纳洛酮对少突胶质细胞的保护作用

目的 研究纳洛酮(naloxone)对脂多糖(lipopolysacchar,LPS)激活的小胶质细胞诱导少突胶质细胞损伤的影响.方法 共培养大鼠小胶质细胞和少突胶质细胞,用LPS(1μg·mL-1)刺激小胶质细胞,随后用0.1μM纳洛酮进行干预,应用免疫组化方法观察计数少突胶质细胞.结果 仅用0.1μM纳洛酮处理细胞,细胞活性基本保持不变,而当小胶质细胞被LPS激活后,与之共培养的大量的少突胶质细胞死亡(P<0.01);小胶质细胞被LPS激活,给予0.1μM纳洛酮处理后,少突胶质细胞的活细胞数显著升高(P<0.05).结论 纳洛酮能够抑制LPS激活的小胶质细胞引起的少突胶质细胞的损伤.     

少突胶质祖细胞的体外分离、培养和定向分化

目的探索体外培养获得高纯度少突胶质祖细胞的方法,观察少突胶质祖细胞的形态学特点以及增殖和分化规律。方法选取新生1～2 d SD大鼠,应用选择性分离程序,根据细胞的不同贴壁特性,通过2次细胞选择性贴壁培养和2次不同频率的振荡,分离纯化少突胶质祖细胞。应用物理振荡方法进行细胞传代,进一步纯化细胞。传代细胞分别用无血清和有血清的培养基培养,应用免疫荧光法进行细胞鉴定。结果纯化后的少突胶质祖细胞达95%。在无血清的情况下,少突胶质祖细胞定向分化为少突胶质细胞;在有血清的情况下,定向分化为2-型星形胶质细胞,并且细胞骨形态形成性蛋白质4(BMP4)表达增加。结论应用选择性分离程序,通过振荡分离的方法可以获得高纯度的少突胶质祖细胞。少突胶质祖细胞具有增殖和双向分化的潜能。BMP4参与了祖细胞定向分化的调控。     

电针对大鼠脊髓损伤后损伤处远端少突胶质细胞的影响

目的 探讨电针对大鼠脊髓损伤后损伤处少突胶质细胞的影响,为探索电针治疗脊髓损伤提供实验依据.方法 将60只SD大鼠随机分为3组,即电针治疗组(EA)、脊髓损伤组(SCI)、对照组(SHAM),每组各20只大鼠.EA组接受SCI手术+EA治疗;SCI组接受SCI手术;SHAM组仅接受椎板切除术.在术后24 h,术后7d、14d、21d、28 d取脊髓损伤处组织行免疫组化染色,测定APC阳性细胞数的表达变化.结果 同一时间点不同组之间,少突胶质细胞数目比较,电针组明显高于其他组;组之间的对比差异有统计学意义(P＜0.05).电针组之间不同时间点对比,随着电针时间的增长,细胞数不断增长;不同时间点之间的差异有统计学意义(P＜0.05).结论 电针能促使大鼠脊髓损伤后损伤处远端少突胶质细胞的增殖与分化.     

少突胶质细胞髓鞘糖蛋白在难治性癫痫中的表达

目的 研究难治性癫痫(IE)患者致痫灶脑组织中少突胶质细胞髓鞘糖蛋白(OMgp)的表达,探讨IE发病的可能机制.方法 选择2011年6月至2012年6月行“致痫灶切除术”的30例IE患者为研究对象,以实时荧光定量PCR检测OMgp mRNA的转录水平,以Western blot检测OMgp蛋白的表达水平,并与正常对照组相比较.结果 IE患者致痫灶脑组织与正常对照组OMgp mRNA的转录水平为(0.722±0.485vs 1.529±0.908,P＜0.01),OMgp蛋白表达为(0.895±0.167 vs 1.285±0.160,P＜0.01).结论 IE患者致痫灶中,OMgp表达明显降低,可能是IE的发病机制之一.     

载脂蛋白D在两型星形胶质细胞和少突胶质细胞中的表达

目的: 通过对载脂蛋白D(ApoD)在分化成熟的两型星形胶质细胞和少突胶质细胞中表达的检测,探讨ApoD等脂代谢相关基因对神经髓鞘生成的调控机制.方法: 用激光共聚焦免疫荧光标记技术检测ApoD在分化成熟的两型星形胶质细胞和少突胶质细胞中的表达情况.结果: 激光共聚焦显微镜检测显示在O-2A谱系来源的成熟2型星形胶质细胞和少突胶质细胞中ApoD标记为阳性,而在T1A谱系来源的成熟1型星形胶质细胞中则未检测到ApoD的表达,从而在蛋白质水平验证本室研究两型星形胶质细胞基因表达谱差异基因芯片结果中ApoD mRNA在T2A中高表达,而在T1A中低表达的现象.结论: ApoD等脂代谢相关基因可能在O-2A谱系发生和分化过程中起重要作用,O-2A谱系与脑内脂质代谢以及神经髓鞘发生内在机制密切相关.     

少突胶质细胞的研究进展

少突胶质细胞几乎不含神经细丝和糖原颗粒,但含有大量的微管。他们的突起和分支均较少。其主要功能是参与形成和维持髓鞘,其细胞有髓磷脂组成,含20％脂质和80％的蛋白质。中枢神经系统的髓鞘主要由它形成,它是除神经元和星型胶质细胞之外大脑中第三种重要的细胞类型。少突胶质细胞将突起发出至神经轴突,将他们与周围的细胞质隔绝,对神经冲动传导速度有重要影响。通过少突胶质细胞的研究对解决中枢神经系统脱髓鞘疾病厌神经干细胞移植、神经损伤后修复均具有重要临床意义。     

氯化锂-匹罗卡品致痫幼鼠成年后少突胶质细胞转录因子Olig2在脑白质区的表达

目的探讨氯化锂-匹罗卡品（lithium-pilocarpine,LI-PILO）点燃幼鼠癫痫持续状态（status epilepticus,SE）,成年后发展为自发反复性癫痫发作（spontaneous recurrent epileptic seizure,SRS）的大鼠脑内转录因子Olig2的表达。方法采用氯化锂-匹罗卡品腹腔注射诱导幼鼠SE模型,应用多道生理信号采集处理系统检测大鼠脑电图（electroencephalogram,EEG）痫样活动波和Nissl染色方法观察神经元鉴定,证实SRS模型大鼠诱导成功;应用免疫组织化学染色技术观察少突胶质细胞（oligodendrocyte,OL）转录因子Olig2变化。结果 SRS模型组脑电图与正常对照组相比,可见频发尖波、棘-慢、尖-慢综合波;海马CA1、CA3和齿状回区Nissl染色显示神经元数目减少,部分细胞变性和坏死。SRS模型组在胼胝体与扣带回区域内Olig2的免疫组织化学染色细胞数量明显减少,与正常对照组相比有显著差异。结论氯化锂-匹罗卡品致痫幼鼠,成年后仍伴有慢性自发反复性癫痫发作的脑内少突胶质细胞转录因子Olig2的表达明显降低。     

人发角蛋白对脊髓损伤大鼠少突胶质细胞增殖分化效应的影响

目的 探讨体内可降解生物材料人发角蛋白(HHK)植入急性冲击性损伤脊髓后，对神经再生过程中少突胶质细胞增殖分化效应的影响。方法 采用改制Ⅱ型NYU装置，在建立大鼠急性冲击性脊髓损伤模型基础上，将经过特殊处理后能在体内降解的HHK植入大鼠脊髓损伤部位，对植入后1、4、12、26周损伤脊髓组织进行光学和电镜结构观察。结果 第1周时，损伤部位可见少突胶质细胞散在分布于大量浸润的炎症细胞中；第4周时，通过Mallory's磷乌酸苏木素染色，显示HHK周边呈层包绕的增生少突胶质细胞；第12和26周主要为神经再生和髓鞘重建过程。重建中的少突胶质细胞髓鞘内出现较大的空腔，髓鞘层状分离，并形成大小不一的髓鞘小体。重建髓鞘周边可见新生的少突胶质细胞。结论 在急性冲击性脊髓损伤后神经再生过程中，HHK对少突胶质细胞的增殖分化及髓鞘再生修复有积极作用。为进一步综合研究HHK对脊髓损伤修复的作用提供了实验依据。     

星形胶质细胞在脊髓损伤修复中的作用

中枢神经系统损伤后的修复一直是科研人员和临床工作者关注的重点.虽然关于中枢神经系统损伤修复的研究已经很多,比如嗅鞘细胞、神经干细胞移植以及各种细胞因子等在损伤修复方面的积极作用[1-4],但目前在该领域的研究却没有实质性进展.星形胶质细胞(astrocyte,AST)是神经系统中数目众多的细胞之一,以往认为它仅是被动的辅助角色,只是起支持、提供营养及协助代谢等作用,而且胶质细胞过度增生形成的胶质瘢痕对哺乳动物神经系统损伤后轴突再生起障碍作用.     

体外少突胶质细胞培养的新方法

目的 探讨小鼠鼠婴大脑皮质体外少突胶质细胞培养的新方法。方法 取C57/BL6新生小鼠P0~P2（出生后0~2天）的大脑皮质,accummax室温消化10min,然后用含10%FBS的DMEM/F-12高糖培养基体外培养,培养至第7天时,运用巴氏管吹打,从混合培养的细胞中分离纯化少突胶质前体细胞,然后加入促分化培养基促使少突胶质前体细胞分化发育成熟,行细胞免疫荧光进行鉴定。结果 少突胶质前体细胞纯度较高,达到93.3%左右。加入促分化培养基后,少突胶质前体细胞可快速分化发育成熟。结论 该体外少突胶质细胞培养方法较简单,细胞纯度及产量高,对临床脱髓鞘疾病的研究具有很大的应用价值。     

少突胶质细胞分化的分子机理研究进展

少突胶质细胞(OL)为神经元的轴突提供髓鞘,起着支持、绝缘和营养作用,对维持电脉冲的快速和准确传递以及神经系统功能完整性十分重要。在不明原因作用下,髓鞘退化甚至消失,可引起一系列神经系统相关疾病。中枢神经系统内存在少突胶质前体细胞(OPC),具有分化成熟、再生髓鞘和修复缺损的潜力。最近的研究显示,OPC分化成熟的调控多采用逐渐解除抑制的方式使分化成熟相关基因表达而启动细胞分化与成熟。因此,了解OPC分化的分子机制,对于研究调控的关键环节或人工调控位点具有重要的理论和实际应用价值。     

OLIG2和GFAP在少突胶质细胞肿瘤诊断中的意义

目的:研究OLIG2和GFAP在少突胶质细胞肿瘤组织病理学诊断中的作用.方法:应用免疫组织化学方法检测28例少突胶质细胞肿瘤、9例星形细胞瘤的OLIG2和GFAP表达情况.结果:免疫组织化学示:少突胶质细胞肿瘤细胞100%阳性;星形细胞瘤细胞56%OLIG2阳性;星形细胞瘤100%GFAP阳性,少突胶质细胞肿瘤中的少突胶质细胞瘤成份46%呈散在和灶状GFAP阳性.结论:OLIG2不是少突胶质系细胞的特异抗体.OLIG2与GFAP联合使用对少突胶质细胞肿瘤的诊断有一定价值.     

新生大鼠视神经少突胶质细胞原代培养及鉴定

目的：探讨视神经少突胶质细胞的分离方法和体外培养条件，为研究视神经损伤修复及少突胶质细胞相关课题研究奠定基础。方法：新生大鼠视神经取材，以DMEM／F12为基础的化学限定性培养基进行组织块培养，并用少突胶质细胞特异性标记物GC鉴定细胞。结果：培养第3天，视神经周围出现少突胶质细胞生长，呈圆形或梭形，10d左右基本铺满盖玻片。免疫细胞化学检测该细胞为阳性细胞，纯度较高。结论：采用视神经组织并用化学限定性培养基能成功获取体外培养的少突胶质细胞、较传统方法有获得细胞量大、纯度高、操作简便易行等特点。     

Olig1转录因子在大鼠脊髓发育过程中的表达

目的:检测Olig1转录因子在大鼠脊髓发育过程中的表达情况。方法:选取胚胎14.5 d、18.5 d和出生后当天、出生后3 d、7 d、2周、4周及成年的大鼠脊髓,采用免疫荧光法和RT-PCR检测Olig1在脊髓的表达。结果:从胚胎14.5 d到成年大鼠的脊髓中Olig1均有表达。结论:Olig1在少突胶质细胞不同发育时期均有表达。     

体外高苯丙氨酸作用下少突胶质细胞Nogo A蛋白及mRNA的检测

目的了解高苯丙氨酸(Phe)对中枢神经系统少突胶质细胞(OLG)Nogo A表达的影响。方法采用水平摇床和差数贴壁方法获取OLG前体细胞,并在化学限定液中培养诱导成OLG。用细胞免疫荧光和免疫组化方法进行OLG的鉴定和Nogo A蛋白的定位。体外模拟高Phe(0.9μmol/L)环境,实时荧光定量PCR和Western blot方法分别检测高Phe作用0(对照组)、12、24和48 h的OLG Nogo A mRNA和蛋白的表达情况。结果高Phe作用12、24和48 h的OLG Nogo A mRNA与alpha-tubolin(DM1A)的相对Ct值无明显改变,其相对表达量轻度上升,分别为0.98、1.09和1.20。高Phe作用12、24和48 h的OLG Nogo A蛋白的相对表达量与对照组相比明显增加,分别为对照组的1.5、5.3和6.7倍。结论高Phe作用下,OLG产生的轴突生长抑制因子Nogo A表达增加,可能为高Phe导致脑损伤的机制之一。     

髓鞘少突胶质细胞糖蛋白在多发性硬化中的作用

多发性硬化（multiple sclerosis,MS）的发病机制至今没有完全阐明,但随着研究的深入,髓鞘少突胶质细胞糖蛋白（myelin oligodendrocyte glycoprotein,MOG）在MS发病过程中的作用越来越受到关注。国外对于MOG的研究已经取得了一定的成果,国内在这方面的研究起步虽晚,但也同样有了一定的发展。文中综述了近年来国内外关于MOG与MS关系的研究进展。     

流式细胞术分选在细胞膜表达Nogo-A的少突胶质细胞

目的：探讨成熟少突胶质细胞在细胞膜上是否有Nogo-A的表达及其比例，并收集该类活细胞。方法：不使用破膜剂，间接荧光标记细胞膜表达Nogo-A的成熟少突胶质细胞，采用流式细胞术分选被染色的阳性细胞。结果：经流式细胞术获得了细胞膜表达Nogo-A的成熟少突胶质细胞，比例为3．36％。结论：使用流式细胞技术，发现部分成熟少突胶质细胞在细胞膜表面有Nogo-A表达，其比例为3．36％。     

少突胶质细胞前体细胞移植治疗中枢神经系统脱髓鞘疾病的研究进展

脱髓鞘疾病是一类以髓鞘脱失为主要特征的神经系统疾病.脱髓鞘疾病可严重影响患者生活质量,并且目前鲜有令人满意的治疗方法.少突胶质细胞前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)是存在于中枢神经系统(central nervous system,CNS)中,具有迁移、增殖及分化为成熟少突胶质细胞(oligodendrocytes,OLs)能力的前体细胞.OLs是CNS中的成髓鞘细胞,因此OPCs与CNS中髓鞘的发生和损伤后再生都密切相关.近些年对OPCs发育和分化分子基础研究的深入直接推动了利用多能干细胞定向分化以及体细胞谱系重编程等手段获得OPCs的进步,使OPCs移植成为可能治疗CNS脱髓鞘疾病的新方法.本文对近些年的相关研究进行了综述.     

少突胶质谱系细胞易损性的研究

目的:研究TNF-α对O-2A祖细胞、原少突胶质细胞、少突胶质细胞(oligodendrocytes,OL)这三个不同发育阶段少突胶质谱系细胞的易损性。方法:采用TNF-α分别刺激这三个不同发育阶段的细胞,MTT法检测存活率,免疫细胞化学检测活化的caspase-3。结果:O-2A祖细胞与OL相比存活率明显降低,原少突胶质细胞与OL相比存活率也降低;50ng/mlTNF-α刺激少突胶质谱系细胞48h以内,O-2A祖细胞的存活率与原少突胶质细胞、OL的存活率相比差异无统计学意义,而原少突胶质细胞的存活率与OL存活率相比较明显降低;caspase-3免疫细胞化学染色显示在这些细胞的胞浆和胞核有大量阳性信号。结论:TNF-α降低少突胶质谱系细胞的存活率具有细胞成熟程度的依赖性;caspase-3参与TNF-α诱导的3个不同发育阶段的OL的凋亡。     

少突胶质细胞相关神经抑制因子

不同于周围神经系统,成年哺乳动物中枢神经系统损伤后,神经的再生能力极为有限。大量研究表明,中枢神经再生困难并不是因为神经元本身特性决定的,而主要是中枢神经损伤后其轴突微环境中的抑制因子不利于神经再生,其中一类重要的抑制因子就是少突胶质细胞产生的髓鞘相关抑制因子(MAIFs),包括髓鞘相关糖蛋白