羟基喜树碱诱导人胰腺癌细胞SW-1990的凋亡

 目的:研究羟基喜树碱体外诱人胰腺癌细胞株SW-1990凋亡的作用.方法:以不同浓度的羟基喜树碱处理在体外培养的胰腺细胞,以电子显微镜、流式细胞仪和原位末端标记分析和检测细胞凋亡.结果:在0.05mg/ml浓度下,羟基喜树碱作用于体外培养的胰腺癌细胞20小时后,肿瘤细胞的凋亡率在13.2%- 15.3%之间,主要以早、中期的表现为主:在0.lmg/ml浓度下,作用20小时后,凋亡率在26.l%-30.4%之间,凋亡形态学表现主要以晚期为主.结论:羟基喜树碱可作为细胞凋亡诱导剂用于胰腺癌治疗.     

TDT法分析羟基喜树碱对人大肠癌细胞凋亡的影响

目的：近年来羟基喜树碱被用地治疗进展期大肠癌，且被认为与５－Ｆｕ无交叉耐药性。本文采用ＴＤＴ法检测羟基喜树碱对大肠肿瘤细胞的凋亡率。并与５－Ｆｕ对比，旨在进一步在喜树碱对人大肠肿瘤细胞的影响。材料与方法：３６例大肠癌标本，无菌情况下取约０．５ｇ组织，获取单个肿瘤细胞分别加入羟基喜树碱，丹参，５－Ｆｕ，羟基喜树碱＋丹参，１５小时手采用ＴＤＴ法进行凋亡细胞检测。３６例中男性１７例，女性１９例。Ｄｕｋｅ     

羟基喜树碱诱导肿瘤细胞凋亡的研究进展

早在三十多年前，取自我国特有植物的喜树碱类物质（camptothecins）就表现出良好的抗瘤活性，在生物碱中令人瞩目。80年代，拓扑异构酶被确认为该类药物作用的独特靶点，再次引起了学者们对该类药物的关注。随着对喜树碱类药物的不断深入研究，证明羟基喜树碱（HCPT）是所有天然喜树碱同类物或合成喜树碱中活性最大的天然衍生物，其对肠癌、卵巢癌、肺癌等恶性肿瘤显示了令人鼓舞的治疗效果，成为抗癌药物中的一支生力军。作为常用的细胞凋亡剂，羟基喜树碱被广泛用于恶性肿瘤细胞凋亡的研究。本文就该研究作一综述，以了解目前进展，指导临床工作。     

羟基喜树碱诱导人肺癌细胞SPC-A-1的凋亡

目的 研究羟基喜树碱体外诱导人肺癌细胞株ＳＰＣ－１凋亡的作用。方法 以不同浓度的羟基喜树碱处理在体外培养的肺癌细胞,以电子显微镜、流式细胞液和原位末端标记分析来检测细胞凋亡。结果 在０．０５mg/ml浓度下羟基喜树碱作用于体外培养的肺癌细胞２０h后,肿瘤细胞的凋亡率在８．７％～１０．４％之间,主要以早、中期的表现为主;在０．１mg/ml浓度下,作用２０h后,凋亡率为１８．６％,凋亡形态学表现主要以晚期为主。结     

羟基喜树碱诱导HL-60细胞凋亡的研究

目的 :探讨国产羟基喜树碱 (HCPT)对 HL - 6 0细胞的作用机制和规律。方法 :应用细胞形态学检查 ,DNA凝胶电泳及流式细胞仪分析检测。结果 :HCPT 1mg/ L和 5 mg/ L作为 HL - 6 0细胞 4h细胞凋亡率分别为 5 0 .6 %和 6 8.6 %。光镜检查见细胞核固缩、碎裂 ;电镜检查见染色质向核周边凝集。 DNA电泳显示典型的梯状条带。当 HCPT浓度超过 5 mg/ L或作用超过 4h,细胞凋亡率无明显增加 ,出现饱和现象。HL - 6 0细胞经 HCPT作用后 ,S期细胞显著减少 ,G0 / G1 期细胞增加。结论 :HCPT诱导 HL - 6 0细胞出现凋亡并具有饱和效应 ,HCPT为 S期特异性药物。临床上 HCPT应与细胞周期非特异性药物联合用药。     

羟基喜树碱促进胃癌细胞凋亡的临床研究

羟基喜树碱（Ｈｙｄｒｏｘｙｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎ,ＨＣＰＴ）是喜树碱经结构改造后的半成品,化学结构与喜树碱（Ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎｅ,ＣＰＴ）相似,仅第十位碳原子上的氢为羟基所取代,但其毒副作用远低于ＣＰＴ。实验证明ＨＣＰＴ作用于瘤细胞分裂周期的Ｓ期,为细胞周期特异性药物。由于发现喜树碱类是目前唯一抑制拓扑异构酶Ｉ（ＴｏｐｏＩ）的药物,重新引起人们对此类药物研究的重视。我们应用ＨＣＰＴ治疗进展期胃癌取得了较好的疗效,并采用末端酶标记法（ＴＵＮＥＬ）检测了ＨＣＰＴ对胃癌细胞凋亡的影响。１　材料…     

羟基喜树碱和奥沙利铂联合应用对大肠癌细胞凋亡的影响

目的：探讨羟基喜树碱（Hydmxycampothcin，HCPT）、奥沙利铂（Oxaliplatin，L—OHP）两药联合对人大肠癌细胞株的作用机制方法：建立人大肠癌裸鼠实验动物模型，腹腔内注入HCPT、L—OHP及HCPT＋L—OHP后，观察细胞凋亡形态．流式细胞仪分析细胞凋亡比率及细胞周期的变化。结果：HCPT组和HCPT＋L—OHP组肿瘤结节较用药前及对照组明显缩小并均以细胞凋亡为主，HCPT＋L—OHP组细胞凋亡率明显高于HCPT组和对照组（P〈0．05），L—OHP组主要表现为细胞坏死HCPT组及HCPT＋L—OHP组阻滞细胞周期于S期，而HCPT＋L—OHP对S期的阻滞作用明显高于其他各组结论：HCPT＋L—OHP对大肠癌细胞株有较好的抑制作用，其作用机理有可能是通过L—OHP加强HCPT诱导大肠细胞凋亡发挥抗肿瘤作用．并主要作用于细胞周期的S期，使S期细胞减少。     

羟基喜树碱诱导HL—60细胞凋亡的研究

目的：探讨国产羟基树碱（ＨＣＰＴ）对ＨＬ－６０细胞的作用机制和规律。方法：应用细胞形态学检查，ＤＮＡ凝胶电泳及流式细胞仪分析检测。结果：ＨＣＰＴ１ｍｇ／Ｌ和５ｍｇ／Ｌ作为ＨＬ－６０细胞４ｈ细胞凋亡率分别为５０．６％和６８．６％。光镜检查见细胞核固缩、碎裂；电镜检查见染色质向核周边凝集。ＤＮＡ电泳显示典型的梯状条带。当ＨＣＰＴ浓度超过５ｍｇ／Ｌ或作用超过４ｈ，细胞凋亡率无明显增加，出现饱和现象。ＨＬ     

羟基喜树碱对喉鳞癌细胞株抑制作用的研究

背景与目的：羟基喜树碱（hydroxycamptothecin,HCPT)具有较广的抗瘤谱,对多种肿瘤细胞株及移植瘤有较高的抑制率,目前尚未见HCPT在喉鳞癌治疗中的研究报告。本研究拟探讨开环和闭环HCPT对喉鳞癌细胞株（Hep-2细胞株）的抑制作用及其作用机理。方法：采用MTT法FCM检测开环或闭环HCPT对Hep-2细胞株的体外细胞毒作用及对细胞周期的影响;观察HCPT对Hep-2细胞裸鼠移植瘤生长的影响,计算肿瘤保增时间和抑癌率。结果：开环或闭环HCPT对Hep-2细胞的生长抑制作用均呈浓度依赖性。其IC50分别为0．69和0．48μmol/L,高浓度的HCPT阻滞细胞周期于S期,然后诱导细胞凋亡;低浓度的HCPT轻微阻滞细胞周期于G2＋M期。与对照组比较,10mg/kg开环HCPT组裸鼠移植瘤生长减慢,肿瘤倍增时间延长,两组间肿瘤体积存在显著性差异（P＜0．001）,其抑瘤率达77．0％,10mg/kg闭环HCPT组则因毒性大导致裸鼠死亡。结论：开环和闭环HCPT对喉鳞癌细胞具有明显的细胞毒作用,其机理与阻断细胞周期于S期以及诱导细胞凋亡有关,开环HCPT毒副作用较小,而闭环HCPT具有严重的毒副作用。     

羟基喜树碱联合草酸铂方案对人大肠癌细胞作用的研究

目的探讨羟基喜树碱(hydroxycampothecin,HCPT)、草酸铂(oxaliplatin,L-OHP)以及两药联合对人大肠癌细胞株的作用机制.方法建立人大肠癌裸鼠实验动物模型,腹腔内注入HCPT、L-OHP及HCPT L-OHP后光镜、电镜观察细胞凋亡形态,流式细胞仪分析细胞凋亡比率的变化,免疫组织化学检测p53、Fas-L的表达.结果HCPT组和HCPT L-OHP组肿瘤结节较用药前及对照组明显缩小.HCPT组和HCPT L-OHP组均以细胞凋亡为主,HCPT L-OHP组细胞凋亡率明显高于单药HCPT组和对照组(P ＜0.05),L-OHP组主要表现为细胞坏死.L-OHP HCPT组与对照组相比突变型p53表达明显下降,而Fas-L的表达明显增高(P＜0.05).结论HCPT L-OHP对大肠癌细胞株有较好的疗效,其作用机制有可能是通过L-OHP加强HCPT诱导大肠细胞凋亡发挥抗肿瘤作用,凋亡的调控可能与p53、Fas-L基因有关.     

siRNA沉默S100P基因对胰腺癌细胞的生长抑制作用

[目的]探讨小干扰RNA（siRNA）沉默S100P基因后对胰腺癌SW1990细胞株生长的影响。[方法]化学合成针对S100P基因的siRNA,用脂质体转染试剂将siRNA体外转染至人胰腺癌SW1990细胞中,48h后收集细胞,分别提取细胞总RNA和蛋白。用实时定量RT-PCR测定S100P基因mRNA水平的表达;免疫印迹测定S100P蛋白的表达;MTT法测定细胞的生长曲线。[结果]转染siRNA后,S100P基因在mRNA水平上表达减少了77%,蛋白表达降低了74%,均显著性低于对照组。siRNA-S100P明显抑制细胞生长。[结论]应用RNAi技术沉默S100P基因可以降低人胰腺癌SW1990细胞株中S100P表达,抑制细胞生长。     

奥曲肽对人胃癌细胞SGC7901生长及凋亡作用的研究

[目的]研究生长抑素类似物奥曲肽(octreotide,OCT)对胃癌SGC7901细胞生长及凋亡的调控作用及其作用机制.[方法]用OCT作用于体外培养的人胃癌SGC7901细胞,应用MTT比色法分析细胞生长抑制作用,流式细胞仪测定细胞周期分布和凋亡率,光镜观察细胞形态等.[结果]OCT在(0.005～20.0)μg/ml浓度范围内呈剂量依赖方式抑制胃癌SGC7901细胞的生长增殖,OCT(O.25～5.0)μg/ml作用48h后,光镜可见SGC7901细胞呈典型的凋亡形态学改变;流式细胞仪检测出现凋亡峰,其测得的细胞凋亡率以及图像分析系统计算的细胞凋亡率与对照组相比均有显著性差异(P＜0.05).[结论]OCT对人胃癌细胞增殖具有抑制作用,其机制与诱导肿瘤细胞的凋亡有关.     

小白菊内酯及顺铂对人结肠癌细胞SW620凋亡和增殖的作用

[目的]探讨小白菊内酯及顺铂对人结肠癌细胞SW620增殖及凋亡的影响.[方法]不同浓度的小白菊内酯和顺铂分别处理SW620细胞,MTr法检测细胞增殖的变化情况,流式细胞仪检测细胞凋亡的情况.[结果]小白菊内酯和顺铂对SW620细胞增殖均具有抑制作用;分别作用48h后,小白菊内酯和顺铂对SW620细胞增殖的抑制作用呈浓度依赖性;5 μmol/L顺铂联合10μmol/L小白菊内酯作用SW620细胞时,对细胞增殖具有协同抑制作用.小白菊内酯和顺铂可以诱导SW620细胞凋亡.[结论]小白菊内酯和顺铂联用具有协同作用,能抑制SW620细胞增殖并诱导细胞凋亡.     

康莱特注射液对人胰腺癌细胞株PANC-1增殖和凋亡影响的实验研究

目的：通过康莱特注射液作用于人胰腺癌细胞株 PANC-1,观察其对 PANC-1细胞增殖和凋亡的影响,并进一步探讨其作用机制。方法倒置显微镜及电镜观察80μL·mL -1康莱特注射液作用 PANC-1细胞72 h 后细胞形态改变;采用 MTT 比色法检测不同浓度（10、20、40、60、80、100μL·mL -1）康莱特注射液对PANC-1细胞生长增殖抑制作用的影响;同时采用流式细胞术检测不同浓度（10、20、40、60、80、100μL·mL -1）康莱特注射液对 PANC-1细胞周期的影响。结果细胞形态学检查发现80μL·mL -1康莱特注射液处理 PANC-1细胞72 h 后细胞生长稀疏,细胞质透亮度下降,线粒体等细胞器功能障碍,细胞核功能上受到一定的抑制;不同浓度康莱特注射液作用于 PANC-1细胞株不同时段（24、48、72 h）后肿瘤细胞生长受到了一定的抑制且呈现时间和剂量依赖性;不同浓度康莱特注射液处理 PANC-1胰腺癌细胞72 h 后 PANC-1细胞周期均阻滞于 G2/ M 期,康莱特注射液可剂量依赖性的诱导 PANC-1细胞凋亡。结论康莱特注射液能够有效抑制人胰腺癌细胞株 PANC-1在体外的生长,其机制可能是通过抑制细胞增殖,促进肿瘤细胞的凋亡而实现,有望成为胰腺癌的有效治疗药物。     

重楼皂苷Ⅰ通过PI3K/Akt途径诱导胰腺癌PANC-1细胞凋亡的研究

[目的]评价重楼皂甙I对胰腺癌PANC-1细胞增殖和凋亡的影响。[方法]以体外培养的胰腺癌PANC-1细胞为研究对象。MTr法检测重楼皂甙I对PANC．1细胞增殖的抑制作用,Annexin．V—FITC／PI双染法检测细胞凋亡,WesternBlot法检测P13K、Akt、pAkt、Bax、Bcl-2、caspase-3蛋白表达改变。[结果]不同浓度重楼皂甙I能有效抑制PANC-1细胞的增殖,且呈时间浓度依赖性（P〈0．01）。低、中、高浓度重楼皂甙I作用PANC-1细胞24、d8h后,细胞凋亡率明显增加,与对照组相比,具有统计学差异（P〈0．01）。2μg／ml重楼皂甙I作用PANC．1细胞48h后,P13K、pAkt、Bcl．2蛋白表达降低．caspase-3、Bax蛋白表达增加,与对照组相比,具有统计学差异（P〈0．01）。[结论]重楼皂甙I能抑制胰腺癌PANC．1细胞的体外增殖,诱导细胞凋亡,机制可能与降低P13K、pAkt、Bcl-2蛋白表达,增加Bax及caspase-3蛋白表达有关。     

阿霉素对人乳腺癌细胞凋亡和增殖的影响

[目的]检测阿霉素(ADR)对体外人乳腺癌化疗敏感细胞(MCF-7/S)凋亡和增殖的影响,并探讨其可能的作用机理.[方法]应用MTT比色法检测ADR对体外培养的MCF-7/S细胞增殖抑制作用,应用流式细胞术检测ADR诱导乳腺癌细胞凋亡,采用免疫细胞化学法检测ADR作用前后去磷酸化Rb蛋白和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.[结果]ADR抑制MCF-7/S细胞增殖,呈剂量依赖性;ADR组MCF-7/S细胞的凋亡率、磷酸化Rb蛋白的表达量与对照组相比明显增高(P＜0.01);PCNA阳性表达率与对照组的相比明显降低(P＜0.01).在ADR组,MCF-7/S细胞的凋亡率(AR)与去磷酸化Rb蛋白的表达量呈正相关,与增殖细胞核抗原的阳性表达率呈负相关.[结论]ADR诱导MCF-7/S细胞凋亡并抑制MCF-7/S细胞增殖可能与其上调去磷酸化Rb蛋白和下调细胞内增殖细胞核抗原表达水平有关.     

TFPI-2基因对Panc-1细胞凋亡的影响

[目的]研究TFPI-2基因对胰腺癌细胞系Panc-1细胞增殖及凋亡的影响。[方法]测定Panc-1-TFPI-2、Panc-1-V和Panc-1-P三组细胞的生长曲线．DNA片段化实验检测细胞凋亡，并用流式细胞仪分析三组细胞的细胞增殖、细胞周期情况。[结果]Panc-1-TFPI-2细胞同Panc-1-V和Panc-1-P细胞相比，细胞生长缓慢，细胞生长受到抑制，被阻滞于G0～G1期；DNA片段化实验显示Panc-1-TFPI-2细胞呈现凋亡细胞特有的“梯状”条带．而Panc-1-V和Panc-1-P细胞无明显“梯状”条带：流式细胞仪分析显示早期Panc-1-TFPI-2细胞凋亡率（6．93％± 0．53％）较Panc-1-V（3．01％± 0．39％）和Panc-1-P细胞凋亡率（3．52％±0．41％）增加，有显著性差异（P〈0．05）。[结论]TFPI-2能够抑制胰腺癌细胞生长、诱导胰腺癌细胞凋亡．可能具有抑制肿瘤细胞增殖的作用。