四逆散对心理应激肝郁证模型大鼠ERK1/2-CREB信号通路的影响

[目的]探讨四逆散对心理应激肝郁证模型大鼠应激相关激素、神经递质及海马和下丘脑部位细胞外信号调节蛋白激酶1/2（ERK）1/2-cAMP反应元件结合蛋白（CREB）信号通路的影响。[方法]采用慢性束缚制动结合孤养的方法制备心理应激肝郁证大鼠模型,根据大鼠一般状态、体质量增长情况、高架十字迷宫实验验证模型成功。将120只大鼠随机分为正常对照组、模型空白组、模型+四逆散组（四逆散组）、模型+艾司唑仑组（艾司唑仑组）,各30只。采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测大鼠血浆及脑脊液促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）、促肾上腺皮质激素（ACTH）、肾上腺素（E）、去甲肾上腺素（NE）、5-羟色胺（5-HT）的含量,半定量PCR法检测大鼠海马和下丘脑部位丝裂原活化蛋白激酶激酶1/2（MEK1/2）、ERK1/2、CREB、c-fos mRNA的表达,蛋白印迹（Western blot）法检测大鼠海马和下丘脑部位磷酸化（p-）MEK1/2、p-ERK1/2、p-CREB、c-fos蛋白的表达。[结果]与正常对照组比较,模型空白组大鼠血浆和脑脊液中CRH、ACTH、E、NE的含量明显增加（P<0.05）,5-HT的含量明显减少（P<0.05）,海马和下丘脑部位MEK1/2、ERK1/2、CREB mRNA及p-MEK1/2、p-ERK1/2、p-CREB蛋白的表达明显降低（P<0.05）。与模型空白组比较,四逆散和艾司唑仑均可降低血浆和脑脊液中CRH、ACTH、E、NE的水平（P<0.05）,升高5-HT的水平（P<0.05）,上调海马和下丘脑部位MEK1/2、ERK1/2、CREB mRNA及p-MEK1/2、p-ERK1/2、p-CREB蛋白的表达（P<0.05）。各组之间大鼠海马和下丘脑部位c-fos mRNA和蛋白质的表达差异无统计学意义（P>0.05）。[结论]四逆散能降低心理应激肝郁证模型大鼠血浆和脑脊液CRH、ACTH、E、NE的水平,增加5-HT的含量,提高应激反应能力,其机制可能与上调ERK1/2-CREB信号通路活动有关。     

抑郁症中腺苷对ERK1/2影响的研究进展

抑郁症的病因和发病机制至今不明。单胺假说是目前大多数人所接受的抑郁症的发病理论,但其又无法解释抗抑郁药的延迟效应。所以,近年来更多的研究指向受体的细胞内信号转导机制。由于单胺类神经递质的受体多是G蛋白耦联受体,所以早期更多的研究集中在cAMP信号转导通路。随着神经生物学和遗传学的发展,对细胞内信号转导通路已经扩展到PI、MAPK/ERK等多种信号转导通路。本文就腺苷及其受体、ERK1/2在抑郁症中的研究进展做一综述。     

沉默miR-18a对抑郁症睡眠障碍模型大鼠丘脑-垂体-肾上腺皮质轴功能的影响

目的:探究沉默miR-18a对抑郁症睡眠障碍模型大鼠丘脑-垂体-肾上腺皮质轴功能的影响.方法:购买72只SPF级SD大鼠,分为空白组、模型组、过表达组、沉默组各18只,模型组、过表达组、沉默组构建抑郁症睡眠障碍模型,做miR-18a慢病毒滴定,采用实时荧光定量聚合酶联反应检测miR-18a基因表达量,采用酶联免疫吸附(...     

五味子提取物对抑郁症大鼠海马神经元损伤的修复作用及其机制

【目的】探讨五味子提取物的抗抑郁作用及机制。【方法】取40只大鼠建立慢性不可预测轻度应激（CUMS）抑郁模型,随机分为模型组,五味子提取物低、中、高剂量组,每组各10只,另设正常组10只。相应干预结束后,进行旷场实验和蔗糖偏好实验评估大鼠行为学。处死大鼠后,尼氏染色法观察海马神经元形态变化,原位末端标记法（TUNEL）染色测定海马神经元凋亡率,Western Blot法检测海马组织Janus蛋白酪氨酸激酶1(JAK1)、信号传导及转录活化因子3(STAT3)及磷酸化JAK1(p-JAK1)、磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白相对表达量。【结果】与模型组比较,五味子提取物各剂量组水平运动得分、垂直运动得分、1%蔗糖水消耗率、p-JAK1和p-STAT3蛋白相对表达量升高,海马神经元凋亡率降低（P<0.05）,其中五味子提取物高剂量组上述指标改变最明显（P<0.05）。尼氏染色结果显示,模型组海马神经元萎缩、排列紊乱稀疏,坏死细胞较多,而五味子提取物各剂量组均较模型组有不同程度改善。【结论】五味子提取物有显著的抗抑郁作用,其机制可能与激活JAK1/STAT3信号通路从而发挥...     

四逆散活性成分对抑郁症大鼠慢性应激模型行为学及脑内单胺类神经递质的影响

目的　研究抑郁症慢性应激模型及氯丙咪嗪、四逆散活性成分治疗后大鼠行为学改变和前皮层、海马单胺类神经递质含量的变化。方法　采用高效液相—电化学方法分析应激及四逆散活性成分对神经递质含量的影响 ,以探讨四逆散活性成分抗抑郁的机制。结果　抑郁症慢性应激模型大鼠体重显著减轻 ,进入敞箱后排便次数增多 ,水平和垂直活动明显减少 ,蔗糖水消耗量下降 (P <0 0 1) ,海马 5 HT含量减少 (P <0 0 1) ,皮层DA含量减少 (P <0 0 5 )。四逆散活性成分能升高 5 HT、DA含量 (P <0 0 1) ,进而改善大鼠行为特征。结论　调节 5 HT、DA神经递质是四逆散活性成分抗抑郁机制之一     

四逆散加味治疗慢性心力衰竭合并抑郁症临床观察

正慢性心力衰竭(CHF)是各种心脏病的终末阶段预后差,迁延不愈,可导致患者体力下降,生活自理能力减退,精神负担加重,易诱发抑郁焦虑情绪。国内荟萃分析显示~([1]),我国心力衰竭患者的焦虑抑郁发病率为40.1%。研究表明,抑郁、焦虑也是心衰患者死亡的重要预后因素~([2])。西药治疗抑郁有服药依从性差、致心律失常及停药反跳现象等不足,可导致慢性     

痛泻要方合四逆散对2型糖尿病KK-Ay小鼠脂代谢及AMPK/SREBP1c/Fas通路的影响

目的 观察痛泻要方合四逆散对2型糖尿病KK-Ay小鼠脂代谢以及肝脏AMPK/SREBP1c/Fas通路的影响。方法 将24只SPF级雄性KK-Ay小鼠建立2型糖尿病模型,采用随机表数字法分为模型组、痛泻药方合四逆散中药低、中、高剂量组,每组各6只,另取6只雄性C57BL/6J小鼠作为正常对照组。干预4周后,检测小鼠血脂[高密度脂蛋白(High density lipoprotein, HDL)、低密度脂蛋白(Low density lipoprotein, LDL)、甘油三酯(Triglyceride, TG)]以及脂联素的表达水平,并通过RT-PCR,Western blot检测小鼠肝脏中AMPK、SREBP1c、Fas蛋白以及基因的表达情况。结果 痛泻药方合四逆散可明显上调KK-Ay小鼠的血清HDL和脂联素水平,下调TG和LDL表达水平,差异有统计学意义(P<0.05),且呈现剂量依赖性;另外,中药高剂量组可以增加小鼠肝脏中AMPK基因和磷酸化蛋白表达水平,降低SREBP1c和Fas的基因和蛋白表达水平,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 痛泻药方合四逆散能通过调控...     

加味四逆散为主治疗卒中后抑郁症51例

中风后抑郁症(post-stroke dep ression,PSD)是指中风发生后,临床上除中风固有的各种躯体症状外,尚出现以情绪低落、兴趣减退为主的病证,是一组以抑郁心境自我体验为中心的临床症状群或状态[1].卒中后抑郁症的临床表现相当于中医学"郁证"等范畴,中医药治疗常可取得满意的疗效.笔者应用加味四逆散治疗缺血性脑卒中后抑郁症51例,疗效满意,报道如下.     

温肾通督针法对抑郁症肾阳虚证模型大鼠相关神经递质及cAMP-RAF1信号通路的影响

目的 通过建立抑郁症肾阳虚证模型大鼠,探究温肾通督针法的温肾调神功效,揭示温肾通督针法温阳解郁的作用机制。方法 将大鼠任意分为正常组、模型组、温针组、抑制剂组、温针+抑制剂组,每组各6只。除正常组外,其余各组采用氢化可的松激素注射(肌肉注射,25 mg/kg)结合慢性不可预见性温和刺激进行造模。温针组和温针+抑制剂组采用针刺和艾灸2种方式进行干预;温针+抑制剂组和抑制剂组在取材前24 h灌胃给药ESI-09[10 mg/kg,环磷酸腺苷(cAMP)-RAF1信号通路抑制剂]。造模及干预前后,观察大鼠一般情况,采用强迫游泳实验、水迷宫实验观察大鼠行为学变化。酶联免疫吸附测定法检测脑源性神经营养因子(BDNF)、5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)及去甲肾上腺素(NE)含量。蛋白质印迹法检测大鼠海马cAMP-RAF1信号通路中cAMP、RAS相关蛋白1(RAP1)和RAF1的蛋白表达。结果 干预后,与正常组比较,模型组、温针组、抑制剂组和温针+抑制剂组的体质量均降低(P<0.01),模型组、抑制剂组的肛温均降低(P<0.01)。与模型组比较,抑制剂组的体质量、肛温降低(P&l...     

除湿胃苓汤对小鼠特异性皮炎的治疗作用及组织ERK1/2、Claudin 1表达的影响

[目的] 探究除湿胃苓汤(Chushi Weiling Decoction,CSWLD)对特异性皮炎(atopic dermatitis,AD)小鼠的皮损改善效果,以及对组织细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase1/2,ERK1/2)、紧密连接蛋白1(Claudin 1)表达的影响。[方法]采用二硝基氟苯(dinitro fluoro benzene,DNFB)诱导建立小鼠AD模型,随机分为模型组(0.9%氯化钠溶液)和低、中、高CSWLD组(5、10、20 mL·kg-1),另设置空白组(0.9%氯化钠溶液),各组均以相应药物灌胃1周。给药结束后,评价皮损改善情况,并行炎症评分。酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测血清白细胞介素-33(interleukin-33,IL-33)、IL-6、IL-4、CC类趋化因子配体-5(C-C motif chemokine ligand-5,CCL-5)和CCL-2含量。取皮损部位组织,以免疫组化染色测定IL-33、肿瘤抑制素2(suppression of tumorigenicity 2,ST2)、Claudin 1含量;以定量聚合酶链式反应(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)和免疫印迹检测ERK1/2、Claudin 1的mRNA和蛋白表达。[结果] 与空白组比较,模型组小鼠皮肤红肿、干燥、结痂明显,炎症评分增加,血清IL-33、IL-6、IL-4、CCL-5、CCL-2含量升高,组织IL-33、ST2含量增加,Claudin 1 mRNA表达降低,ERK1/2 mRNA表达升高,Claudin 1蛋白表达降低,ERK1/2磷酸化产物(phosphorylated-ERK1/2,p-ERK1/2)与ERK1/2蛋白比值增加(均P<0.01)。在给予不同剂量CSWLD后,小鼠皮损部位红肿消退,结痂脱落,症状减轻。与模型组比较,中、高CSWLD组小鼠炎症评分降低,血清IL-33、IL-6、IL-4、CCL-5、CCL-2 含量下降,组织IL-33、ST2 含量降低,Claudin 1 mRNA 表达升高,ERK1/2 mRNA 表达降低,Claudin 1蛋白表达升高,p-ERK1/2与ERK1/2蛋白比值降低(P<0.05,P<0.01);而低CSWLD组小鼠的各项指标差异无统计学意义(P>0.05)。[结论] CSWLD可下调炎性介质,并能抑制组织ERK1/2表达、促进组织Claudin 1表达,缓解AD小鼠皮损症状。     

加味四逆散抗肝纤维化大鼠机理研究

目的观察加味四逆散对肝纤维化大鼠的预防效果并探索其防治机理。方法采用四氯化碳（CCL4）植物油溶液和酒精复制大鼠肝纤维化模型,观察加味四逆散对肝纤维化大鼠肝窦内皮细胞（SEC）窗孔大小及层黏蛋白（LN）表达的影响。结果加味四逆散组大鼠SEC壁LN的表达明显减弱,SEC失窗孔减轻,窗孔变大,与模型组比较差异有高度统计意义（P〈0．01）。结论加味四逆散抗肝纤维化的机制之一是通过阻止SEC膜上筛状窗孔变小。降低LN表达．进而抑制肝窦毛细血管化来实现的。     

柴胡疏肝散及其拆方对慢性应激抑郁大鼠模型海马组织ERK1/2 mRNA表达的影响

目的:探讨柴胡疏肝散及其拆方的抗抑郁作用及机制.方法:将SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、全方干预组、拆方干预I组和II组、氟西汀对照组.采用慢性轻度不可预见性应激配合孤养复制抑郁模型;运用敞箱试验和蔗糖水消耗实验观察大鼠行为改变;荧光实时定量PCR(FQ-PCR)检测各组大鼠海马组织细胞外调节蛋白激酶(extr...     

四逆散加味治疗慢性萎缩性胃炎的疗效观察及机制探讨

目的评价四逆散治疗慢性萎缩性胃炎肝郁脾虚型患者的有效性和作用机制。方法选择我院确诊为慢性萎缩性胃炎、中医辨证属肝郁脾虚型患者76例,并设健康对照组36例;将慢性萎缩性胃炎患者又随机分为两组．四逆散治疗组（40例）给予四逆散治疗,胃复春对照组（36例）给予胃复春治疗,两组均治疗3个月。观察三组临床疗效、胃镜下变化、病理改变、血清转化生长因子-α（TGF-α）水平及安全性指标。结果①四逆散治疗组的临床、胃镜、病理疗效显著优于胃复春对照组（P〈0．05）;②治疗前四逆散治疗组及胃复春对照组血清TGF-α水平均高于健康对照组,治疗后两组血清TGF-α水平较治疗前明显降低（P〈0．05）。结论四逆散对慢性萎缩性胃炎肝郁脾虚型患者有良好的疗效,其作用机制可能与调节TGF—α的合成有关。     

Effect of Sini San Freeze-dried powder on sleep-waking cycle in insomnia rats

ObjectiveTo investigate the effects of the Sini San at different doses on each sleeping state [slow-wave sleep 1 (SWS1), slow-wave sleep 2 (SWS2), rapid-eye-movement (REM), wakefulness (W)] in insomnia rats and to identify its mode of acaction for improving sleep.MethodsThe insomnia rats were randomly divided into a high-, medium- or low-dose group of Sini San (equal to crude drug 8.8, 4.4, or 2.2 g/kg, respectively) for seven consecutive days.ResultsCompared with pre-administration, SWS2 was significantly increased after administration of the low dose. Compared with pre-administration, W was significantly decreased and SWS1, SWS2, and the total sleeping time (TST) were markedly increased after administration of the medium dose. Compared with pre-administration, W was significantly decreased and SWS1, SWS2, rapid-eye-movement sleep, and TST were significantly longer after administration of the high dose. The effects of Sini San on sleep-wake cycle are dose-dependent.ConclusionThe results suggest that Sini San extends SWS1 and SWS2, which increases the total sleeping time.     

四逆散对肝损害细胞bax基因表达的影响

[目的]通过观察四逆散对肝损害细胞bax基因表达的影响来研究四逆散的保肝作用。[方法]采用石胆酸灌胃造成肝损害,用免疫组化的方法观察肝组织bax基因的表达情况。[结果]石胆酸灌胃能增强小鼠肝组织bax蛋白的阳性表达率,四逆散能降低灌胃石胆酸小鼠肝组织bax蛋白的阳性表达率。[结论]四逆散对肝损害的保护作用可能是通过降低bax蛋白的表达,减少肝细胞的凋亡来实现。     

四逆散药理作用研究进展及质量标志物（Q-marker）预测分析

四逆散由炙甘草、柴胡、白芍、枳实组成,具有透邪解郁、疏肝理脾的功效。现代药理学研究表明该药具有抗抑郁、保肝、治疗功能性消化不良、改善动脉硬化、镇静催眠及抗溃疡等药理作用。本文在对四逆散药理作用的研究进展进行总结的基础上,依据中药质量标志物（quality marker,Q-marker）的“五原则”对四逆散的Q-marker进行预测分析。结果提示甘草苷、甘草素、甘草次酸、甘草酸、山柰酚、槲皮素、柚皮苷、柴胡皂苷a、柴胡皂苷d、芍药苷、芍药内酯苷、橙皮苷、新橙皮苷、辛弗林可考虑作为四逆散的Q-marker,以期为四逆散质量控制研究提供参考。     

应激抑郁模型大鼠脑内ERK1／2含量和活性的变化

目的探讨慢性轻度不可预见性应激抑郁模型大鼠脑内ERK1/2含量和活性的变化,为进一步从信号传导的角度阐明抑郁症的分子病理机制提供线索。方法20只SD2~3月龄雄性大鼠,随机分为正常对照组10只、应激抑郁模型组10只,应激抑郁模型组经过21d慢性轻度不可预见性应激,以旷场行为总分评定其应激前后行为学改变。正常对照组和抑郁模型组在应激后即断头处死,采用蛋白印迹技术检测大鼠额叶皮质、海马、下丘脑、纹状体磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)和非磷酸化ERK1/2的表达。结果经过21d的慢性应激,应激大鼠旷场行为总分较应激前显著减少(P<0.001)。应激后抑郁模型组额叶部位p-ERK1、p-ERK2含量较正常对照组低,差异有显著性(P<0.001),ERK1/2的表达两组间比较差异无显著性(P>0.05);海马部位p-ERK1、p-ERK2含量也较正常对照组低,但差异无显著性,海马部位ERK1/2的表达两组间比较差异无显著性(P>0.05);纹状体和下丘脑部位p-ERK1/2、ERK1/2含量在应激前后均无明显变化。结论应激大鼠额叶部位p-ERK1/2含量的降低提示ERK信号传导通路的下调可能参与了应激所致抑郁的机制。     

四逆汤对供心冷保存保护作用的实验研究

目的探讨四逆汤对供心冷保存的保护作用,以达到延长供心保存时限的目的．方法新西兰大白兔16只随机分2组,A组为对照组,B组为实验组。B组取心前连续四逆汤汤剂灌胃3d,A组灌注及保存用Uw液、B组则另加用四逆汤注射液。保存6h后在langendoff模型上A组用氧合的KHB液、B组用KHB液加四逆汤注射液灌注30min。以功能、代谢和结构等指标评价供心恢复情况。结果再灌注至恢复稳定心跳节律的时间、稳定心跳时的心率、心肌收缩力恢复情况、再灌注0、5、10、15、30min各时点的冠脉流量和心肌耗氧量、再灌注前和再灌注末ATP、MDA及SOD含量、再灌注末超微结构等各项指标B组均优于A组。结论用四逆汤对供心作预处理,并在灌洗液、保存液和再灌注液中加入适量的四逆汤,对供心冷保存有保护作用,值得临床应用。