记忆网络中的N-甲基-D-天冬氨酸受体

N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体属谷氨酸离子型受体,其与突触的可塑性和学习记忆密切相关。中枢神经系统中与学习记忆相关的,如以胆碱受体、谷氨酸受体、腺苷A1受体等为代表的诸多受体及递质,以谷氨酸(Glu)/GABA为代表的氨基酸能神经通路,以长时程增强(LTP)等为代表的脑内神经电活动,以脑源性神经营养因子(BDNF)等为代表的基因蛋白遗传信息改变,甚至许多神经退行性疾病中Glu的神经毒性,等等,都与NMDA受体相关,通过NMDA受体功能的改变调控学习记忆功能,进而对整个中枢神经系统产生影响。换句话说,如果把学习记忆的信息传递系统看做一个庞大的信息网络,那么NMDA受体就是学习记忆相关神经网络中一个相对中心的关键位点。因此,以探讨NMDA受体在学习记忆错综复杂网络中的关联为切入点,以微观深入研究为基础、以宏观视野分析为引领,全方位评价NMDA受体在学习记忆网络中的作用,或许可以引领未来脑功能及相关疾病系统的研究。     

NMDA受体及其拮抗剂的研究进展

N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体是一种离子型谷氨酸受体,在中枢神经系统兴奋性的突触传递、可塑性和兴奋毒性中起着关键作用,与机体的记忆、学习和情绪密切相关.本文从结构分布和生理活性这两方面详细总结了N-甲基-D-天冬氨酸受体各亚型的特点,介绍并汇总了目前研究较多的N-甲基-D-天冬氨酸受体拮抗剂,为N-甲基-D-天...     

二苯乙烯苷对慢性脑缺血大鼠学习记忆的影响

目的观察何首乌有效成分二苯乙烯苷(TSG)对慢性脑缺血大鼠学习记忆能力的影响,并探讨其可能机制。方法雄性SD大鼠双侧颈总动脉永久性结扎制备慢性脑缺血致痴呆模型。术前2周起,分别给TSG30,60及120mg·kg-1·d-1,ig,连续11周。术后8周时,分别用Morris水迷宫实验和避暗实验检测大鼠的空间学习记忆能力和被动回避学习记忆能力。术后9周时,采用生化方法检测海马乙酰胆碱酯酶(AChE)活性,免疫组化方法检测海马蛋白磷酸酶2A(PP-2A)和微管相关蛋白2(MAP-2)的表达。结果慢性脑缺血模型组大鼠空间和被动回避学习记忆能力明显降低,海马AChE活性显著升高,PP-2A和MAP-2表达明显减少。TSG给药10周可显著改善慢性脑缺血引起的学习记忆能力降低;给药11周明显抑制海马AChE活性增高,并增加PP-2A和MAP-2的表达。结论TSG可改善慢性脑缺血大鼠的学习记忆能力,其机制可能与抑制海马AChE活性,增加海马PP-2A和MAP-2的表达有关。     

沙土鼠15min前脑缺血再灌注后对慢性期学习记忆功能的评价

目的探讨沙土鼠15min前脑缺血再灌注后慢性期认知障碍及组织形态学改变。方法采用双侧颈总动脉结扎法制作15min前脑缺血再灌注模型,利用“Y”字穿梭箱观察缺血4周后的记忆能力（长期记忆）及再学习能力（短期记忆）,同时对脑组织进行组织学观察。结果15min前脑缺血沙土鼠,慢性期出现明显的学习记忆功能障碍,并观察到包括整个海马及躯体感觉皮层区域在内的神经细胞损伤。结论沙土鼠15min脑缺血可造成严重的组织学损害并导致慢性期学习记忆障碍。这种模型将有助于血管性痴呆症的研究。     

二苯乙烯苷对脑缺血啮齿动物脑NMDA受体及细胞内钙离子的影响

目的　研究二苯乙烯苷对脑缺血再灌注啮齿动物脑组织N 甲基 D 天 (门 )冬氨酸 (NMDA)受体结合力的影响 ,同时观察二苯乙烯苷对神经细胞内钙离子浓度的影响 ,初步探讨二苯乙烯苷对缺血再灌注动物的脑保护作用的机制。方法　麻醉后夹闭沙土鼠和小鼠双侧颈总动脉 10min后 ,小心撤去动脉夹制作缺血再灌注动物模型 :(1)沙土鼠再灌注 7d后处死 ,取前脑进行NMDA受体结合力实验 ;(2 )小鼠再灌注 15min后迅速断头取脑 ,切成脑片 ,加入Fluo 3/AM负载后 ,在激光扫描共聚焦显微镜上进行光切 ,观察不同层面皮层和海马区细胞内游离钙的荧光强度。结果　模型组的NMDA受体结合力比假手术组明显升高 ,而二苯乙烯苷治疗组可以降低模型动物的NMDA受体结合力 ;脑片的光切结果显示 ,脑缺血再灌注模型组神经细胞内游离钙离子浓度比假手术组明显升高 ;与模型组相比 ,二苯乙烯苷治疗组的细胞内游离钙离子浓度降低。结论　二苯乙烯苷能够抑制啮齿动物脑缺血再灌注所导致的脑组织NMDA受体结合力及神经细胞内钙离子浓度的升高 ,减轻钙超载导致的脑组织损伤 ,可能具有脑保护作用     

何首乌提取物二苯乙烯苷对东莨菪碱致学习记忆障碍模型小鼠的影响

目的观察何首乌提取物二苯乙烯苷(TSG)对东莨菪碱致学习记忆障碍模型小鼠的影响。方法将小鼠随机分为空白对照组、模型组、TSG组(低、高剂量组)和阳性对照组(吡拉西坦),分别灌胃给药,之后造模并进行Morris水迷宫测试和避暗测试。结果与模型组小鼠比较,在Morris水迷宫测试中,空白对照组、阳性对照组及TSG高剂量组小鼠搜索时间及搜索距离均明显缩短(P<005);在避暗测试中,TSG组小鼠受电击次数明显减少(P<005),潜伏期延长。结论何首乌提取物TSG对东莨菪碱所致小鼠学习记忆障碍具有一定的改善作用。     

脑缺血再灌注损伤大鼠大脑皮质NR2A及NR2B受体表达变化

目的探讨N-甲基-D-天冬氨酸受体亚单位NR2A/2B表达与缺血再灌注损伤的关系。方法建立局灶性大脑中动脉阻塞大鼠模型观察缺血2 h再灌6～96 h的组织病理学改变,实时荧光定量PCR及Western印迹法测定大脑皮质NR2A/2B mRNA及蛋白表达。结果大鼠缺血再灌注后6 h,皮质开始出现明显病理学改变,12 h可见血管内有淤血,24 h梗死区锥体细胞出现严重的核固缩、核溶解,几乎看不到正常神经元,48 h出现大面积角质化,96 h可见炎症细胞浸润。与假手术组相比,再灌组NR2A/2B mRNA于再灌注6 h即开始一直持续明显下降(P<0.01),再灌12和24 hNR2A/2B mRNA比值均为1∶2,偏离正常的1∶1,48 h两者的表达开始上调,至96 h NR2A/2B mRNA比值达到1∶1;再灌24 h后NR2A蛋白表达显著降低(P<0.05);NR2B蛋白于再灌6 h开始明显降低,一直持续到24 h(P<0.01),48 h开始上调,96 h后蛋白表达接近假手术组水平。结论缺血2 h再灌注24 h后神经元损伤最严重,并与NR2A/2B表达改变存在时间一致性和受体亚型选择性。     

盐酸戊乙奎醚对沙土鼠前脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:研究盐酸戊乙奎醚(PHC)对沙土鼠前脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法:采用沙土鼠双侧颈总动脉阻断模型,观察PHC对沙土鼠前脑缺血再灌注后卒中症状、病理形态的影响,并测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量。结果:与模型组比较,PHC 0.08、0.24 mg.kg-1组与阿托品组均明显降低动物缺血再灌注6 h卒中指数,同时PHC可使大脑皮质及海马组织中SOD活性明显升高、MDA含量明显降低。PHC可以减轻再灌注3 d后海马神经元锥体细胞损伤程度。结论:PHC对沙土鼠前脑缺血再灌注损伤具有保护作用。     

二苯乙烯苷（TSG）对D-半乳糖致脑老化小鼠学习记忆及神经营养因子的影响

目的：观察TSG对D-半乳糖致脑老化模型小鼠学习记忆及脑内神经营养因子表达的影响。方法：将雌性小鼠随机分为正常对照、D-半乳糖模型、VitE阳性对照、TSG小剂量（0．033g／kg）、TSG中剂量（0．1g／kg）、TSG大剂量（0．3g／kg）6个组，采用灌胃给药途径给药60天；用D-半乳糖生理盐水溶液每日颈后皮下注射50mg／kg（60天）造模；进行Morris水迷宫测试后取材，用免疫组化及western blotting方法检测TSG对神经营养因子神经生长因子（Nervegrowth factor，NGF）和Neurotrophin（NT-3）的影响。结果：与对照组相比，模型组小鼠学习记忆能力明显降低，海马CAl区NGF和NT-3阳性细胞数目、面积和灰度均明显减少，western blotting结果显示模型组皮层NGF和NT-3条带明显变细；     

NMDA受体2A亚基磷酸化对幼鼠肝缺血再灌注后脑损伤及远期认知功能障碍的影响

目的 评价肝缺血再灌注 （HIR） 对幼鼠海马以及远期认知功能的影响, 并探讨N-甲基-D-天冬氨酸受体 2A亚基 （NR2A） 磷酸化在其中发挥的作用。方法 健康C57小鼠54只, 2周龄, 体质量6～9 g, 采用随机数字表法分为3组 （n=18）： 假手术组 （S）、 HIR组 （I） 和NR2A抑制剂NVP-AAM077处理组 （N）。建立70% HIR模型, N组于术后连续3 d每天予NVP-AAM077 （10 mg/kg） 腹腔注射。S组和I组以相同方式腹腔注射等体积生理盐水。每组随机取 10只小鼠于术后3 d处死, 分离血清并取脑组织, 酶联免疫吸附测定 （ELISA） 检测血清脑损伤标志物S100β和神经元特异性烯醇化酶 （NSE） 水平, HE染色观察海马组织病理改变, Western blot检测cleaved caspase-3、 NR2A、 p-NR2A Y1325蛋白水平。其余小鼠于术后30 d进行Morris水迷宫实验, 评价远期认知功能。结果 与S组比较, I组与N组血清S100β和NSE水平明显升高, 海马组织水肿, 细胞排列紊乱, cleaved caspase-3、 p-NR2A Y1325蛋白水平升高, 平台所在象限滞留时间缩短 （P＜0.05）; 与I组比较, N组血清S100β和NSE水平降低, 海马神经元病理损伤减轻, cleaved caspase-3、 p-NR2A Y1325蛋白水平下降, 平台所在象限滞留时间明显延长 （P＜0.05）。3组之间NR2A表达水平、 逃逸潜伏期差异无统计学意义 （P＞0.05）。结论 幼鼠HIR可导致脑损伤和远期认知功能障碍, 其机制可能与 NR2A Y1325过度磷酸化介导的兴奋性毒性和细胞凋亡有关。     

类叶升麻苷对东莨菪碱所致记忆获得性障碍的改善作用

目的　观察类叶升麻苷对小鼠学习记忆能力的影响。方法　用东莨菪碱致小鼠记忆获得性障碍模型 ,以行为学实验 (跳台法、水迷路法 )、大脑皮层和纹状体乙酰胆碱酯酶活性和M受体的最大结合力为指标观察类叶升麻苷的作用。结果　在东莨菪碱致小鼠记忆障碍模型中 ,类叶升麻苷可延长跳台实验的平台停留期 ,并显著减少错误次数 ;在水迷路实验中可提高正确反应百分率 ;并能拮抗东莨菪碱所引起的大脑皮层乙酰胆碱酯酶的增高及皮层、纹状体M受体最大结合力的降低。结论　类叶升麻苷对东莨菪碱所引起的小鼠学习记忆能力障碍有改善作用 ,其作用机制可能与抑制乙酰胆碱酯酶活性和激动M受体的作用有关     

Effects of putative cognition enhancers on the NMDA receptor by [3H]MK801 binding

Piracetam, aniracetam, and d-cycloserine were tested for their ability to reduce inhibition of [³H]MK801 (dizocilpine) binding by 100 μM kynurenate. Piracetam (100 μM-1 mM) failed to reduce inhibition by kynurenate but stimulated [³H]MK801 binding in the absence of kynurenate. In contrast, d-cycloserine (30 μM-1 mM) and aniracetam markedly reduced this inhibition by kynurenate. Thus, cognition enhancers might function via at least some subtypes of NMDA receptors.     

七氟醚预处理对局灶性脑缺血/再灌注后早期大鼠空间学习与记忆能力的影响

目的观察七氟醚预处理对局灶性脑缺血/再灌注后大鼠空间学习与记忆能力的影响。方法♂SD大鼠24只,随机分成假手术(C)组、缺血/再灌注组(I/R)和七氟醚预处理组(S),每组8只。采用线栓法行大脑中动脉阻断前脑血供1 h,拔出栓线实现再灌注。七氟醚预处理组术前吸入七氟醚1 h(呼气末浓度维持在1.0 MAC)。再灌注72 h后利用Morris水迷宫测量术后大鼠空间学习与记忆的能力,用HE染色法测定大鼠海马CA1区锥体细胞数目的变化。结果七氟醚预处理组大鼠逃避潜伏期明显短于缺血/再灌注组(P<0.05),在记忆保留实验中七氟醚预处理组大鼠穿越平台次数和平台所在象限探索时间明显多于缺血/再灌注组(P<0.05),海马CA1区的锥体细胞数目七氟醚预处理组也明显多于缺血/再灌注组(P<0.05)。结论1.0 MAC七氟醚预处理1 h可能通过保护CA1区锥体细胞,对局灶性缺血/再灌注大鼠的空间学习与记忆有明显的改善作用。     

Differential binding properties of [3H]dextrorphan and [3H]MK-801 in heterologously expressed NMDA receptors

The N-methyl-D-aspartate receptor (NMDAR) antagonists: MK-801, phencyclidine and ketamine are open-channel blockers with limited clinical value due to psychotomimetic effects. Similarly, the psychotomimetic effects of the dextrorotatory opioids, dextromethorphan and its metabolite dextrorphan, derive from their NMDAR antagonist actions. Differences in the use dependency of blockade, however, suggest that the binding sites for MK-801 and dextrorphan are distinct. In the absence of exogenous glutamate and glycine, the rate of association of [3H]MK-801 with wild-type NR1-1a/NR2A receptors was considerably slower than that for [3H]dextrorphan. Glutamate individually, and in the presence of the co-agonist glycine, had substantial effects on the specific binding of [3H]MK-801, while the binding of [3H]dextrorphan was not affected. Mutation of residues N616 and A627 in the NR1 subunit had a profound effect on [3H]MK-801 binding affinity, while that of [3H]dextrorphan was unaltered. In contrast, NR1 residues, W611 and N812, were critical for specific binding of [3H]dextrorphan to NR1-1a/NR2A complexes with no corresponding influence on that of [3H]MK-801. Thus, [3H]dextrorphan and [3H]MK-801 have distinct molecular determinants for high-affinity binding. The ability of [3H]dextrorphan to bind to a closed channel, moreover, indicates that its recognition site is shallower in the ion channel domain than that of MK-801 and may be associated with the extracellular vestibule of the NMDAR.     

真武汤对帕金森病模型大鼠学习记忆能力的影响

目的研究真武汤对MPTP致帕金森病（PD）模型大鼠学习记忆能力的影响。方法 SD大鼠分为假手术组、模型组、美多芭组和真武汤低、中、高剂量组,采用脑内黑质部位定向注射MPTP的方法造模,用跳台实验和Y迷宫实验评价大鼠的学习记忆能力,用高效液相色谱法分别检测模型鼠大脑皮质和海马内的多巴胺（DA）、二羟基苯乙酸（DOPAC）、5-羟色胺（5-HT）、5-吲哚乙酸（5-HIAA）和高香草酸（HVA）的含量。结果真武汤明显延长PD大鼠跳台实验的错误潜伏期,显著减少错误次数,并提高PD大鼠在Y迷宫中的自主选择正确率,且有一定的剂量依赖关系。给予真武汤后模型鼠大脑皮质内DA、DOPAC、5-HT、5-HIAA和HVA的含量明显升高,但海马内各递质含量未见显著变化。结论真武汤改善PD大鼠的学习记忆障碍作用与保护脑内多巴胺能神经系统有关。     

小鼠暂时性脑缺血引起学习记忆障碍模型的制备及人参皂甙的保护作用

人参皂甙是人参的主要有效成分。本文在建立小鼠脑缺血再灌注导致学习记忆障碍模型的基础上，用跳台、避暗两种实验方法观察了人参皂甙对小鼠脑缺血再灌注后学习记忆功能的保护作用。结果显示小鼠脑缺血再灌注可以导致学习记忆障碍，而人参皂甙（１０，１００ｍｇ·ｋｇ－１，ｐｏ）可以对这种记忆障碍起到保护作用。     

The relationship between hippocampal ultrastructure and learning and memory ability in aging rats

Objective： Behavioristics studies the complex response of an organism to environmental stimuli, received by the sensory organs and processed by the central nervous system, a response manifested as movements, actions, and emotions. In basic research, an accurate and objective evaluation of behavior in experimental animals, their learning and memory ability in particular, has become indispensable to the study of higher cerebral functions in neurobiology,     

赤芍总苷对小鼠学习记忆能力的改善作用

目的　观察赤芍总苷对小鼠学习记忆能力的影响。方法　选用东莨菪碱所致小鼠记忆获得 ,环己酰亚胺所致记忆巩固 ,乙醇所致记忆再现障碍模型及戊巴比妥钠所致空间分辨障碍模型。结果　赤芍总苷显著减少上述记忆障碍小鼠受刺激时间 ,延长平台停留期 ,减少错误次数 ,并调节反应潜伏期 ;对空间分辨障碍小鼠 ,赤芍总苷具有一定增加达岸成功率 ,减少错误次数及缩短达岸时间的作用。结论　赤芍总苷对药物所致小鼠学习记忆障碍有明显的改善作用     

七氟醚麻醉对新生鼠学习与记忆的影响

目的 探索用七氟醚麻醉发育期小鼠是否会引起成长过程中学习记忆障碍。 方法 实验包括122只新生鼠(出生后7 d)。其中72只分别经七氟醚1.0或0.5最低肺泡有效浓度(minimum alveolar concentration,MAC)麻醉或吸入40% O₂ 2 h,4周或12周行水迷宫实验,记录训练各天潜伏期和游泳速度,以及探索期平台滞留时间和平台穿越次数。另外50只小鼠用于测定七氟醚麻醉(1.0或0.5 MAC)过程(0、1、2 h)中动脉血血气分析。 结果 新生鼠在整个麻醉过程中,pH值、PaCO₂、PaO₂和SaO₂均保持稳定,P>0.05。麻醉后4周,训练期后3 d,对照组小鼠潜伏期明显低于麻醉组,且后2 d,0.5 MAC组小鼠的潜伏期明显短于1.0 MAC组。探索期,对照组小鼠平台停留时间和平台穿越次数均明显高于2组麻醉组。麻醉后12周,1.0 MAC组小鼠在训练第5天潜伏期仍明显延长。探索期,对照组小鼠平台停留时间和(或)平台穿越次数均明显高于麻醉组。 结论 七氟醚麻醉引起新生鼠成长过程中学习与记忆障碍,其程度与药物浓度有关,且随时间推移减弱。     

Studies on the binding of [3H]flumazenil and [3H]sarmazenil in post-mortem human brain

Two benzodiazepine analogues, [³H]flumazenil and [³H]sarmazenil, were used to study the GABA_A/benzodiazepine receptor complex in human post-mortem brain using in vitro receptor assays on homogenates and whole hemisphere autoradiography. Both radioligands bound in a saturable manner to single binding sites in the tissue preparations from any brain region. The highest levels of binding were found in the cortical regions and in cortex cerebelli. Both [³H]flumazenil and [³H]sarmazenil were excellent radioligands for autoradiography with high binding in cerebral and cerebellar cortex with no or very low binding in areas with white matter. The addition of a high concentration of flumazenil or clonazepam did not inhibit the binding of [³H]sarmazenil to granule cells in the cerebellum while the binding of [³H]flumazenil was abolished completely in all regions. The results show that with the two different radioligands, one an antagonist and one a partial inverse agonist, the binding pattern to GABA_A/benzodiazepine receptor complex is approximately similar in most brain regions. The additional binding seen in the cerebellum with [³H]sarmazenil is suggested to be due to binding to an α₆-containing complex.