益气解毒方对CNE2鼻咽癌细胞迁徙运动和c-myc、p-Ezrin基因转录活性的影响

目的 探讨不同中医治法对CNE2细胞迁移运动及p-Ezrin与c-myc基因转录的影响.方法 以甲氯蝶呤作为阳性对照,以正常大鼠血浆作为空白对照,采用划痕法检测益气解毒方及其拆方药物血浆对cNE2细胞迁徙运动的影响,RT-PCR法检测其对CNE2细胞p-Ezrin和c-myc基因转录活性的影响.结果 益气解毒方原方、解毒组分和益气组分药物血浆能显著抑制cNE2细胞的迁徙运动能力,养阴组分和甲氯蝶呤对细胞迁徙运动无明显抑制效应,益气解毒方原方对CNE2细胞c-myc基因转录活性显示抑制效应,而其他组分效应则不明显;益气解毒方原方、解毒组分和益气组分药物血浆显著抑制CNE2细胞p-Ezrin基因转录活性,养阴组分和甲氯蝶呤对其转录无明显抑制效应.结论 益气解毒方原方、解毒组分和益气组分药物血浆均对CNE2细胞迁徙运动具有明显抑制效应,尤以原方最为显著;作用机理可能与其抑制靶细胞p-Ezrin基因的转录活性有关.     

益气解毒法不同组方对鼻咽癌细胞迁徙运动潜能及细胞伪足的影响

目的 研究益气解毒法不同组方对鼻咽癌细胞迁徙运动潜能及其细胞伪足的影响.方法 以正常大鼠血浆为对照,分别应用益气解毒方原方及其改方大鼠药物血浆对CNE2Z细胞进行干预,采用划痕实验法评价不同组方药物对靶细胞迁徙运动潜能的影响,以扫描电镜观察细胞伪足形态特征,分析靶细胞的反应特性.结果 益气解毒原方对CNE2Z细胞的迁徙运动潜能显示抑制效应,细胞迁徙能力较差,伪足伸展不明显;益气解毒改方则对靶细胞迁徙运动潜能显示为促进效应,细胞伪足伸展长度较长.结论 同为益气解毒法的组方,由于剂量构成比不同,各方对鼻咽癌细胞迁徙运动潜能的药效学差异巨大.这样的药理效应特点,对中药复方的合理组方提出了严格要求.     

益气解毒方对中晚期鼻咽癌患者Th17细胞活性的干预效应

目的 探讨益气解毒方对中晚期鼻咽癌患者Th17细胞活性的干预效应.方法 40例中晚期鼻咽癌患者,于治疗开始前应用流式细胞术检测外周血Th17细胞数值比例,ELISA法检测血清细胞因子IFN-γ、IL-17含量水平,并以10例健康人作为对照,分析各指标的组间差异及其意义.然后,将40例中晚期鼻咽癌患者随机分为常规治疗组和...     

益气解毒方对鼻咽癌患者疗效及血清肿瘤标志物的影响

目的 探究益气解毒方对鼻咽癌患者疗效及血清肿瘤标志物的影响。方法 选取我院2019年6月到2022年6月期间收治的鼻咽癌患者85例作为研究对象。将患者随机分为试验组(n=42)和对照组(n=43)。对照组给予常规治疗,试验组患者在常规治疗基础上联合益气解毒方治疗。对比两组患者缓解情况及治疗前后血清肿瘤标志物水平变化。结果 试验组患者临床缓解情况明显优于对照组,同时ORR明显高于对照组(76.19%vs60.47%),比较差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组血清肿瘤标志物水平均较治疗前显著降低(P<0.05),但与对照组比较,试验组血清CYFRA21-1、SCCAg及CEA水平更低,比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 联合益气解毒方治疗可有效提高鼻咽癌患者的临床疗效,降低血清肿瘤标志物水平,具有一定的临床应用价值。     

益气解毒方干预鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤肿瘤微环境细胞免疫耐受现象的初步研究

目的通过观察益气解毒方对鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤的干预效应,探讨调节性T细胞诱导的鼻咽癌肿瘤微环境免疫耐受性特征及其对干预药物的反应性。方法人鼻咽癌细胞株CNE2细胞建立裸鼠移植瘤模型,然后随机分为模型组、益气解毒方治疗组、顺铂阳性对照组、益气解毒方与顺铂联合治疗组,每组8只动物,分别给予相应处理药物,系统观察各组裸鼠移植瘤生长情况及体积变化。观察期满后处死动物,取瘤体称重,分别计算抑瘤率,并切取瘤体组织标本,观察比较各组移植瘤的病理组织学变化,免疫组化法检测各组标本CD4、CD8、Foxp3表达活性,比较其组间差异。结果各组检测结果比较显示,益气解毒方处理后,移植瘤组织中的CD4、FoxP3表达活性受到明显抑制,CD8表达则明显提高,尤以联合治疗组表现明显,与模型组比较,组间差异具有显著性统计学意义。结论益气解毒方能有效改善鼻咽癌裸鼠移植瘤肿瘤微环境的免疫耐受现象而抑制肿瘤生长速度;联合应用化学药物后,该一效应尤为明显。     

益气解毒颗粒干预鼻咽癌细胞HNE1蛋白质表达的研究

目的探讨中药复方益气解毒颗粒对鼻咽癌细胞杀伤作用的分子机制.方法筛选益气解毒颗粒药液对鼻咽癌杀伤的半抑制浓度(IC50),用0.1倍半抑制浓度(0.1×IC50)的益气解毒颗粒作用鼻咽癌细胞HNEl 96h,用固相pH梯度双向凝胶电泳分离益气解毒颗粒处理和未处理的鼻咽癌细胞HNE1的总蛋白质,银染显色,PDQuest 2-de软件分析差异蛋白质点.结果益气解毒颗粒药液杀伤鼻咽癌细胞HNE1的半抑制浓度为6.25mg/ml;双向电泳图像分析益气解毒颗粒药物处理组图像的平均蛋白质数为1120±89,未处理组的平均蛋白质数为1281±102;差异蛋白质有673个,其中有218个表达增强,有455个蛋白质表达下降.结论益气解毒颗粒对鼻咽癌细胞的杀伤作用这些差异表达蛋白质有关,这些差异蛋白质有待质谱分析鉴定,为中药作用的分子机理研究提供了新的思路.     

益气解毒方乙酸乙酯提取部位对鼻咽癌患者外周血树突状细胞生物学特性的影响

目的察益气解毒方乙酸乙酯提取部位(ethyl acetate extract,EAE)对鼻咽癌(nasopha ryngealcarcinoma,NPC)患者外周血树突状细胞(dendritic cells,DCs)生物学特性及其功能的影响。方法初诊NPC患者10例,抽取肘静脉血,分离培养外周血单个核细胞(PBMC),用10%胎牛血清RPMI 1640培养基分别加不同浓度益气解毒方EAE进行体外培养,倒置显微镜下观察DCs的形态学特征,流式细胞仪检测DCs表面特异分子CD1a、CD86和HLA DR的表达水平,ELISA法检测培养上清液中IL-12含量。结果益气解毒方EAE能促进NPC患者PBMC来源的DCs成熟分化并高表达成熟DCs表面的特异性分子标志物(CD1a,CD86,HLA DR),其IL 12分泌水平亦随着培养天数的增加而持续升高。结论益气解毒方EAE能明显促进NPC患者外周血来源的DCs成熟分化和功能活性表达。     

益气解毒颗粒影响鼻咽癌细胞HNE1增殖活力的实验研究

目的：探讨不同中医疗法对HNE1细胞增殖的影响。方法：采用MTT法观察含益气解毒颗粒原方及其拆方药物血清对体外培养的人鼻咽癌细胞株HNE1增殖的影响。结果：原方组和解毒组分组药物血清作用48h时,细胞增殖活性最低;而益气组分组、养阴组分组和其他组分组药物血清作用72h时细胞增殖活性最低。15％原方组药物血清对HNE1细胞增殖活性的抑制率达到67．68％。结论：原方及其拆方组药物血清对HNE1细胞具有增殖抑制作用,以原方效应最为明显,且具有时间和浓度依赖性。     

鼻咽癌细胞表面糖蛋白结构与转移倾向关系的研究

为研究鼻咽癌细胞表面糖蛋白结构的改变与其转移间的关系，测定了15例正常鼻粘膜和102例鼻咽癌（84例原发性癌和18例转移淋巴结）细胞的花生凝集素（peanutagglutinin）受体、荆豆凝集素（ulexeuropeans）受体和刀豆凝集素（concanavalinensifomisagglutinin）受体的改变。结果发现大多数（91．6％）鼻咽癌细胞的花生凝集素受体阳性，其与癌细胞的组织类型、细胞分化程度和转移无关。转移鼻咽癌细胞的荆豆凝集素受体明显增多，而刀豆凝集素受体明显减少。因此，鼻咽癌细胞荆豆凝集素受体增多和刀豆凝集素受体减少可能与其转移能力有关。     

益气养阴解毒方影响鼻咽癌患者放化疗后康复过程的临床疗效观察

目的观察益气养阴解毒方干预疗法对初诊鼻咽癌患者放化疗后康复过程的影响,评价其临床疗效。方法初诊鼻咽癌放疗化疗后患者65例作为观察组,予以益气解毒养阴方干预治疗;1:1配对法平行设置放化疗后常规对症治疗的初诊鼻咽癌患者65例作为对照组。收集所有患者社会人口学信息、治疗前后临床资料;随访患者康复过程,包括病灶愈合、复发或转移情况,生存时间,生活质量QOL评分,评价益气养阴解毒方干预疗法对鼻咽癌患者放化疗后康复过程的临床疗效。结果观察组和对照组QOL评分(50.25±8.60,40.80±5.63)、肿瘤复发时间(7.36±2.12,5.86±1.59)年、5年复发率(18.46%,33.85%)、10年及以上生存率(67%,43.77%)的差异比较有显著性统计学意义(P<0.05)。结论益气养阴解毒方干预疗法能够有效改善鼻咽癌患者放化疗后的QOL,延长生存期,降低复发率。     

益气通窍方治疗变应性鼻炎临床疗效观察

目的观察评价杨道文经验方益气通窍方加减对变应性鼻炎的临床疗效。方法50例变应性鼻炎患者,分为治疗组20例,应用益气通窍方加减治疗;对照组30例,应用常规西药治疗。疗程1周,然后比较2组的疗效。结果疗程结束时,治疗组显效75％,有效20％,总效率为95％;对照组显效60％,有效30％,总效率为90％,组间差异无统计学意义（P〉0．05）。疗程结束4周后,治疗组显效85％,有效15％,总效率为100％;对照组显效63．3％,有效30％,总效率93．3％,组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论在改善变应性鼻炎患者临床症状方面,益气通窍方同西医常规治疗作用具有同样疗效。     

靶向联合阻断表皮生长因子受体和环氧化酶-2信号通路影响鼻咽癌细胞生长的研究

目的：观察联合阻断表皮生长因子受体（EGFR）和环氧化酶-2（COX-2）介导的信号通路,对鼻咽癌细胞株CNE-2的影响。方法：用EGFR-酪氨酸激酶拮抗剂和COX-2抑制剂单独和联合处理鼻咽癌细胞株CNE-2,采用CCK-8法检测细胞生长抑制率,流式细胞术进行细胞周期、凋亡率的分析,Western blot检测相关蛋白表达。结果：①联合用药组CNE-2细胞生长抑制率显著大于两者单独处理组生长抑制率之和（P〈0．05）;②联合处理组细胞G1期比例大于单独处理组（P〈0．05）。联合处理组细胞凋亡率与单独处理组相比差异无统计学意义（P〉0．05）;③与单独处理组相比,联合处理组出现明显的p—EGFR,COX-2表达下调。结论：联合阻断EGFR和COX-2信号通路对抑制鼻咽癌细胞株CNE-2生长,增加G1期阻滞及抑制EGFR的磷酸化和COX-2的表达方面具有协同作用。     

RNA干扰对喉癌细胞MMP-9基因表达的抑制效应及其与瘤细胞增殖活性和侵袭潜能的相关性

目的 探讨RNA干扰(RNAi)对喉癌细胞基质金属蛋白酶-9基因(MMP-9)表达活性的抑制作用及其与瘤细胞增殖和侵袭潜能的相关性.方法 于MMP-9基因编码区选择1对目标序列(A组)及1对非特异性序列(B组)构建小分子干扰RNA(siRNA)表达元件,转染Hep-2喉癌细胞,以未转染的母代细胞作为对照组(C组),RT-PCR法检测MMP-9 mRNA转录活性,蛋白印迹法检测MMP-9蛋白表达活性,细胞侵袭重建基底膜实验检测细胞体外侵袭潜能.结果 A、B、C组细胞MMP-9mRNA相对表达水平分别为0.51±0.05、0.87±0.09、0.89±0.07,MMP-9蛋白相对表达水平分别为0.29±0.07、0.595±0.11、0.61±0.10,A组的相对表达水平均明显下降(P<0.05);A、B组细胞侵袭抑制率分别为48.0%和11.5%,组间差异有统计学意义(P<0.05),但细胞增值活性却无明显变化(P>0.05).结论 Hep-2喉癌细胞中存在RNAi现象,MMP-9 siRNA特异性抑制MMP-9基因表达,伴随以细胞侵袭潜能明显减弱.     

Molecular mechanisms underlying the protective effects of hydrogen-saturated saline on noise-induced hearing loss

Objectives: This study aimed to explore the molecular mechanism of the protective effects of hydrogen-saturated saline on NIHL.

Methods: Guinea pigs were divided into three groups: hydrogen-saturated saline; normal saline; and control. For saline administration, the guinea pigs were given daily abdominal injections 3 d before and 1?h before noise exposure. ABR were tested to examine cochlear physiology changes. The changes of 8-hydroxy-desoxyguanosine (8-HOdG), interleukin-1 (IL-1), interleukin-6 (IL-6), interleukin-10 (IL-10), tumor necrosis factor-α (TNF-α), intercellular cell adhesion molecule-1 (ICAM-1) and high mobility group box-1 protein (HMGB1) in the cochlea were also examined.

Results: The results showed that pre-treatment with hydrogen-saturated saline could significantly attenuate noise-induced hearing loss. The concentration of 8-HOdG was also significantly decreased in the hydrogen-saturated saline group compared with the normal saline group. After noise exposure, the concentrations of IL-1, IL-6, TNF-α, and ICAM-1 in the cochlea of guinea pigs in the hydrogen-saturated saline group were dramatically reduced compared to those in the normal saline group. The concentrations of HMGB-1 and IL-10 in the hydrogen-saturated saline group were significantly higher than in those in the normal saline group immediately and at 7 d after noise exposure.

Conclusions: This study revealed for the first time the protective effects of hydrogen-saturated saline on noise-induced hearing loss (NIHL) are related to both the anti-oxidative activity and anti-inflammatory activity.     

The effect of fibronectin on the migration of keratinocytes

Basal cell migration appears to be a crucial factor in the development of acquired cholesteatoma. We studied the effect of fibronectin (FN) on the migration of basal cells. Keratinocytes were prepared from epidermis of newborn rats and fractionated using Percoll gradients. The lightest cells were maturing keratinocytes and the heaviest, basal cells. The effect of various concentrations of FN on keratinocyte migration was studied using Boyden's chamber assay and the spreading assay methods. FN had little effect on mature keratinocytes, but FN markedly stimulated the migration of keratinocyte basal cells. FN appears to play an important role in stimulating basal cell keratinocyte migration.     

诱导化疗对鼻咽癌病人白细胞介素2活性及其受体反应性的影响

７６例局部中，晚期初治鼻咽癌患者，放疗前被随机分成动脉灌注化疗和全身化疗两组，接受相同的联合方案治疗，观察两组的白细胞介素２活性和白细胞介素２受体反应性的变化。