正常人垂体滤泡星状细胞对S-100蛋白和GFAP的免疫组织化学

本文应用S-100蛋白(S-100)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经特异性烯醇酶(NSE)、细胞角蛋白(CK)4种抗体,对63例正常人垂体进行了免疫组织化学研究。结果表明:垂体前叶内散在有S-100和GFAP阳性的滤泡星状细胞(FSC),双重染色证明。FSC可以分为3种:S-100阳性的FSC、GFAP阳性的FSC,S-100和GFAP皆为阳性的FSC。CK和NSE染色FSC均为阴性。垂体前叶内的内分泌细胞(EC)绝大多数显示CK阳性,也有少量散在的EC显示NSE阳性。上述研究结果有力地证明了FSC来源于神经外胚层,从而否认其来源于Rathke囊上皮的观点。     

S100 PROTEIN-POSITIVE DENDRITIC CELLS AND THE SIGNIFICANCE OF THEIR DENSITY IN GASTRIC PRECANCEROUS LESIONS

Quantitative analysis of dendritic cells (DC's) was carried out in tissue specimens of normalgastric mucosa (n=15),gastric ulcer (n=19),chronic atrophic gastritis (n=28),and gastriccarcinoma (n=65) by ABC immunostaining with S100 protein antibody.Significant increasein DC number were observed in chronic atrophic gastritis with type Ⅲ intestinal metaplasiaand/or grade Ⅱ,Ⅲ dysplasia.The result suggests that DC's are potentially capable opresenting neoantigens associated with malignant transformation at the precancerous stagewhen malignant morphological changes have not yet taken place.Combined with routinediagnostic methods,the serial monitoring of DC density in gastric mucosa may be usefulin the follow-up of premalignant lesions in the stomach and the diagnosis of early gastriccarcinoma.     

大鼠脾悬液和原位树状突细胞的免疫组化观察

采用 ABC 免疫酶标技术,观察了大鼠脾悬液和原位树状突细胞的 S-100蛋白免疫反应性。结果表明,脾悬液标本中的淋巴树状突细胞(LDC)和脾石蜡切片标本中的交错突细胞(IDC)、滤泡树状突细胞(FDC)均为显示棕黄色反应的 S-100蛋白阳性细胞。结合扫描电镜和透射电镜观察的结果,支持了 LDC 在体内的等同细胞是 IDC 的观点。     

人类胚胎胸腺细胞凋亡的定量研究

用５３例人类胚胎胸腺标本对胸腺细胞在发育过程中的凋亡现象进行了定量研究。结果显示，８周时开始出现胸腺细胞，１１周时腺实质开始区分出皮质和髓质。此后，皮质内正常胸腺细胞的量始终明显多于髓质，而凋亡胸腺细胞的量却明显少于髓质。不同发育阶段的胸腺细胞凋亡率，在皮质变化较小，波动于１．４％～４．７％之间；在髓质则变化较大，波动于６．５％～７４％之间，其峰值出现于１７～２２周。表明胸腺细胞的凋亡主要发生在髓质，而且具有明显的阶段性。     

人胎儿脾脏T细胞表型分析

本文研究了人胎儿脾脏T细胞的表型,结果显示:(1)胎儿脾脏T细胞比例偏低,TCRαβ+T细胞占CD 3+T细胞的84.5％;(2)CD4/CD8比值和胎龄成正相关,这提示抑制性T细胞在自身耐受形成中可能具有重要意义;(3)胎儿脾细胞的74％表达CD38抗原。     

卵巢组织发生中间质细胞形态学观察

用光镜和透射电镜技术观察了12-38周胎儿卵巢组织发生中间质细胞的组织化学和超微结构的改变。在胚胎发育的第12周卵巢髓质近皮质区内已出现少量散在间质细胞,第15-16周间质细胞向皮质内侧份的生卵索周围延伸,数量渐增多,第19-30周数量减少,仅存在于皮质外侧份生卵索周围,第36周后少见。间质细胞同毛细血管具有密切关系。光镜下间质细胞体积较大,胞质着色淡,油红0方法显示质内含有较多的脂类内含物。电镜下间质细胞具有分泌类固醇激素细胞的超微结构特征,这表明它们可能在胚胎发育时期已具有分泌活动。本文就间质细胞细胞的发生来源及功能进行了初步探讨。     

六种皮肤病病灶中S100蛋白阳性细胞的观察

用抗S100蛋白抗血清对面部播散粟粒状狼疮、着色真菌病、疥疮、日光性皮炎、银屑病及扁平苔藓的病损行免疫组化染色。前4种病真皮淋巴细胞浸润灶中均可见较多的S100蛋白阳性细胞(+++、++++),而在浆细胞密集区阳性细胞则很少或没有。表明此种细胞与炎症发生有关,但无疾病特异性,与郎格罕氏细胞的抗原提呈作用相一致。     

红景天苷对人皮肤黑色素瘤细胞A375侵袭的影响

目的 探讨红景天苷对人皮肤黑色素瘤细胞A375侵袭的影响.方法 采用细胞培养技术培养的人皮肤黑色素瘤细胞A375,经不同浓度(0.01、0.10、1.00、10.00、100.00 μg/mL)红景天苷处理后,应用结晶紫染色法,检测人皮肤黑色素瘤细胞A375对基膜黏附的影响;应用transwell小室模型,观察人皮肤黑色素瘤细胞A375在药物影响下侵袭、迁移能力的改变;采用细胞黏附实验、重组基底膜侵袭实验、趋化性运动能力实验以及小鼠黑色素瘤自发性转移模型,观察红景天苷对B16-BL6细胞生长、黏附、侵袭、运动及转移能力的影响.结果 与对照组比较,红景天苷各浓度组能显著抑制黑色素瘤细胞与基膜的黏附,抑制其迁移和侵袭,差异显著,有统计学意义(P＜0.05),并且药物组之间随药物浓度的增高其抑制作用增强,组间差异显著,有统计学意义(P＜0.05).结论 红景天苷对人皮肤黑色素瘤细胞A375具有抑制侵袭的功效.     

胃癌中的内分泌细胞及临床病理学意义

本文应用胃泌素、血清素、生长抑素单克隆抗体对64例胃癌组织中的肿瘤内分泌细胞及多种多肽激素产物进行了组化染色。结果显示:21.88%(14/64)胃癌中含有内分泌细胞;其激素产物有血清素7例,生长抑素4例,胃泌素6例。其中含两种以上激素者2例。又对胃癌中内分泌细胞的临床病理学意义进行了探讨,发现胃癌中内分泌细胞的出现与分化程度有密切关系。认为胃癌中的不同类型癌细胞(内分泌型和非内分泌型)均起源于肿瘤多能于细胞,分化愈低者,愈倾向于多向分化。     

DHAQ对体外培养人肺腺癌、肝癌和胃癌细胞抗癌作用的研究

作者用我院合成的抗癌药DHAQ对体外培养的人肺腺癌、肝癌及胃癌细胞进行实验,结果表明DHAQ能直接杀伤和抑制这三种细胞的生长,可阻断其核分裂。     

冠状动脉粥样硬化不稳定斑块中肥大细胞分布与血管新生相关性研究

目的：探讨冠状动脉粥样硬化斑块不同区域肥大细胞的分布及与新生血管的关系。方法：将经苏木素一伊红染色筛选出的属于中晚期的动脉粥样硬化病变（脂质核心面积大于斑块面积的40％）的组织块和10例尸检正常冠状动脉标本进行抗肥大细胞类胰蛋白酶和CD31单克隆抗体免疫组化染色。结果：在正常内膜、斑块的纤维帽区、核心区、肩区肥大细胞密度（细胞如视野）和新生微血管密度（微血管杉视野）分别为1．2±1．7、2．6±2．1、3．1±2．4、7．2±3．9和0、2．8±1．6、3．6±1．8、8．3±2．6,斑块肩区肥大细胞密度（MCD）和新生微血管密度（MVD）明显高于其它部位（P〈0．05或P〈0．01）且二者存在明显的正相关（r=0．545;P〈0．05）。结论：冠状动脉粥样硬化斑块中肥大细胞的分布与新生微血管密度具有相关性且可能影响斑块的稳定性。     

牦牛胃肠胰(GEP)中高糖素免疫反应细胞的分布及形态学研究

牦牛GEP系统中,从十二指肠开始,高糖素免疫瓜细胞分布密度呈现上升趋势。但盲肠除外。空肠、回肠、直肠分布密度较高。肠中高糖素免疫反应细胞形态多为锥体形、长颈瓶形;其次为椭圆形和棱形。高糖素免疫反应细胞为棕黄色——棕灰色颗粒。颗粒多分布于核周围和基底部。小肠中高糖素免疫反应细胞多位于肠腺中,绒毛中较少。大肠中高糖素免疫反庆细胞多位于肠腺中部了上部。肠上皮中也有一定数量的高糖素免疫反应细胞存在。腺胰中高糖素免疫反应细胞多居于胰岛周边。其颗粒多为棕黄色。胰腺腺泡中,高糖素免疫反应细胞为数很少。     

蒙药复方菖蒲四味体外抑制人肝癌细胞活性的研究

目的：探索蒙药复方菖蒲四味两种提取物体外对人肝癌细胞（SMMC-7721）的生长影响。方法：体外培养条件下,分别用不同浓度的蒙药复方菖蒲四味乙醇和石油醚提取物处理人肝癌细胞（SMMC-7721）,采用噻唑蓝（MTT）法测定细胞的活性。结果：蒙药复方菖蒲四味的两种提取物对体外培养的SMMC-7721细胞在12.5～200μg/mL剂量内均具有剂量依赖性的抑制作用,与空白对照组比较,差异显著（P〈0.01）;阳性对照药环磷酰胺亦可显著地抑制SMMC-7721细胞的增殖。体外增殖抑制作用的强弱为石油醚提取物样品2〉乙醇提取物样品1。结论：两种提取物对SMMC-7721细胞具有明显的抑制作用,有进一步研究的潜在价值。     

当归补血汤对内皮细胞和骨髓造血细胞的增殖和分化作用

目的：探讨当归补血汤对内皮细胞及骨髓造血细胞的刺激增殖和诱导分化作用。方法：在培养的内皮细胞及骨髓造血细胞半固体和液体培养体系中加入不同浓度的当归补血汤，采用流式细胞术、双抗夹心法检测其对内皮细胞及骨髓造血细胞增殖的影响。结果：当归补血汤能够促进内皮细胞由G1期进入S期及细胞因子的分泌，但对BFU—E，CFU—E，CFU—GM和CFU—MK集落产率的提高及细胞表面表达CD13和CD71的细胞数量没有统计学上的意义。结论：在体外，当归补血汤能够促进内皮细胞的增殖及细胞因子的分泌，但未发现促进骨髓造血干细胞增殖与分化的作用。     

大鼠结肠粘膜EC细胞的定量研究

用免疫组织化学PAP法显示大鼠结肠粘膜EC细胞,并用Veibel体视学方法对该细胞进行定量分析。结果表明,大鼠结肠粘膜EC细胞的体密度(Vv)为:0.0029士0.0003,面数密度(NA)为22.85士1.1.20个/mm~2;数密度(Nv)为1629士100.43个/mm~3。     

早期培养人胎胸腺基质细胞的组织化学和免疫组织化学观察

１３例胸腺组织取自３．５至４个月新鲜死亡人胎，剪碎后种在培养瓶内。所用培养液为ＤＭＥ，另加５％胎牛血清、１０％新生牛血清及Ｄ－缬氨酸６５０ｍｇ／Ｌ早期培养中出现两类不同形态的细胞。上皮样细胞的ＮＥ、ＡｃＰ活性及ＰＡＳ反应较弱，ＡＴＰ酶和５－ＮＴ活性较强，角蛋白呈阳性。成纤维样细胞显示较强的ＮＥ、ＡｃＰ活性及ＰＡＳ反应，Ｖｌｍｅｎｔｉｎ呈阳性。３例培养中均含两类细胞，表明培养细胞仍为胸腺基质细胞的混合体。     

大鼠皮质、海马微血管构筑的定量分析

目的：观察并定量分析大鼠皮质、海马的微血管构筑。方法：采用单宁酸-氯化铁媒染微血管的方法观察大鼠海马与额叶皮质的微血管构筑,并采用MiVnt图像分析系统对海马与额叶皮质的微血管密度（MVD）及微血管面积密度（MVA）进行定量分析。结果：分布于大脑额叶皮质的动脉在脑表面垂直进入脑实质,各分支间可见丰富的吻合;营养海马的动脉自海马裂进入海马后发出分支,海马与周围脑组织之间血管吻合较少。定量分析结果显示大鼠皮质的MVD值和MVA值明显高于海马（P〈0．01）。结论：海马的微血管不及额叶皮质丰富,这可能是脑血管性痴呆早期智力障碍的原因之一。     

MEK AND p38 MAPK-DEPENDANT PATHWAYS ARE INVOLOVED IN THE POSITIVE EFFECT OF INTERLEUKIN-6 ON HUMAN GROWTH HORMONE GENE EXPRESSION IN RAT MtT/S SOMATOTROPH CELLS

Objective To investigate the effect of interleukin-6（IL-6） on the human growth hormone （hGH） gene expression in a rat somatotropic pituitary cell line MtT/S. Methods The plasmids containing various lengths of hGH gene 5＇-promoter fragments were constructed. Stably transfected MtT/S cells were created by cotransfecting the above plasmids and pcDNA3.1 （＋） with DMRIE-C transfection reagent. After the administration of these cells with IL-6 and/or various inhibitors of signaling transduction path-ways, the luciferase activities in MtT/S cells lysis were assayed to demonstrate the effects of IL-6 on hGH gene promoter activity and possibly involved mechanism. Results The 10^3U/mL IL-6 stimulated GH secretion and synthesis, and promoted the 5＇-promoter activity of GH gene in stably transfected MtT/SGL cells with the action of 1.69 times above the control. Among inhibitors of signaling transduction pathways, mitogen-activated protein kinase kinase （MAPKK/MEK） inhibitor PD98059 （40μmol/L） and p38 mitogen-activated protein kinase （MAPK） inhibitor SB203580 （5μmol/L） completely blocked the stimulatory effect of IL-6. Western blot analysis further confirmed the activation of phosphorylated MEK and p38 MAPK in MtT/SGL cells. Neither over-expression of Pit-1 nor inhibition of Pit-1 expression affected IL-6 induction of hGH promoter activity. A series of deletion constructs of hGH promoter were created to identify the DNA sequence that mediated the effect of IL-6. The results showed that the stimulatory effect of IL-6 was abolished following deletion of the - 196 to - 132 bp fragment. Conclusions IL-6 promotes GH secretion and synthesis by rat MtT/S somatotroph cells. The stimulatory effect of IL-6 on hGH gene promoter appears to require the activation of MEK and p38 MAPK, and a fragment of promoter se- quence that spans the - 196 to - 132 bp of the gene, but may be unlinked with Pit-1 protein.     

脑缺血再灌注大鼠海马神经元线粒体变化的形态计量分析

目的:探讨大鼠脑缺血再灌注后海马神经元线粒体的形态变化.方法:采用结扎颈总动脉的方法制备缺血再灌注模型,根据再灌注时间将大鼠分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三组.电镜下观察海马神经元线粒体的改变,并采用Leica Qwin图像分析系统对线粒体的形态变化进行计量分析.结果:缺血再灌注各组海马神经元线粒体均出现损伤,线粒体肿胀、外膜破坏,嵴断裂、溶解呈空泡状,缺血再灌注Ⅱ组线粒体的损伤较Ⅰ、Ⅲ组严重.与假手术组相比,缺血再灌注Ⅱ、Ⅲ组线粒体的体密度、数密度、比表面和嵴膜表面密度明显减小(P<0.05),平均体积和平均截面积显著增大(P<0.05);缺血再灌注Ⅰ组仅平均体积和平均截面积增大(P<0.05),其余改变不明显(P＞0.05).结论:缺血再灌注可损伤海马神经元线粒体的形态结构,且与再灌注时程有关.     

高浓度葡萄糖对人腹膜间皮细胞c-myc和p21基因表达的影响

目的 :探讨高浓度葡萄糖对人腹膜间皮细胞 c- myc和 p2 1基因表达的影响。方法 :体外培养的人腹膜间皮细胞经含 1.5 %、2 .5 %、4 .2 5 %葡萄糖的 M199培养基培养 2 4 h,以正常 M199培养基和含 4 .2 5 %甘露醇的 M199培养基为对照。应用半定量 RT- PCR检测 c- m yc、p2 1基因 m RNA表达。结果 :2 .5 %葡萄糖组、4 .2 5 %葡萄糖组间皮细胞 c- myc和 p2 1m RNA的表达量显著高于 1.5 %葡萄糖组、M199对照组及 4 .2 5 %甘露醇渗透压对照组 (P<0 .0 5 ) ;而 1.5 %葡萄糖组、M199对照组及 4 .2 5 %甘露醇渗透压对照组间间皮细胞 c- myc和 p2 1m RNA的表达量无显著差异 (P>0 .0 5 ) ,且葡萄糖浓度越高 ,c- myc和 p2 1m RNA表达量越高 (r=0 .96 8,0 .96 7,P<0 .0 1)。结论 :高浓度葡萄糖能上调 C- myc和 P2 1m RNA基因表达 ,这种作用与葡萄糖浓度呈正相关。