沉默B7-H3基因表达对人肝癌细胞侵袭能力的影响

目的 研究靶向沉默B7-H3基因表达对HepG2细胞侵袭能力的影响及可能机制。方法 设计针对B7-H3基因的shRNA沉默质粒,转染HepG2细胞,下调B7-H3的表达。划痕修复实验检测转染前后HepG2细胞移行能力的变化,Transwell实验检测基因沉默对细胞侵袭能力的影响,MST-1法和ELISA凋亡试剂盒分别检测细胞增殖和凋亡水平变化。通过Western blot实验和明胶酶谱实验检测侵袭相关分子MMP-2、MMP-9的表达和活性变化。结果 成功构建B7-H3 shRNA沉默质粒并转染HepG2细胞。与对照质粒转染组和未转染组比较,沉默B7-H3基因表达后,B7-H3 shRNA转染组HepG2细胞的移行（24 h: P=0.001; 48 h: P<0.001; 72 h: P<0.001）和侵袭（P<0.001）能力受到显著抑制,细胞的增殖和凋亡水平没有明显变化（P>0.05）。MMP-2、MMP-9的蛋白表达（MMP-2: P<0.001; MMP-9: P=0.007）和活性（MMP-2: P<0.001; MMP-9: P<0.001）均显著下降。结论 通过B7-H3 shRNA沉默质粒靶向沉默B7-H3的基因表达能抑制HepG2细胞的侵袭能力,其机制可能与抑制MMP-2、MMP-9的表达和活性有关。     

Pin1对内质网应激下肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨内质网应激下HepG2细胞中Pin1蛋白的表达情况及其对细胞增殖和凋亡的影响。方法 衣霉素（TM）分别作用于正常肝细胞THLE3和肝癌细胞HepG2（THLE3细胞TM组和HepG2细胞TM组）、全反式维甲酸（ATRA）单独作用于HepG2细胞（ATRA组）、TM和ATRA共同作用于HepG2细胞（TM+ATRA组）及DMSO处理的对照组细胞。48 h后,Western blot检测Bip和Pin1蛋白的表达水平,CCK-8试剂检测细胞的增殖情况,流式细胞术分析细胞的凋亡情况。结果 TM处理的THLE3和HepG2细胞中Bip蛋白表达增加,说明TM有效诱导细胞发生内质网应激;与DMSO组相比,THLE3细胞TM组中Pin1的蛋白水平随着TM浓度的升高而降低（P<0.001）。HepG2细胞TM+ATRA组中Pin1蛋白水平随着TM浓度的升高而降低（P<0.01）。HepG2细胞TM组细胞增殖抑制率仅（29.33±4.73）%,明显低于THLE3细胞TM组（（60.33±2.08）%）（P<0.001）,但HepG2细胞TM+ATRA组细胞增殖抑制率显著提高至（60.33±6.03）%。与DMSO组相比,THLE3细胞TM组凋亡率显著升高（（22.25±0.78）% vs.（3.57±0.31）%,P<0.01）。与DMSO组（5.10±1.00）%相比,HepG2细胞ATRA组凋亡率只有（10.03±0.49）%（P<0.05）,但TM+ATRA组凋亡率显著增加至（23.70±0.75）%（P<0.01）。结论 HepG2细胞通过维持Pin1蛋白水平抵制ERS诱导的细胞凋亡,降低Pin1蛋白水平能够抑制细胞增殖、促进细胞凋亡。     

GSTP1基因对人肝癌细胞系HepG2增殖和侵袭能力的影响

目的 探讨过表达/沉默GSTP1基因对人肝癌细胞系HepG2增殖及侵袭能力的影响。 方法 采用腺病毒载体转染人肝癌细胞系HepG2,获得过表达/沉默GSTP1基因的HepG2细胞。实时荧光定量PCR（qPCR）法检测细胞中GSTP1 mRNA表达水平;CCK-8法和Transwell小室法分别检测细胞的细胞活力和侵袭能力;免疫印迹法（Western blot）检测细胞中Akt、mTOR、p-Akt和p-mTOR的蛋白表达。 结果 经腺病毒载体转染后,成功获得过表达/沉默GSTP1基因的HepG2细胞;过表达GSTP1 基因后,HepG2细胞的细胞活力和侵袭能力显著降低（P<0.05）,而沉默GSTP1基因后,HepG2细胞的细胞活力和侵袭能力则显著增高（P<0.05）;过表达GSTP1基因后,p-Akt和p-mTOR的蛋白表达水平显著降低（P<0.05）,而沉默GSTP1基因的结果则相反。 结论 过表达GSTP1基因可抑制HepG2细胞的增殖和侵袭能力,沉默GSTP1基因则促进HepG2细胞的增殖和侵袭能力,其作用机制可能与Akt/mTOR信号通路有关。     

奥沙利铂对肝癌HepG2细胞生长及侵袭转移的抑制作用

目的 观察奥沙利铂（L-OHP）对人肝癌HepG2细胞生长、凋亡、黏附及侵袭行为的影响。方法 分别采用MTT法及AnnexinV / PI 双染色流式细胞术检测不同浓度L-OHP对肝癌HepG2细胞生长及凋亡的影响;分别以MTT法及Transwell实验检测L-OHP对HepG2细胞黏附、迁移及侵袭力的影响。结果 在（10.0～40.0）mg/L浓度的L-OHP作用下,HepG2细胞增殖明显降低,抑制作用呈浓度和时间依赖性（P<0.01）;5.0 mg/L以下浓度无明显的细胞毒作用;（2.5～10.0）mg/L的L OHP可使凋亡细胞明显增多(P<0.05);无毒剂量（2.5 mg/L）的L-OHP作用时,HepG2细胞的黏附力明显下降（P<0.05）,30、60、90 和120 min的黏附抑制率分别为29.2%、27.3%、26.6% 和24.8%;HepG2细胞的迁移及侵袭细胞数明显减少（P<0.01）,迁移、侵袭抑制率分别为53.68% 和54.38%。结论 L-OHP既可通过抑制肝癌细胞增殖、诱导凋亡,又可通过抑制肝癌细胞黏附、迁移、侵袭能力发挥抗转移的作用。     

shRNA沉默Annxin A2基因对放射抗拒鼻咽癌细胞迁移和侵袭的影响

目的 探讨shRNA沉默Annxin A2基因对放射抗拒鼻咽癌细胞迁移和侵袭的影响。方法 采用FuGENE HD将Annexin A2 shRNA转染放射抗拒的鼻咽癌CNE2（R743）细胞,qRT-PCR验证转染细胞中Annxin A2基因的表达,细胞划痕实验和Transwell实验观察下调Annxin A2基因表达及联合照射对鼻咽癌细胞迁移和侵袭的影响,Western blot检测细胞中基质金属蛋白酶2（MMP2）蛋白的表达。结果 转染组细胞Annexin A2 基因的mRNA相对表达量为（0.25±0.17）,较对照组的（1±0.00）和转染对照组的（0.96±0.06）明显下降,差异有统计学意义（P<0.05）。细胞划痕实验显示,下调Annxin A2基因表达可抑制照射诱导的CNE2（R743）细胞的迁移能力（P<0.05）。Transwell实验结果显示,下调Annxin A2基因表达可抑制照射诱导的CNE2（R743）细胞的迁移和侵袭能力（P<0.05）。Western blot结果表明,下调Annxin A2基因表达能抑制照射诱导的MMP2蛋白的表达上调（P<0.05）。结论 下调Annxin A2基因表达能抑制照射诱导放射抗拒的鼻咽癌CNE2（R743）细胞的迁移和侵袭能力,可能与MMP2蛋白表达下调相关。     

FEN1过表达对肝细胞癌细胞生物学行为及患者预后的作用

目的 探讨FEN1在肝细胞癌中的表达及其在肝细胞癌发生发展中的作用。方法 应用RTqPCR及免疫组织化学方法检测FEN1基因在52例肝细胞癌组织及相应癌旁组织中的表达。FEN1基因特异性siRNA转染肝癌细胞株HepG2并用Western blot检测转染效率。用MTT及流式细胞技术检测干扰FEN1后HepG2增殖及凋亡情况。Transwell实验检测HepG2迁移、侵袭能力改变。结果 RT-qPCR结果显示与癌旁正常组织相比较,FEN1高表达于肝细胞癌组织（P<0.01）。免疫组织化学与临床资料统计分析进一步证实FEN1的高表达与肿瘤分化程度（P=0.017）、肝内转移（P=0.046）、临床TNM分期（P=0.020）相关,而与患者性别、年龄、术前AFP值及肿瘤直径无相关性（P>0.05）。通过siRNA干扰肝癌细胞株HepG2中FEN1基因表达,MTT及流式细胞术检测表明干扰FEN1表达后肝癌细胞株HepG2增殖受到明显抑制（P<0.05）,凋亡率明显增加（P<0.05）。Transwell实验发现干扰FEN1后可明显抑制HepG2迁移、侵袭能力（P<0.05）。结论 FEN1在肝细胞癌组织中高表达,高FEN1表达提示肿瘤分化程度低,易转移及预后差,干扰FEN1后抑制肝癌细胞增殖,诱导其凋亡,并降低肝癌细胞体外迁移和侵袭能力。FEN1基因可成为肝细胞癌诊断及治疗的一个新生物靶点。     

Tspan8基因敲除联合安罗替尼对结肠癌SW480细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响

目的 探讨Tspan8基因敲除联合安罗替尼对结肠癌SW480细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法 采用CRISPR/Cas9技术构建质粒并敲除SW480细胞的Tspan8基因,Western blot法检测敲除效果。采用MTT法计算安罗替尼的半数抑制浓度（IC₅₀）。实验分为对照组、安罗替尼组、Tspan8敲除组和联合组。采用细胞增殖实验、克隆形成实验、划痕实验、Transwell小室法和流式细胞术检测各组细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡情况;Western blot法检测安罗替尼对SW480细胞中Tspan8表达水平的影响。结果 在Tspan8敲除组中,SW480-KO-Ⅲ细胞的敲除效率最高,用于后续实验。不同浓度的安罗替尼在不同作用时间均能抑制SW480细胞的增殖（P<0.01）,且呈浓度依赖性和时间依赖性（P<0.01）,根据IC50选择14 μmol/L为后续实验浓度。与对照组相比,安罗替尼组、Tspan8敲除组和联合组的细胞增殖、迁移及侵袭能力显著降低,细胞凋亡水平明显提高（P<0.05）,且联合组的上述变化较安罗替尼组或Tspan8敲除组更为显著（P<0.05）。与对照组相比,安罗替尼组SW480细胞的Tspan8表达水平明显下降（P<0.01）。结论 Tspan8基因敲除联合安罗替尼能协同抑制SW480细胞增殖、迁移、侵袭,并促进其凋亡。     

FOXK1对肝癌高转移细胞系Huh7侵袭和迁移能力的影响

目的 探讨叉头框转录因子1(FOXK1)对肝癌高转移细胞Huh7侵袭和迁移能力的影响。方法 采用实时定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测40例肝癌组织及其癌旁正常组织FOXK1 mRNA的表达,qRT-PCR和Western blot检测正常肝细胞HL7702、肝癌细胞BEL7402和肝癌高转移细胞Huh7中FOXK1 mRNA和蛋白的表达。小RNA干扰技术下调FOXK1表达后,qRT-PCR和Western blot检测肝癌高转移细胞Huh7 FOXK1 mRNA和蛋白的表达,Transwell实验检测其侵袭和迁移能力。 结果 qRT-PCR检测结果显示,肝癌组织中FOXK1 mRNA的表达高于癌旁正常组织(2.87±0.21 vs 1.35±0.11,P=0.004);qRT-PCR和Western blot检测结果显示,相比正常肝细胞HL7702,肝癌细胞BEL7402和肝癌高转移细胞Huh7中FOXK1 mRNA和蛋白表达升高(P<0.001)。下调FOXK1表达后,肝癌高转移细胞Huh7中FOXK1 mRNA和蛋白表达显著下调(P<0.01),侵袭和迁移细胞数目明显减少(P<0.01)。结论 下调FOXK1表达能抑制肝癌高转移细胞Huh7侵袭和迁移能力。     

CircHIPK3通过调控p53-Akt-Mdm2通路影响食管鳞癌的恶性表型

目的 研究食管鳞癌组织中CircHIPK3的表达差异,以寻找食管鳞癌诊断和靶向治疗的新思路。方法 qRT-PCR、CCK-8法、Transwell法和流式细胞术检测CircHIPK3在食管鳞癌和癌旁组织中的表达差异以及其对细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响;生物信息数据分析确定CircHIPK3的可能作用通路,Western blot对其通路相关功能蛋白加以验证。结果 11例患者的癌组织和对应的7例癌旁组织中CircHIPK3表达异常（P=0.027）;CircHIPK3高表达的细胞增殖（P<0.001）、迁移（P<0.001）、侵袭（P<0.001）能力增强;CircHIPK3过表达的EC9706细胞凋亡受到抑制,抑癌基因p53被明显抑制,而Akt-Mdm2信号通路处于激活状态,p53-Akt-Mdm2通路蛋白的表达量随之增加,最终导致癌细胞增殖、迁移、侵袭以及相关癌症蛋白的表达增加。结论 CircHIPK3可能通过调节p53-Akt-Mdm2信号通路促进人食管鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭,并抑制细胞凋亡,其可能是食管鳞癌诊断和治疗的潜在靶点。     

布洛芬通过PI3K/Akt/mTOR信号通路调控肝癌QGY-7703细胞迁移和侵袭的机制

目的 探讨布洛芬通过PI3K/Akt/mTOR信号通路对肝癌QGY-7703细胞迁移和侵袭的调控机制。方法 取对数生长期人肝癌细胞QGY-7703,采用随机法分为两组,对照组（C组）：加入等容量的RPMI l640培养液;实验组（B组）：按照不同布洛芬浓度分为三个亚组：B1组250 μmol/L,B2组500 μmol/L、B3组1 000 μmol/L。各组分别作用24、48和72 h后,利用Transwell小室检测各组细胞的侵袭和迁移能力。各组分别作用48 h后,采用Real-time PCR检测各组细胞中PI3K、PTEN和MMP-9基因表达的变化;用Western blot检测各组细胞中PTEN、Akt、磷酸化Akt（p-Akt）、mTOR、磷酸化mTOR（p-mTOR）和MMP-9蛋白表达情况。结果 与C组比较,B1、B2、B3三组细胞迁移和侵袭能力均降低,具有浓度和时间的依赖性,差异有统计学意义（P<0.01）;与C组比较,B1、B2、B3三组细胞PTEN mRNA和PTEN蛋白表达明显升高,且随着布洛芬作用浓度的增加而升高,具有浓度依赖性,差异有统计学意义（P<0.05）;与C组比较,B1、B2、B3三组细胞PI3K mRNA、Akt和mTOR蛋白的表达量差异均无统计学意义（P>0.05）;与C组比较,B1、B2、B3三组细胞MMP-9 mRNA和蛋白的表达以及p-Akt、p-mTOR蛋白的表达均显著下降,且随着布洛芬作用浓度的增加而降低,具有良好的浓度依赖性,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 布洛芬可以抑制QGY-7703细胞的迁移和侵袭能力,与布洛芬对细胞PI3K/Akt/mTOR信号通路的调控有关。     

岩黄连水提物对肝癌HepG2细胞增殖和迁移能力的影响及其可能机制

目的 观察岩黄连水提物对原发性肝癌HepG2细胞增殖和迁移能力的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 将含不同浓度（0.4 mg/mL、0.8 mg/mL、1.6 mg/mL）的岩黄连水提物100 mL作用于肝癌 HepG2 细胞,以等量未处理培养基培养的肝癌HepG2细胞为对照组。采用CCK-8法检测肝癌HepG2细胞的增殖能力,Transwell法检测细胞迁移能力,Western blot和荧光定量PCR分别检测NF-κBp65蛋白和mRNA的表达水平。结果CCK-8实验结果显示,24 h、48 h和72 h不同浓度岩黄连水提物作用肝癌HepG2细胞的增殖抑制率组内差异均有统计学意义（P<0.01）,且0.8 mg/mL、1.6 mg/mL干预的细胞增殖抑制率均高于0.4 mg/mL（P<0.01）。Transwell实验结果显示,不同浓度岩黄连水提物作用肝癌HepG2细胞48 h后的细胞迁移数均低于对照组（P<0.001）,且可上调NF-κBp65蛋白和mRNA的表达（P<0.001）。结论 岩黄连水提物能抑制肝癌HepG2细胞增殖、迁移能力,其作用机制可能与上调NF-κBp65表达有关。     

美蓝染色标记法联合Glisson蒂横断式肝切除与非规则性肝切除治疗肝癌的临床疗效

目的 探讨美蓝染色标记法联合Glisson蒂横断式肝切除与非规则性肝切除治疗肝癌的临床疗效。方法 对美蓝染色标记法联合Glisson蒂横断式肝切除25例（联合组）与非规则性肝切除23例（非规则组）治疗肝癌作前瞻性研究,比较两组患者围手术期情况,包括平均手术时间、术中出血量、术后1 d和4 d AST的水平、肿瘤标本切缘阳性率、并发症发生率、术后1年复发率和1年生存率等,并分析其临床疗效。结果 两组患者均无围手术期死亡病例。联合组平均手术时间较非规则组少［（120.16±15.45） min vs（130.26±8.48） min,t=2.77,P<0.05］;联合组术中出血量较非规则组少［（252.40±81.25） ml vs （493.44±100.96） ml,t=8.42,P<0.05］;联合组术后1 d、4 d AST水平上升幅度较非规则组小［（1 d AST：（143.76±49.48）U/L vs （253.82±77.79） U/L,t=5.90,P<0.05;4 d AST：（79.36±24.51） U/L vs（129.57±45.66） U/L,t=4.80,P<0.05］;肿瘤标本切缘阳性率分别为4.0%和8.7%（P>0.05）;围手术期并发症发生率联合组较非规则组低（12.00% vs 39.13%,P<0.05）;术后1年复发率联合组较非规则组低（20.00% vs 47.83%,P<0.05）;术后1年生存率两组差异无统计学意义（80.00% vs 78.26%,P>0.05）。结论 美蓝染色标记法联合Glisson蒂横断式肝切除较非规则性肝切除治疗肝癌的术中出血量和术后并发症少,患者术后恢复快,复发率低,值得临床推广应用。     

卵巢癌相关抗原TM4SF1 HLA-A2限制性CTL表位预测及鉴定

目的 预测并筛选免疫反应性较强的四跨膜蛋白超家族成员1（transmembrane 4 L6 family member 1，TM4SF1） 人类白细胞抗原A2（human leukocyte antigen A2，HLA-A2）限制性T淋巴细胞（cytotoxic lymphocyte，CTL）表位肽。方法 联合4种软件（BIMAS、SYFPEITHI、IEDB、PROPRED I）对TM4SF1的 HLA-A2限制性CTL表位进行预测，并采用预培养法酶联免疫斑点法（enzyme-linked immunospot assy，ELISOPT）、直接法ELISOPT对所测得表位肽的免疫反应性进行鉴定。结果 4种不同软件共预测出10条表位多肽，对其中4条（P1、P2、P8、P10）进行免疫反应性验证。多肽活化CTL能力结果显示，预培养法ELISPOT产生斑点形成细胞（spvt forming cell，SFC）的净值T明显高于直接法ELISPOT：［（阳性对照肽：322±8 vs 169±22，P<0.05）、（多肽P1：114±10 vs 39±7，P<0.05）、（多肽 P10：156±31 vs 52±8，P<0.05）］。单个活化CTL细胞分泌INF-γ因子的水平检测结果显示，预培养法 ELISPOT 产生斑点的平均大小明显大于直接法 ELISPOT［（阳性对照肽：21.91±2.45 vs 13.80±1.76，P<0.05）、（多肽P1：12.90±0.88  vs 8.31±1.40，P<0.05）、（多肽P10：17.50±3.85 vs 11.96±0.61，P<0.05）］。表位多肽P1、P10均具有免疫原性，P10的免疫活性更高。结论 预培养法ELISPOT检测多肽的免疫反应性较直接法ELISPOT灵敏性更高，多种软件联合ELISPOT预培养法可有效筛选出免疫反应性更强的卵巢癌相关抗原TM4SF1 HLA-A2限制性CTL优势表位，其中P10的免疫活性最高。     

RSK4与Ki-67、cyclin D1、CXCR4、E-cadherin在乳腺癌裸鼠移植瘤中的相关性研究

目的 分析乳腺癌裸鼠移植瘤中核糖体 S6蛋白激酶 4（ribosomal protein S6 kinase 4,RSK4） 与Ki-67、cyclin D1、CXCR4、E-cadherin表达的相关性,进一步探讨RSK4在乳腺癌发展中的作用机制。方法 将转染siRNA （RSK4-RNAi-LV）的MCF-7细胞（实验组）、转染siRNA （NC-GFP-LV）的MCF-7细胞（阴性对照组）和未转染的MCF-7细胞（空白对照组）分别接种至裸鼠乳腺脂肪垫下,建立乳腺癌裸鼠移植瘤模型,剥离裸鼠移植瘤;采用免疫组织化学法检测移植瘤标本中增殖因子RSK4、Ki-67、cyclin D1 及侵袭因子CXCR4、E-cadherin蛋白的表达。结果 实验组RSK4、E-cadherin蛋白的表达水平分别为（3.2±0.5）％、（28.2±0.7）％,明显低于空白对照组的（36.7±3.4）％、（51.7±4.2）％和阴性对照组的（61.1±5.1）％、（49.2±3.8）％,差异有统计学意义（F=56.79,61.89,P＜0.05）。实验组Ki-67、cyclin D1、CXCR4蛋白的表达水平分别为（67.8±5.8）％、（61.7±4.6）％、（56.3±3.9）％,明显高于空白对照组的（34.5±1.4）％、（29.7±2.5）％、（30.7±3.1）％和阴性对照组的（29.8±1.9）％、（35.7±4.6）％、（28.5±3.7）％,差异有统计学意义（F=45.24,52.16,61.24,P＜0.05）。相关性分析显示,RSK4与 Ki-67、cyclin D1、CXCR4表达呈负相关（r=-0.857,-0.826,-0.867,P<0.001）,与E-cadherin表达呈正相关（r=0.879,P<0.001）。 结论 RSK4可能通过调节CXCR4、Ki-67、CyclinD1和E-cadherin肿瘤相关因子的表达,在乳腺癌在乳腺癌生长及转移过程中发挥作用。     

APOF和IGFALS基因在原发性肝癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨载脂蛋白F（apolipoprotein F,APOF）和人胰岛素样生长因子酸不稳定亚基（the insulin-like grouth factor binding protein acid labile subunit,IGFALS）在原发性肝癌组织中的表达及临床意义。 方法 选取2014年1月1日至2015年12月30日于广西医科大学附属肿瘤医院经手术切除及病理确诊为原发性肝癌88例,实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测88例肝癌组织及其相应癌旁组织和6例正常肝组织中APOF基因和IGFALS基因mRNA的相对表达量,并分析两者表达与肝癌患者临床病理特征的关系。结果 肝癌组织中APOF mRNA相对表达量低于癌旁组织和正常肝组织（0.156±0.019 vs 0.971±0.010,P<0.001;0.156±0.019 vs 81.140±0.092,P<0.001）;肝癌组织中IGFALS mRNA相对表达量亦低于癌旁组织及正常肝组织（0.111±0.016 vs 1.090±0.054,P<0.001;0.111±0.016 vs 1.101±0.211,P<0.001）。APOF mRNA表达与门静脉侵犯相关（P=0.004）;IGFALS mRNA表达与肿瘤分化程度、门静脉侵犯相关（P<0.05）。APOF mRNA表达水平与IGFALS mRNA表达水平呈正相关（r=0.332,P<0.01）。结论 APOF和IGFALS基因在肝癌组织中表达下调,二者表达呈正相关,且与门静脉侵犯有关,可能参与了肝癌的发生发展。     

牛磺酸对7，12-二甲基苯蒽诱发大鼠乳腺癌的干预作用及其机制

目的 研究牛磺酸对7,12-二甲基苯蒽（7,12- dimethyl benzene［a］ anthracene,DMBA）诱发大鼠乳腺癌的干预作用及其机制。方法 将30只6周龄雌性SD大鼠随机分为牛磺酸干预组、模型对照组和空白对照组,每组10只。牛磺酸干预组和模型对照组大鼠给予15 mg/100g的DMBA,在牛磺酸干预组的日常饮水中添加3%牛磺酸,一次性灌胃;空白对照组大鼠予1 mL/100 g花生油灌胃。所有大鼠均自由饮水和进食。观察、记录大鼠乳腺肿瘤发生情况,采用酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测大鼠血清IL-6和TNF-α含量。结果 与模型对照组相比,牛磺酸干预组肿瘤发生的潜伏期延长,致瘤率、荷瘤总数、血清IL-6和TNF-α水平均下降,差异有统计学意义（P<0.05）,肿瘤体积和重量增加,但差异无统计学意义（P>0.05）;与空白对照组相比,模型对照组血清IL-6和TNF-α水平显著升高［（41.41±10.10）pg/mL vs （20.00±10.10） pg/mL,P<0.05;（71.72±25.83） pg/mL vs （42.00±16.69） pg/mL,P<0.05）,而牛磺酸干预组升高不明显［（22.48±10.38） pg/mL vs（20.00±10.10） pg/mL,P>0.05;（42.52±9.15） pg/mL vs （42.00±16.69）pg/mL,P>0.05）。 结论 牛磺酸对DMBA诱发大鼠乳腺癌的发生有较明显的抑制作用,其机制可能通过调节机体免疫反应途径实现。     

索拉非尼联合斑蝥酸钠对肝癌HepG2细胞的抑制作用

目的 探讨索拉非尼联合斑蝥酸钠对肝癌HepG2细胞的抑制作用及相关机制。方法 将不同浓度的索拉非尼和斑蝥酸钠分为索拉非尼组、斑蝥酸钠组及索拉非尼+斑蝥酸钠联合用药组（联合用药组）,并设空白对照组,分别作用于肝癌HepG2细胞。CCK-8法测定两个单药组及联合用药组对肝癌HepG2细胞的抑制作用,流式细胞术检测细胞周期,Western blot法检测ERK及pERK蛋白的表达水平。结果 索拉非尼组、斑蝥酸钠组及联合用药组均可抑制肝癌HepG2细胞的增殖,并具有剂量-时间依赖效应,联合用药组细胞抑制率高于两个单药组（P均<0.05）。索拉非尼浓度为4 μmol/L、斑蝥酸钠浓度为3.88 μmol/L联合用药的48 h时段表现为协同作用,其余大多表现为相加作用。3组G1期细胞百分比均明显高于对照组 （P均<0.001）,联合用药组较两个单药组更高（P<0.05）;两个单药组及联合用药组的ERK蛋白的表达较对照组无明显差异 （P=0.1）,索拉非尼组及联合用药组pERK蛋白的表达明显低于对照组的（P<0.05）,斑蝥酸钠组明显高于对照组 （P=0.023）。结论 索拉非尼和斑蝥酸钠对肝癌HepG2细胞均有抑制增殖的作用,联合用药表现为协同或相加作用,其机制可能与阻滞细胞周期及抑制RAF/MEK/ERK信号传导通路有关。     

人白细胞介素18对肺癌A549细胞生物学功能的影响

目的 探讨人白细胞介素18（interleukin 18,IL-18）对肺癌A549细胞生物学功能的影响。方法 将IL-18重组质粒及其空载对照质粒转染肺癌A549细胞,用抗生素加压筛选阳性细胞,构建稳定表达IL-18质粒及空载质粒的肺癌细胞,将构建好的稳定过表达IL-18细胞和空载对照细胞分别命名为IL18-A549细胞和NC-A549细胞。采用细胞计数法、流式细胞术、划痕实验和transwell迁移、侵袭实验检测IL-18过表达对肺癌A549细胞增殖、凋亡、运动、迁移和侵袭能力的影响。结果 成功构建稳定过表达IL-18肺癌细胞IL18-A549。与空载对照细胞NC-A549相比,过表达IL-18可促进肺癌A549细胞增殖（P＜0.05）,但对细胞早期、晚期及总凋亡率无明显影响（P＞0.05）。IL18-A549细胞的划痕愈合率为（62.0±5.7）%,高于NC-A549细胞的（31.2±3.7）%,两者比较差异有统计学意义（P＜0.05）;IL18-A549细胞和NC-A549细胞发生迁移的细胞数目平均为48个和9个,发生侵袭的细胞数目平均为33个和11个,两者差异均有统计学意义（P均＜0.05）。结论 过表达IL-18可促进肺癌A549细胞增殖、运动、迁移和侵袭,IL-18可能是肺癌转移过程中的关键因子。     

白花丹素对骨肉瘤MG-63细胞迁移的影响及其作用机制

目的 观察白花丹素对骨肉瘤细胞迁移的抑制作用并初步探讨其可能的机制.方法 以2.5 μmol/L、5μmol/L和10 μmol/L浓度白花丹素分别作用于骨肉瘤MG-63细胞,以含0.1％ DMSO完全培养基为对照组.作用24 h后,Transwell法观察骨肉瘤MG-63细胞迁移能力,Real-time PCR检测骨肉瘤MG-63细胞中Ezrin基因mRNA表达情况,Westem blot检测Ezrin蛋白和p-Ezrin的表达情况.结果 Transwell结果显示,作用24h后,各实验组下层小室细胞数明显减少,2.5 μmol/L组、5μmol/L组和10 μmol/L组的细胞迁移率分别为(69.9±4.5)％、(39.3±3.5)％和(26.2±4.1)％,呈浓度依赖性(P＜0.05);Real-time PCR结果显示,骨肉瘤MG-63细胞中Ezrin mRNA表达水平明显下降,呈浓度依赖性(P＜0.05).Western blot结果显示,Ezrin蛋白和p-Ezrin的表达量明显降低,呈浓度依赖性(P＜0.05).结论 白花丹素能够抑制骨肉瘤MG-63细胞迁移,其作用机制可能与抑制骨肉瘤MG-63细胞中Ezrin的表达及活化有关.