塞来昔布对膀胱癌裸鼠皮下移植瘤及移植瘤细胞凋亡的影响

目的探讨环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布对膀胱癌裸鼠皮下移植瘤及移植瘤细胞凋亡的影响.方法6周龄BALB/c裸鼠8只,建立膀胱癌裸鼠皮下移植瘤动物模型,分为2组,实验组每kg食物添加1 g塞来昔布,观察塞来昔布对裸鼠健康状况、体重变化及移植瘤变化的影响,并用TUNEL方法检测其对移植瘤细胞凋亡的影响.结果塞来昔布对裸鼠健康状况及体重变化无明显影响(P＞0.05),对移植瘤的生长有抑制作用,肿瘤抑制率为83.7%(P＜0.05),对移植瘤细胞的凋亡有促进作用(P＜0.05).结论塞来昔布可能通过促进肿瘤细胞凋亡等途径对膀胱肿瘤产生抑制作用,可能成为膀胱肿瘤化学预防及治疗的辅助手段.     

塞来昔布对裸鼠结肠癌移植瘤放疗增敏作用的机制研究

为探讨环氧化酶-2（COX-2）抑制剂塞来昔布对裸鼠结肠癌移植瘤放疗增敏作用的机制,本研究应用人结肠癌SW480细胞建立裸鼠移植瘤模型,并将32只裸鼠随机分为A组（对照组）、B组（塞来昔布组）、C组（放疗组）和D组（塞来昔布＋放疗组）,观察各组裸鼠结肠癌移植瘤的生长情况,并应用免疫组化法检测移植瘤组织中COX-2、8-catenin、血管内皮生长因子（VEGF）、CD34表达,并对CD34阳性血管进行计数,计算微血管密度（MVD）。结果显示,（1）干预30d后,B、C、D组移植瘤瘤体质量及体积均明显小于A组,P〈0．05;而D组移植瘤瘤体质量和体积明显小于B、C组,P〈0．05。（2）免疫组化检测显示,COX-2、β—catenin、VEGF及CD34在各组移植瘤组织中均呈阳性表达。B、c、D组COx-2、p—catenin、VEGF表达水平及MVD均明显低于A组,P〈0．05;而D组各指标明显低于B、c组,P〈0．05。（3）相关性分析显示,COX-2、VEGF、β-catenin及MVD,各指标两两之间均具有显著相关性,P〈O．05。结果表明,塞来昔布可能是通过抑制wnt信号通路来抑制肿瘤新生血管的生成,最终发挥放疗增敏作用。     

塞来昔布对裸鼠结肠癌移植瘤放疗增敏作用的实验研究

为探讨环氧化酶2（COX～2）抑制剂塞来昔布对裸鼠结肠癌移植瘤放疗的增敏作用,本研究应用人结肠癌SW480细胞建立裸鼠移植瘤模型,并将32只裸鼠随机分为A组（对照组）、B组（塞来昔布组）、C组（放疗组）和D组（塞来昔布＋放疗组）。观察各组裸鼠结肠癌移植瘤的生长情况。结果显示,B、C、D组移植瘤的生长明显受到抑制,干预后期移植瘤瘤体质量及体积均明显小于A组,P〈0．05;而D组移植瘤瘤体质量和体积显著小于B、C组,P〈0．05。结果表明,塞来昔布不仅能抑制裸鼠结肠癌移植瘤的生长,而且具有放疔增敏作用。     

塞来昔布联合依维莫司对恶性嗜铬细胞瘤裸鼠移植瘤的抑制作用

目的本研究通过观察环氧合酶2(Cox-2)抑制剂塞来昔布与哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)抑制剂依维莫司对大鼠嗜铬细胞瘤细胞PC12的裸鼠移植瘤生长的影响,探讨依维莫司对大鼠嗜铬细胞瘤肿瘤生长和血管生成的抑制作用。方法用大鼠嗜铬细胞瘤细胞PC12接种于裸鼠皮下,建立移植瘤模型,15d后将荷瘤裸鼠随机分为4组,每组12只,分别为依维莫司组(依维莫司灌胃1mg/kg)、塞来昔布组(塞来昔布100mg/kg灌胃)、联合组(依维莫司1mg/kg+塞来昔布100mg/kg灌胃)、对照组(生理盐水灌胃10mL/kg),用药3周,第4周后测量裸鼠移植瘤的体积变化以及裸鼠的生存时间,采用免疫组化方法检测肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达,采用Western blotting法检测肿瘤组织中VEGF的表达。结果第4周时移植瘤体积:对照组为(4 159.72±651.84)mm3,依维莫司组为(2 816.49±332.05)mm3,塞来昔布组为(4 018.38±527.46)mm3,联合组为(1 035.28±177.30)mm3,联合组与前3组均存在显著性差异(P0.01)。平均生存时间:对照组(23.3±2.8)d,依维莫司组(36.8±3.6)d,塞来昔布组(26.4±2.4)d,联合组(45.9±4.5)d,用Kaplan-meier,Log-rank方法分析,联合组与前三组的生存函数的差异有统计学意义(P0.05)。实验组肿瘤组织的VEGF表达明显低于对照组(P0.05)。结论塞来昔布联合依维莫司对大鼠嗜铬细胞瘤裸鼠移植瘤有明显抑制作用,并可降低肿瘤组织中VEGF的表达。     

埃罗替尼和塞来昔布抑制胆管癌生长和血管生成

目的:观察表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶抑制剂埃罗替尼与环氧合酶(COX-2)抑制剂塞来昔布对胆管癌荷瘤裸鼠的肿瘤生长协同抑制作用。方法:联合EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-selective tyrosine kinaseinhibitor,EGFR TKI)埃罗替尼和COX-2抑制剂塞来昔布作用于胆管癌细胞株QBC939荷瘤裸鼠,评价药物体内作用效果。结果:埃罗替尼、塞来昔布联合用药显著抑制肿瘤生长,与对照组、埃罗替尼、塞来昔布单药组相比,均有显著性差异。抑制肿瘤生长的作用伴随EGFR下游活性蛋白p-MAPK的下调和VEGF、Ki-67表达的降低。肿瘤组织微血管密度降低。结论:埃罗替尼、塞来昔布抑制胆管癌荷瘤生长,抑制肿瘤细胞增殖,同时抑制肿瘤新生血管。两者具协同作用。靶向抑制EGFR和COX-2通路可以作为胆管癌的潜在治疗方法。     

赛来昔布对人骨肉瘤类肿瘤干细胞移植瘤微血管生成的影响

[目的] 探讨cox-2抑制剂赛来昔布(Celecoxib)对骨肉瘤类肿瘤干细胞裸鼠移植瘤生长及微血管生成的影响.[方法] 无血清堵养法从骨肉瘤细胞株MG-3中分离出类肿瘤干细胞建立裸鼠移植瘤模型.30只成瘤裸鼠随机分 Celecoxib 组和对照组,Celcoxib:25 mg/ (kg·d),用药15 d,第27 d处死裸鼠,观察肿瘤体积、抑瘤率,免疫组化技术检测VEGF表达及CD34标记的MVD值.[结果] 分离的骨肉瘤类肿瘤干细胞有致瘤性,可以建立动物模型.Celecoxib抑瘤率为23.2%,Celecoxib组裸鼠移植瘤的体积、VEGF的表达、MVD值均显著低于对照组(P＜0.05).[结论] 骨肉瘤类肿瘤下细胞可以建立裸鼠骨肉瘤移植瘤模型.Celeeoxib可以抑制肿瘤生长,减少移植瘤组织VEGF的表达,减少微血管生成,具有抗血管生成作用.     

塞来昔布对人结肠癌细胞生长及裸鼠肝转移瘤形成的影响

目的探讨塞来昔布对体外培养的结肠癌细胞生长及裸鼠肝转移瘤的影响。方法以人结肠癌细胞株HT-29（COX-2高表达）和HCT-116（COX-2低表达）为研究对象，采用噻唑蓝（MTT）比色法检测塞来昔布对2种细胞的增殖抑制效应，应用流式细胞术检测2种细胞的周期分布情况；将2种细胞接种裸鼠，观察其肝转移瘤形成情况。结果①塞来昔布对人结肠癌细胞株生长的抑制作用呈时间、剂量依赖性效应（P〈0．05，P〈0．01），且对HT-29细胞的作用强于HCT-116细胞（P〈0．05）。②塞来昔布可改变结肠癌细胞株细胞周期的分布，明显降低其增殖指数。③塞来昔布具有明显的抑制裸鼠肝转移瘤生长的作用。结论塞来昔布可能通过抑制COX-2酶活性而抑制结肠癌细胞的分裂和增殖，诱导其凋亡，干预结肠癌的转移与复发。     

塞来昔布联合卡培他滨对裸鼠人肝癌模型中肿瘤细胞增殖与凋亡的影响

目的研究环氧化酶-2抑制剂塞来昔布（Celecoxib）和化疗药物卡培他滨（Capecitabine）对裸鼠人肝癌模型中肿瘤细胞增殖与凋亡的影响。方法建立LIC-D35裸鼠人肝癌模型,成瘤后40只裸鼠随机分成4组即对照组、塞来昔布组、卡培他滨组、联合用药组（卡培他滨与塞来昔布）。观察肿瘤大小,计算抑瘤率;采用RT-PCR方法观察肿瘤中COX-2的mRNA表达,并应用免疫组化法Ki一67检测肿瘤细胞增殖水平、末端脱氧核苷转移酶标记法（TUNEL）检测凋亡细胞。结果对照组、塞来昔布组、卡培他滨组、联合组瘤体体积分别为（3880±438）mm3、（3374±465）mm3、（1859±362）mm3和（981±197）mm3;塞来昔布组、卡培他滨组、联合用药组抑瘤率分别为15％、45％和71％。四组中Ki-67阳性率分别为46％、32％、25％和11％;肿瘤细胞凋亡指数D1分别为8％、22％、27％和38％;塞来昔布组、联合组肿瘤组织中COX-2mRNA表达显著低于对照组和卡培他滨组（P〈0．01）。结论塞来昔布可显著抑制裸鼠人肝癌模型中肿瘤细胞COX-2mRNA表达,抑制肿瘤细胞Ki-67表达,诱导肿瘤细胞凋亡。与卡培他滨联合应用可提高抗肿瘤效果。     

塞来昔布联合HMG-CoA还原酶抑制剂对人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响

目的探讨选择性环氧化酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂塞来昔布(celecoxib)联合HMG-CoA还原酶抑制剂氟伐他汀(fluvastatin)对实验性人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法接种BEL-7402肝癌细胞株的裸鼠,分别予以塞来昔布,氟伐他汀及联合用药,并对肿瘤生长进行评估。ki67免疫组化染色检测肿瘤细胞增殖,TUNEL法检测凋亡,免疫蛋白印迹法(Western blot)检测Akt、磷酸化Akt(p-Akt)蛋白的表达。结果联合应用塞来昔布及氟伐他汀明显抑制肿瘤生长,其机制可能与抑制肿瘤细胞增殖、诱导凋亡以及抑制Akt磷酸化有关。结论本研究表明塞来昔布及氟伐他汀联合用药可能更有效地治疗肝癌,为进一步防治肝癌提供了新的方法。     

塞来昔布联合化疗对腹腔镜胃癌根治术患者的临床疗效

目的：评价塞来昔布联合FOLFOX4化疗方案对腹腔镜胃癌根治术患者的疗效和安全性.方法：将已行腹腔镜胃癌根治术患者50例随机分为观察组和对照组,每组各25例.对照组行常规FOLFOX4方案化疗,21 d为1个周期,共6个周期;观察组在常规化疗基础上给予口服塞来昔布400 mg,2次/d.收集术前、术后3周（化疗前）及治疗6个周期后的血清标本,采用酶联免疫吸附试验检测血清VEGF和COX-2水平.结果：50例患者均按期完成治疗,两组患者有效率、临床获益率及生活质量比较差异有统计学意义（P＜0.05）;不良反应比较差异无统计学意义（P＞0.05）;术前及术后3周（化疗前）观察组和对照组患者血清VEGF和COX-2表达差异无统计学意义（P＞0.05）;治疗6个周期后观察组血清VEGF和COX-2水平明显低于对照组（P＜0.01）,且均较化疗前显著下降（P＜0.01）.结论：塞来昔布联合FOL-FOX4方案治疗胃癌根治术后患者效果较单用化疗方案好,能提高有效率、临床获益率及生活质量,且耐受性良好,能够降低血清VEGF和COX-2的表达水平,抑制肿瘤血管新生,有助于减少复发转移.     

Effects of cyclooxygenase - 2 inhibitor on peritoneal function and angiogenesis in uremic peritoneal dialysis rats

Objective To investigate the effects of the cyclooxygenase-2 (COX-2) inhibitor (celecoxib) on angiogenesis and peritoneal function of uremic peritoneal dialysis rats. Methods Forty - eight male SD rats were selected, and they were randomly divided into five groups: normal control group(n=8), sham operation group(n=8), uremia group(5/6 nephrectomy, n=8), PD group [4.25% PD solution, 2 weeks PD model(n=8) and 4 weeks PD model(n=8)], PD + celecoxib intervention group[treated by celecoxib(20 mg/kg) via oral gavage, n=8].The peritoneum of uremic peritoneal dialysis rats was observed in different dialysis time from peritoneal structures, functions, peritoneal tissue capillary density (microvessel density, MVD) and COX-2, vascular endothelial growth factor (VEGF) expression level, and the impacts of celecoxib on uremic peritoneal dialysis rats peritoneal angiogenesis and peritoneal function were study. Results With the conduct of the peritoneal dialysis, peritoneal thickness increased, the inflammatory cells infiltrated, peritoneal equilibration test (PET) showed that ultrafiltration volume decreased significantly (P＜0.05), the amount of glucose transport rate rised significantly (P＜0.05), but the celecoxib could improve net ultrafiltration volume (P＜0.05), and reduce the glucose transport rate (P＜0.05). The peritoneal tissue MVD and COX - 2, VEGF expression were significantly increased in uremia group and PD group compared with that in the normal control group (all P＜0.05), were significantly lower in PD + Celecoxib intervention group than that in uremia group (P＜0.05). The correlation analysis showed that the level of COX-2 protein expression with MVD, VEGF protein expression was positively correlated (both P＜0.05), the level of VEGF protein expression and MVD was positively correlated (P＜0.05). Conclusions In vivo high glucose dialysate and uremia environmental can stimulate the COX-2 and VEGF expression raised, and the capillaries production increased in peritoneal tissue. Celecoxib can alleviate the change of peritoneal tissue morphology and function in long-term peritoneal dialysis rats. Celecoxib inhibits the peritoneal neovascularization of uremic peritoneal dialysis rats, possibly through inhibition of COX-2 expression to reduce the production of VEGF.     

COX-2抑制剂对膀胱肿瘤的抑制作用

目的探讨环氧化酶（COX-2）抑制剂塞来昔布对小鼠膀胱肿瘤的抑制作用及其机制。方法利用BTT739膀胱癌细胞株和T739小鼠建立膀胱肿瘤动物模型。小鼠随机分为实验组和对照组,每组10只。造模后第2天起实验组塞来昔布混悬液灌胃（20mg／kg）,对照组生理盐水灌胃。观察肿瘤的生长情况并绘制肿瘤生长曲线。4周后,处死小鼠,切取肿瘤,称量瘤重,计算抑瘤率。肿瘤行常规病理学检查,观察肿瘤细胞的形态学变化,用免疫组化法观察肿瘤细胞中的COX一2、血管内皮生长因子（VEGF）的表达情况。结果对照组平均瘤重为（3．27±1．89）g,实验组为（1．10±0．52）g,两组差别有统计学意义（P〈0．05）;抑瘤率为66,4％。实验组和对照组肿瘤潜伏期[（7．10±2．28）dvs（7．20±2．71）d]差别无显著性（P〉0．05）。肿瘤生长曲线上可看出两组肿瘤生长自第2周开始显示差异,直至实验结束。显微镜下实验组标本见大片凝固性坏死区,而对照组标本仅可见局灶性坏死。免疫组化见COX-2、VEGF是表达于肿瘤细胞的细胞浆和／或细胞膜。实验组与对照组COX-2、VEGF的表达水平有统计学差异（P〈0．05或P〈0．01）。且COX-2与VEGF的表达呈正相关。结论塞来昔布对小鼠膀胱肿瘤有抑制作用,其机制可能为通过抑制COX-2来抑制血管形成,从而抑制肿瘤生长。     

Ciglitazone对裸鼠肝癌移植瘤的血管生成的抑制作用

目的 观察过氧化物酶体增殖激活受体配体Ciglitazone在肝癌治疗中对血管生成的作用.方法 3周龄裸鼠随机分为实验组(10只)、对照组(10只).皮下接种HepG2肝癌细胞,待肿瘤生长至约0.5 cm时,实验组瘤内注射100 μmol/L的Ciglitazone 100 μl,对照组注射100μ生理盐水,隔天注射连续15次.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测第31天的肝癌组织标本内PPAR的表达,免疫组织化学法和蛋白质定量分析法(Western blot)测定癌组织中因子Ⅷ和VEGF的表达.结果 肝癌组织内存在PPAR的表达,实验组PPARγ表达增高[(1.26±0.29)比(0.32 ±0.11),P<0.05],实验组的瘤块体积小、生长慢于对照组[(207.5 ±192.9)mm3比(445.0 ±150.9)mm3;P<0.05],实验组裸鼠体内肿瘤MVD低于对照组[(11.0 ±7.6)比(18.9 ±7.0),P<0.05];实验组裸鼠体内肿瘤VEGF的表达低于对照组(17.2±3.7比47.9 ±11.3,P<0.01).结论 Ciglitazone对肝癌的生长具有抑制作用,抗肿瘤血管形成可能是其中的作用机制之一.     

干扰素-α抑制高转移潜能人肝癌裸鼠肝细胞生长因子及血管内皮生长因子的表达

目的 观察干扰素-α(IFN-α)对高转移潜能人肝癌裸鼠模型中血管内皮生长因子(VEGF)、肝细胞生长因子(HGF)mRNA表达的影响.方法 应用绿色荧光蛋白转染的人高转移肝癌细胞株HCC-LM3建立高转移潜能人肝癌裸鼠模型LCI-D20,种植后第2天开始分别使用IFN-α 1.5×104 U/(kg·d)(治疗组,n=12)或生理盐水(对照组,n=12)皮下注射,28 d后处死裸鼠,比较肝脏肿瘤的大小和肝内转移,免疫组织化学检测肿瘤微血管密度(MVD),实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测肿瘤HGF和VEGF表达的变化.结果治疗组、对照组的肝内肿瘤大小分别为(0.11±0.03)cm3、(0.99±0.37)cm3(P<0.05);肝内转移率分别为33.3%(4/12)、83.3%(10/12)(P<0.05);肝内转移数目分别为0.67±0.31个比1.91±0.43个(P<0.05);肿瘤内MVD分别为3.19±0.52、4.85±0.72(P<0.05);肿瘤VEGF mRNA表达(-△CT)分别为-8.16±0.54、-6.95±0.86(P<0.05);HGF mRNA表达分别为-11.62±0.63、-10.56±0.48(P<0.05).结论 IFN-α对HGF及VEGF表达的抑制可能是其抗肿瘤血管生成作用、抑制肿瘤生长转移作用的机制之一.     

雷帕霉素在人肝癌裸鼠肝移植瘤血管形成和肿瘤进展中的作用

目的 探讨雷帕霉素(RPM)在人肝癌裸鼠肝移植瘤血管形成和肿瘤发展中的作用.方法 建立人肝癌裸鼠肝移植瘤模型,使用RPM、环孢素A(CsA)进行干预治疗,采用实时定量PCR法检测移植瘤血管内皮细胞生长因子(VEGF)mRNA的表达,免疫组织化学方法和图像分析技术检测移植瘤VEGF蛋白、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达和微血管密度(MVD),ELISA法检测外周血VEGF蛋白水平的变化.结果 (1)RPM、CsA和对照组移植瘤重量分别为(372±35)mg、(769±39)mg、(751±42)mg;RPM组移植瘤重量较对照组显著减少(P<0.01);CsA组和对照组比较无明显变化(P>0.05).(2)RPM组移植瘤VEGF mRNA、蛋白和PCNA的表达及外周血中VEGF蛋白水平较对照组显著下调(P<0.05),CsA组和对照组比较无明显差异(P>0.05).(3)RPM组移植瘤MVD较对照组显著减少(P<0.01);CsA组和对照组相比无明显变化(P>0.05).结论 RPM通过阻止肿瘤增殖,下调VEGF的表达,抑制肝癌血管形成和肿瘤进展.     

反义HIF-1α基因治疗人肝癌裸鼠移植瘤的实验研究

摘要：目的:探讨反义HIF-1α基因对人肝癌裸鼠皮下移植瘤的影响及其相关机制。方法:使用人原发性肝癌细胞株SMMC-7721建立人肝癌裸鼠皮下移植瘤动物模型。待肿瘤生长至直径约0.4cm时，将荷瘤裸鼠随机分为3组，分别注射生理盐水、质粒PcDNA3和HIF-1α/PcDNA3B，质粒用脂质体DOTAP介导转染细胞。观察各组动物的肿瘤生长曲线；取肿瘤标本作免疫组织化学检查（SABC法）及蛋白质印迹检查，检测各组肿瘤的VEGF和HIF-1α表达及微血管密度（MVD）和细胞凋亡。结果:HIF-1α/PcDNA3B治疗组各时点的肿瘤体积，以及肿瘤组织中HIF-1α蛋白、MVD，VEGF表达均低于对照组，而细胞凋亡指数高于对照组，差异均有显著性（P＜0.05）。结论:通过阻断癌细胞的缺氧适应途径，反义HIF-1α基因治疗肝癌有抑制肿瘤生长、抑制肿瘤血管生成及诱导细胞凋亡的作用。     

COX-2特异性抑制剂NS-398对胰腺癌生长及肿瘤血管 生成影响

目的:探讨COX-2特异性抑制剂NS-398对胰腺癌生长的影响及其机制。方法:分别用q RT-PCR与Western blot检测不同人胰腺癌细胞株(Bx PC-3、SWl990、Capan-2、Aspc-1、PANC-1)中COX-2及VEGF表达,并用MTT法检测NS-398在体外对人胰腺癌细胞增殖抑制作用;用体外实验最敏感细胞株建立裸鼠胰腺癌原位移植瘤模型,并随机将荷瘤鼠分为实验组和对照组,分别用NS-398与生理盐水处理,比较两组移植瘤的生长情况,并检测肿瘤组织中COX-2、VEGF蛋白表达及肿瘤微血管密度(MVD)。结果:各胰腺癌细胞中均有COX-2及VEGF表达,NS-398呈时间与浓度依赖性抑制各胰腺癌细胞的体外增殖,其中Bxpc-3细胞COX-2与VEGF表达量最高,且对NS-398最敏感。用Bxpc-3细胞建立原位移植瘤的实验组与对照组裸鼠比较,平均肿瘤体积明显减小(20.215 2 mm~3 vs.204.444 4 mm~3),瘤组织中COX-2与VEGF表达及MVD均明显降低(均P0.05)。结论:NS-398对胰腺癌的生长有抑制作用,其机制可能是通过COX-2途径降低VEGF基因表达从而抑制肿瘤血管生成有关。