核酶在肿瘤基因治疗中应用的研究进展

核酶是一类具有催化活性的小分子RNA，它能够特异性的与靶RNA分子结合后进行切割，从而能抑制目的基因的表达。设计合适的核酶分子能够阻断癌基因的异常表达，逆转肿瘤细胞MDR，促进肿瘤细胞凋亡，有望成为肿瘤基因治疗的有效手段之一。     

核酶在肿瘤基因治疗中的研究进展

核酶是一类具有酶活性的RNA分子，它可以序列特异性地定点切割靶RNA，从而阻断有害基因的表达。作为一种新的基因治疗手段，核酶技术近年来发展迅速，在基因调控、抗病毒复制和灭活癌基因方面有很大的应用潜力。本文就核酶在肿瘤的基因治疗方面的应用作一介绍。     

核酶在肿瘤基因治疗中的研究进展

核酶是一类具有酶活性的RNA分子，它可以序列特异性地定点切割靶RNA，从而阻断有害基因的表达。作为一种新的基因治疗手段，核酶技术近年来发展迅速，在基因调控、抗病毒复制和灭活癌基因方面有很大的应用潜力。本文就核酶在肿瘤的基因治疗方面的应用作一介绍。     

核酶在肿瘤基因治疗中的应用

核酶(ribozyme)又叫做催化RNA,“ribo”说明其本质是一类RNA,而“zyme'则强调其具有酶样的催化功能。核酶种类繁多,包括Ⅰ,Ⅱ类内含子,锤头、发夹核酶等。天然类型核酶一般只顺式作用于分子本身,不可用来切割底物,只有将其顺式变为反式才能用于切割靶RNA。核酶与底物RNA结合后行使其切割功能,可以帮助人们了解特定基因的转录、复制、转录后加工、表达及其功能等,并可用于降解特定的mRNA,控制多种病毒感染以及用于癌症的治疗。核酶要经合适的途径进入体内才能发挥作用,核酶可以和合成及天然药物一样直接进入机体、细胞内发挥其治疗作用,也可以将核酶的基因采取适当的途径导入活细胞中,使其高效表达。核酶发现后人们一直从事其抗肿瘤作用的研究,本文从逆转肿瘤细胞的多重耐药性(MDR)、抑制癌基因mRNA、抑制PDGF产生和治疗慢性粒细胞白血病等方面综述核酶在肿瘤基因治疗方面的应用。     

核酶抗肿瘤的基因治疗研究进展

核酶是一类具有生物催化活性的ＲＮＡ分子。它能够定点切割ｍＲＮＡ靶分子,从而有效阻断基因表达。因此,核酶不但是研究肿瘤发病机制的有用工具,它在抗肿瘤增殖、转移、多药耐药的基因治疗中也具有潜在的应用价值。     

肿瘤基因治疗的研究进展

目的:综述分析国内外肿瘤基因治疗研究现状的文献,为基础与临床研究提供研究方向、思路和资料。方法:应用MEDLINE、CA、CBMdisc、CMCC、CJFD和CSTPCD等数据检索系统及数据库,以"肿瘤基因治疗"等为关键词,检索1998-01～2007-06与肿瘤基因治疗相关的文献。纳入标准:1)肿瘤基因治疗的动物及临床试验研究,包括方法、效果及进展;2)肿瘤基因治疗与其他生物疗法疗效、不良反应及优缺点的比较。根据纳入标准,粗选143篇文献,最后17篇文献纳入综述分析。结果:基因治疗作为肿瘤治疗的新手段是随着DNA重组技术的成熟而发展起来的,是以改变遗传物质为基础的生物医疗技术,它通过将正常基因或有治疗作用的基因导入靶细胞来纠正突变或有缺陷的基因,以达治疗目的。基因沉默疗法、自杀基因疗法、免疫基因疗法、基因替代疗法、反义基因疗法、多药耐药相关基因治疗、抗肿瘤新生血管治疗和抗端粒酶治疗等均取得显著进展。结论:不同的肿瘤基因治疗方法各有利弊,随着治疗方法与病毒载体的不断改造和完善,基因的转移率、靶向性与安全性不断提高。     

核酶—慢性髓细胞白血病基因治疗新方法

核酶是具有酶催化活性的ＲＮＡ分子可以特异性地结合和切割靶序列抑制基因表达。目前利用核酶慢性髓细胞白血病才刚刚起步，研究发展与反义核酸相比具有高效性，稳定性等特点。本文概述了核酶对ＣＭＬ细胞抑制作用的研究进展和应用前景。     

siRNA为基础的RNAi在肿瘤基因治疗中的应用进展

几乎所有的人类肿瘤都存在多基因损伤,药物治疗很难只作用于癌基因本身,而不影响相对应的未发生突变的原癌基因及其相关因子。最近发现的RNA干扰和小干扰RNA（small interfering RNA,siR-NA）在哺乳动物细胞中的应用,为肿瘤特异性治疗途径提供了新的工具。因其具有高度特异性和高效性,siRNA可能成为基因治疗的新型抗肿瘤药。总结siRNA在肿瘤中的研究成果,包括在细胞培养和动物模型对癌基因的抑制作用、有效的siRNA传递系统的开发及其治疗潜能发展的研究。     

核酶技术的研究进展

核酶是一类具有酶活性剂ＲＮＡ分子，可序列特异性定点切割靶ＲＮＡ，从而在发子水平和细胞水平真正实现对失控基因或有害其因表达的粗效阻断，本文对目前发现的几种核酶，特别是锤头状核酶及发夹状核酶的研究进展进行了简要介绍。     

抑制VEGF表达的锤头状核酶系统

目的:建立和评估抑制血管内皮生长因子(VEGF)表达的锤头状核酶(hammerhead ribozyme)技术系统.方法:对VEGF121基因RNA序列进行二级结构分析,选择靶点;设计并构建针对VEGF的分泌肽RNA的可表达锤头状核酶(14)载体系统和VEGF-荧光色素酶融合基因报告质粒;通过试管内切割实验等方法评估核酶对于试管内转录得到的VEGF RNA切割特异性和效率;通过瞬时共转染实验和稳定转染实验评估核酶在细胞内对于VEGF RNA的切割效率.结果:设计和构建了对VEGF RNA二级结构水平上的暴露区( 8, 36和 71位点:核酶1,3和4)和非暴露区( 17位点:核酶2)4个锤头状核酶(14)的两套质粒;试管内切割检测表明,针对 8, 36和 71位点的核酶(1,3和4)可以有效地在试管内对VEGFRNA进行特异性切割,使其水平分别降至对照的61.7%,27.6%和44.8%(荧光色素酶活性)或66.3%,27.0%和30.0%(蛋白质水平);将核酶表达质粒与VEGF-LUC模板质粒瞬时共转染人SMMC-7721肝癌细胞,核酶1,3和4 VEGF-LUC水平分别降低到对照的81.4%,56.6%和69.1%;稳定表达针对VEGF的核酶1,3或4的SMMC-7721细胞株中,内源性VEGF RNA的水平降至对照水平的5%以下.对照未转染的、转染空载体的和转染了核酶2( 17)的SMMC-7721细胞.结论:分别针对VEGF 8, 36和 71位点锤头状核酶可有效地抑制VEGF的RNA水平.     

Abrogation Of Tumor Vasculature Using Gene Therapy

Anti-angiogenic gene therapy may be rational approach in the treatment of solid tumors. The current state of gene therapy with regard to the abrogation of tumor vasculature is reviewed in this article and the different administration vehicles are noted. Furthermore, this article discusses the influence of vascular support cells in the tumor vasculature and choice of pre-clinical model for anti-angiogenic cancer gene therapy.     

自杀基因治疗乳腺癌的研究进展

自杀基因疗法是近年乳腺癌基因治疗研究的热点之一。这类基因所编码的酶能将无细胞毒性或低细胞毒性的前体药转化成细胞毒性代谢产物 ,经靶向性转导或靶向性转录 ,选择性地杀伤肿瘤细胞。简要介绍该疗法的机理以及基因治疗载体、靶向性治疗和联合基因治疗的新进展     

Multi-Unit Anti-BCR-ABL Ribozyme Therapy in Chronic Myelogenous Leukemia

In this review, we summarize and update our data on the development of a multi-unit anti-BCR/ABL ribozyme. In vitro studies comparing several anti-BCR/ABL ribozymes demonstrated that a tripleunit ribozyme is the most efficient. Detailed kinetic analysis revealed this ribozyme to have a lower K_cat, most likely due to non homologous bases at restriction enzyme sites used in ribozyme construction. Delivery of this ribozyme to a BCR/ABL transformed cell line by a novel vehicle targeting the folate receptor resulted in a 3 log reduction in BCR/ABL mRNA when analyzed by RT-PCR. This delivery strategy reversed the IL-3 independence of this cell line. Retroviral vectors containing genes coding for the multi-unit ribozyme have been constructed and their use to effect BCR/ABL transformed cell biology is discussed.     

抗bcl-2核酶在HL-60细胞内的表达

设计并合成针对bcl-2 mRNA的“锤头型”(hammerhead)核酶基因,克隆后经测序表明序列正确。bcl-2和RZ基因经体外转录和切割实验后,表现出很强的切割活性,然后把RZ基因定向克隆于真核表达载体pDOR-neo,重组体被命名为pDOR-RZ。通过脂质体(lipofectin)介导的DNA转染法,成功地把pDOR-RZ导入HL-60细胞。用Southern印迹杂交、RNA斑点杂交和流式细胞仪(FCM),观察RZ基因在HL-60细胞内的表达。结果表明:(1)RZ在转染HL-60细胞后72小时得以表达;(2)由于RZ的表达,细胞内Bcl-2蛋白合成受到抑制;(3)在FCM图谱上可见到明显的凋亡峰。     

肿瘤血管生成与抗血管生成基因治疗

肿瘤血管生成是肿瘤生长浸润转移的关键步骤,其形成主要是促血管生成因子和抑制因子作用失衡的结果。以肿瘤血管生成为靶点的抗血管生成治疗作为肿瘤治疗新视野,已发展为重要的抗肿瘤策略。基因治疗则使抗血管生成治疗更具有靶向性,使这一治疗策略产生新的飞跃。本文就该领域研究情况作一综述。     

癌基因CD_(44)及抑癌基因p16在头颈部肿瘤中的表达及意义

综述癌基因CD4 4 和抑癌基因p16在头颈部肿瘤中的最新研究进展。主要内容包括CD4 4 和p16的研究现状 ,CD4 4 高表达可增加头颈部肿瘤颈淋巴结转移的危险性 ;而p16高表达则降低其淋巴结的转移。研究显示 ,CD4 4 及p16基因检测很有可能在临床应用价值方面具有广阔的发展前景。     

靶向FGFR的肿瘤治疗新进展

成纤维细胞生长因子受体(FGFR)信号的异常在多种肿瘤中被发现,FGFR信号的异常参与了肿瘤发生的多项进程,包括细胞存活、增殖、炎性反应、迁移、血管生成、上皮间质转化及耐药.故FGFR是治疗肿瘤有应用前景的靶点,越来越多的FGFR抑制剂进入临床前研究及临床研究阶段,部分FGFR抑制剂已被批准应用于临床.但是获得性耐药及...     

三氧化二砷抗肿瘤作用研究进展

三氧化二砷治疗急性早幼粒白血病疗效肯定 ,但对其他血液肿瘤及实体瘤的治疗作用及抗肿瘤作用机理仍末明确。综述国内、外有关研究 ,探索其治疗作用及抗肿瘤机制 ,为开辟三氧化二砷新的治疗作用提供参考。     

细胞因子基因治疗肿瘤的研究

本文就细胞因子基因治疗恶性肿瘤的某些进展进行了综述，指出细胞因子基因治疗是有前景的治疗方法。