骨髓涂片中网状细胞观察及临床意义

骨髓网状细胞是骨髓基质中一类独特的细胞,与造血细胞密切接触为造血细胞提供支持,网状细胞在骨髓涂片分类中比例较低,所以对骨髓网状细胞的报导甚少.本文通过对360例骨髓涂片中网状细胞数量及形态观察以探讨其在血液病诊断中的临床意义.     

血液病骨髓活检的病理诊断意义

众所周知,血液病的首选诊断方法依赖于骨髓涂片,骨髓活检由于其在普通制片过程中粒系细胞胞浆内颗粒被破坏,无法准确区分红系造血细胞成分,使其应用价值有限。应用PCF固定液固定,骨髓塑料包埋,半薄切片,H-Giemsa-E染色,可准确区分骨髓造血细胞及淋巴细胞、浆细胞、网状细胞等非     

成骨细胞对造血干细胞增殖、分化影响的研究进展

造血干细胞的增殖和分化直至最后成为成熟的血液细胞释放至外周血的整个过程都离不开骨髓造血微环境 (BM HME)的调节。BMHME是由骨髓基质细胞 (BMSC)构成的。同时 ,BMSC又是成骨细胞的主要来源。也就是说 ,在体内造血细胞和成骨细胞具有非常密切的空间关系。体外长期培养造血干细胞也离不开基质细胞的支持。BMSC为造血细胞提供了保护作用[1 ] 。基质细胞 (包括网状成纤维细胞、巨核细胞、脂肪细胞和内皮细胞 )和造血细胞的直接接触 ,基质细胞产生的细胞外基质和基质细胞合成的细胞因子与各种造血细胞的形成都有关系[2 ,3] 。成骨细…     

骨髓基质细胞对多细胞因子介导人脐血单个核细胞体外扩增的影响

背景:体外扩增脐血造血细胞的目的是促进脐血造血细胞的植入能力,细胞因子介导的脐血造血细胞能使细胞数有效扩增,但同时也耗竭了具有分化潜能的造血干细胞.目的:观察骨髓基质细胞对多细胞因子组合介导人脐血单个核细胞体外扩增及扩增后黏附分子和CXCR4表达的影响.方法:将分离的人脐血单个核细胞接种在预先建立的人骨髓基质细胞层上,分组培养:对照组仅含有脐血单个核细胞;多种细胞因子+脐血单个核细胞组;骨髓基质细胞+脐血单个核细胞组;骨髓基质细胞+多种细胞因子+脐血单个核细胞组.培养0,7 d检测有核细胞数, CD34+细胞数及CD34+CXCR4+,CD34+CD62L+,CD34+CD49d+的细胞数.结果与结论:单纯骨髓基质细胞和单用细胞因子组均可有效地扩增脐血造血细胞,并提高造血细胞上CD49d,CD62L及 CXCR4表达.而单用细胞因子组促进脐血造血细胞扩增能力较单纯骨髓基质细胞强,提高造血细胞CD49d,CD62L及 CXCR4表达能力较单纯骨髓基质细胞差.提示骨髓基质细胞虽可支持脐血造血细胞扩增,但难以实现造血细胞的大量扩增,但在骨髓基质细胞层的支持下,多细胞因子可有效地促进脐血造血细胞的扩增,并优于单用细胞因子及骨髓基质细胞,证实骨髓基质细胞可协同多细胞因子有效地促进脐血单个核细胞的扩增,促进造血干细胞的黏附和趋化能力.     

骨髓基质细胞在造血调控中的作用

骨髓基质细胞是造血诱导微环境的重要组成成分,一直是造血调近研究的重点。骨髓基质细胞通过与造血细胞密切接触而直到支持造血细胞的作用。随着近年分子生物学技术的发展,揭示了基质细胞通过其粘附结构对造血下／祖细胞的回髓定位以及基质细胞产生多种细胞因子调控造血的机理。本文就骨髓基质细胞的造血调控的研究进展作一综述。     

骨髓微环境造血调控的研究进展

骨髓造血微环境是造血细胞赖以生存的内环境，它包括基质细胞、细胞外基质以及各种细胞因子等。骨髓微环境通过多种方式支持和调节造血细胞的黏附归巢、自我更新、增殖分化及发育成熟。本文就近年来骨髓微环境造血调控的研究进展作一综述。     

骨髓基质细胞在造血调控中的作用

骨髓基质细胞是造血诱导微环境的重要组成成分,一直是造血调控研究的重点。骨髓基质细胞通过与造血细胞密切接触而起到支持和营养造血细胞的作用。随着近年来分子生物学技术的发展,揭示了基质细胞通过其粘附结构对造血干／祖细胞的回髓定位以及基质细胞产生多种细胞因子调控造血的机理。本文就骨髓基质细胞的造血调控的研究进展作一综述。     

骨髓微环境造血调控的研究进展

骨髓造血微环境是造血细胞赖以生存的内环境,它包括基质细胞、细胞外基质以及各种细胞因子等。骨髓微环境通过多种方式支持和调节造血细胞的黏附归巢、自我更新、增殖分化及发育成熟。本文就近年来骨髓微环境造血调控的研究进展作一综述。     

胎儿骨髓基质细胞与细胞因子支持人脐血单个核细胞体外扩增的研究

为了探讨胎儿骨髓基质细胞(FBMSC)联合细胞因子对脐血单个核细胞(MNC)体外扩增作用的影响及比较扩增前后脐血(CB)CD34 细胞上细胞表面趋化因子受体CXCR4和黏附分子CD49d (VLA4)的表达情况,将从新鲜CB标本中分离出的MNC分别接种于已建立的无血清培养体系,该体系分4组:A组为培养过程中不加细胞因子和基质细胞;B组为单用胚胎骨髓基质细胞支持;C组为单用细胞因子支持;D组为细胞因子和胚胎骨髓基质细胞联合支持。在0、6、10及14天检测细胞总数、CD34 细胞数及集落形成单位(CFU)数,同时检测CD34 细胞上CD49d 及CXCR4的表达数。结果表明:在体外14天培养过程中,各时间点D组CD34 细胞、CFU数及CD34 CXCR4 细胞和CD34 CD49d 细胞扩增数均高于A、B、C组(P<0.05);B、C和D组在各时间点各测量指标与A组比较具显著性差异(P<0.05);6天后,B组各测量指标与C组比较具显著性差异(P<0.05)。结论:胚胎骨髓基质细胞联合外源性细胞因子不仅可以支持脐血MNC的有效扩增,而且扩增后与趋化作用和与粘附作用相关的造血细胞亦较扩增前明显增加。单用细胞因子扩增会造成造血细胞的耗竭,单用基质细胞支持可扩增或维持造血细胞的量,但难以实现造血细胞的大量扩增,FBMSC联合外源性细胞因子可能是扩增造血干祖细胞的较理想方案。     

骨髓基质细胞系QXMSC_1体外促进造血及其作用机理的研究

本实验研究了骨髓基质细胞系QXMSC_1体外对CFU-F,CFU-GM,BFU-E及CFU-E集落形成的影响,并通过建立QXMSC_1基质细胞与骨髓造血细胞的长期共培养体系,研究了QXMSC-1在体外促进造血的机理。结果表明,QXMSC_1基质细胞条件培养上清液可促进小鼠CFU-F,CFU-GM,BFU-E及CFU-E集落的生长。在无GM-CSF和Epo存在的情况下,QXMSC_1细胞能维持CFU-GM,BFU-E和CFU-E集落生长。表明QXMSC_1细胞本身可分泌GM-CSF和Epo。QXMSC_1细胞与骨髓造血细胞共培养时,可明显提高CFU-GM集落数。共培养体系中,用微孔滤膜隔断QXMSC_1与造血细胞的直接接触,也能促进CFU-GM集落生成,但比混合培养时低,说明QXMSC_1通过直接接触和分泌细胞因子促进造血的过程。     

骨髓造血基质的电子显微镜观察

为观察骨髓造血基质结构特点,作者采用电子显微镜观察雄性Wistar大鼠的骨髓基质的结构。乙醚麻醉后,从主动脉插管至肾动脉下方连同动脉一并结扎,静脉端开放。应用林格液50毫升灌流及2.5％戊二醛固定。将大鼠的股骨切成2mm的带有骨髓的骨片。用超声波处理将骨髓块震动3分钟后再固定。按常规方法制成电子显微镜样品,先后用扫描和透射电镜观察。发现位于窦旁的一种结构为网状细胞以扁平粗短突起构成只容纳一个造血细胞的网状结构。另一种结构为位于窦间的网状细胞以丝状细长突起构成可容纳数个血细胞的大网眼结构。成熟的血细胞是穿经窦内皮细胞释放到血循环中。血管外膜细胞突起伸向骨髓腔与窦间网状细胞突起相连形成有效的造血微环境的三维网状结构。作者并发现髓腔骨内膜表面一些多角形细胞渐移向骨髓腔,并包绕着血细胞,这种细胞可能是骨髓内最早发育的网状细胞,参与其支持组织的三维结构的形成。     

肝细胞生长因子与造血调控

造血诱导微环境是造血细胞赖以生存、增殖与分化的场所，骨髓基质细胞是造血诱导微环境的核心成分。近年研究表明：骨髓基质细胞能分泌肝细胞生长因子（ＨＧＦ），或称离散因子（ＳＦ）而造血干、补助细胞能表达ＨＧＦ的受体（ｃ－Ｍｅｔ）。Ｍｅｔ－ＨＧＦ的相互作用对造血细胞的增殖分化、粘附及生存等起着重要的调控作用。     

基质细胞对体外扩增造血细胞造血重建活性的促进作用

本研究探讨骨髓单个核细胞(13MMNC)在不同的培养条件下扩增后是否具有造血重建的活性。在小鼠BMMNC液体培养体系中，分别在含有几种细胞因子组合和(或)基质细胞层存在的条件下进行体外扩增，然后将不同条件下扩增的细胞经尾静脉回输至经致死量照射的小鼠体内，动态观察小鼠的骨髓有核细胞数及各种祖细胞集落数，以观察其造血重建的效果。结果表明：单纯细胞因子介导BMMNC体外扩增后并不能增进这些细胞的造血重建功能，但含有骨髓基质细胞底层的体外扩增，无论是否加入细胞因子，均有明显的促进移植受体造血功能重建的作用。结论：骨髓基质细胞支持下体外扩增的造血细胞具有促进移植受者造血重建的功能。证实了在维持体外扩增造血细胞的移植活性中，基质细胞具有非常重要的作用。     

硫化砷对骨髓增生异常综合征骨髓单个核细胞体外凋亡的作用

为了研究硫化砷（As2S2）在体外对骨髓增生异常综合征患者骨髓单个核细胞增殖的影响，并探讨其可能的作用机制，采用MTT法、流式细胞术、RT-PCR等多参数检测不同浓度As2S2诱导MDS细胞的凋亡。结果表明：①低浓度（0-0．6mg／L）的硫化砷对MDS细胞无明显抑制作用；②相对高浓度的硫化砷（1．5-0mg／L）对低危组MDS以及高危组MDS的单个核细胞均有诱导凋亡作用，且呈时间浓度依赖关系；bcl-2mRNA在As2S2作用后表达明显下调，bcl-2／bax比例明显下降（P〈0．05）；③MDS病人存在骨髓造血细胞的过度凋亡。结论：MDS病人存在骨髓造血细胞的过度凋亡；低浓度的硫化砷对MDS细胞没有明显的增殖抑制作用，高浓度的硫化砷主要通过诱导凋亡使MDS细胞死亡．     

微载体支持体外造血研究

为了探索体外维持造血干细胞自我更新潜能,抑制过度分化以及大量扩增造血细胞的技术,我们将小鼠骨髓基质细胞贴附于微载体上,再接种小鼠骨髓造血细胞共同培养(G2组).在此基础上,用海藻酸钠包埋微载体基质细胞和造血细胞制成凝胶珠进行培养(G1组);设置单纯微载体基质细胞(G3组)和单纯骨髓细胞(G4组)培养作为对照.对比观察,显微摄影,计数细胞总数、CFU-GM集落数和CD34阳性细胞百分率.培养2周观察到造血细胞粘附在微载体基质细胞上或龛在微载体基质细胞间并形成造血灶.3次实验结果显示,G2组CFU-GM集落总数显著高于G4组,同时也显著高于G3加G4组集落总数之和(t=6.553和t=5.494;P＜0.05);G2组CD34+细胞百分率高于其他各组,与CFU-GM测定结果趋向一致.实验表明,微载体基质细胞有较好的支持体外造血的效果,至少可维持4周,而海藻酸固定化造血细胞培养与对照组没有差异.     

骨髓涂片结合活检诊断120例血液病患者的分析

骨髓涂片细胞形态学检查是诊断血液系统疾病最常用、最主要的方法,但由于易受到多种因素的干扰,骨髓涂片不能准确地指导临床诊断。骨髓活检和骨髓涂片在血液疾病的诊断中各具优缺点,而骨髓活检和骨髓涂片结合同步分析可弥补骨髓涂片检查的不足,能真实地反映骨髓造血细胞增生程度、骨     

AA,CAA及增贫骨髓片中骨髓小粒分析

骨髓涂片中常可见到骨髓小粒,其中有各种细胞成份,我们通过对急、慢性再障(AA、CAA)及增生性贫血骨髓片中骨髓小粒中细胞成份的比例的观察分析,对其有较大的诊断及鉴别诊断价值,现将我们细胞室对确诊的上述三种疾病各30例骨髓涂片中骨髓小粒总结分析如下. 1 材料与方法 1．1 材料：选自91年以来确诊的AA、CAA及增生性贫血的骨髓涂片各30例,其中增生性贫血包括缺铁贫12例,溶贫6例,巨幼贫6例. 1．2 方法：在低倍镜下计数每张涂片中的骨髓小粒数,再用油镜对骨髓小粒中的各种细胞进行分类,包括造血细胞(幼红、幼粒、巨核细胞)及非造血细胞(…     

肝细胞生长因子与造血调控

造血诱导微环境是造血细胞赖以生存、增殖与分化的场所,骨髓基质细胞是造血诱导微环境的核心成分。近年研究表明:骨髓基质细胞能分泌肝细胞生长因子(HGF),或称离散因子(SF),而造血干、祖细胞能表达HGF的受体(c-Met)。Met-HGF的相互作用对造血细胞的增殖分化、粘附及生存等起着重要的调控作用。     

多能造血干细胞的增殖和定向分化

一、造血干细胞的概念正常血液中的各种血细胞是由骨髓中的造血细胞发育而来的。由于血细胞的寿命短暂、更新速度较快,因此骨髓中的造血细胞必须不断生成,才能保持血细胞的数量相对稳定。骨髓中的造血细胞来自何处?传统的看法认为网状细胞是各种造血细胞的始祖,     

人骨髓基质细胞参与造血调控的研究进展

人骨髓基质细胞（ｈＢＭＳＣｓ）对造血细胞的增殖及分化有支持、诱导和调控作用。上述作用的分子基础主要涉及特异性细胞表面受体、生长因子、细胞粘附分子（ＣＡＭｓ）及细胞外基质（ＥＣＭ）分子等，这些分子的相互作用介导了细胞间的粘附和造血干细胞的归巢。