重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子活性测定标准品的研制

目的建立效价测定用的重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)国家标准品.方法标准品按WHO有关要求进行制备、分装、冻干、检测,用GM-CSF国际标准品为标准进行协作标定.结果冻干重组GM-CSF标准品经检测外观,无菌实验合格,水分为0.93%,加速热稳定实验表明其生物学活性在温度为-20℃,4℃和25℃,37℃条件下23个月保持稳定.该标准品经3家实验室协作标定共21次测定,几何平均效价为1.77×105IU/支.实验均数的95%可信区间为(1.64～1.90)×105IU/支,单次实验的95%参考值范围为(1.23～2.34)×105IU/支,平均可信限率为6.962%.结论该批重组GM-CSF国家标准品各项指标均符合要求,可作为国家标准品使用,效价定为1.8×105IU/支,编号为98/01.     

重组人肿瘤坏死因子(rhTNF-α)国家标准品的研制

目的:建立符合WHO重组细胞因子要求,用于rhTNF质量控制的国家标准品.方法:用NIBSC提供的国际标准品为标准,采用L929细胞体外活性测定系统,按统一方案组织了4家实验室,对这批rhTNF-α国家标准品(批号960508)的效价进行协作标定.结果:经统计学分析,均数的95%可信区间为3289～4266IU/支,单次测定的95%标准值范围为1735～8087IU/支.这批国家标准品效价确定为3500IU/支.4种不同温度存放27个月的样品,效价测定结果表明其效价稳定.结论:这批rhTNF-α经统一协作,质量可靠,效价稳定,可用作国家标准品使用.     

重组人白细胞介素-l1的质量研究

白细胞介素-11(IL-11)为血小板生长因子,可直接刺激造血干细胞和巨核细胞母细胞的增殖.并诱导巨核细胞的成熟、从而增加血小板的生成.1997年11月由美国Genetic Instirute研制的rhIL-11通过FDA审评.在国内一度成为新的开发热点.在对成都地奥九泓制药厂生产的大肠杆菌表达的重组人白细胞介素-11(rhIL-11)的检定过程中,参照《重组DNA质量控制要点》,研究国内外标淮,结合制品特点,建立了rhIL-11质量标准,对我国第一家送检的样品进行了质量检定.rhIL-11的为179个氨基酸,比天然成熟的人IL-11在N端多一个氨基酸,分子量为19kD,等电点为11.7.虽然厂家基本能按《重组DNA质量控制要点》的要求制定质量标准,但由于缺少有效的HPLC分析方法,肽图分析往往不够准确;活性测定缺少国际标准品,比活性无法确定.针对这些问题我们进行了以下4个方面的研究.     

炎症标志物与肺癌关系的研究进展

肺癌是最常见的恶性肿瘤,发病率高、生存率低、死亡率高,预后差.自1863年Virchow提出肿瘤可能是由慢性炎症引起的假设后,人们进行了很多研究.研究表明,炎症标志物与肺癌的发生、发展、预后都有密切关系,对炎症标志物的研究可能为肺癌患者提供另一个评价预后的指标,且其检测简单方便,标准化,并可排除主观因素的影响,是一个很好的客观评价系统.本文对炎症介质白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-8、白细胞介素-10、白细胞介素-2及炎症蛋白C反应蛋白、纤维蛋白原与肺癌的关系进行综述.     

白细胞介素2脂质体抗肿瘤活性研究

人重组白细胞介素2(rhIL-2)是T淋巴细胞产生的一种细胞因子,在抗肿瘤、抗感染等方面具有应用价值.但rhIL-2在体内半衰期短,稳定性差,限制了其临床应用.改变细胞因子类药物的剂型,可延长细胞因子类药物在体内的半衰期,增强其稳定性.国外已有报道,将白细胞介素-2包于脂质体中可明显增加它的稳定性和体内的生物利用度,从而提高IL-2的疗效.本文以对IL-2敏感的B16黑色素瘤为靶细胞,研究了IL-2脂质体的抗肿瘤作用,以期为白细胞介素-2脂质体药物的应用提供实验依据.     

阳离子脂质体介导的小鼠白细胞介素2基因修饰肝癌细胞瘤苗

目的 研究阳离了脂质体介导的小鼠白细胞介素2基因修饰肝癌细胞瘤苗的抗肿瘤作用。方法 利用阳离子脂质体Transfectam,将携带小鼠白细胞介素2（IL－2）基因的真核表达南粒VR1110,导入小鼠肝癌细胞H22;采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测转染后经放射线照射、末经放射线照射和冻融后的细胞培养上清液中白细胞介素2的浓度;并研究转染后经放射线照射而制成的瘤苗的抗肿瘤效应。结果 转染后经放射线照射和末经放射线照射的H22细胞均持续分泌IL－2达30天以上;转染细胞在冻融后也能分泌IL－2;制备的瘤苗对小鼠肝癌模型肿瘤的生长有明显的抑制作用,并能明显提高荷瘤小鼠的生存率。结论 阳离了脂质体介导的小鼠细胞介素2基因转染后,能在肝癌细胞中有效表达,所制备的瘤苗可诱导有效的抗肿瘤效应。     

肾透明细胞癌患者血清中可溶性白细胞介素-2受体水平变化及临床意义

目的 分析可溶性白细胞介素-2受体在肾透明细胞癌患者血清中的水平变化及临床意义.方法 选取60例肾透明细胞癌患者作为研究对象,作为实验组;对照组则为60例健康成人.采用酶联免疫吸附试验,检验实验组和对照组血清中可溶性白细胞介素-2受体的水平变化.结果 实验组血清中可溶性白细胞介素-2受体水平为(951.6±49.3) ng/L,明显高于对照组的(442.2±75.8) ng/L,其差异有统计学意义;影响肾透明细胞癌预后的危险因素有临床分期、血清中可溶性白细胞介素-2受体水平及是否发生远处转移.结论 肾透明细胞癌患者血清中可溶性白细胞介素-2受体水平明显增高,血清中高水平的可溶性白细胞介素-2受体可能预示预后较差.     

重组白细胞介素2联合化疗治疗卵巢癌复发和转移灶的探讨

卵巢癌是常见的妇科恶性肿瘤之一,由于缺乏早期诊断的手段,很多患者在诊断时已达晚期.而晚期病人由于手术难以彻底及化疗药物的耐受性,患者常于术后1～2年中复发.虽然二线药物泰素对复发患者有30%的疗效,但仍不能解决药物的耐受性问题.而白细胞介素2作为免疫调节剂不受药物的耐受性的限制,可望对复发及转移的晚期卵巢癌有一定的治疗作用.本研究应用重组白细胞介素2及化疗联合应用治疗卵巢癌的复发及转移灶,探讨重组白细胞介素2治疗实体肿瘤的作用效果,为有效冶疗复发和转移的卵巢癌提供一种方法.     

rhTNF-α生物活性测定方法的改进及其对人白血病早幼粒细胞HL-60作用机理研究

目的:通过对rhTNF-α生物活性方法的改进,建立了较规范的活性测定方法,避免了人为判定的误差,提高了测定精确性.方法:本研究应用L929鼠结缔组织来源纤维母细胞系,参照国际标准品测定rhTNF-α效价.分别用Northern Dot Blot杂交检测及DNA电泳等方法,观察不同效价rhTNF-α对HL-60人白血病早幼粒细胞生长的影响.结果:rhTNF-α对HL-60细胞的生长抑制作用与时间、剂量正相关,核酸水平检测初步发现c-myc基因表达量降低,且rhTNF-α对DNA有损伤作用.结论:rhT-NF-α的测定可用自动分析的方法进行.rhTNF-α抑制HL-60细胞生长,其机理不同于阿霉素.     

IL-18基因转染人乳腺癌细胞系的建立及其表达的研究

目的　建立转人白细胞介素 -18(h IL -18)基因的乳腺癌细胞株 ,并研究 h IL -18的表达情况。方法　将携带人白细胞介素 -18的质粒 pc DNA3 .1-h IL -18转导入人乳腺癌细胞系 Bcap3 7中 ,通过药物 G-418进行筛选 ,利用 RT-PCR和 EL ISA法对白细胞介素 -18(IL-18)的表达进行检测。结果　 IL-18基因成功地转导入 Bcap3 7细胞中并能顺利表达。RT-PCR电泳结果显示 IL -18基因在 m RNA水平有表达 ;EL ISA结果显示 ,10 6个转导细胞在 2 4小时内分泌 IL-18的含量为 (186.3± 15.7) pg;空载体转染的细胞未检测到 IL-18。结论　人 IL-18基因成功地整合到乳腺癌细胞系 Bcap3 7细胞基因组中 ,且能持续大量表达     

CD4+T细胞平衡失调与宫颈癌发生、进展及预后的关系研究

目的 探讨宫颈癌患者肿瘤组织中CD4+T淋巴细胞平衡失调与宫颈癌发生、进展及预后之间的关系.方法 收集48例宫颈癌患者的临床资料,设为观察组,选取同期健康体检的52例女性,设为对照组.对观察组患者进行随访,了解患者生存情况.对比γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-...     

沙利度胺联合干扰素、白细胞介素2治疗复发难治急性髓系白血病长期生存二例并文献复习

目的 观察沙利度胺联合干扰素、白细胞介素2治疗复发难治急性髓系白血病(AML)患者长期生存的临床疗效.方法 回顾性分析2例接受沙利度胺联合干扰素、白细胞介素2方案治疗的复发难治AML患者临床资料,并进行文献复习.结果 2例AML患者治疗后达完全缓解并长期生存.结论 沙利度胺联合干扰素、白细胞介素2方案治疗复发难治AML安全、有效.     

白细胞介素-2联合化疗药物腔内注药治疗恶性胸腔积液的疗效观察

目的 观察白细胞介素-2联合化疗药物腔内注药治疗恶性胸腔积液的疗效.方法 对36例恶性胸腔积液采用白细胞介素-2联合化疗药物腔内注药治疗,白细胞介素-2 200～300万u,化疗药物根据肿瘤类型选择,在胸穿抽液后注入胸膜腔内,每周1～2次,1月后评价疗效.结果 36例有效28例,无效8例,有效率77.8%,毒副反应主要表现为骨髓抑制、恶心、呕吐、胸痛、发热.结论 白细胞介素-2联合化疗药物腔内注药治疗恶性胸腔积液疗效确切,毒副反应可耐受.     

检测晚期肿瘤患者血液中可溶性白细胞介素Ⅱ受体的临床意义

近年来随着免疫学在肿瘤临床上的应用，可溶性白细胞介素Ⅱ受体（SIL－2R）检测日益受到重视。SIL－2R可与膜白细胞介素Ⅱ受体（MIL－2R）竞争结合白细胞介素2（IL－2），使IL－2廓清加速，从而抑制T淋巴细胞的增殖，研究表明多种肿瘤患者体IL－2产生能力下降，而同时SIL－2水平升高。本文采用双夹心酶联免疫吸附法，对145例晚期恶性肿瘤患者血清中SIL－2R进行检测，并同时对145例非恶性肿瘤患者及145例健康献血者进行对照，同时对恶性肿瘤组生存期与SIL-2R的相关性进行了探讨。材料与方法1．对象：恶性肿瘤组145例，其中肺癌45…     

瘤源活化细胞:实验室和临床的初步效果

瘤源活化细胞(Tumor derived activat-ed cells,TDAC)是瘤组织中的浸润淋巴细胞(主要是 T 细胞),是在人工培养条件下经重组的白细胞介素2(r-IL2)刺激而获得的细胞。它具有溶解瘤细胞的活性,可用于肿瘤的生物治疗。作者等研究了大量制备 TDAC 的技术,即取切碎的瘤块,在加热灭活人血清和r-IL2的组织培养瓶中培养,再补充以适于 LAK 细胞生长的培养基。     

重组人白细胞介素2治疗恶性肿瘤的Ⅲ期临床研究

我院于1996年4～1997年4月参加中华医学会组织的重组人白细胞介素2(rhIL-2)Ⅲ期临床研究,治疗20例恶性肿瘤.男性15例,女性5例,平均年龄52.85岁.其中肺癌6例,原发性肝癌Ⅲ期5例,直肠癌2例,乳腺癌2例,恶性黑     

肺癌患者血清可溶性白细胞介素2受体的研究

白细胞介素2(IL—2)是T淋巴细胞产生的一种重要的淋巴因子.IL—2通过与细胞膜上的白细胞介素2受体(IL—2R)结合调节T、B淋巴细胞及NK,LAK细胞的增殖和功能,发挥抗肿瘤作用。IL—2R可从细胞膜上部分脱落,形成可溶性白细胞介素2受体(slL-2R)。现已证实:恶性肿瘤、自身免疫病及器官移植患者血清sIL-2R显著升高。我们用酶标双抗夹心法(ELISA)对35例肺癌患者血清sIL-2R进行     

重组人白细胞介素-6抑制BTT739小鼠膀胱癌生长和转移的实验研究

目的　探讨重组人白细胞介素 6对小鼠膀胱癌BTT739生长和转移的抑制作用。方法将BTT739肿瘤细胞接种于T739近交系小鼠皮下 ( 2 6× 10 5/小鼠 ) ,2 4只小鼠随机分成 3组 ,第 3天始分别给予对照组溶剂 ( 0 9NS) 0 3mL ,治疗组重组人白细胞介素 6( 4× 10 6IU kg) ,日 2次 ,腹腔注射 ,共 2 0天 ,阳性对照组MMC ( 1mg kg)日 1次 ,腹腔注射计 14天。第 2 5天测对照组和治疗组的皮下瘤重及肺转移率 ,分别进行t检验和 χ2 检验。结果　两组皮下瘤重分别为 11 4± 1 9g和 7 4± 0 8g ,重组人白细胞介素 6有明显抑制BTT739肿瘤生长作用 ,抑瘤率 35 1% (P<0 0 5) ,而对肺转移灶数目及转移灶大小的抑制率分别为 61 3%和 2 6 2 % (P值均 <0 0 5) ,有显著性差异。结论　重组人白细胞介素 6可明显抑制BTT739小鼠膀胱癌生长和转移。     

肺癌患者血清sIL-2R、IL-6和TNF-α水平的测定及其临床意义

众多临床研究表明,恶性肿瘤患者存在某些细胞因子的异常改变.为了解肺癌患者血清中可溶性白细胞介素-2受体(soluble interleukin-2 receptor,sIL-2R)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)的水平以及它们在化疗前后的变化,本文对一组肺癌患者治疗前后外周血sIL-2R、IL-6和TNF-α进行测定,并探讨其变化及临床意义.     

奥沙利铂联合胸腔内灌注重组人白细胞介素-2治疗肺癌恶性胸水的疗效观察

目的探讨奥沙利铂与胸腔内灌注重组人白细胞介素-2联合治疗肺癌恶性胸水的效果。方法选取2017年9月至2018年9月间山东省立第三医院收治的100例肺癌恶性胸水患者,采用随机数表法分为观察组和对照组,每组50例。对照组患者采用胸腔给予奥沙利铂进行治疗,观察组患者在对照组基础上通过胸腔内灌注重组人白细胞介素-2进行联合治疗,比较两组患者的治疗效果、治疗前后血浆B型钠尿肽(BNP)和降钙素原(PCT)的水平。结果观察组患者治疗总有效率为98. 0%,显著高于对照组患者的84. 0%,差异有统计学意义(P <0. 05)。治疗前,两组患者BNP水平比较,差异无统计学意义(P> 0. 05)。治疗后,两组患者的BNP水平均降低,且观察组患者降低程度较对照组更大,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。治疗前,两组患者的PCT水平比较,差异无统计学意义(P> 0. 05)。治疗后,两组患者的PCT水平均降低,且观察组患者的改善情况优于对照组患者,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论奥沙利铂与胸腔内灌注重组人白细胞介素-2联合治疗肺癌恶性胸水患者,有较好的治疗效果,且对BNP和PCT水平的降低有更积极的作用。