温阳解郁不同复方对母婴分离/社会击败应激小鼠内分泌的影响

目的用温阳解郁三种不同组方对母婴分离/社会击败应激抑郁症小鼠模型进行干预治疗,探讨其作用机理。方法选用从出生起连续10 d、每天3h母婴分离的12~20周成年C57BL/6J小鼠遭受社会击败应激塑造抑郁症模型。分别以逍遥散、二仙汤和温阳解郁复方(XSF)进行6周的干预,放射免疫测定正常状态下和DEX/CRH试验血清皮质酮水平,Western blot检测海马区糖皮质激素受体(glucocorticoid reccptor,GR)含量。结果正常状态下模型组的皮质酮水平并无明显变化(P0.05);Dex/CRH试验中,模型组的皮质酮水平异常抬高,XSF组、氟西汀组明显降低。MD小鼠海马的GR明显减少,而二仙汤、XSF可上调这种变化。结论温阳解郁复方对抑郁症有明显治疗作用,可能是温阳和解郁互相配合的结果。     

基于BDNF/Akt/mTOR信号通路探讨温阳解郁方调控海马神经元凋亡和突触可塑性的机制

目的：探讨温阳解郁方调节“母婴分离+束缚应激（MS+RS）”抑郁小鼠海马神经元凋亡改善突触可塑性的机制。方法：仔鼠出生第0天（PD0）随机分为空白组10只和造模组50只。造模采用MS+RS建立抑郁模型,PD21离乳后随机分为模型组、温阳组、解郁组、温阳解郁组、氟西汀组,每组10只,PD21～PD111分组给药。糖水偏好、开放旷场、O迷宫及新物体识别行为实验评估小鼠焦虑抑郁和学习记忆能力;免疫组化法（IHC）检测小鼠海马突触后致密物95(PSD95)表达情况;原位末端标记法（TUNEL）染色检测小鼠海马神经元凋亡情况;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测海马脑源性神经营养因子（BDNF）、磷酸化酪氨酸蛋白激酶/酪氨酸蛋白激酶（p-TrkB/TrkB）、磷酸化蛋白激酶B/蛋白激酶B(p-Akt/Akt)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR/mTOR）、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、突触后致密蛋白95(PSD95)、突触素（Syn）蛋白表达情况。结果：与空白组比较,模型组小鼠糖水...     

母婴分离/社会击败应激抑郁症小鼠行为学与中枢神经递质的变化及温阳解郁复方的干预作用

目的:建立与验证母婴分离/社会击败应激抑郁症小鼠模型,并研究温阳解郁不同组方对抑郁症的干预效果。方法:用母婴分离与社会击败应激相结合的方法建立小鼠抑郁症模型,并用温阳解郁不同组方进行干预治疗。通过行为学实验(强迫游泳、鼠尾悬挂实验)验证模型,高效液相色谱法检测不同脑区单胺类神经递质的含量。结果:行为学实验结果表明,母婴分离/社会击败小鼠在强迫游泳与鼠尾悬挂实验中不动时间均明显延长。模型小鼠腹侧被盖核(VTA)区去甲肾上腺素(NE)水平明显上升,但未达到显著水平。温阳解郁不同组方均有不同程度的调整作用。结论:从行为学实验的结果看,母婴分离/社会击败模型存在着焦虑、抑郁状态,符合抑郁症模型标准。该模型并不存在神经递质含量的变化,这可能与模型本身的特点有关。     

温阳、解郁及温阳解郁方对LPS“二次应激”诱发的抑郁样行为小鼠海马小胶质细胞的影响

目的 观察母婴分离（MS）联合脂多糖（LPS）应激后抑郁样行为小鼠海马区小胶质细胞活化及炎症因子的表达情况,从温阳、解郁及温阳解郁二方合用的角度探讨温阳解郁法抗抑郁的可能机制。方法 将70只仔鼠随机分为正常组（10只）、LPS应激组（LPS,10只）和造模组（MS,50只）,造模组小鼠在产后第5天（PD₅）-PD₁₄进行8 h·d^-1的母婴分离,后将造模组分为母婴分离+脂多糖应激组（MS+LPS）,温阳组（WY）,解郁组（JY）,温阳解郁组（WYJY）及氟西汀组（FLU）,每组10只。将仔鼠出生日期记为PD₀,正常,LPS及MS+LPS组小鼠于PD₂₁-PD₉₀饲喂正常饲料,其余各组给予对应的药混饲料喂养,且于PD₉₁给予脂多糖腹腔注射7 d,建立抑郁症小鼠模型。采用旷场,O迷宫和社会交互实验检测各组小鼠抑郁样行为;免疫组化法观察海马组织小胶质细胞钙结合蛋白-1（Iba-1）蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应法检测白细胞介素-1β（IL-1β）,白细胞介素-6（IL-6）,肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,Iba-1及糖皮质激素受体（GR） mRNA表达量。结果 与正常组比较,LPS组小鼠5 min中心区停留时间有减少趋势、运动总路程显著减少（P<0.01）,活动总路程显著减少（P<0.01）,MS+LPS组小鼠开放臂活动时间及活动总路程明显减少（P<0.05,P<0.01）,训练、辨别探查时间显著升高（P<0.01）,LPS,MS+LPS组小鼠海马CA1区Iba-1表达显著升高（P<0.01）;与LPS组比较,MS+LPS组小鼠5 min运动总路程明显增长（P<0.05）,训练、辨别探查时间明显升高（P<0.05,P<0.01）,海马CA1区Iba-1表达显著升高（P<0.01）;与MS+LPS组比较,各给药组小鼠5 min运动总路程均明显减少（P<0.01）,训练探查时间均显著降低（P<0.05,P<0.01）,JY,WYJY,FLU组小鼠辨别探查时间均显著降低（P<0.01）,各给药组小鼠海马CA1区Iba-1表达显著降低（P<0.01）。结论 温阳解郁法可能通过抑制抑郁症小鼠海马区小胶质细胞的激活,降低IL-1β,IL-6,TNF-α等炎症因子的表达,进而抑制抑郁症发生及发展。     

温阳解郁不同组方对母婴分离/社会击败应激小鼠影响的比较研究

目的用温阳解郁三种不同组方对模拟早年不良经历的母婴分离小鼠进行干预,比较其治疗效果并探讨其作用机理。方法选用从出生起连续10天、每天3h母婴分离的12~20周成年C57BL/6J小鼠遭受社会击败应激塑造抑郁症模型。分别以逍遥散、二仙汤和温阳解郁复方进行6周的干预,通过旷场、高架十字迷宫及强迫游泳实验观察行为模式变化并运用原位杂交检测不同脑区BDNF的表达。结果模型小鼠在旷场实验中央区域的活动减少,高架十字迷宫实验中开放臂和中央交汇区进入次数及停留时间均明显减少,强迫游泳不动时间明显延长,提示该模型已有明显的抑郁或焦虑表现。二仙汤和温阳解郁复方均能显著提高中央交汇区进入次数(P0.05),温阳解郁复方能显著缩短强迫游泳不动时间(P0.05)。除前额皮质(PFC)外,模型小鼠各脑区的BDNF表达均明显下降,各治疗组均能明显提高各脑区BDNF mRNA的表达量。结论温阳解郁复方对抑郁症有明显治疗作用,可能是温阳和解郁互相配合的结果。     

温阳、解郁及温阳解郁方对母婴分离结合慢性神经疼痛应激小鼠疼痛敏感性及抑郁样行为的调节作用

目的 观察母婴分离小鼠给予慢性神经疼痛应激后的行为、痛阈改变，以及血清和中枢抑郁、疼痛相关指标的变化，以温阳方、解郁方、及温阳解郁方进行干预探讨温阳解郁法抗抑郁、改善疼痛敏感的可能机制。方法 以小鼠出生日为PD0，小鼠在出生后随机分为对空白组和母婴分离组，母婴分离组在PD5~14进行8 h·d^-1的母婴分离，离乳后将其分为母婴分离组、温阳组、解郁组、温阳解郁组和氟西汀组，每组15只，同时以15只未经母婴分离的同期雄性仔鼠作为空白组。空白组、母婴分离组小鼠于PD21~90以普通发育饲料喂养，余组分别以温阳方二仙汤、解郁方逍遥散、温阳解郁方及氟西汀药混饲料喂养（用药剂量分别为5.84、12.00、16.68 g·kg^-1及2.60 mg·kg^-1）。于PD91行坐骨神经结扎手术，建立母婴分离+慢性神经病理性疼痛模型。采用旷场实验观察各组小鼠抑郁样行为，测量机械痛阈和温度痛阈检测各组小鼠疼痛敏感性，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清皮质酮（CORT）、P物质及β-内啡肽（β-EP）含量，免疫组化检测杏仁核糖皮质激素受体（GR）和下丘脑β-EP蛋白表达，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测杏仁核糖皮质激素受体基因（Nr3c1）、FK506结合蛋白5基因（FKBP5）、代谢型谷氨酸受体5基因（GRM5）及脑源性神经营养因子（BDNF）mRNA的表达量。结果 与空白组比较，母婴分离组小鼠5 min旷场中心停留时间和运动总距离均显著减少（P<0.01），机械痛阈显著降低（P<0.01）。血清CORT和β-EP均显著上升（P<0.01），FKBP5 mRNA表达显著下降（P<0.01）。下丘脑β-EP表达上升，差异具有明显统计学意义（P<0.05）。与母婴分离组比较，各给药组5 min旷场中心停留时间均明显增加（P<0.05，P<0.01），温阳组、温阳解郁组和氟西汀组小鼠在5 min旷场运动总距离明显增加（P<0.05，P<0.01），各给药组痛阈均不同程度上调。解郁组小鼠血清CORT显著下降（P<0.01），β-EP明显下降，但差异无统计学意义；BDNF mRNA显著上升（P<0.01）。温阳组小鼠Nr3c1及GRM5 mRNA均明显下降（P<0.05，P<0.01）。温阳解郁组小鼠血清CORT明显下降（P<0.05），Nr3c1、GRM5及BDNF mRNA均下降（P<0.05，P<0.01），差异具有明显统计学意义，各给药组下丘脑β-EP表达水平均有不同程度提升，但差异无统计学意义。温阳组、解郁组和温阳解郁组小鼠杏仁核GR表达水平均明显上升，差异具有明显统计学意义（P<0.05）。结论 温阳解郁方可通过增强杏仁核GR表达、抑制杏仁核区神经可塑性及兴奋性达到抑制中枢疼痛敏化和调节下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴功能，缓解抑郁行为和改善躯体疼痛过敏的作用。     

二次打击致抑郁小鼠的证候属性及其机制

目的 探讨母婴分离（MS）联合慢性束缚应激（RS）致抑郁小鼠的证候属性及其机制研究。方法 仔鼠出生第0天（PD0）随机分为空白组和造模组。PD21后剔除雌鼠，随机分为模型组、温阳组、解郁组、温阳解郁组、氟西汀组，采用MS+RS建立二次打击模型，每组15只。采用糖水、悬尾及旷场实验评估小鼠焦虑抑郁样行为；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组小鼠血浆促肾上腺皮质激素（ACTH）及皮质酮（CORT）含量；高效液相-电化学法（HPLC-ECD）检测各组小鼠海马单胺类神经递质含量；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测各组小鼠海马5-羟色胺（5-HT）系统、下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴及脑源性神经营养因子（BDNF）信号通路基因表达水平；免疫组化法（IHC）检测各组小鼠海马5-HT系统及HPA轴蛋白表达水平；全自动蛋白表达分析系统（Simple Wes）检测各组小鼠海马BDNF等蛋白表达水平。结果 与空白组比较，模型组小鼠出现抑郁样行为，温阳解郁方及氟西汀可显著缓解。与空白组比较，模型组血浆CORT及ACTH含量显著升高（P<0.01）；与模型组比较，温阳解郁方及氟西汀组小鼠血浆CORT及ACTH含量明显降低（P<0.05，P<0.01）。与空白组比较，单胺类神经递质表达方面，模型组海马神经递质表达水平明显降低（P<0.05，P<0.01）；与模型组比较，温阳解郁方及氟西汀组小鼠海马神经递质表达水平明显升高（P<0.05，P<0.01）。与空白组比较，模型组小鼠5-HT能神经受到抑制、HPA轴异常激活，温阳解郁方及氟西汀可调控5-HT能神经及HPA轴的异常状态。与空白组比较，海马组织BDNF、TrkB mRNA及蛋白表达明显降低（P<0.05，P<0.01）；与模型组比较，温阳、解郁、温阳解郁方及氟西汀组小鼠海马BDNF、TrkB mRNA及蛋白表达水平明显升高（P<0.05，P<0.01）。结论 二次打击致抑郁小鼠的证候属性可能是阳虚肝郁型，温阳解郁方可能通过调节5-HT神经系统及HPA轴介导的BDNF信号通路，增加海马神经递质含量，进而缓解模型小鼠抑郁样行为。     

逍遥丸对慢性束缚应激小鼠行为学和神经递质含量的影响

目的:考察逍遥丸对慢性束缚应激小鼠行为学和脑内神经递质含量的影响。方法:采用每天束缚小鼠8 h,连续10 d,制备慢性束缚应激小鼠模型,正常组和模型组ig给予等体积蒸馏水,药物组给予逍遥丸按人临床用量换算成小鼠等效剂量1.365 g.kg-1的混悬液,均在束缚前1 h ig给药,连续12 d,于第11 d采用旷场实验测定小鼠的自发活动,第12 d采用酶联免疫法测定小鼠不同脑区神经递质含量。结果:小鼠每天束缚8 h连续10 d后,穿格次数和直立次数显著减少(P<0.05),同时,海马5-羟色胺(5-HT)、前脑去甲肾上腺素(NE)、加压素(AVP)含量和下丘脑组胺含量非常显著增加(P<0.01)。连续ig给予逍遥丸,可显著增加模型小鼠的穿格次数(P<0.05),显著减少模型小鼠脑内的5-HT,NE,AVP含量(P<0.01)及组胺含量(P<0.05)。结论:逍遥丸明显改善慢性束缚引起的小鼠行为学异常,下调脑内单胺类神经递质和AVP含量变化。     

石菖蒲挥发油微乳对慢性应激小鼠记忆的影响及其机理研究

目的:建立慢性应激小鼠模型,观察石菖蒲挥发油微乳对慢性应激小鼠记忆的调节作用,并初步探讨其作用机制。方法:将36只昆明小鼠随机分为3组,每组12只,分别为空白对照组、慢性应激组、慢性应激+石菖蒲挥发油微乳组(给药组)。空白对照组正常喂养,慢性应激组每天进行8 h"慢性应激束缚实验",给药组给予石菖蒲挥发油微乳4.5 g/(kg·d)灌胃,同时与慢性应激组同步进行"慢性应激束缚实验"。观察小鼠一般状态并测量其体质量,利用Morris水迷宫观察小鼠的空间学习记忆能力,并检测小鼠血清糖皮质激素水平。结果:实验第28天时,与空白对照组比较,慢性应激组小鼠体质量明显下降,差异有统计学意义(P0.05)。与慢性应激组比较,给药组小鼠的体质量增长明显,差异有统计学意义(P0.05)。与空白对照组比较,慢性应激组小鼠在训练期间的平均潜伏期明显较长,平台穿越次数也显著减少,血浆皮质醇水平较高,差异均有统计学意义(P0.01)。与慢性应激组比较,给药组小鼠的训练平均潜伏期缩短,平台穿越次数增多,血清中皮质醇水平明显下降,差异均有统计学意义(P0.01)。结论:石菖蒲挥发油微乳具有改善慢性应激小鼠记忆的作用,其机制与降低血清糖皮质激素水平有关。     

基于NLRP3/Caspase-1/IL-1β通路探讨温阳解郁方调节小鼠海马突触可塑性的机制

目的 探讨温阳解郁方改善“母婴分离+束缚应激（MS+RS）”抑郁小鼠神经炎症，保护突触可塑性的作用机制。方法 仔鼠出生第0天（PD0）随机分为空白组和造模组。造模采用母婴分离联合束缚应激21 d建立抑郁模型，PD21离乳后剔除雌鼠，随机分为模型组、温阳组、解郁组、温阳解郁组、氟西汀组，每组15只，PD21~PD111各给药组药混饲料给药，给药剂量分别为5.85、12.03、16.71 g·kg^-1，2.6 mg·kg^-1。糖水偏好、开放旷场、O迷宫及新物体识别行为学实验评估小鼠焦虑抑郁和学习记忆能力；免疫组化法（IHC）观察海马小胶质细胞离子钙接头蛋白-1（Iba-1）；高效液相色谱法（HPLC）检测海马去甲肾上腺素（NE）、肾上腺素（E）含量；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测海马白细胞介素-18（IL-18）、白细胞介素-1β（IL-1β）含量；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测海马NOD样受体蛋白3（NLRP3）、凋亡相关斑点蛋白（ASC）、胱天蛋白酶-1（Caspase-1）、IL-1β、突触素（Syn）、突触后致密物95（PSD95）蛋白表达。结果 与空白组比较，模型组小鼠糖水偏好率、5 min中央运动时间、运动总距离、开臂停留时间和认知指数明显降低（P<0.05，P<0.01），IHC结果显示，小胶质细胞呈“阿米巴”激活态，Iba1明显增加，海马NE、E含量显著减少（P<0.01），IL-1β和IL-18含量显著增加（P<0.01），PSD95、Syn蛋白表达明显减少（P<0.05，P<0.01），NLRP3、ASC、Caspase-1和IL-1β蛋白表达明显增加（P<0.05，P<0.01）。与模型组比较，温阳解郁组和氟西汀组小鼠糖水偏好率、认知指数增加，5 min中央运动时间、开臂停留时间、认知指数明显增加（P<0.05，P<0.01），小胶质细胞形态恢复正常，Iba1明显降低，海马NE、E含量明显增加（P<0.05，P<0.01）、IL-1β和IL-18含量显著降低（P<0.01），PSD95、Syn蛋白表达显著增加（P<0.01）、NLRP3、ASC、Caspase-1和IL-1β蛋白表达明显降低（P<0.05，P<0.01），各中药组以温阳解郁方效果最佳。结论 温阳解郁方可能通过调节NLRP3炎症通路，缓解小胶质细胞诱导的神经炎症，增加海马神经递质含量，并改善突触可塑性，减轻MS+RS小鼠抑郁样行为，其综合效果优于温阳方和解郁方。     

抗抑郁新药-参味宁郁片对大鼠慢性应激模型及小鼠悬尾模型的抗抑郁作用研究

目的:研究抗抑郁症中药新药-参味宁郁片对慢性应激抑郁模型大鼠及小鼠悬尾抑郁模型的抗抑郁作用。方法:大鼠慢性应激模型:除正常组外,其余各组给予相应的慢性应激,并在造模前1 h灌胃给药,共持续21 d。实验前后通过体质量变化、糖水实验、自发活动开场实验测试,观察各组大鼠相应指标的评分变化。采用放射免疫测定法检测相关激素水平。小鼠悬尾抑郁模型:连续给药7 d后用小鼠自主活动记录仪记录活动次数,再将小鼠悬尾后记录小鼠不动时间,探究各给药组对小鼠悬尾不动时间的影响。结果:慢性应激抑郁模型:在造模21 d后,与正常组比较,模型组大鼠在体质量、糖水偏好指数、水平及垂直运动评分等方面均显著降低(P<0.05),参味宁郁片低剂量组在糖水实验、水平及垂直运动评分与模型组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。此外,参味宁郁片3个剂量组均可有效降低慢性应激模型大鼠CRF的含量,低剂量组可显著降低模型大鼠的ACTH水平(P<0.05)。小鼠悬尾抑郁模型:各给药组小鼠悬尾后的不动时间与模型组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:抗抑郁症中药新药-参味宁郁片对慢性应激抑郁模型及小鼠悬尾抑郁模型均具有一定的抗抑郁作用。     

解郁顺心汤对小鼠抑郁模型的影响研究

目的:解郁顺心汤是治疗肝气郁结所致抑郁症的临床经验复方,通过观察解郁顺心汤在小鼠强迫游泳模型、小鼠慢性应激模型中是否具有抗抑郁作用。方法:强迫游泳实验中连续给药7天,慢性应激实验连续21天给予小鼠不可预见性刺激,建立小鼠抑郁模型,同时给予解郁顺心汤或盐酸氟西汀,进行蔗糖饮水实验、开场实验观察解郁顺心汤的抗抑郁效应。结果:解郁顺心汤2.3、6.9g/kg能够明显缩短强迫游泳中小鼠的不动时间,逆转慢性应激导致的糖水消耗量得降低。结论:解郁顺心汤具有明显的抗抑郁作用。     

母婴分离/束缚应激模型小鼠海马小胶质细胞变化及温阳解郁方的调节作用

目的 观察母婴分离/束缚应激诱发焦虑抑郁小鼠海马小胶质细胞激活和白细胞介素-1β（IL-1β）,白细胞介素-6（IL-6）,肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达情况,探讨温阳解郁方抗焦虑抑郁的机制。方法 84只雄性C57BL仔鼠于出生后第0天（PD0）随机分为空白组、束缚应激组和造模组,造模组采取母婴分离结合束缚应激制备焦虑抑郁模型,将造模组按随机数字表法分为模型组、温阳组、解郁组、温阳解郁组和氟西汀组。在离乳第21天（PD21）至成年第90天（PD90）,空白组、束缚应激组和模型组饲喂正常饲料,其余饲喂药混饲料（温阳组、解郁组、温阳解郁组和氟西汀组用药剂量分别为5.85,12.03,16.71 g·kg^-1及2.60 mg·kg^-1）。采用旷场实验,O迷宫和社会交互实验评估模型组小鼠焦虑抑郁状态;免疫组化法（IHC）观察海马小胶质细胞及离子钙接头蛋白-1（Iba-1）表达;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测IL-1β,IL-6,TNF-α,Iba-1,糖皮质激素受体（GR）mRNA表达水平。结果 与空白组比较,模型组小鼠5 min运动总路程和中央区活动时间显著减少（P<0.01）,开臂活动时间与活动总路程明显减少（P<0.05,P<0.01）,训练探察时间和辨别探查时间显著增加（P<0.01）,Iba-1蛋白及mRNA表达,IL-1β,IL-6,TNF-α mRNA表达水平显著升高（P<0.01）,GR mRNA表达水平显著降低（P<0.01）,IHC结果显示小胶质细胞的过度激活。与模型组比较,温阳解郁方及氟西汀组小鼠5 min运动总路程和中央区活动时间显著上升（P<0.01）,开臂活动时间显著上升（P<0.01）,训练探察时间和辨别探查时间明显降低（P<0.05,P<0.01）;Iba-1蛋白及mRNA表达,IL-1β,IL-6,TNF-α mRNA表达水平明显降低（P<0.05,P<0.01）,GR mRNA表达水平显著上升（P<0.01）,IHC结果表明小胶质细胞的形态恢复;温阳组和解郁组小鼠开臂活动时间显著上升（P<0.01）,辨别探查时间明显降低（P<0.05）,Iba-1蛋白及mRNA表达,IL-6 mRNA表达水平明显降低（P<0.05,P<0.01）;温阳组小鼠GR mRNA表达水平明显上升（P<0.05）,TNF-α mRNA表达水平明显降低（P<0.05）;解郁组小鼠5 min运动总路程显著上升（P<0.01）,训练探察时间明显降低（P<0.05）,IL-1β mRNA表达水平明显降低（P<0.05）,IHC结果表明两组小胶质细胞有所恢复。结论 温阳解郁方的综合疗效和药理作用优于温阳方和解郁方,其作用机制可能通过抑制母婴分离/束缚应激小鼠海马小胶质细胞的激活,降低IL-1β,IL-6,TNF-α等细胞因子的表达,增加海马GR表达,从而改善小鼠的焦虑抑郁样行为。     

银杏叶提取物对慢性社交挫败应激小鼠外周血清代谢物的调控作用

目的 探讨银杏叶提取物对慢性社交挫败应激小鼠抑郁样行为的影响,并分析其对抑郁模型小鼠外周血清代谢谱的影响.方法 采用慢性社交挫败应激造模10 d诱导小鼠抑郁样行为,给药组预防性给予氟西汀(15 mg·kg-1)或银杏叶提取物(低剂量组:120 mg· kg-1,高剂量组:240 mg·kg-1).于第11天通过社交躲避...     

从温阳解郁方研究谈抑郁症治疗用药思路

抑郁症是一种复杂的情感性精神障碍,中医临床治疗抑郁症多采用疏肝解郁的方法。课题组提出抑郁症存在阳气不足、气机不畅的病机,与早年创伤造成神经心理变化关系密切,治疗需温补阳气、行气解郁,并拟定了温阳解郁方。该方由温阳的二仙汤和解郁的逍遥散合方而成,通过选择母婴分离抑郁小鼠模型模拟早年创伤,并与温阳的二仙汤、解郁的逍遥散对比,发现温阳解郁方能够显著提高小鼠的活动性和环境探测能力,减少强迫游泳和悬尾实验中的不动时间,缓解趋暗和场景恐惧行为,增强社会交互和社会认知能力,改变趋向与回避决择反应的偏向,改善抑郁样行为和决择行为模式;降低小鼠血清皮质醇水平,抑制地塞米松/促肾上腺皮质激素释放激素（Dex/CRH）实验中皮质醇的高涨反应,上调海马区盐皮质激素受体（MR）和11β-羟基类固醇脱氢酶（11β-HSD2）表达,下调糖皮质激素受体（GR）和促肾上腺皮质激素释放激素受体1(CRHR1)表达,降低GR exon1甲基化程度和甲基化转移酶1(DNMT1)表达,恢复下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴功能和负反馈机制;上调海马区脑源性神经营养因子（BDNF）表达,增加突触后致密蛋白95(PSD95)和突触素...     

左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症模型大鼠海马齿状回神经元树突及Wnt5a/RhoA信号通路的影响

目的 探讨左归降糖解郁方治疗糖尿病并发抑郁症的可能作用机制。方法 60只大鼠随机分为正常组、模型组、无翅型MMTV整合位点家族成员5a (Wnt5a)激动剂组、左归降糖解郁方组、左归降糖解郁方+Wnt5a抑制剂组,每组12只。除正常组外,其余各组大鼠采用高脂饲料饲养、链脲佐菌素注射和慢性温和不可预知应激联用法建立糖尿病并发抑郁症大鼠模型。造模成功后Wnt5a激动剂组大鼠给予双侧海马立体定位注射Wnt5a激动剂Foxy-5各5μl,连续7天;左归降糖解郁方组给予左归降糖解郁方20.52 g/(kg·d)灌胃;左归降糖解郁方+Wnt5a抑制剂组进行灌胃给药和双侧海马立体定位注射Wnt5a抑制剂Box5,给药剂量和注射方法同上。正常组和模型组给予10 ml/(kg·d)生理盐水灌胃。各组灌胃均连续4周。干预结束后采用强迫游泳实验(不动时间)和旷场实验(活动次数)评价大鼠的抑郁样行为;检测大鼠的血糖和胰岛素含量,并计算胰岛素抵抗指数;采用高尔基染色观察大鼠海马齿状回神经元的树突形态;采用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu)注射及免疫荧光检测齿状回神经元增殖水平;采用RT-qPCR和Western ...     

培元解郁方对慢性应激BALB/c小鼠的抗抑郁作用及TRY-KYN代谢途径的调节

目的:研究四逆散、天丝饮、培元解郁方的抗抑郁作用及其对血清皮质酮含量和色氨酸(TRP)-犬尿氨酸(KYN)途径关键代谢酶色氨酸2,3-双加氧酶(TDO)的影响。方法:使用束缚加噪声造成小鼠抑郁模型,采用Noldus Etho Vision XT9系统采集分析小鼠强迫游泳不动时间,采用HPLC-MS/MS技术检测血清色氨酸(TRP)、犬尿氨酸(KYN)、犬尿烯酸(KA)、喹啉酸(Q)、皮质酮(C)含量,实时荧光定量PCR检测肝组织中TDO的mRNA表达水平。结果:束缚加噪声应激5d后可以引起模型组小鼠强迫游泳不动时间延长,血清皮质酮含量增高,KYN/TRP、KYN/KA比值升高,KYN/Q比值降低。四逆散、天丝饮、培元解郁方能缩短小鼠不动时间(P0.01),降低血清皮质酮含量(P0.05),提高KYN/TRP、KYN/Q比值(P0.05),降低KYN/KA比值。结论:四逆散、天丝饮、培元解郁方具有抗抑郁药物样作用,这一作用与对抗应激引发的血清皮质酮升高,抑制色氨酸-犬尿氨酸代谢途径中的神经毒性代谢产物产生并提高神经保护作用有关。     

基于肝脏代谢组学研究柴胡皂苷A对小鼠酒精性脂肪肝保护作用

目的：基于代谢组学探讨柴胡皂苷A (SSa)改善酒精饮食诱导下小鼠酒精性脂肪肝(AFL)的作用机制。方法：将C57BL/6J雄性小鼠分为饮食对照(NC)组、模型(EtOH)组、不同剂量SSa干预(Et+SA-L、Et+SA-M、Et+SA-H,5、10、20 mg·kg^–1)组,每组6只。除对照组外,各组小鼠使用含5%乙醇的流质饮食诱导10 d构建AFL模型,自乙醇饲料喂养第4天起给药至造模结束。应用酶联免疫吸附法检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)和小鼠肝脏丙二醛(MDA)含量水平。采用苏木精-伊红(HE)染色观察肝脏组织形态学变化。采用超高效液相色谱串联四极杆静电场轨道阱质谱法(UPLC-Q-Exactive MS)建立检测NC组、EtOH组、Et-SA-H组小鼠肝脏代谢谱,以偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)分析模式识别,以T检验、差异倍数筛选潜在生物标志物,并借助MetaboAnalyst数据库富集代谢通路。结果：SSa减轻AFL小鼠肝体比...     

"时相药法"对运动应激小鼠血清一氧化氮水平的影响

目的:探讨"时相药法"对运动应激疲劳的干预作用特征。方法:以运动应激疲劳小鼠为实验对象,随机分为正常组(A)、疲劳组(B)、大剂量温阳激活颗粒组(C)、小剂量温阳激活颗粒组(D)和"时相药法"组(E),每组10只。分时应用"温阳激活颗粒"和"滋阴修养胶囊",组成"时相药法";同时采用酶法,检测并分析了各组小鼠血清NO2-/NO3-总量的变化。结果:①B组比A组小鼠血清NO水平明显升高(P<0.01),升高131%,表明运动应激引起小鼠血清NO水平升高;②"时相药法"干预2w后,E组NO水平明显降低(P<0.01),与B相比降低了31.1%。提示"时相药法"具有降低运动应激所产生高水平NO带来细胞或组织损伤作用,进一步证实了我们前期完成的"时相药法"对运动疲劳人体实验的有效性;③C组(5g生药/kg)NO水平未见明显变化(P>0.05),而D组(10g生药/kg)NO水平明显降低(P<0.01);同时,与B组相比,D组NO水平降低了22.0%,但低于"时相药法"的31.1%,表明温阳激活颗粒用量需在10g生药/kg以上方能降低血清NO水平,提示"时相药法"比单纯应用温阳激活颗粒更优越。结论:①"时相药法"的"温阳激活颗粒"和"滋阴修养胶囊"具有一定的干预运动应激疲劳作用,此干预作用机制与降低NO水平有关;②"时相药法"干预运动应激疲劳效果可能比单纯应用"温阳激活颗粒"更明显。     

解郁开心丹对抑郁模型大鼠神经内分泌的影响

目的观察解郁开心丹对抑郁模型大鼠血清皮质醇、β-内啡肽含量的影响。方法将80只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药物对照组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组,每组10只;用慢性应激结合孤养的方式造模。造模后给药,阳性药物对照组给予盐酸氟西汀混悬液10 mg/d;中药高、中、低剂量组分别给予解郁开心丹2.0,1.0,0.5 g/d(给药体积为每100 g体质量给予1.0 m L),模型组给予等量生理盐水,连续28 d。用放射免疫分析法检测大鼠血清皮质醇、β-内啡肽的含量。结果与模型组比较,中药高剂量组、中药中剂量组大鼠的血清皮质醇含量明显减少,β-内啡肽的含量明显增加,P<0.05;中药高剂量组、中药中剂量组与阳性药物对照组比较无明显差异,P>0.05。结论解郁开心丹具有与西药抗抑郁药物氟西汀同样的抗抑郁作用,且抗抑郁作用机制可能与调节大鼠的血清皮质醇、β-内啡肽的平衡有关。