两点单侧注射前脑内侧束建立PD大鼠模型及其行为学评价

目的 6-羟基多巴胺(6-OHDA)两点单侧注射前脑内侧束建立帕金森病(PD)大鼠模型,从行为学角度对模型进行评价.方法 104只SD大鼠随机分为正常对照组(n=14),生理盐水对照组(n=35)和模型组(n=55).模型组SD大鼠以6-OHDA立体定向两点单侧注射至前脑内侧束.术后不同时间点(第7、14、21、28天)进行行为学分析(姿势不对称性、前肢始动不能试验);术后第1周开始,每周1次腹腔注射阿朴吗啡(Apo)诱发大鼠旋转行为,连续6周,分别计数阳性大鼠例数.结果 模型组大鼠姿势不对称性和前肢始动不能试验指标与正常对照组和生理盐水对照组比较,有显著差异(P＜0.01);其行为学不对称性随时间延长而逐渐加重,至28 d后趋于稳定.第1、2、3、4周Apo诱发模型组大鼠旋转行为的阳性例数分别为9、12、12、1.结论 前脑内侧束单侧注射6-OHDA诱发大鼠的行为学改变与PD患者临床表现有相似之处.Apo诱发的PD模型大鼠旋转行为次数随损毁时间延长而增加,与其行为不对称性随时间延长加重的表现一致.实验为深入研究帕金森病发病机制奠定了基础.     

内侧前脑束不同部位注射6-羟多巴胺建立帕金森病大鼠模型的对比性研究

目的 建立简单、易行、成功率高的制作帕金森病大鼠模型的方法 。方法 注射同等剂量的6-羟多巴胺于内侧前脑束不同部位（第1组注射位点：位点1：前囟后1.8mm,右侧2.0mm,背腹8.0mm;位点2：前囟后1.8mm,右侧3.0mm,背腹7.5mm。第2组注射位点：位点1：前囟后1.8mm,右侧2.5mm,背腹8.0mm;位点2：前囟后1.8mm,右侧2.5mm,背腹7.5mm）,造成黑质多巴胺能神经元的损坏,运用阿朴吗啡诱发旋转试验及免疫组化检验模型是否成功。比较两组注射位点的成功率。结果 采用第1组注射位点的成功率为51%,第2组注射位点的成功率为77%,显著高于第1组（P〈0.01）。结论 采用第2组注射位点制作帕金森病大鼠模型成功率高、易行。     

6-羟基多巴胺损毁单侧内侧前脑束与单侧纹状体大鼠模型的病变早期比较

目的 比较6-羟基多巴胺(6-OHDA)损毁的单侧内侧前脑束(MFB)与单侧纹状体大鼠模型成模4周后多巴胺(DA)系统中神经递质功能变化。方法 选择62只成年雄性Sprague-Dawley大鼠,随机分为4组：1位点模型组(n=18,1个位点纹状体损毁)、4位点模型组(n=18,4个位点纹状体损毁)、MFB模型组(n=18,MFB损毁)和假手术对照组(n=8)。运用免疫组织化学酪氨酸羟化酶(TH)染色方法统计阳性DA神经元脱失率,运用体外放射配体-受体结合实验、行为学实验和小动物正电子发射断层扫描(PET)检测四组模型DA转运蛋白(DAT)和D2受体的放射活性结合率的变化。结果 TH免疫组化染色结果显示,1、4位点模型组和MFB模型组病灶侧TH阳性细胞脱失率分别为19.1%、 84.7%、97.1%,提示模型制作成功。DAT和D2受体检测结果显示：与假手术对照组相比,1、4位点模型组及MFB模型组病侧DAT放射活性结合率均下降(P<0.05、P<0.05和P<0.01),且4位点模型组的下降程度明显高于1位点模型组(P<0.05),MFB模型组的下降程度明显高于...     

早期帕金森病大鼠模型的建立

目的 探索建立早期帕金森病（Parkinson disease,PD）大鼠模型.方法 成年大鼠单侧纹状体内注射6-羟多巴胺（6-hydroxydopamine,6-OHDA）.注射后第7天,通过姿势不对称性、前肢始动不能、前肢使用不对称性、阿朴吗啡诱发旋转实验进行行为学评估.观察组织学变化,取鼠脑黑质节段（n=6）,固定、石蜡包埋、连续冠状切片.焦油紫（Nissl）染色显示黑质神经细胞;抗酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase,TH）抗体免疫组织化学染色显示黑质多巴胺（DA）能神经元,光镜下观察并进行细胞计数,统计学分析处理数据.而且,使另一部分模型动物（n=6）继续存活到第28天,鉴定所选动物模型的可靠性.结果 纹状体内注射6-OHDA后第7天,动物行为学出现有意义改变,黑质内神经细胞出现肿胀等变性坏死的早期形态变化,DA能神经元出现有意义减少;注射后的第28天,行为学改变更加显著,神经细胞大量减少,DA能神经元数量减少到92%.结论 纹状体内注射6-OHDA后第7天,通过行为学方法能确定早期PD动物模型.     

应用斜面汉密顿微量注射器针头脑内注射6-羟基多巴胺制作大鼠帕金森病模型

目的：探讨应用斜面汉密顿微量注射器针头代替平面汉密顿微量注射器针头,6-羟基多巴胺（6-hydroxydopamine,6-OHDA）中脑黑质单侧单点立体定向注射法制作单侧帕金森病（Parkinson＇sdisease,PD）模型的可行性。方法：采用雌性SD大鼠,在脑立体定位技术下,应用斜面汉密顿微量注射器针头将6-OHDA注入大鼠右侧的中脑黑质部位,用动物旋转行为监测仪记录阿扑吗啡（Apomorphine,Ap0）诱发的大鼠异常旋转行为,并测定脑组织液生化改变,并与平面汉密顿微量注射器针头注射组相比较。结果：实验组和对照组的PD动物模型成功率分别为73．33％（11／15）和80．00％（12／15）,两者比较差异无统计学意义（P〉O．05）。两种针头制作的PD鼠损毁侧脑组织液中多巴胺（Dopamine,DA）代谢产物3,4-二羟基乙酸（dihydroxyphenylaceticacid,DOPAC）和高香草酸（homovanillicacid,HVA）明显低于未损毁侧（P〈0．05）。而空白对照组的旋转行为、两侧脑组织液中多巴胺代谢产物均没有明显改变。结论：应用斜面汉密顿微量注射器针头代替平面汉密顿微量注射器针头可以制作可靠而稳定的PD大鼠模型。     

帕金森病大鼠模型的建立

目的应用6-羟多巴胺建立帕金森病大鼠模型并对其进行行为学评估。方法采用立体定向技术,将6-羟多巴胺注入大鼠前脑内侧束和腹侧被盖区,观察阿朴吗啡诱发大鼠旋转行为的变化。结果 50只大鼠中有39只(78%)经阿朴吗啡诱导后恒定向健侧旋转(旋转速度>7 r/min),帕金森大鼠模型复制成功。结论成功建立帕金森病大鼠模型,为进一步开展细胞移植治疗帕金森病的实验研究奠定基础。     

选择性毁损帕金森病大鼠模型的建立

目的探讨提高 6 -羟基多巴胺 (6 -OHDA)帕金森病 (PD)大鼠模型成功率的方法 ,并对模型进行评价。方法 :取SD大鼠 90只 ,将 6 -OHDA立体定向微量注射于左侧黑质区及黑质纹状体通路 ,观察大鼠行为及黑质细胞形态学变化。结果 :90只大鼠中经阿朴吗啡诱导后有 6 4只 (占 71.1% )恒定转向右侧且结果稳定 ,旋转圈数 >2 10r/ 30min ,被视为成功PD大鼠模型 ;免疫组化观察发现注射侧黑质区多巴能神经元 (NDN)较对侧明显减少 ,电镜观察发现其普遍存在凋亡及坏死样改变。结论 :用 6 -OHDA选择性损毁NDN可较快建立稳定的类似于人类中晚期PD行为病理的大鼠模型 ,但在病理和行为学等方面同自然PD病人仍有较多差异     

6-羟基多巴胺损毁单侧内侧前脑束和单侧纹状体的帕金森病大鼠模型早期和晚期行为学

目的 比较6-羟基多巴胺损毁单侧内侧前脑束（MFB）和单侧纹状体的帕金森病大鼠模型在不同时期行为学的差异。方法将62只成年雄性SD大鼠随机分为4组：1位点纹状体损毁模型组（n=18）、4位点纹状体损毁模型组（n=18）、MFB损毁模型组（n=18）和假手术组（n=8）。通过甲基苯丙胺诱导的旋转实验、溴隐亭诱导的旋转实验和步行实验比较损伤后早期（4周后）和晚期（6个月后）大鼠行为学的变化,并通过免疫组织化学和结合分析实验计算病灶侧阳性多巴胺神经元脱失率和多巴胺转运蛋白、D2受体结合率。结果 甲基苯丙胺诱发1位点纹状体损毁模型组、4位点纹状体损毁模型组和MFB损毁模型组大鼠均产生朝向病灶同侧的旋转;溴隐亭诱发纹状体损毁模型产生朝向病灶同侧的旋转,而MFB损毁模型组则产生朝向病灶对侧的旋转。成模早期和晚期不同模型组组间比较以及同一模型组中成模早期和晚期比较,旋转圈数的差异均无统计学意义。步行实验结果显示,同一模型组中,成模早期和晚期病侧肢体运动启动时间明显长于健侧肢体（P <0.001）,病侧肢体步长长度明显短于健侧肢体（P <0.001）,病侧肢体前后步伐调整数明显少于健侧肢体...     

6-羟基多巴胺帕金森病大鼠模型的建立与评价

目的 探讨提高6-羟基多巴胺帕金森病大鼠模型成功率的方法 ,并从行为学、黑质多巴胺神经元形态学角度对模型进行评价.方法 取SD大鼠90只,将6-羟基多巴胺立体定向微量注射于左侧黑质区及黑质纹状体通路,观察大鼠的行为及黑质细胞形态学变化.结果 ①90只大鼠中经阿朴吗啡诱导后有64只(占71.1%)恒定转向右侧且结果 稳定,旋转圈数>210r/30min,被认为是成功的帕金森病大鼠模型;②除旋转行为外,部分大鼠还出现震颤、活动迟缓、嗅探、觅食、竖尾等异常表现;③随机选取10只不同时期的成功帕金森病大鼠模型,免疫组化下观察发现注射侧黑质区多巴胺能神经元较对侧明显减少(P＜0.001),电镜观察发现大鼠中脑黑质神经细胞普遍存在变性坏死及不同阶段的凋亡样改变.结论 用6-羟基多巴胺选择性损毁黑质多巴胺能神经元可较快建立稳定的成功率较高的类似于人类中晚期帕金森病行为和病理的大鼠模型,但在病程和行为学等方面同帕金森病人仍有许多差异.     

单点注射6-羟基多巴胺成功建立帕金森病大鼠模型的实验研究

目的 探讨成功建立帕金森病（Parkinson＇s disease,PD）大鼠模型的快速有效方法.方法 将Wistar大鼠92只,随机分为实验组（80只）及对照组（12只）,采用脑立体定向术,实验组在大鼠右侧中脑腹侧被盖区（ventral tegmental area,VTA）注入6-OHDA,经阿朴吗啡（Apomorphine,APO）诱导表现为恒定左侧旋转且旋转圈数﹥210 r/30 min的视为成功PD大鼠模型,对照组则在脑部相应位置注入生理盐水.免疫组化法观察成功模型毁损侧黑质酪氨酸羟化酶（TH）阳性神经元的形态及数量变化.结果 （1）行为学检测：模型组与对照组手术后分别死亡2只及1只,实验组78只大鼠中36只左侧恒定旋转圈数﹥210 r/30 min,造模成功率为46.2%,并且维持时间长.（2）免疫组化：成功大鼠模型毁损侧黑质区TH阳性的神经元较对侧及对照组明显减少（P＆lt;0.01）.结论 大鼠中脑VTA单点注射6-OHDA制作PD大鼠模型,易于定位,操作简单,动物死亡率低,模型成功率较高,成本较低,是较快建立稳定PD大鼠模型的可行方法.     

帕金森病大鼠模型的炎性机制

目的 :研究帕金森病 (PD)大鼠模型的炎性机制。　方法 :采用酶联免疫吸附法 (ELISA)检测PD大鼠模型黑质纹状体区肿瘤坏死因子 α(TNF α)和白细胞介素 1(IL 1)的水平。采用酪氨酸羟化酶 (TH)免疫组化法估测黑质区神经损伤的程度。　结果 :PD大鼠模型黑质纹状体区TNF α和IL 1的水平较对照组明显增高 (P <0 .0 5 ) ,环孢素 (CsA)可减轻 6 羟基多巴胺 ( 6 OHDA)对黑质多巴胺神经元的损伤 ,但对黑质纹状体区TNF α和IL 1水平无明显影响。　结论 :免疫炎性机制可能参与PD的发病过程 ,CsA可能通过与炎性因子无关的途径对黑质多巴胺神经元起保护作用     

3 种不同脑区定点注射 6-OHDA 单侧损伤大鼠帕金森病模型的比较研究

[摘要] 目 的 从 神 经 行 为 学、组 织 病 理 和 生 化 方 面 对 3 种 不 同 脑 区 单 侧 定 点 注 射 6- 羟 基 多 巴 胺 ( 6- hydroxydopamine , 6-OHDA )损伤大鼠帕金森病( Parkinsondisease , PD )模型进行比较研究。方法 健康雄性 SD 大 鼠随机分为 3 组( n =10 ):纹状体组、黑质组、黑质 + 中脑腹侧被盖区组。根据脑立体定位图谱,将微量 6-OHDA 单点定位注入大鼠中脑黑质区、纹状体区和双点定位注入黑质区与中脑腹侧被盖区。观察阿朴吗啡诱发大鼠旋转 行为,免疫组织化学检测大鼠黑质区酪氨酸( tyrosinehydroxy-lase , TH + )阳性神经元数目,电化学高效液相色谱法 检测纹状体中多巴胺( dopamine , DA )及其代谢产物 3 , 4- 二羟苯乙酸( dihydroxy-phenylaceticacid , DOPAC )和高香 草酸( homovanillicacid , HVA )含量。结果 纹状体组 3 周后模型稳定,黑质组与黑质 + 中脑腹侧被盖区组大鼠 2 周后稳定, 3 组 30min 内向健侧转圈数均呈升高趋势,黑质 + 中脑腹侧被盖区组高于纹状体组和黑质组,组间· 时点间交互作用差异有统计学意义( P <0.05 )。纹状体组和黑质 + 中脑腹侧被盖区组造模成功率高于黑质组 ( P <0.05 )。 3 组大鼠注射 6-OHDA 损伤侧纹状体中 DA 、 DOPAC 、 HVA 含量和 TH + 神经元数目均明显低于非 损伤侧( P <0.05 )。结论 纹状体单点注射 6-OHDA 损伤建立 PD 模型成功率高,可作为研究 PD 的一种稳定可靠 的动物模型。     

纹状体内注射6-羟基多巴胺制作帕金森病大鼠模型

[目的]研究帕金森病(PD)大鼠模型的制作方法.[方法]采用单点双注法将6-羟基多巴胺(6-OHDA)立体定向注入到大鼠右侧纹状体,观察大鼠的行为变化和中脑黑质区的形态学变化.[结果]注药后2周,大鼠经阿扑吗啡诱导出现向健侧旋转行为,在2个月的观察中见旋转行为稳定.形态学观察结果示,损伤侧黑质区致密部和中脑被盖腹侧区内酪氨酸羟化酶阳性神经元数量明显减少.[结论]6-OHDA单针道双点法是制作大鼠PD模型的可行方法.     

大鼠帕金森氏病模型的建立

用Ｗｉｓｔａｒ大白鼠６４只，经微量注射６－羟多巴胺入右侧黑质区后，观察大鼠的行为和黑质及尾壳核细胞形态学变化。结果如下：①６４只大鼠中，３５只（５４．７％）恒定转向左侧且结果稳定，与帕金森氏病的症状相类似，被视为帕金森氏病旋转鼠模型。②在旋转鼠右侧黑质和尾壳核内，酪氨酸羟化酶样（多巴胺能）神经元和神经纤维末稍明显减少或消失，而左侧黑质和尾壳核内无明显变化。结果提示：６－羟多巴胺能选择性地损毁多巴胺能神经元及纤维末稍，从而建立稳定的帕金森氏病旋转鼠模型。     

采用Ⅳ型胶原酶构建大鼠脑出血模型

目的：利用Ⅳ型胶原酶构建大鼠脑出血模型，并研究血肿形成速度和血肿形成大小的影响因素。方法：使用健康雄性200－250g Wistar大鼠，随机分组，分别脑内尾状核注射不同容积Ⅳ型胶原酶／肝素生理盐水溶液，单纯Ⅳ型胶原酶生理盐水溶液，单纯生理盐水，于术后6h,12h,24h,3d,7d分别观察冰冻切片连续切片血肿大小，结果：单纯生理盐水注射仅引起12h内的针道渗血，单纯胶原酶生理盐水注射3d可以形成直径3mm左右的血肿，IV型胶原酶／肝素生理盐水注射24h可形成直径3mm左右的血肿，结论：IV胶原酶／肝素生理盐水注射可以建立理想稳定的脑出血动物模型，且血肿大小和注射溶液容积呈正相关。     

纹状体注射不同剂量6-OHDA制备帕金森病小鼠模型的评价

目的纹状体内注射6-OHDA可用于制备帕金森病(Parkinson’s disease,PD)模型,其在小鼠模型上的行为学、形态学及多巴胺水平的变化需要进行系统评价。方法在小鼠右侧纹状体背外侧部立体定位分别注入4、6、8及10μg的6羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA),动态观察各剂量组小鼠的基本生理状况。旋转行为和转棒行为可评价PD小鼠的运动症状;酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)免疫组化染色可反映黑质-纹状体内多巴胺能系统的功能改变;高效液相色谱法能检测多巴胺(dopamine,DA)及其代谢产物的含量并分析DA代谢率。结果除了10μg 6-OHDA组的小鼠体质量呈一过性下降,其他剂量对小鼠体质量无显著影响。在6-OHDA注射一周后,各组小鼠均出现了持续性的异常旋转行为增加。此外,高剂量组(8μg及10μg)小鼠的转棒时间较低剂量组(4μg及6μg)小鼠明显缩短。TH组织化学染色显示,低剂量组小鼠损伤侧丢失了约60%的多巴胺神经元及40%的多巴胺神经纤维;而高剂量组小鼠则有超过80%的多巴胺神经元丢失和70%的多巴胺神经纤维减少。各组小鼠损伤侧纹状体内的DA水平及其代谢产物含量也显著降低,与6-OHDA注射量具有剂量依赖性;而DA代谢率却出现了代偿性增加改变。结论纹状体内注射不同剂量6-OHDA均能引起一定程度的PD病理表型,其损伤程度与6-OHDA剂量相关,为研究PD不同病理阶段及其干预策略提供了新的模型。     

Wistar大鼠C6胶质瘤脑移植模型的应用

目的通过观察C6胶质瘤大鼠脑移植模型,了解该模型的生物学特点,以帮助实验中有效应用。方法 Wistar大鼠20只,将活性较好的C6胶质瘤细胞微量移植入大鼠大脑半球,观察肿瘤生长特点及行为学改变。结果肿瘤移植后第3天,TW2即可出现轻微高信号改变。15/18的大鼠在第5天至少能看到2个层面的信号改变。16/18的大鼠在第11天能看见实质性肿瘤。13/18的大鼠第14天生长至半侧大脑的1/2。14/18的大鼠第20天大部分肿瘤达到半侧大脑的2/3,部分生长至对侧半球。结论实验可能的最佳时间窗在14～18 d。同时,肿瘤移植的初始细胞浓度、细胞活性和移植部位可能也对实验时间窗会有较大影响。