时阻断EGFR和激酶结构域受体(KDR)的磷酸化,最终导致丝氨酸/苏氨酸激酶等信号通路被强烈抑制.通过SKOV-3细胞裸鼠移植瘤模型的体内抗肿瘤实验,scDb组在体内仍能发挥较强的抗肿瘤效果,高剂量组肿瘤抑制率可以达到(74.53±9.63)%.结论 该文成功构建并表达了scDb.scDb具有良好的体内外抗肿瘤活性,为抗肿瘤治疗提供了新的思路,有潜在的临床应用前景.     

乳腺癌耐受蛋白的表达与5-氟尿嘧啶耐受的相关性研究

目的 筛选乳腺癌耐受蛋白(BCRP)介导的耐受药物,探讨BCRP的表达与耐受药物的相关性.方法 采用已成功建立的BCRP表达细胞模型,经细胞存活实验(MTr法)筛选出BCRP介导的耐受药物,并利用高效液相色谱法(HPLC)测定细胞内残留耐受药物的相对含量;运用荧光定量逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学方法(IHC)检测140例临床乳腺癌组织标本中BCRP的表达,同时利用MrIT法研究临床组织标本对耐受药物的化学敏感性;采用单项方差统计学检验方法分析临床乳腺癌组织中BCRP的表达与药物耐受的相关性.结果 MTT实验结果显示,细胞对5.氟尿嘧啶(5-Fu)的耐药指数随着BCRP表达的升高而增加,达到10.58倍(P＜0.05,n=3).HPLC实验证实BCRP的表达与细胞内残留的5-Fu呈显著的负相关性(r=-0.897,P＜0.05).140例临床乳腺癌组织标本中,BCRP阳性表达率为33%(47/140).BCRP阳性表达的乳腺癌组织对5-Fu的耐药指数是正常癌旁组织的7-12倍,BCRP的表达与5-Fu的耐受具有正相关性(R2=0.8124,P＜0.01).结论 BCRP的表达与5-Fu的药物耐受具有显著的相关性,研究结果有助于BCRP阳性;表达的乳腺癌病人化疗方案的制订和优化.     

肺炎克雷伯菌生物膜与细菌耐药性的关系分析

目的 分析首都医科大学附属北京世纪坛医院临床分离的肺炎克雷伯菌产生生物膜与耐药间的关系,为临床对该类菌的治疗提供依据.方法 收集北京世纪坛医院2011年3-5月临床分离的非重复肺炎克雷伯菌株,采用VITEK-2 compact鉴定系统进行菌株鉴定及药敏测定,半定量结晶紫法进行生物膜形成能力测定,卡方检验进行统计分析.结果 在140株菌中共有52株为生物膜阳性,占全部菌株的37.1％;生物膜阳性株对阿米卡星、庆大霉素、头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南的敏感率分别为44.2％、15.4％、28.8％、30.8％、11.5％;生物膜阴性菌对阿米卡星、庆大霉素、头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南的敏感率分别为80.6％、26.1％、35.2％、37.5％、35.2％;生物膜阳性菌与阴性菌对上述药物的敏感率差异有统计学意义.结论 肺炎克雷伯菌生物膜阳性菌与阴性菌对多种药物的敏感率差异有统计学意义.     

凋亡相关基因PDCD5与三氧化二砷诱导卵巢癌细胞凋亡的相关性研究

目的探讨凋亡相关基因人程序化死亡分子5（PDCD5）在三氧化二砷（As2O3）诱导卵巢癌细胞凋亡过程中发挥的作用。方法流式细胞仪检测，并在荧光显微镜下观察PDCD5在As2O3诱导卵巢癌细胞凋亡前后的表达状况。结果PDCD5在卵巢癌细胞系中表达，经As2O3孵育后PDCD5的表达强度增加，其增加量与As2O3的剂量有关。结论凋亡促进剂PDCD5在As2O3诱导的卵巢癌细胞凋亡过程中发挥重要作用。     

沉默VEGF基因对腺样囊性癌细胞侵袭的影响

目的：利用RNAi技术沉默腺样囊性癌细胞株ACC-2中VEGF的表达,探讨其对肿瘤细胞侵袭能力的影响。方法：利用RNAi技术沉默VEGF表达,用Transwell侵袭实验检测细胞体外侵袭能力的变化。结果：与对照组比较,VEGF的siRNA能有效地抑制实验组ACC-2细胞的侵袭能力。结论：沉默VEGF减弱腺样囊性癌的侵袭能力。     

表皮生长因子与胎儿生长受限胎盘组织Bcl-2,Bax基因表达相关性研究

目的探讨胎儿生长受限（fetal growth restriction，FGR）病例母血及脐血中表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）与胎盘组织中凋亡相关基因Bcl-2，Bax表达的关系。方法放射免疫分析法（RIA）测定FGR组20例母血、脐血EGF浓度，以同期足月正常体重儿25例为对照组。免疫组化SP法检测胎盘组织中Bcl-2，Bax基因表达。图像分析系统进行单个绒毛阳性细胞率、阳性细胞面积、总面积测定，量化Bcl-2，Bax基因表达。结果FGR组母血、脐血EGF浓度与对照组比较，明显减少（P〈0.01），FGR组胎盘组织中Bcl-2阳性细胞率及单个绒毛阳性细胞面积占总面积百分比较对照组明显减少（P〈0．01），而Bax基因明显增加（P〈0.01）。FGR组母血、脐血EGF与胎盘组织中Bcl-2阳性细胞率、面积百分比呈正相关，与Bax表达无相关性。结论母血、脐血EGF减少可能是引起FGR的原因之一。FGR组胎盘组织中Bcl-2表达下降，Bax表达增高。EGF可以通过上调Bcl-2的表达，抑制胎盘细胞凋亡，促进胎儿生长发育。     

食管癌患者放疗后真菌感染危险因素分析

目的 探讨食管癌患者放疗后真菌感染危险因素与耐药性,以降低感染的发生.方法 对40例食管癌放疗后真菌感染患者临床资料进行调查分析.结果 共分离出病原菌40株,其中白色假丝酵母菌最高,占72.50％,其余依次为毛孢子菌、热带假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌、克柔假丝酵母菌,分别占12.5％、5.0％、5.0％、5.0％;对6种抗真菌药物均有不同程度的耐药性,其中伏立康唑耐药率高达55.00％.结论 根据食管癌患者实际情况采取综合防治措施,合理应用抗菌药物,严密监测化疗、放疗时患者的病情变化,加强营养及支持治疗,提高患者的自身抵抗力,可提高预防感染和抗感染的效果.     

MDR1及MDR3基因与卵巢癌细胞顺铂耐药的关系

目的:探讨MDR1(Multidrug resistance gene-1)及MDR3(Multidrug resistance gene-3)基因与卵巢癌细胞顺铂耐药的关系。方法:两种质粒一起瞬时转染A2780/DDP细胞,空载体组及未转染组作为对照。Annexin V-FITC/PI双标流式细胞术、MTT法、RT-PCR、western blot分别检测A2780/DDP细胞早晚期凋亡、细胞增殖活性、MDR1和MDR3 mRNA表达及caspase-3蛋白水平。结果:两种质粒(pSuppressorNeo MDR1 siRNA,MDR3 siRNA)均未能逆转A2780/DDP细胞顺铂耐药:①流式显示转染MDR1 siRNA组、MDR3 siRNA组和pSuppressorNeo空载体组后相比较未转染A2780/DDP细胞凋亡率无显著改变(P>0.05);②在一定药物浓度范围内,转染MDR1和MDR3小分子干扰RNA均未能增强顺铂对A2780/DDP细胞的细胞毒作用;③与空载体组和未转染细胞相比,A2780/DDP细胞的MDR3及MDR1 mRNA表达均低下(P>0.05);④Caspase-3蛋白表达未见增加。结论:顺铂所致的卵巢癌细胞多药耐药与MDR1及MDR3基因过度表达均无关,卵巢癌细胞顺铂耐药为非P-gp