bcl-2 mRNA在正常和增生前列腺组织中的表达及意义

目的:探讨bcl-2 mRNA在良性前列腺增生发病过程中所起的作用.方法:采用斑点杂交技术研究正常和增生前列腺组织中bcl-2 mRNA表达情况,并加以比较,同时采用原位杂交技术了解bcl-2 mRNA在增生前列腺中表达.结果:bcl-2 mRNA在增生前列腺组织中表达明显高于在正常前列腺组织中的表达,增生组织中平均表达值是正常组织的(1.71±0.72)倍;原位杂交显示:bcl-2 mRNA主要在前列腺上皮组织中表达,并呈现由基底细胞向表层上皮细胞表达逐渐减弱趋势.结论:bcl-2 mRNA 在增生组织中高表达表明增生前列腺上皮细胞抗凋亡作用强于正常组织,提示bcl-2参与前列腺细胞增殖与凋亡过程,增生前列腺中bcl-2高表达可能是诱发良性前列腺增生的重要病因.     

IMMUNOHISTOCHEMICAL DISTRIBUTION OF ERYTHROPOIETIN AND ITS RECEPTOR EXPRESSION IN POSTNATAL RAT RETINA DEVELOPMENT

Objective To investigate the distribution of erythropoietin （EPO） and erythropoietin receptor （ EPOR ） expression in the postnatal rat retina development. Methods Forty-two male Sprague-Dawley rats were divided into 7 groups according to their various postnatal days： postnatal 1 d （D1 group）, 3 d （D3 group）, I week （W1 group）, 2 weeks （W2 group）, 3 weeks （W3 group）, 4 weeks （W4 group） and8 weeks （W8 group） （ n = 6 ）. Single eye was randomly chosen from each rat for the study. The retinal sections were stained with hematoxylin and eosin （HE） and used for the retina development observation. Immunohistochemical staining was used to localize EPO and EPOR expressions in retinas.of differentstages of development, and the expression intensities were determined by an image plus 4 program~~ Results The retinal inner nuclear layer （INL） and outer nuclear layer （ONL） were mixed together and had not yet fully differentiated in D1 and D3 groups. The INL and ONL formed their own independent regions and the outer plexiform layer （OPL） appeared between two layers in W1 group. With the postnatal retinal development, the inner plexiform layer （ IPL ） , rods and cones layer （ RCL ）, and OPL were gradually widened and stabilized in W2 to W3 groups. EPO/EPOR expressions located prominently in the inner part of the postnatal rat developing retinas. The expression of EPO in GCL and INL gradually increased from DI to W4, then the expression decreased in W8. Expression of EPOR in GCL gradually increased from DI to WI , then decreased in W2 ; and it gradually increased again from W3 to W8. Expression of EPOR in INL gradually increased from D1 to W1, then decreased in W2 ; and it continued to decrease from W3 to W8. Expression of EPOR in the external segment of RCL gradually increased from D1 to W8. However, expression in the internal segment of RCL gradually decreased from D1 to W3 , then no obvious expression was seen in the internal segment of RCL in W4 and W8. Conclusion     

非小细胞肺癌组织中PEDF、VEGFR-2的表达

目的：检测非小细胞肺癌（ NSCLC）组织标本中色素上皮衍生因子（ PEDF）、血管内皮生长因子受体（VEGFR-2）的表达,探讨PEDF在NSCLC血管新生中的作用及其与VEGFR-2之间关系。方法：应用免疫组织化学法检测28例NSCLC患者癌组织和远离癌组织的对照组织中PEDF和VEGFR-2的表达;通过标记CD34计数微血管密度（ mVD）,比较癌组织中PEDF和VEGFR-2阴阳性表达时血管新生情况。结果：癌组织中PEDF和VEGFR-2表达阳性率分别为71.43%、64.29%,与对照组织不表达相比,差异有统计学意义（ P<0.05）;PEDF和VEGFR-2的共表达率在癌组织和对照组织中分别为39.29%、0%,差异有统计学意义（ P<0.01）;癌组织mVD （29.30±3.80）低于对照组织（98.86±18.87）,差异有统计学意义（ P<0.05）;癌组织中PEDF阳性表达的mVD显著低于阴性表达的mVD,VEGFR-2阳性表达的mVD显著高于其阴性表达的mVD,差异均有统计学意义（ P<0.05）。结论：NSCLC细胞PEDF和VEGFR-2阳性表达百分率高;PEDF阳性表达和VEGFR-2的阴性表达可能与组织mVD有关。     

血小板激活因子受体mRNA在小鼠附睾精子内的表达

①目的检测血小板激活因子受体(PAFR)mRNA在小鼠附睾精子内的表达,探讨PAFR对受精过程的影响.②方法分离提取小鼠附睾精子mRNA,经逆转录(RT)合成PAFR-cDNA.利用聚合酶链反应(PCR)扩增PAFR-cDNA,DNA序列分析验证扩增产物的准确性.③结果小鼠附睾精子表达PAFR-mRNA;DNA序列分析验证PCR产物为小鼠PAFR-cDNA.④结论小鼠附睾精子有PAFR-mRNA的表达.     

结肠腺癌与正常黏膜组织RP基因mRNA表达差异分析

目的:探讨结肠腺癌与正常黏膜组织中核糖体蛋白(Ribosomal protein,RP)基因mRNA的表达差异.方法:用基因表达系列分析(Serial analysis of gene expression,SAGE)方法对结肠腺癌组织及正常黏膜组织中核糖体蛋白基因mRNA的表达进行分析.结果:在结肠腺癌和正常黏膜组织中共出现了101种RP基因或RP类似基因的表达,其中有6种仅在正常黏膜中表达,有17种仅在腺癌中表达,41种RP基因在癌组织中表达明显升高.结论:在结肠腺癌和正常黏膜中均有多种RP基因表达,但两者之间存在明显差别.     

RSK4蛋白在胰腺癌组织中的表达及意义

目的：：检测核糖体 S6蛋白激酶4(Ribosomal S6 protein kinase4,RSK4)在胰腺癌组织中的表达,并探讨其与临床病理参数的关系及预后意义。方法：使用免疫组化检测50例胰腺癌及30例癌旁组织中 RSK4蛋白的表达,χ2检验和 Spearman相关分析其表达与临床病理参数的关系;Kaplan-Meier单因素分析和 COX 比例风险模型分析患者预后的影响因素。结果：RSK4蛋白在胰腺癌组织中表达率为28%(14/50),癌旁组织中表达率为50%(15/30),胰腺癌组织表达率明显低于癌旁组织(P <0.05)。RSK4蛋白与血清CA19-9水平有关(r=-0.288,P <0.05),而与其它临床病理参数无关(P >0.05)。RSK4蛋白与患者术后生存期无关(P>0.05);肿瘤分化程度和TNM临床分期是影响胰腺癌患者预后的因素,且均是独立的预后因素。结论：RSK4蛋白在胰腺癌组织中表达水平降低,提示其可能参与胰腺癌的发生发展。     

肾细胞癌MMP-9、VEGF表达与MVD的相关性

目的探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）与血管内皮生长因子（VEGF）在肾癌组织中的表达及其与血管生成、肿瘤侵袭和转移的关系。方法采用免疫组织化学SP法,检测75例肾细胞癌、12例正常肾组织中MMP-9与VEGF的表达情况;CD34免疫组化染色方法标记微血管内皮计数微血管密度（MVD）。结果肾癌组织MMP-9与VEGF表达均明显高于正常肾组织（F=13.12、9.76;q=4.568～9.333;P〈0.05）,不同病理类型的肾癌组织中MMP-9与VEGF表达差异均无显著性（q=0.035～2.209,P〉0.05）,不同临床分期肾癌组织MMP-9与VEGF表达差异均有显著性（F=24.95,3.54;q=3.086-11.846;P〈0.05）。MVD与VEGF、MMP-9蛋白表达之间均呈显著正相关（r=0.381、0.375,P〈0.05）,VEGF与MMP-9蛋白表达之间也有显著相关性（r=0.507,P〈0.05）。结论MMP-9、VEGF与肾细胞癌的血管生成有关,MMP-9与VEGF表达检测可作为反映肾细胞癌侵袭和转移潜能的生物学指标。     

肝细胞癌及癌旁组织中白蛋白mRNA和甲胎蛋白mRNA的表达

目的：检测肝细胞癌及癌旁组织白蛋白ｍＲＮＡ和甲胎蛋白ｍＲＮＡ表达，为外周血肝细胞癌转移指标提供依据。方法：用ＲＴ－ＰＣＲ技术检测１８例肝细胞癌和１３例癌旁肝组织中白蛋白ｍＲＮＡ。结果：①白蛋白ｍＲＮＡ在１８例癌及１３例癌旁组织中均有高表达；②白蛋白ｍＲＮＡ检出率明显高于第一轮ＰＣＲ甲胎蛋白ｍＲＮＡ（Ｐ〈０．００１）；③白蛋白ｍＲＮＡ和甲胎蛋白ｍＲＮＡ可同时在癌组织中表达。结论：选择检测白蛋白ｍＲＮ     

腹腔脂肪型丝氨酸蛋白酶抑制剂与脂联素mRNA在肥胖及糖尿病大鼠肝脏中的表达

目的了解腹腔脂肪型丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)与脂联素(Adiponectin,APN)mRNA在肥胖及糖尿病大鼠肝脏中的表达及意义。方法雄性Wistar大鼠100只,适应性饲养1周后,随机分为三组:基础对照组15只喂以基础饲料;肥胖组20只喂以高脂饲料;糖尿病组47只喂以高脂饲料,4周后一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病大鼠模型。三组大鼠共饲养28周,采用半定量RT-PCR法检测大鼠肝脏组织中Vaspin及APN mRNA的表达。结果肥胖与糖尿病组大鼠Vaspin mRNA表达水平高于对照组(P<0.05),APN mRNA表达水平低于对照组(P<0.05),肥胖组Vaspin和APN mRNA表达与糖尿病组相比无统计学意义(P>0.05);Vaspin与APN mRNA表达呈中度负相关(P<0.05)。结论 Vaspin与APN mRNA表达的改变可能是糖脂代谢紊乱的一种适应性改变。     

肿瘤坏死因子基因和蛋白及受体在子宫内膜组织的表达

目的探讨子宫内膜癌组织肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）基因和蛋白及受体的表达及意义。②方法分别采用非同位素原位杂交方法、免疫组化方法对４８例子宫内膜癌组织ＴＮＦｍＲＮＡ,ＴＮＦ蛋白及ＴＮＦ受体（ＴＮＦＲ）的表达进行检测。③结果子宫内膜癌组织中１６例ＴＮＦｍＲＮＡ呈阳性表达,均为间质的单个核细胞和平滑肌细胞,腺癌细胞无阳性表达,对照组未见阳性表达。１５例病人ＴＮＦ蛋白呈阳性表达,２５例ＴＮＦＲ呈阳性表达,对照组子宫内膜腺体也有ＴＮＦＲ阳性表达,两组比较差异无显著性（χ２＝２．４５,Ｐ＞０．０５）。ＴＮＦｍＲＮＡ与ＴＮＦ蛋白表达存在不一致性,ＴＮＦ与ＴＮＦＲ表达与组织学分化及肌层浸润深度差异均无显著性（χ２＝２．１７,０．８１,Ｐ＞０．０５）;ＴＮＦＲ蛋白表达明显高于ＴＮＦ,两者比较差异有极显著性（χ２＝４．２９,Ｐ＜０．０５）;ＴＮＦＲ在正常内膜表达与子宫内膜癌表达差异无显著性（χ２＝２．４５,Ｐ＞０．０５）。④结论子宫内膜癌间质细胞能够表达ＴＮＦｍＲＮＡ,并产生ＴＮＦ蛋白。     

生长因子在视网膜增殖膜的表达

目的：了解血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）和碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）在视网膜增殖膜细胞的表达及其与增殖性玻璃体视网膜病变（ＰＶＲ）的关系。方法：免疫组化法研究ＰＤＧＦ和ｂＦＧＦ在２０例视网膜前膜和１例视网膜下膜（视网膜脱离术后继发）细胞中的表达情况。结果：①１５／２１（７１．４％）例标本对抗ＰＤＧＦ抗体呈阳性反应，１４／２１（６６．７％）例对抗ｂＦＧＦ呈阳性反应；②Ｅａｌｅｓ病和增殖性糖尿病视网膜病引起的血管增殖性前膜（≥６１个细胞／视野，１０００×）较ＰＶＲ引起的非血管增殖性前膜（３１～６０个细胞／视野）内细胞密度高，黄斑前膜（≤３０个细胞／视野）最低。结论：ＰＤＧＦ和ｂＦＧＦ在ＰＶＲ发展过程中起重要作用；ＰＶＲ膜上增殖细胞可产生ｂＦＧＦ，它是导致严重ＰＶＲ时玻璃体内ｂＦＧＦ含量异常升高的主要原因。     

原发性卵巢癌p15 mRNA及其蛋白的表达

①目的　检测原发性卵巢癌中p15mRNA及其蛋白的表达 ,以探讨该基因在原发性卵巢癌发生发展过程中的作用。②方法　应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)以及免疫组化方法 ,对 4 8例原发性卵巢癌以及 15例正常卵巢组织中 p15mRNA及其蛋白的表达进行检测。 ③结果　原发性卵巢癌中 p15mRNA及其蛋白的表达与正常卵巢组织比较差异有显著性 (χ2 =4 .16、5 .11,P <0 .0 5 )。p15mRNA及其蛋白表达与卵巢癌组织学类型相关 (χ2 =5 .5 9、7.30 ,P <0 .0 5 ) ,与其FIGO分期及组织学分级无关 (χ2 =1.13～ 2 .0 9,P >0 .0 5 )。④结论　原发性卵巢癌中p15mRNA及其蛋白表达异常 ,提示该基因的失活与原发性卵巢癌的发生有关。     

老年肥胖者脂肪组织内脂素基因的表达及其相关因素

目的 探讨老年肥胖患者腹部网膜及皮下脂肪组织内脂素mRNA的表达情况及其相关因素.方法 根据体质量指数不同,将择期腹部手术的老年患者40例分为肥胖组20例,对照组20例.采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应方法检测内脂素mRNA的表达量,酶联免疫吸附法测定血浆内脂素浓度,稳态模型评估胰岛素抵抗指数(homeostasis model of assessment for insulin resistant index,HOMA-IR),并分析内脂素与人体测量指标和代谢指标的相关性.结果 ①2组网膜脂肪组织内脂素mRNA的表达量明显高于皮下脂肪组织内脂素mRNA的表达量(P＜0.05),肥胖组网膜脂肪组织内脂素mRNA的表达量高于对照组(P＜0.05),而2组皮下脂肪组织内脂素mRNA的表达量差异无统计学意义(P＞0.05);②肥胖组血浆内脂素浓度显著高于对照组(P＜0.05);③合并2组数据,网膜脂肪组织内脂素mRNA的表达水平与腰臀比、空腹胰岛素、HOMA-IR呈正相关(r=0.264、0.108、0 173,P＜0.05),而皮下脂肪组织未发现任何相关性因素(r=0.099,P＞0.05);血浆内脂素浓度与总胆固醇呈正相关(r=0.257,P＜0 05),且与网膜脂肪组织内脂素mRNA的表达水平呈正相关(r=0.267,P＜0.05);④多元逐步回归分析发现,空腹胰岛素是血浆内脂素浓度和网膜脂肪组织内脂素mRNA的独立相关因素.结论 内脂素mRNA主要在内脏脂肪组织中表达,可能与肥胖、胰岛素抵抗有关.     

溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜超微结构变化及肠组织中P-选择素表达的研究

目的:探讨溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠肠黏膜超微结构的变化及肠组织中P-选择素表达情况和在UC发病机制中的作用.方法:用三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇制作实验性溃疡性结肠炎的动物模型,电镜观察肠黏膜超微结构的变化及免疫组化法检测实验性溃疡性结肠炎肠组织中P-选择素表达.结果:UC组P-选择素的表达明显高于对照组,UC组电镜下见结肠黏膜上皮细胞微绒毛消失,内质网扩张,线粒体明显肿胀,对照组电镜下可见结肠黏膜上皮细胞有较多的粗短的微绒毛,未见扩张的内质网及肿胀的线粒体.结论:UC肠黏膜超微结构明显改变,P-选择素在UC中表达明显上调,在UC的发生和维持中发挥了重要作用.     

人肺癌及癌旁组织p21蛋白表达的免疫组化检测

以相当于 ras p21蛋白一段氨基酸序列的合成肽的单克隆抗体 EB_(24?),用 ABC 免疫组化技术检测50例福尔马林固定-石腊包埋的人肺癌组织切片的 p21蛋白表达。46例癌组织的 p21表达,比癌旁病理形态证明“正常”的肺泡及正常肺泡明显增强.其中以肺腺癌最为显著。42例非小细胞肺癌中38例呈阳性反应(90.5%),强阳性约占60%;而8例小细胞肺癌中只有1例阳性(12.5%)。一般说肺腺癌对化疗最不敏咸.小细胞肺癌对化疗较为敏感。这种差别与 p21的表达是否有关联值得进一步探讨。     

碱性成纤维细胞生长因子在前列腺增生组织中表达的临床意义

目的　探讨碱性成纤维细胞生长因子 (b -FGF)在前列腺增生组织中表达的临床意见。方法　采用斑点杂交技术和免疫组化染色测定 4 0例正常前列腺 (NP)、38例前列腺增生症 (BPH )组织中b -FGF的表达情况。结果　BPH组织中b -FGF的表达明显高于NP组织 (P <0 0 1 )。b -FGF表达升高的程度与BPH的分度无明显关系。结论　b -FGF可能为BPH组织自身分泌 ,与其发生发展过程密切相关     

端粒酶和mdm2基因蛋白在膀胱癌组织中的表达及其临床意义

目的　检测膀胱癌组织中端粒酶及mdm2基因表达并探讨其临床意义。方法　用免疫组织化学技术 (SP法 )检测 38例膀胱组织标本中端粒酶及mdm2基因蛋白表达。结果　端粒酶在G1和Tis- 1肿瘤中阳性表达率分别低于在G2 G3和T2 - 4中的阳性表达率 ,初发组阳性表达率低于复发组 (P <0 .0 5)。mdm2基因蛋白在Tis- 1肿瘤中阳性表达率显著高于T2 - 4中阳性表达率 (P<0 .0 5) ,初发组中阳性表达率高于复发组中阳性表达率 (P <0 .0 5)。随着病理分级及临床分期的增高 ,端粒酶阳性表达率逐渐增高 ,而mdm2基因蛋白阳性表达率逐渐下降。端粒酶阳性表达与患者术后生存率无关 ,mdm2阴性表达的病例生存率较低。结论　端粒酶染色阳性与mdm2基因蛋白的异常表达与肿瘤的发生及发展有关 ,两者表达均可作为判定膀胱肿瘤恶性程度的重要指标 ,且mdm2阳性表达可提供膀胱癌患者预后信息     

实验性糖尿病大鼠视网膜中Visfatin mRNA及蛋白表达研究

目的:研究糖尿病大鼠视网膜中Visfatin mRNA及蛋白表达情况,探讨Visfatin与糖尿病视网膜病变的关系。方法:建立链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病大鼠模型(实验组),同时设立正常对照组。饲养12wk后处死大鼠并取视网膜组织,采用冰冻切片免疫荧光染色法和RT-PCR法观察和检测Visfatin和VEGF mRNA及蛋白的表达情况。结果:对照组中Visfatin主要在神经纤维层中少量表达,但在实验组视网膜中Visfatin及VEGF的蛋白表达明显增强,特别是在Müller细胞中。Visfatin及VEGF表达部位一致。RT-PCR显示实验组中Visfatin及VEGF mRNA水平较正常对照组明显增高(P<0.01)。结论:糖尿病大鼠视网膜中Visfa-tin的表达增加,可能是导致增生性糖尿病视网膜病变(PDR)发展的重要因素之一,提示Visfatin在糖尿病视网膜病变发生过程中可能起重要作用。     

胃腺癌组织中p53和NF-资Bp65蛋白表达的关系及意义

目的：探讨p53和NF-资Bp65蛋白在胃腺癌中表达及与临床病理特征的关系。方法：采用免疫组化S-P法检测100例胃腺癌及42例胃腺癌淋巴结转移灶中p53和NF-kBp65蛋白表达水平。结果：胃腺癌组织中p53阳性表达率为53%。低分化胃腺癌组的阳性表达率明显高于中高分化胃腺癌组的阳性表达率(χ2=7.486, P<0.01);在有淋巴结转移的胃腺癌组中阳性的表达率明显高于无淋巴结转移的胃腺癌组(χ2=6.368, P<0.05);Ⅲ、Ⅳ期胃腺癌组的阳性表达率明显高于I、Ⅱ期组的阳性表达率(χ2=13.864,P<0.01);胃底/贲门、胃体、胃窦/幽门胃腺癌之间的阳性表达率无显著差异性(χ2=2.529,P>0.05)。胃腺癌组织中NF-资Bp65阳性表达率为58%。低分化、中高分化胃腺癌之间,有淋巴结转移、无淋巴结转移胃腺癌之间,芋、郁期和玉、域期胃腺癌之间的阳性表达率均存在显著的差异性(χ2=4.624,P<0.05;χ2=3.876,P<0.05;χ2=7.436,P<0.01),而胃腺癌部位阳性表达率无显著差异性(χ2=3.306,P>0.05)。42例淋巴结转移灶中p53和NF-kBp65阳性表达率分别为30.95%和35.71%,均明显低于胃腺癌原发灶(χ2=4.861,P<0.05;χ2=8.052,P<0.05),p53和 NF-kBp65在胃腺癌原发灶和淋巴结转移灶中的表达均呈正相关(c=0.505,P=0.001;c=0.316,P=0.041)。结论：p53的异常表达和NF-资Bp65分别在胃腺癌的发展、侵袭和转移中起到重要作用;p53的和NF-资Bp65在胃腺癌中协同表达,提示可能共同参与胃腺癌的增殖、侵袭和转移;联合检测胃腺癌中p53和NF-κBp65表达,可为临床诊断病情发展程度提供指导意义。