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相似文献
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1.
叶晓芬 《贵阳医学院学报》1998,23(3):267-268,271
用聚合酶链反应(PCR)技术检测了39例新生儿黄疸患儿。结果13例外周血淋巴细胞检出疱疹病毒DNA,总检出率333%,其中巨细胞病毒(CMV)11例,Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSVⅡ)2例,检出率分别为282%(11/39)和51%(2/39),未检出Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSVⅠ)和EB病毒(EBV)DNA。提示新生儿黄疸与疱疹病毒感染有关  相似文献   

2.
用已构建的不同载体乙型肝炎。基因疫苗(PCR3.1-S,pcDNA3-S)和乙型肝炎C基因疫苗(PCR3.1-C0分别给Balb/c小鼠多点肌肉注射,2周后追加免疫一次,用ELISA法及MTTI地分别检测小鼠血清抗-HBs、抗-HBC抗体及地HBsAg或HBcAg的特异性增殖反应。结果:免疫接种2周后小鼠血清抗-HBS及抗-HBC抗体OD值分别为0.8373和0.7961均明显高于对照组(0.12  相似文献   

3.
将淋巴结病理组织提取DNA后,用Tg-DNAPCR药盒体外扩增弓形虫DNA。结果显示,120例淋巴结病理标本中,7例可检出210bp的扩增产物,其中3例HD(3/32),2例NHL(2/41),2例CL(2/47)。取PCR扩增产物进行Southern-blot杂交试验(PCR-SBH),发现除原有7例阳性外,CL患者中另1例阳性;总检出率为6.67%(8/120)。HD,NHL及CL的阳性率分别为9.38%,4.88%和6.38%。  相似文献   

4.
慢性乙型肝炎病人外周血单个核细胞HBV DNA的PCR检测   总被引:2,自引:0,他引:2  
①目的 探讨慢性乙型肝炎病人外周血单个核细胞(PBMC)乙型肝炎病毒(HBV)DNA和血清HBVDNA的感染情况及其临床意义。②方法 采用聚合酶链反应(PCR)技术对128例慢性乙型肝炎病人和20例健康人进行了PBMC及血清中HBVDNA检测。③结果 慢性乙型肝炎病人PBMC中HBV DNA的感染率为64.2%,和血清HBVDNA的感染率具有一致性倾向(X^2-0.63,P〉0.05),慢性肝病病  相似文献   

5.
选择疱疹病毒科病毒DNA多聚酶基因高保守区中的一对引物,一次PCR可同时扩增疱疹病毒科的4种病毒[单纯疱疹病毒I型(HSV1)、单纯疱疹病毒I型(HSV2)、EB病毒(EBV)、及巨细胞病毒(CMV)]相应的DNA片段。根据扩增产物分子的大小及对扩增产物酶切分析,可将标本中的4种病毒准确分型。用该法检测临床疑为病毒脑炎患者和其他中枢神经系统疾病患者(对照组)的脑脊液(CSF),脑炎组CSF阳性率30%(9/30),对照组CSF阳性率6.7%(2/30);其中8例为HSV1阳性,2例为CMV阳性,1例为HSV2阳性。2例病毒脑炎患者经用无环鸟苷抗病毒治疗7~10d后其CSF中的HSV1DNA由阳转阴。由此说明PCR法不仅可早期诊断疱疹病毒性脑炎,还可显示抗病毒药物的疗效。  相似文献   

6.
应用聚合酶链反应(PCR)及其扩增产物的直接测序技术对2.2.15细胞中乙型肝炎病毒(HBV)基因前C和C区进行测序。结果表明,根据ayw亚型HBV基因设计的引物能够扩增2.2.15细胞中HBVDNA扩增产物位于221-298碱基对之间,而对adr亚型HBVDNA无扩增作用,说明PCR扩增是特异性的,所测到的132个碱基序列与awy1亚型HBVDNA完全符合,提示2.2.15细胞中HBVDNA属a  相似文献   

7.
沈阳地区乙型肝炎病毒DNA前C区变异研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
丁虹  刘沛 《中国医科大学学报》1996,25(5):505-507,510
用限制性酶切片段长度多态性分析对沈阳地区70例血清经巢式聚合酶链反应扩增HBV DNA阳性的乙型肝炎患者的C基因前C区1896位点进行分析。结果:(1)急性乙型肝有C区变异检出率为4%(1/20),慢性迁延肝炎为25%(5/20),慢性活动性肝炎为38%(5/13),肝硬化为33%(4/12);(2)ALT升高组中,HBeAg及抗HBe均阴性患者和HBeAg阴性,抗HBe阳性患者HBV DNA前C  相似文献   

8.
采用聚合酶链反应(PCR)结合地高辛素标记的乙肝病毒DNA探针(HBVDNA-Dig)杂交技术检测了49份乙型肝炎患者的肝组织标本和46份血清标本中的HBVDNA。结果表明:PCR检出乙肝病人肝组织和血清中HBVDNA阳性率比斑点杂交高(P<0.05)。在21例同时检测了肝组织和血清中HBVDNA的病人中,肝组织HBVDNA阳性率为57.1%(12/21);血清阳性率为61.3%(13/21);两者总阳性率为80.9%(17/21),说明用PCR同时检测肝组织和血中HBVDNA,可明显提高HBVDNA的检出率。  相似文献   

9.
目的 研究乙型肝炎病毒(HBV)前S1/S2基因变异规律及其与HBV感染临床转归的关系。方法 选择急性自限性乙型肝炎患者,慢性HBV携带者及慢性重型乙型肝炎患者各3例,用半巢式PCR法从此9例HBV感染者血清中扩增出前S1/S2片段,并用标准分子生物学方法对PCR产物进行克隆和序列分析.每个感染者随机选择10个克隆,总共测定了90个克隆。通过核苷酸、氨基酸序列同源性比较分析前S1/S2区内肝细胞结  相似文献   

10.
用RT-PCR的方法从非甲、乙、丙、丁、戊型肝炎病人血清中检测到一株庚型肝炎病毒(GBV-C/HGV)。其中扩增NS3区基因采用56例循环周期减温PCR方法;扩增NS5区基因采用35个循环周期的正常PCR方法。并对其PCR产物进行了克隆测序。在NS3区,样品与GBV-C和HGV的核苷酸序列同源性分别为84.2%和89.9%;而在NS5区样品与HBV-V和HGV的核苷酸同源性分别为94.9%和98.  相似文献   

11.
建立一种敏感,特异和精确的乙型肝炎病毒(HBV)基因PCR及其产物的酶联杂交定量分析技术。方法:(1)常规PCR法扩增HBV DNA质粒和血清HBV DNA,引物(SP1,SP2)为一对HBV DNA S区基因特异引物,扩增片段长319bp,SP2的5′端用生物素修饰。扩增条件经过严格优化组合,以最大限度减少非特异片段,包括引物二聚体产生。设定5个不同梯度的HBV DNA外参照管,制作标准曲线。(  相似文献   

12.
本文报道HBV基因扩增产物的限制性酶切分析和寡核苷酸探针杂交鉴定、应用血清HBVDNA的PCR扩增产物制备基因探针和单项抗HBc阳性血清的HBV基因扩增。PCR用adr、adw、ayw3种亚型HBV的C基因区共有序列为内外两对引物分单次或套式扩增,产物为66abp或428bp,两者序列中段共含-BgIⅡ酶切点并与一寡核苷酸探针同源。428bp产物被用以缺口平移标记32P探针作斑点和转印杂交检测。结合分子杂交的PCR结果从单项抗HBc阳性的8/42例慢性肝炎和2/12例无症状受测者血清中检出HBVDNA,证实病毒低度复制和传染性。  相似文献   

13.
为探讨婴儿肝炎综合征(NHS)与疱疹病毒(HSV)感染的关系。在疱疹病毒高度同源序列DNA聚合酶基因中设计一对引物,能对HSV—Ⅰ、HSV—Ⅱ、EBV和CMV四种疱疹病毒DNA进行扩增,继而用凝胶电泳和限制性内切酶BamHⅠ或SmaⅠ酶切分析扩增产物进行鉴别,建立了能一次性分型检测上述四种病毒的PCR—酶谱法。灵敏度可测到1fgDNA,且该引物仅对四种疱疹病毒扩增。用建立的PCR—酶谱法检测30例NHS的患儿尿中CMV、HSV—Ⅰ、HSV—Ⅱ、EBV阳性率分别为66.67%、30%、3.33%、6.67%。12例同日龄肺炎治愈新生儿CMV阳性检出率为16.7%,与NHS的CMV感染率差异显著,P<0.05。而HSV—Ⅰ、HSV—Ⅱ、EBV的感染率在NHS与正常儿无明显差异。提示:NHS与CMV感染有关,与HSV—Ⅰ、HSV—Ⅱ、EBV感染关系不大  相似文献   

14.
乙型肝炎病毒前C区基因变异的研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
作者应用聚合酶链反应(PCR)检测e系统阳性的慢件乙型肝炎(乙肝)患者血清乙肝病毒(HBV)DNA,筛选出乙肝e抗原(HBeAg)阳性/乙肝e抗体(抗—HBe)阴性和HBeAg阴性/抗—HBe阳性各20份PCR阳性血清,分别用人工合成的HBV前C区基因寡核苷酸探针M0(无突变),M1(1点突变),M2(2点突变)进行斑点杂交,结果发现HBeAg阴性/抗—HBe附性慢性乙肝患含有17例(占85%)在1896位核苷酸发生点突变,形成终止密码,其中10例(占50%)发生2点突变。选突变PCR产物直接测序,同样证实点突变的存在。提示乙肝患含HBeAg阳性自然转换为抗—HBe阳性、并不一定是病毒复制减弱,而可能足HBVDNA前C区发生了基因变异。  相似文献   

15.
HBV感染者外周血单个核细胞中HBV DNA的检测   总被引:5,自引:0,他引:5  
目的;研究乙型肝炎毒(HBV)感染者外周血单个核细胞(PBMCs)中HBV DNA的存在及其与血清HBV DNA的关系。方法:用PCR法及斑点杂交法对50例HBsAg(+)的感染者PBMCs HBV DNA进行检测。同时用PCR法检测感染者血清HBV DNA。结果:PCR法和斑点杂交法分别从35份和32份PCMCs检出率均为60.0%左右。PCR法检测血清HBV DNA阳性率为36.0%。结论:H  相似文献   

16.
慢性乙型肝炎患者HBV前C区基因突变与临床的关系   总被引:4,自引:0,他引:4  
目的:探讨慢性乙型肝炎患者HBV前C区基因变异与临床的关系。方法:应用3′-碱基特异性PCR法(3′-BS-PCR)。结果:55例HBVDNA阳性慢性乙型肝炎患者中检出突变株25例。突变株的检出主要集中在抗-HBe阳性患者中,并随肝损害加重而增加,重型肝炎患者突变株检出率最高。HBV、HCV重叠感染者高于HBV单纯感染者。结论:突变株感染者病情较重,预后差;抗-HBe的出现并不完全意味着病情的缓解;HCV的重叠感染可能是导致HBV前C区基因突变的原因之一。  相似文献   

17.
【目的】 探讨BCP、PreC和C区基因突变率及突变热点与HBV母婴传播免疫失败的关系。【方法】 选取血清HBsAg阳性且HBV DNA定量>1000U/mL的孕妇,以所分娩的新生儿是否发生免疫失败和孕妇血清HBV DNA定量水平将孕妇分为免疫失败组(19例)和对照1组(免疫成功且HBV-DNA定量≥1.0 × 107 U/mL,48例)、对照2组(免疫成功且HBV-DNA定量<1.0 × 107 U/mL,38例)。对3组孕妇血中HBV进行BCP/PreC/C区基因PCR扩增和测序,比较3组的突变率和突变位点的不同。【结果】免疫失败组与对照1组间HBVDNA定量相比,差异无统计学意义(P > 0.05),但均大于对照2组(P < 0.05);BCP、PreC、C区基因突变率,免疫失败组与对照1组间相比,差异无统计学意义(P> 0.05),但均低于对照2组(P < 0.05)。突变热点ntA1762T、ntG1764A、ntG1896A在3组中的发生率差异无统计学意义(P > 0.05)。【结论】BCP/PreC/C区基因突变率与HBV DNA定量有关,但未见其与HBV母婴传播免疫失败有明显相关性;也未见tA1762T、ntG1764A、ntG1896A等突变热点与免疫失败的相关性。  相似文献   

18.
用地高辛标记的HBV基因组探针检测了66例肝细胞性肝癌(HCC)中HBV的存在状态,从中筛选出32例仅有HBVDNA整合的HCC作为研究对象,进一步检测了HBVX基因、S基因、Pre-S、C基因DNA片段的整合情况,并探讨了HBV4种基因亚片段整合与ras、myc癌基因表达的关系。结果显示,HBVX、S、Pre-S和C基因片段的整合率分别为87.5%(28/32)、62.5%(20/32)、62.5%(20/32)和25.0%(8/32)。p21ras、p62myc在HCC中的表达率分别为50.0%(20/40)、81.2%(26/32)。通过对HCC中4种HBV基因片段整合与p21ras、p62myc表达之间关系的研究,显示p62myc的表达与HBVX、Pre-S基因整合关系密切,p21ras的表达则主要与HBVX基因整合有关(P<0.05)。提示HBVX、Pre-SDNA片段在宿主细胞染色体上的整合可能直接或通过其蛋白启动myc和(或)ras癌基因的表达。  相似文献   

19.
王爱莲  周永兴 《医学争鸣》1993,14(6):414-417
作应用聚合酶链反应检测了89例慢性乙型肝炎e系统阳性患血清乙型肝炎病毒DNA,其中44例ELISA法HBeAg阳性,PCR法HBVDNA检出率为88.10%;47例抗-HBe阳性,PCR法HBVDNA检出率为65.96%,应用高特异,高录敏的PCR法检测e系统阳性患血清HBVDNA提示既往认为HBeAg阳性转为抗-HBe阳性做为病毒复制减弱或消失,病情缓解的指标是不确切的,而情缓解的指标  相似文献   

20.
HBV前C区1896位点变异与HBV感染者肝功能损害程度的关系   总被引:9,自引:3,他引:6  
了解HBV前C区1896位点变异与乙型肝炎病毒感染者肝功能损害程度的关系。方法:用PCR技术,通过改变引物3’端的方法,检测HBV感染者的前C区第1896位点变异株。结果:105例HEV感染者中的HBV前C区1896位点变异株总检出率为56.2%;男性与女性患者的检出率分别为57.0%与500%;≤30岁组,31-59岁组,≥60岁年龄组的检率分别为60.0%,56.6%,28.6%;无黄疸组,轻~中度黄疸组,重度黄疸组的检出率分别为53.2%,65.1%,40.0%;在HBV携带者、慢性肝炎(包括轻、中、重庆),重症肝炎及肝硬化患者中的检出率分别为60.0%,57.4%,33.3%,70.0%。结论:HBV前C区1896位点突变株广泛存在于HBV感染者中,而且其检出率与患者性别、年龄、HBV感染时间长短及肝功能损害程度并无明显联系。  相似文献   

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